老年急性心肌梗死患者黏着斑激酶和脂肪酸结合蛋白4与心肌损伤及心功能的关系

目的 探讨老年急性心肌梗死患者血清黏着斑激酶(FAK)和脂肪酸结合蛋白4(FABP4)水平变化与心肌损伤及心功能的关系。方法 选择2020年1月至2023年4月牡丹江心血管病医院收治的211例急性心肌梗死患者作为疾病组;选择同期在我院行体检的60例健康志愿者为对照组。比较2组血清FAK和FABP4水平,多因素logistic回归分析老年急性心肌梗死的影响因素,应用ROC曲线评估血清FAK和FABP4对老年急性心肌梗死的预测价值,Pearson相关分析血清FAK和FABP4与心肌损伤和心功能的相关性。结果 疾病组患者血清FAK、FABP4、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶(CK)、左心室收缩末期内径(LVESD)和左心室舒张末期内径(LVEDD)显著高于对照组,左心室射血分数(LVEF)显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。血清FAK和FABP4与CK-MB、cTnI、CK、LVESD和LVEDD均呈正相关,与LVEF呈负相关(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,血清FAK(OR=2.872,95%CI:2.230~3.698,P=0.000)和FABP4(OR=2.667,95%CI:1.713~4.154,P=0.000)是老年急性心肌梗死发生的影响因素。ROC曲线分析显示,血清FAK诊断的临界值为25.60μg/L,曲线下面积为0.801(95%CI:0.750~0.852);血清FABP4诊断的临界值为23.22μg/L,曲线下面积为0.760(95%CI:0.707~0.812);FAK和FABP4联合分析显示,曲线下面积为0.899(95%CI:0.839~0.918)。结论 老年急性心肌梗死患者血清FAK和FABP4异常高表达,与心肌损伤及心功能密切相关,单独或联合分析可有效预测急性心肌梗死的发生。

黏着斑激酶与基质金属蛋白酶9在垂体腺瘤中的表达

目的研究黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)在垂体腺瘤中的表达及意义。方法垂体腺瘤组织标本50例,其中侵袭性27例,非侵袭性23例,利用免疫组化法检测并分析比较FAK及MMP-9在侵袭性垂体腺瘤和非侵袭性垂体腺瘤中的表达。结果侵袭性垂体腺瘤中FAK和MMP-9的表达均高于非侵袭性垂体腺瘤(P<0.05);在侵袭性垂体腺瘤中FAK和MMP-9的表达水平呈正相关(P<0.05)。结论垂体腺瘤的侵袭性与FAK、MMP-9的过度表达有关,FAK和MMP-9可作为辅助诊断侵袭性垂体腺瘤的一项生物学指标。

抑制整合素和黏着斑激酶促进神经干细胞对脑缺血后的神经修复

目的探究抑制整合素-黏着斑激酶(FAK)信号通路对脑缺血动物模型神经干细胞(NSC)移植后NSC增殖的影响。方法选择12只健康SD大鼠作为对照组,另将线栓法成功构建脑缺血模型大鼠36只。随机分为脑缺血组、NSC移植组和西仑吉肽组,每组12只。后2组大鼠注射10μl NSC溶液(细胞浓度为1×10^(6)个/L),西仑吉肽组还腹腔注射整合素抑制剂西仑吉肽100μg/kg。水迷宫实验分析大鼠神经功能,Western blot检测整合素和FAK蛋白表达,TUNEL染色检测神经细胞凋亡,免疫荧光染色检测NSC增殖。结果与对照组比较,脑缺血组逃避潜伏期显著升高,而穿越平台次数显著降低(P<0.05);NSC移植组逃避潜伏期显著低于脑缺血组[(34.02±4.02)s vs(48.79±4.94)s,P<0.05],而穿越平台次数显著高于脑缺血组[(4.86±0.54)次vs(2.74±0.42)次,P<0.05];西仑吉肽组逃避潜伏期显著高于NSC移植组,而穿越平台次数显著低于NSC移植组(P<0.05)。与对照组比较,脑缺血组大鼠整合素、FAK蛋白表达、凋亡指数和5溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)/神经元核抗原(NeuN)阳性细胞数显著升高(P<0.05);NSC移植组整合素、FAK蛋白表达、BrdU/NeuN阳性细胞数显著高于脑缺血组,凋亡指数显著低于脑缺血组(P<0.05);西仑吉肽组整合素、FAK蛋白表达、BrdU/NeuN阳性细胞数显著低于NSC移植组,凋亡指数显著高于NSC移植组(P<0.05)。结论外源性NSC增殖、分化为神经元的过程中,整合素-FAK信号通路被激活,抑制整合素-FAK信号通路会影响NSC对脑缺血大鼠神经功能恢复的促进作用。

Peg10基因在黏着斑激酶介导的肝癌细胞耐药中的作用

目的初步探讨Peg10基因与黏着斑激酶(FAK)介导的肝癌细胞耐药(CAM-DR)的关系及分子机制。方法采用MTT法检测5-氟尿嘧啶(5-Fu)、阿霉素(ADR)对LO2细胞、ADR耐药的人肝癌细胞BEL-7404/ADR(7404/ADR)和Peg10基因沉默的siRNA-BEL-7404/ADR(siRNA-7404/ADR)细胞增殖的影响;建立7404/ADR和siRNA-7404/ADR裸鼠荷瘤模型,48只裸鼠随机分为6组,每组8只,A、C、D组注射7404/ADR细胞,B、E、F组注射siRNA-7404/ADR细胞;A、B组尾静脉注射生理盐水,C、E组给予5-Fu,D、F组给予尾静脉注射ADR,测量瘤块体积,RT-PCR检测Peg10基因的表达,Western Blot法检测PEG10、p-FAK、p-JNK、p-ERK和p38MAPK蛋白的表达。两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果 ADR和5-Fu对siRNA-7404/ADR 24 h的IC50值均较7404/ADR的降低,差异均具有统计学意义(t值分别为7.641,7.560,P值均<0.01)。B、C、D组肿瘤体积较A组小,差异均有统计学意义(P值均<0.05),E、F组肿瘤体积较B组小,差异均具有统计学意义(P值均<0.01);E组与C组比较,F组与D组的肿瘤体积差异亦均有统计学意义(P值均<0.05)。B、E、F组Peg10的mRNA极少表达,C、D组Peg10的mRNA表达较A组有所降低。B组PEG10蛋白极少表达,与A组比较,差异具有统计学意义(P<0.01),其pFAK、p-JNK、p-ERK和p38MAPK蛋白表达与A组比较,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。C、D组PEG10、p-FAK、pJNK、p-ERK和p38MAPK蛋白的表达较A组均降低,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。E、F组p-FAK、p-JNK、p-ERK和p38MAPK蛋白表达与B组比较,差异均有统计学意义(P值均<0.01),而C组与E组、D组与F组相比,PEG10、p-FAK、p-JNK、p-ERK和p38MAPK蛋白的表达差异亦均有统计学意义(P值均<0.01)。结论 Peg10基因失活后可增加ADR耐药的BEL-7404细胞株对5-Fu和ADR的敏感性,其作用机制可能与其下调p-FAK、p-JNK、p-ERK和p38MAPK蛋白的表达有关。

舒尼替尼对人高转移肝癌细胞株MHCC97-H局部黏着斑激酶表达的影响

目的探讨舒尼替尼对人高转移肝癌细胞株MHCC97-H的体外杀伤作用,以及对局部黏着斑激酶(FAK)表达水平的影响。方法 MHCC97-H肝癌细胞培养传代,空白对照组不加舒尼替尼,实验组加2.5、5、10和20μmol/L的舒尼替尼,分别作用24、48和72 h。采用瑞氏吉姆萨法染色,观察用药前后MHCC97-H肝癌细胞的形态学变化;MTT法检测细胞的增殖抑制率;用Western blot检测用药前后FAK的蛋白表达。结果舒尼替尼对肝癌细胞株MHCC97-H有抑制作用,瑞氏吉姆萨法染色200倍光镜下可观察到染色质固缩、胞核碎裂及凋亡小体等典型的凋亡形态。药物作用48 h时抑制率最明显,空白对照组,2.5、5、10和20μmol/L浓度下抑制率分别为(0.433±0.115)%、(32.863±1.471)%、(49.240±2.256)%、(63.797±2.707)%和(58.887±3.409)%,各组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示经不同浓度舒尼替尼作用48 h后,FAK蛋白的表达水平出现不同程度的下降,各组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论舒尼替尼对肝癌细胞株MHCC97-H有抑制及促凋亡作用,并能降低FAK蛋白的表达。

富含半胱氨酸蛋白61对人肾小管上皮细胞增殖与细胞周期的影响

目的观察富含半胱氨酸蛋白61（Cyr61）蛋白对人肾小管上皮细胞（HK-2）增殖与细胞周期的影响。方法细胞被分为空白对照、阴性对照和Cyr61转染组。克隆Cyr61cDNA，构建pEGFP-N2-Cyr61重组质粒，利用脂质体分别将重组质粒与pEGFP—N2空质粒瞬时转染HK-2。四唑盐比色实验（MTT）检测细胞增殖；流式细胞分析术检测转染效率和细胞凋亡率；Western印迹法检测Cyr61蛋白、磷酸化黏着斑激酶（p-FAK）、细胞周期蛋白依赖性激酶2（CDK2）的表达。结果pEGFP-N2-Cyr61重组质粒可高效转染HK-2细胞。与空白对照、阴性对照组相比，Cyr61转染组细胞和培养液中的Cyr61蛋白表达量显著提高，细胞增殖活力明显增强，细胞中G1时相的比例显著减少，s时相显著增加，细胞凋亡率下降（均P〈0．01）。Cyr61转染组细胞中P—FAK、CDK2表达量亦显著提高（P〈0．01）。结论高表达的Cyr61蛋白可通过FAK途径促进CDK2表达，从而促进HK-2细胞进入S期，促进细胞增殖，抑制细胞凋亡。

大麻素受体1、FAK mRNA在小鼠肝纤维化形成过程中肝组织中的表达及相互关系

目的研究大麻素受体1(CB1)mRNA在肝纤维化形成过程中表达的变化,从基因转录水平探讨其与黏着斑激酶(FAK)的关系。方法采用10%四氯化碳腹腔注射制备肝纤维化模型,分别于造模第2、4、6、8周留取小鼠的肝组织及血清。通过肝组织病理对肝纤维化程度进行评分,荧光定量PCR检测CB1 mRNA和FAK mRNA水平,ELISA方法检测血清中转化生长因子(TGF)β1的含量。结果与正常对照组相比,各模型组小鼠肝组织中CB1 mRNA和FAK mRNA含量显著升高(P<0.05),而且随造模时间的延长,CB1 mRNA和FAK mRNA含量亦逐渐增高,各组之间差异有统计学意义(P<0.05)。CB1 mRNA的含量不但与肝纤维化评分呈显著正相关(r=0.747),而且与肝组织中FAK mRNA含量也呈显著正相关(r=0.907),P值均<0.01。各模型组小鼠血清中TGFβ1的水平随造模时间延长而不断升高,各组间差异具有统计学意义(P<0.05)。肝组织中CB1 mRNA的含量与血清TGFβ1水平呈显著正相关(r=0.542,P<0.01)。结论 CB1可能通过激活FAK,以磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)通路诱导肝星状细胞(HSC)增殖并分泌大量TGFβ1,从而促进肝纤维化的形成。

真性红细胞增多症急性髓细胞白血病转化三例

真性红细胞增多症(polycythemia vera,PV)是一种起源于造血干细胞的克隆性骨髓增殖性疾病。PV起病隐匿,进展缓慢,晚期可以转化为骨髓纤维化或急性白血病等骨髓增生异常的疾病。现报道3例PV转化为急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)的病例,以提高临床医师对此类疾病的认识。1 临床资料病例1患者,男性,53岁,主因头晕、乏力3年余于2011年12月首次收住本院。

高浓度氧通过抑制黏着斑激酶表达损伤早产大鼠肺泡Ⅱ型细胞

目的探讨高浓度氧暴露不同时间点早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（AECⅡ）凋亡规律及其与黏着斑激酶（FAK）表达的关系。方法原代培养早产鼠AECⅡ，暴露于高氧环境中6、12、24和48h，并以空气组作为对照组，采用Annexin—V和PI双标法经流式细胞仪检测AECⅡ凋亡情况，并采用Western印迹、RT—PCR技术分析AECⅡFAK多肽、磷酸化FAK（FAK—Tyr^397）多肽和FAKmRNA表达变化。结果与空气组比较，高氧暴露12h，Annexin—V^＋／PI^-（早期凋亡）亚群细胞所占比例最高，达（23．83±4．43）％。随高氧暴露时间延长，Annexin—V^＋／PI^-亚群细胞所占比例逐步减低，而Annexin—V^＋／PI^-亚群细胞所占比例逐步增高（P〈0．05或P〈0．01）。AECⅡFAK、FAK—Tyr^397多肽及FAKmRNA表达水平随高氧暴露时间延长呈明显下降趋势（P〈0．05或P〈0．01）。结论高浓度氧抑制FAK表达可能是AECⅡ凋亡和坏死的重要原因之一。

非小细胞肺癌EGFR-TKI耐药机制研究进展

晚期非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）的一线治疗正由传统的化疗向分子靶向治疗发展。根据肿瘤组织癌变驱动基因的改变,选择相应的靶向药物已成为晚期NSCLC一线治疗的发展方向。

Paxillin、FAK和PTEN在胃腺癌组织中的表达及其临床意义

背景:研究表明Paxillin、黏着斑激酶(FAK)和PTEN在许多肿瘤的发生、发展、侵袭、转移中发挥重要作用,但联合检测三者在胃癌中表达的报道罕见。目的:研究正常胃黏膜和胃腺癌组织中Paxillin、FAK和PTEN的表达及其临床意义。方法:以免疫组化SP法分别检测40例正常胃黏膜组织和88例胃腺癌组织中Paxillin、FAK和PTEN表达,并分析其与胃腺癌临床病理特征的关系以及Paxillin与PTEN表达之间的相关性。结果:与正常胃黏膜组织相比,胃腺癌组织Paxillin(65.9%对32.5%,P<0.05)、FAK(56.8%对17.5%,P<0.05)阳性表达率显著增高,PTEN阳性表达率显著降低(47.7%对100%,P<0.05)。Paxillin、FAK和PTEN表达与胃腺癌分化程度、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期有关(P<0.05),与性别和年龄无关。胃腺癌组织中Paxillin表达与PTEN表达呈显著负相关(r=-0.369,P<0.05)。结论:Paxillin、FAK高表达和PTEN低表达可能与胃腺癌的浸润、淋巴结转移等恶性生物学行为相关,联合检测三者可能有助于判断胃腺癌恶性程度和患者预后。

黏着斑激酶在肿瘤坏死因子α上调人角膜上皮细胞明胶酶活性中的作用

目的探讨黏着斑激酶（FAK）在肿瘤坏死因子α（TNF-α）上调体外培养人角膜上皮细胞明胶酶活性中的作用。方法实验研究。体外培养无眼部疾患人角膜上皮细胞，将传至3—4代的细胞暴露于含1μg/L TNF-α（B组）、10μg／LTNF—α（C组）、100μg/LTNF-α（D组）的培养基中，对照组（A组）用含等量磷酸盐缓冲液（PBS）的培养基处理，明胶酶谱分析各组条件培养基中基质金属蛋白酶2和9（MMP-2、MMP-9）的活性，免疫印迹法分析FAK总蛋白表达及磷酸化FAK的表达；运用RNA干扰技术特异性抑制人角膜上皮细胞FAK的表达并重复以上过程。统计学方法使用单因素方差分析，各组间比较采用TukeyHSD检验。结果明胶酶谱分析：与A相比，B、C、D组MMP-2、MMP-9活性均明显上调，差异有统计学意义（A、B、C、D组MMP-2活性表达分别为：124．06±4．06、146．72±5．51、241．18±5．65、389．95±4．44，F=2960．91，P=0．000；MMP-9活性表达分别为：122．78±5．86、165．70±7．90、479．49±6．22、495．88±5．03，F=4937．46，P=0．000），各组间比较差异均有统计学意义（MMP．2各组间比较均为P=0．000；MMP-9各组间比较P=0．000）；免疫印迹分析：C、D组中磷酸化FAK较A组增加，差异有统计学意义（C、D组磷酸化FAK分别为：0．52±0．03、0．61±0．06；F=431．03，P=0．000），100μg／L TNF-α组较10μg／LTNF-α组中磷酸化FAK表达增加（P=0．005）；运用RNA干扰技术特异性抑制人角膜上皮细胞FAK表达后，FAK总蛋白较特异性抑制之前明显下调，B、C、D组MMP-2的活性差异无统计学意义（转染后A、B、C、D组MMP-2分别为：55．13±0．66、55．67±0．43、55．49±0．20、55．91±0．37；F=2．73，P=0．079）。10、100汕g／LTNF-α干预组中MMP-9少量增加（转染后A、B、C、D组MMP-9分别为：80．48±0．39，81．26±0．62，84．43±0．47，85．56±0．61；F=105．80，P=0．000）但增加幅度较转染前明显减小，D组较C组MMP-9活性增强，差异有统计学意义（P=0．019）。仅在100μg／LTNF-α干预组中检测到FAK磷酸化（0．47±0．05），但表达量较抑制前明显减少（t=5．03，P=0．001）。结论FAK信号在TNF-α上调人角膜上皮细胞明胶酶活性过程中发挥一定作用。

肾综合征出血热患者循环内皮细胞中黏着斑激酶的表达

目的检测肾综合征出血热（HFRS）患者循环内皮细胞（CEC）中磷酸化黏着斑激酶910（FAKps910）的表达。方法50例HFRS患者按病情分为轻型17例，中型20例，危重型13例，另纳入健康对照组20例。Percoll密度梯度离心法分离内皮细胞，流式细胞技术检测APC—CD31特异性标记的CEC中FAKps910的表达。数据行单因素方差分析。结果发热早期CEC中FAKps910阳性表达率为59．87％±9．580A，健康对照组为21.14％±2．53％，发热期末或低血压休克期为11．64％±2．17％（F=262．31，P〈0．01），以后恢复至正常。发热期末或低血压休克期CEC中FAKps910的阳性率在轻型患者为17．45％±2．64％，中型为13．84％±2．54％，危重型为7．47％±2．57％，各型及与健康对照组之间差异均有统计学意义（F=52．642，P〈0．01）。结论HFRS患者CEC中黏着斑激酶（FAK）与病情轻重有关，FAKpsg10可能参与汉坦病毒引起的β3整合素介导的血管内皮细胞损伤。

穿心莲内酯对人骨肉瘤细胞的影响及其分子机制

目的探讨穿心莲内酯(AG)对人骨肉瘤细胞的影响及其分子机制。方法分别以含有AG为0、5、10、20、50、100μmol/L(A、B、C、D、E、F组)的培养基培养人骨肉瘤细胞,倒置显微镜下计数各组细胞数,并计算各组细胞密度及细胞生存率;采用平板克隆实验观察AG对人骨肉瘤HOS和U2OS细胞增殖能力的影响;Transwell小室实验观察AG对人骨肉瘤HOS和U2OS细胞侵袭和迁移能力的影响;流式细胞术观察AG对人骨肉瘤HOS和U2OS细胞周期分布的影响;Western Blot实验检测AG对鞘氨醇激酶(SphK1)以及黏着斑激酶(FAK)表达水平的影响。结果组别、时间以及组别与时间交互作用均对人骨肉瘤HOS和U2OS细胞的生存率具有明显影响(F组别=9608.52、5409.49,F时间=8312.14、352.91,F时间*组别=18.06、3.55,P<0.05);使增殖能力呈浓度依赖性降低(FHOS=97.41,FU2OS=174.13,P<0.05);侵袭和迁移能力明显减弱(t=39.06~135.96,P<0.05);组别、周期及组别与周期交互作用均对人骨肉瘤HOS和U2OS细胞的细胞周期分布具有明显影响(F组别=35.05、8.24,F周期=3211.19、192.49,F周期*组别=75.96、140.97,P<0.05);SphK1和FAK的表达水平均下调(t=15.94~95.79,P<0.05)。结论AG对人骨肉瘤细胞有杀伤作用,其可能与AG影响SphK1信号通路有关。

朝鲜白头翁、人参和甘草的复合水提物的抗血管生成作用(英文)

目的:本研究旨在证实朝鲜白头翁、人参和甘草的复合水提物(water extract ofPulsatillakoreana(Yabe ex Nakai)Nakai ex T.Mori.,PanaxginsengC.A.Meyer andGlycyrrhizauralensisFisch,WEPPG)的抗血管生成作用。方法:使用纤维母细胞生长因子致血管生成的人类脐静脉内皮细胞模型衡量细胞的增殖、黏附及迁移,同时进行细管形成实验及纤维母细胞生长因子致鸡胚绒毛尿囊膜血管生成实验检测WEPPG的抗血管生成作用。结果:WEPPG能够显著抑制纤维母细胞生长因子所致血管生成的人类脐静脉内皮细胞的增殖、黏附及迁移。信号蛋白分析显示多种蛋白表达变化,如细胞周期素A、p63、KIP2的上调及nibrin蛋白和黏着斑激酶的下调。与对照组相比,WEPPG显著减少了鸡胚绒毛尿囊膜血管生成。结论:本研究的结果证实了WEPPG的抗血管生成作用,这可能是这种药物具有抗癌功效的原因之一。

黏着斑激酶相关非激酶对肝星状细胞活化及迁移功能的影响

目的探讨黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)对肝星状细胞(HSCs)活化及迁移功能的影响。方法2019年3—9月,收集贵州医科大学附属医院肝胆外科9例肝纤维化患者肝组织标本。人体肝组织分为健康对照组与纤维化组。C57BL/6实验小鼠分为野生型(WT)、FRNK基因敲除型(FRNK-/-)两组,以四氯化碳(CCl4)进行肝纤维化造模,完成后使用腺病毒载体构建FRNK基因过表达型(Ad-FRNK)。通过HE、Masson染色观察肝组织病理改变,Western蛋白印迹法检测磷酸化黏着斑激酶(PY397-FAK)与α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达;提取小鼠原代HSCs,细胞划痕实验检测FRNK对HSCs迁移功能的影响,及对Rac、Rho活化的影响。结果肝纤维化人体肝组织PY397-FAK蛋白表达量显著高于健康对照组(0.88±0.09比0.73±0.09),FRNK低于健康对照组(0.68±0.09比0.79±0.11),P值均<0.01。CCl4造模后,FRNK-/-组小鼠肝纤维化[(153±13)%]较WT组(100%)程度更明显,PY397-FAK与α-SMA蛋白表达量高于WT组(2.50±0.23比0.75±0.09,1.46±0.20比0.92±0.10),P值均<0.01。在FRNK-/-组小鼠体内重新导入FRNK基因(100%)后,小鼠肝纤维化程度减轻[(74±6)%],PY397-FAK与α-SMA蛋白表达量减少(0.68±0.11比1.12±0.19,0.68±0.10比0.85±0.06),P值均<0.01。体外实验显示,FRNK可抑制HSCs的迁移功能[WT︰FRNK-/-︰Ad-FRNK为(339±49)%︰(580±53)%︰(259%±33)%],并抑制Rac和Rho蛋白的活化(Rac为0.54±0.07比0.91±0.10比0.77±0.12,Rho为0.45±0.05比0.64±0.06比0.53±0.07),P值均<0.01。结论FRNK可通过抑制HSCs的活化及迁移功能改善肝纤维化,其机制可能与下调PY397-FAK、抑制Rac和Rho的活化有关。

STYK1激活Akt信号通路促进肺癌细胞增殖

目的探讨酪氨酸蛋白激酶1(tyrosine-protein kinase 1,STYK1)在肺癌组织中的表达水平、对肺癌细胞生存的影响及其作用机制。方法定量PCR检测STYK1在35例肺癌组织中的表达水平,分析其与患者临床病理特征间的关系。沉默肺癌细胞A549和HCC827中STYK1基因,定量PCR检测mRNA表达水平,Western blot检测蛋白表达水平,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果STYK1在肺癌组织中表达水平升高(P<0.01)。其表达水平在肺癌病理分期方面比较,差异具有统计学意义(P<0.01)。沉默STYK1后,肺癌细胞增殖活性降低,细胞凋亡率升高,差异均具有统计学意义(均P<0.01)。沉默STYK1抑制Akt磷酸化,下调Bcl-2和Bcl-xL表达水平(均P<0.01)。结论STYK1在肺癌组织中呈高表达。其可能通过激活Akt信号通路,促进肺癌细胞增殖。

伴肌萎缩重症肌无力4例分析并文献复习

目的探讨伴肌萎缩重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者的临床特征、抗体及电生理特点,提高对此少见疾病的认识。方法回顾性分析作者医院2003—2016年收治的伴肌萎缩MG患者4例的临床资料,分析其临床特征、抗体、神经电生理检查、治疗及预后特点。结果 4例患者病程中出现不同程度的肌肉萎缩,1例为手肌(左侧大鱼际肌、小鱼际肌及第一骨间肌)萎缩,3例为舌肌萎缩(其中1例同时伴面肌萎缩);抗体检查显示乙酰胆碱受体抗体(AChR-Ab)阳性3例,1例为抗骨骼肌特异性受体酪氨酸激酶抗体(MuSK-Ab)阳性。4例患者低频重复神经刺激波幅均可递减,高频刺激波幅未见明显递增。伴手肌萎缩MG患者针极肌电图检查结果提示神经源性损害。结论伴肌肉萎缩MG较罕见,MuSK-Ab、AChR-Ab阳性MG患者均可出现肌肉萎缩,其机制有待进一步明确;早期行神经电生理检查、AChR-Ab及MuSK-Ab测定有助于明确诊断。

肝素对脓毒症小鼠急性肺损伤时FAK/RhoA/ROCK信号通路的影响

目的评价肝素对脓毒症小鼠急性肺损伤(ALI)时黏着斑激酶(FAK)/Ras同源家族成员A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)信号通路的影响。方法SPF级健康成年雄性C57BL/6J小鼠30只,6~8周龄,体质量20~23 g,采用随机数字表法分为3组(n=10):对照组(C组)、ALI组和肝素组(H组)。采用腹腔注射LPS 15 mg/kg的方法制备脓毒症小鼠ALI模型,C组注射等量生理盐水。H组尾静脉注射肝素钠10 U,30 min后制备模型,C组和ALI组注射等量生理盐水。于注射LPS后24 h时深麻醉下采集眼球静脉血样,随后处死小鼠取肺组织。采用ELISA法测定血清IL-1β、IL-6和TNF-α浓度;HE染色法观察肺组织病理学结果并行肺损伤(LI)评分,确定肺湿质量/干质量(W/D)比值;免疫组化染色法观察血管内皮黏附因子1(VCAM-1)表达;Western blot法检测FAK、磷酸化FAK(p-FAK)、RhoA、结合GTP形式Rho蛋白A(RhoA-GTP)和ROCK表达。结果与C组相比,ALI组血清IL-1β、IL-6、TNF-α浓度、肺W/D比值、LI评分和VCAM-1表达水平升高,肺组织p-FAK、RhoA-GTP和ROCK表达上调(P<0.05);与ALI组相比,H组血清IL-1β、IL-6、TNF-α浓度、肺W/D比值、LI评分和VCAM-1表达水平降低,肺组织p-FAK、RhoA-GTP和ROCK表达下调(P<0.05)。结论肝素减轻脓毒症小鼠ALI的机制与抑制FAK/RhoA/ROCK信号通路有关。

咖啡酸苯乙酯靶向调控人结肠癌HT-29细胞FAK-ERK信号通路的研究

目的探讨咖啡酸苯乙酯(caffeic acid phenethyl ester,CAPE)对结肠癌HT-29细胞FAK-ERK信号转导通路中相关蛋白表达的作用,寻找其作用靶点,试图阐明CAPE抗肿瘤作用的分子机制。方法用不同浓度CAPE处理HT-29细胞,利用Hoechst33258染色法和流式细胞术,检测细胞凋亡的发生。应用Western印迹法分析不同浓度CAPE对HT-29细胞中黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)和细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulatedkinase,ERK)蛋白表达的影响。结果 Hoechst33258染色发现CAPE作用后凋亡细胞数量增加。流式细胞仪细胞凋亡率分析显示,0,2.55,.0,7.5和10μg/ml处理HT-29细胞24 h后,细胞凋亡率上升,呈剂量依赖性。Western印迹结果显示,在0～10μg/ml范围内不同浓度CAPE作用于HT-29细胞24 h后,FAK、ERK蛋白表达随CAPE浓度的增加而下调。结论 CAPE可诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡,其作用机制可能与CAPE抑制FAK-ERK信号转导通路的激活有关。