树突状细胞在黏膜免疫模型鼠体内的分布及趋化因子的表达

目的:研究小鼠树突状细胞(DC)在体内的迁移、分布、形态特征及趋化因子的表达情况,探讨趋化因子在黏膜免疫模型鼠体内的表达及其在DC迁移过程中的调控作用.方法:采用光镜、免疫组织化学和原位杂交染色方法,观察肿瘤模型鼠中DC的分布和形态学特征;分析S-100蛋白、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、T细胞特异性趋化因子(Rantes)、巨噬细胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)和趋化因子受体7(CCR7)的表达情况,并与对照组进行比较.结果:在黏膜免疫模型小鼠体内的DC主要分布于肠系膜淋巴结(MLN)、集合淋巴小结(PP)和胃肠(GUT),与对照组数量比较有显著差异,(35.32±3.17vs15.03±1.81,29.14±2.03vs11.35±0.97,27.96±1.97vs9.86±0.82,P<0.01)其MCP-1,Rantes,MIP-1β和CCR7表达明显增高,分别与对照组数密度和面密度比较有显著差异.结论:在黏膜免疫模型小鼠体内的DC可向肠系膜淋巴结、集合淋巴小结和胃肠等器官迁移和聚集;MCP-1,Rantes,MIP-1β和CCR7表达均明显升高.

树突状细胞在黏膜免疫模型小鼠中的分布及E-cadherin和ICAM-1表达的研究

目的通过研究小鼠树突状细胞在黏膜免疫模型小鼠中分布特征及上皮型钙黏附分子(E-cadherin)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达,以探讨E-cadherin和ICAM-1在树突状细胞迁移过程中的调控作用。方法采用光镜和免疫组织化学染色方法,观察黏膜免疫模型小鼠中树突状细胞的分布特征;分析E-cadherin和ICAM-1的表达情况。结果体内的树突状细胞在黏膜免疫模型小鼠中,主要分布于肠系膜淋巴结、回肠集合淋巴小结、胃和空回肠黏膜及黏膜下层,与对照组相比有显著差异,其ICAM-1表达明显增高,E-cadherin表达下调,分别与对照组数密度和面密度比较有显著差异。结论在树突状细胞迁移运动过程中,E-cadherin和ICAM-1黏附分子可能起着关键性的调控作用。

白色念珠菌经口感染ICR小鼠建立系统性感染模型

目的探究白色念珠菌(C.albicans)经口感染ICR小鼠建立系统性感染模型,观察C.albicans经黏膜感染后在小鼠体内组织增殖及分布规律。方法 46只ICR雄性小鼠随机分为模型组A(n=20)、模型组B(n=20)、对照组(n=6)。模型组采用棉签法口腔接种C.albicans(7×106cfu/m L),对照组同方法接种等容积生理盐水。模型组A小鼠用于临床、生存、剖检观察试验;模型组B接种后第3、5、7天随机解剖5只小鼠用于组织载菌量和病理检验(对照组每个时间点解剖2只),活菌平板计数法检测小鼠组织载菌量,光镜观察小鼠舌、胃、肝、肾病理组织学变化。结果模型组小鼠接种后第3天舌面出现明显白斑并随时间加重引起死亡,第5天小鼠死亡率超过50%,第7天死亡率达100%,并能从舌(87.5%)、胃(87.5%)及内脏组织肝(54.5%)、肾(50.5%)、肺(20%)和心脏(4%)中分离到C.albicans,显微镜观察在舌、食道、胃、肝、肾存在菌丝的增殖,对照组未见C.albicans生长,提示模型组小鼠因C.albicans黏膜感染引起小鼠播散性的系统性感染。结论 C.albicans可在一定条件下突破黏膜免疫屏障引起小鼠机会性系统性感染,从而加重感染死亡。

真菌生物膜体内模型研究进展

生物膜是临床真菌感染的常见形式。以生物膜状态存在的真菌与浮游真菌存在很大不同。由生物膜引发的感染较难治愈。因此,开发对抗真菌生物膜的新手段成了研究热点。动物体内模型可以更好地与宿主免疫系统联系起来,并且对于医疗器械相关生物膜感染的研究意义更加重大。本文选用白色念珠菌作为真菌研究对象。本文的主要目的就是介绍用于研究真菌生物膜的5种体内生物膜模型,并对这些模型的操作过程、应用、优势和不足进行介绍。

毛冬青提取物对小鼠放射性口腔黏膜炎模型创面修复作用研究

目的:研究毛冬青提取物外用对放射性口腔黏膜炎模型小鼠创面愈合的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法:选取8周龄雄性C3H小鼠,通过X射线单次照射法照射口腔及舌部诱导复制小鼠放射性口腔黏膜炎(RTOM)模型,随机分为模型组、细胞生长因子组和冬青组。HE染色观察黏膜病损恢复情况、成纤维细胞密度情况。免疫组化评价炎性因子TNF-α和IL-6的表达情况,Western blot进一步检测各组TNF-α和IL-6蛋白的表达。结果:成功复制小鼠RTOM模型。模型组小鼠7d后表现为口腔溃疡溃疡Ⅲ级,口腔黏膜上皮层厚度变薄,角化上皮结构轻微紊乱,毛细血管扩张,可见炎性细胞浸润;细胞生长因子组小鼠表现为口腔溃疡溃疡Ⅱ级,颊黏膜上皮厚度较正常组略微增加,角化上皮结构正常;冬青组小鼠处理7 d后表现为口腔溃疡溃疡I级,颊黏膜角化增厚,角化上皮结构正常。免疫组化和Western blot结果显示,细胞生长因子组和冬青组小鼠颊黏膜TNF-α及IL-6表达明显低于模型组,冬青组小鼠颊黏膜TNF-α及IL-6表达明显低于细胞生长因子组,细胞生长因子组和冬青组小鼠TNF-α及IL-6表达阳性率明显低于模型组,冬青组小鼠TNF-α及IL-6表达阳性率明显低于细胞生长因子组。结论:毛冬青提取物外用对小鼠RTOM的溃疡创面有修复作用。

补中益气丸对糖尿病大鼠NO、PGs、MAN1A1相关胃黏膜损伤的修复

选用SD大鼠建立糖尿病胃黏膜损伤模型,动态观察补中益气丸对糖尿病大鼠NO、α-甘露糖苷酶(MAN1A1)、PGs和AMS的影响,探讨糖尿病状态下胃黏膜损伤的发病机制及补中益气丸的作用。通过比色法和ELISA法检测NO、MAN1A1、PGs和淀粉酶(AMS)动态变化。结果显示,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)结合30%乙醇灌胃方法可制作出糖尿病大鼠胃黏膜损伤模型;补中益气丸可显著降低糖尿病大鼠胃黏膜损伤指数,调节血清NO和胃黏膜前列腺素(PGs)含量,升高血清MAN1A1和AMS活性的作用。结果表明,糖尿病状态下胃黏膜损伤的发病机制可能跟糖尿病状态下的NO、MAN1A1、PGs缺陷有关,补中益气丸对以上异常有显著治疗作用,可能是通过促进NO生成、升高MAN1A1活性,因而促进蛋白N-糖基化。

六月雪水提取物对实验性胃黏膜损伤的修复作用

目的研究六月雪水提取物对实验性胃黏膜损伤的修复作用。方法采用无水乙醇胃饲诱发急性胃黏膜损伤大鼠模型并于伤后给药2 d处死大鼠,测定给药后胃黏膜损伤面积,病理组织学观察其修复情况。结果六月雪水提取物对大鼠乙醇诱发的胃黏膜损伤有明显的修复作用。结论六月雪水提取物对实验性胃黏膜损伤有明显的修复作用。

积雪草苷应用于漱口水中的护龈舒缓作用评估

将水溶性的积雪草苷按0.3%的加量添加到无其他活性功效组分的基础漱口水产品中,可制备得到稳定的口感良好的漱口水产品。经口腔黏膜上皮模型体外模拟试验表明,含积雪草苷0.3%的漱口水在浓度为10%时能明显降低炎症因子IL-6和IL-8的含量,表明积雪草苷应用于漱口水中有护龈舒缓作用。

保健品对胃黏膜损伤的辅助保护作用方法学研究

目的:通过与新药研究的比较,确定并完善评价供试保健品对胃黏膜损伤的辅助保护功能的试验方法。方法:以活谓素胶囊为例,通过乙醇诱发大鼠急性胃黏膜损伤;乙酸诱发大鼠慢性胃黏膜损伤;消炎痛诱发大鼠胃黏膜损伤3种试验模型,进行试验方法学研究。结果:采用改进的模型和评价方法进行研究,活谓素胶囊连续给药对胃黏膜损伤有明确的保护作用。结论:经改进后的动物模型和评价方法,可以更客观准确地评价保健品对胃黏膜损伤的辅助保护作用。

用胶原酶治疗口腔黏膜下纤维化对患者开口度及咀嚼功能的影响

目的口腔黏膜化造成患者开口受限。本研究的目的就是改善患者的开口度,降低此病发展为口腔癌的几率。方法首先诱导出兔口腔黏膜纤维化的模型,评价外源性胶原酶对此类病损的疗效。应用胶原酶治疗口腔黏膜纤维化的患者。结果正常人口腔黏膜胶原酶的活性为黏膜下纤维化组织区胶原酶活性的3～5倍。经胶原酶治疗后黏膜下纤维化患者张口度明显好转,患者对辛辣、酸、冷、热过敏的情况亦大为改善。结论用胶原酶治疗对改善黏膜下纤维化患者的张口度是有效的。

电解抛光法制备铝合金EBSD试样方法研究

目的为在导电单相金属中获得高质量EBSD试样表面,研究电解抛光法制备铝合金试样的方法,并提供理论支持。方法基于Jacquet黏膜模型和金属阳极原理,提出利用阳极极化曲线、电流-时间曲线和扫描电镜二次电子图像获得电解抛光工艺参数,批量制备铝合金EBSD试样的理论方法。采用恒电位法中的静态法记录稳定的电压-电流走势,以获得电流稳定的实验时间,在90 s内进行各电压下的电解抛光实验,获得电压与稳定电流的对应关系,并绘制阳极极化曲线。电流由持续稳定转至持续上升后的斜率与电压横坐标相交处为理论最低分解电压值。结合扫描电镜二次电子图像在最低分解电压以上观察抛光表面。结果获得最优抛光电压值为31 V。利用电流随时间的变化曲线,结合黏膜模型分析,并通过扫描电镜二次电子图像验证,最优电压下的最佳抛光时间为12 s,该值是电流-时间曲线中的电流最低点。此工艺使制备的铝合金EBSD样品标定率为97%,是理想的电解抛光工艺。结论采用阳极极化曲线获得的最优电压和最优电压下的最小电流规律由Jacquet黏膜模型支持,其所获得的电解抛光工艺能够制备出优质的样品表面,也能够为其他金属块体导电材料和其他需要电解抛光的实验类型提供获得最佳电解抛光工艺值的理论方法。

对胃粘膜损伤有辅助保护功能的评价试验中的病理学方法的探讨与建议

目的建立科学的大体病理学检查和组织病理学诊断的评分原则、更合理的评分标准以及合理的统计学方法,为保健食品对胃粘膜损伤有辅助保护作用提供更为科学、可行的评价方法。方法通过对大鼠胃黏膜急性损伤酒精模型的全面分析,针对现行方法中评价方法的缺点,根据病变特点及病理学检查的原则和半定量分析方法,以及相应的统计学方法等信息化处理,进行方法学探讨。结果大体病理学检查按照病变所占面积以及在整个胃粘膜所占的比例;组织病理学诊断根据病变累及粘膜层的深度作为判定粘膜受损严重程度的主要依据,其他各种病变作为参考因素。分别分为未见异常(0分)、轻度病变(1分)、中度病变(2分)和重度病变(3分)。统计学方法采用Ridit统计学方法分析病理学半定量的结果。结论从大体病理学、组织病理学的评价方法以及数据处理方法和结果判定等方面,提出了对胃粘膜损伤有辅助保护功能的动物实验相对更为科学、可行的评价方法的建议。

利用小鼠炎症模型评价苯扎氯铵的黏膜毒性

目的利用小鼠黏膜炎症因子模型,研究不同浓度苯扎氯铵(BZK)对生殖道黏膜的刺激毒性,以探究BZK作为黏膜用药物的安全性和应用前景。方法连续三天用浓度为0.02%、0.2%和2%的BZK凝胶处理小鼠阴道黏膜,每天收集小鼠阴道灌洗液,用多指标流式蛋白定量技术(Cytometric Bead Array,CBA)检测其中的6种炎症因子[白介素(Interleukin,IL)-2、IL-4、IL-6、IL-17A和肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor,TNF)-α、γ干扰素(Interferonγ,IFN)-γ]的表达情况;利用苏木紫-伊红(Hematoxylin-Eosin,HE)染色法对小鼠阴道黏膜的病理学损伤情况进行观察。结果 2%的BZK凝胶诱导了较为明显的小鼠阴道黏膜上皮损伤,0.02%和0.2%的BZK与安慰剂组相比无明显病理改变;但是0.2%的BZK显著上调了IL-6和TNF-α在阴道灌洗液中的表达,而0.02%和2%的BZK诱导的各炎症因子与安慰剂组相比差异无统计学意义。结论 2%和0.2%的BZK具有一定的黏膜毒性;0.02%的BZK展现了较好的安全性,该浓度下BZK的病原体感染抑制能力需要进一步研究确认。

盐酸文拉法辛鼻喷剂在大鼠体内的药动学研究及对鼻黏膜纤毛毒性的评价

目的研究盐酸文拉法辛（Ven）鼻喷剂在大鼠体内的药动学特征,并评价其对鼻黏膜纤毛的毒性。方法以Ven灌胃给药为对照,大鼠经鼻腔给予Ven鼻喷剂后,测定血浆中Ven的浓度并比较两种给药途径的主要药动学参数;以离体蟾蜍上颚黏膜为模型,经Ven鼻喷剂处理后,记录黏膜纤毛的持续摆动时间（LTCM）。结果 Ven在大鼠体内的药动学过程符合二室模型;Ven经鼻腔及灌胃给药后,药动学参数Tmax分别为2.67±0.82、11.67±2.58 min,Cmax分别为15.90±6.54、6.43±2.93μg·m L-1,二者比较均有统计学意义;Ven鼻喷剂的相对生物利用度（Fr）高达649.6%;经Ven鼻喷剂处理后,首次测得蟾蜍上颚黏膜的LTCM为42.2±2.6 min,纤毛摆动恢复后,再次测得LTCM为174.8±4.1 min,鼻喷剂组总的LTCM为阴性对照组的61.2%。结论 Ven鼻喷剂在大鼠体内吸收迅速,生物利用度高,且对鼻黏膜纤毛的毒性较小,是一种具有潜在开发前景的鼻用新制剂。