弥漫大B细胞淋巴瘤中NFκB活化相关基因表达与Bcl2表达的关系

目的探讨DLBCL中Bcl2表达与MALT1和CARMA1表达的关系,了解3种分子对DLBCL临床特征和发展过程的影响。方法收集非特指DLBCL病例42例及其收集临床病理资料,用免疫组化染色检查肿瘤中Bcl2和MALT1蛋白的表达,RTPCR检查CARMA1 mRNA水平,对收集和检查资料进行统计学分析。结果半数以上病例不同程度表达Bcl2(29/42,69.05%)和MALT1蛋白(28/42,66.67%),全部病例都检测出CARMA1 mRNA表达。Bcl2与MALT1蛋白表达呈明显正相关,Bcl2阳性表达病例的CARMA1 mRNA水平明显高于阴性表达病例。Bcl2和MALT1阳性和阴性表达病例相比较:阳性表达病例的临床分期较晚,但IPI指数没有明显差异。CARMA1 mRNA高表达和低表达水平病例比较:临床分期无明显差异,但高表达水平者具有较高的IPI指数。Bcl2、MALT1和CARMA1的表达与DLBCL患者的发病年龄、性别无明显相关。结论 DLBCL中Bcl2的表达可能部分与肿瘤中MALT1和CARMA1对NFκB的异常活化有关,Bcl2、MALT1和CARMA1表达可能与肿瘤的临床发展和预后有关。

长链非编码RNA浆细胞瘤多样异位基因1对幽门螺旋杆菌感染胃上皮细胞系引起的炎症反应和细胞迁移的影响

目的研究长链非编码RNA浆细胞瘤多样异位基因1(PVT1)在幽门螺旋杆菌(HP)感染相关胃癌中的作用。方法在HP感染的胃黏膜正常上皮细胞(GES-1)中,用实时定量PCR(qRT-PCR)检测PVT1的表达;通过瞬时转染小干扰RNA,在胃癌细胞系SGC-7901中敲低PVT1,然后与HP共培养,用qRT-PCR检测炎症相关细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素(IL)-1β、IL-6及IL-8的表达情况;在敲低PVT1后,通过细胞划痕实验,检测PVT1对胃癌细胞增殖及迁移能力的影响。RNA下拉联合质谱分析技术检测能够与PVT1相互结合的蛋白,并用RNA下拉实验联合Western blot验证质谱分析结果的准确性。结果在HP感染的胃黏膜正常上皮细胞GES-1中,PVT1明显上调(t=7.160,P=0.019)。在胃癌细胞中敲低PVT1,再用HP感染,发现炎症因子TNF-α(t=3.899,P=0.011)、IL-1β(t=14.610,P=0.000)、IL-8(t=6.557,P=0.001)的表达受到明显抑制。PVT1敲低后,对胃癌细胞的增殖能力无影响,但抑制细胞的迁移能力。PVT1可能与RPS8蛋白相互作用。结论PVT1可能作为促炎因子促进胃癌细胞迁移,在HP感染相关的胃癌中发挥调节作用。

LncRNA PVT1对弥漫大B细胞淋巴瘤细胞活性的影响及其机制

目的 探究长链非编码RNA(LncRNA)浆细胞瘤变体异位基因1(PVT1)对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞生物学行为的影响,并分析其潜在机制。方法 收集41例DLBCL病人和15例淋巴结反应性增生(RLH)病人的组织标本,体外培养人正常B淋巴细胞GM12878和人DLBCL细胞(OCI-Ly3、U2932、TMD8),对TMD8细胞进行转染,将其分为control组(只转染Lipofectamine-2000)、si-NC组(转染si-NC)、inhibitor-NC组(转染inhibitor-NC)、si-PVT1组(转染si-PVT1)、miR-145-5p inhibitor组(转染miR-145-5p inhibitor)、si-PVT1+miR-145-5p inhibitor组(转染si-PVT1和miR-145-5p inhibitor)。应用qRT-PCR方法检测各组细胞PVT1 mRNA和miR-145-5p表达,Western Blot方法检测CDK6蛋白表达,CCK-8法检测TMD8细胞增殖,流式细胞术检测TMD8细胞周期变化,Transwell实验检测TMD8细胞迁移和侵袭能力,RNA pull down和双荧光素酶报告基因法验证PVT1、miR-145-5p与细胞周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)的靶向关系。结果 DLBCL组织PVT1 mRNA、CDK6蛋白的表达水平高于RLH组织,miR-145-5p表达低于RLH组织(t=14.264~24.445,P<0.05)。与GM12878细胞比较,OCI-Ly3、U2932、TMD8细胞中PVT1 mRNA、CDK6蛋白表达均增加,miR-145-5p表达均减少(F=69.557~234.718,P<0.05)。6组细胞PVT1 mRNA、miR-145-5p、CDK6蛋白表达及增殖率、G0/G1期细胞比例、S期细胞比例、迁移和侵袭细胞数差异有统计学意义(F=25.589~319.150,P<0.05);与control组比较,si-PVT1组细胞PVT1 mRNA、CDK6蛋白、增殖率、S期细胞比例、迁移和侵袭数量降低,miR-145-5p表达、G0/G1期细胞比例升高(P<0.05),miR-145-5p inhibitor组呈相反变化(P<0.05);下调miR-145-5p表达可减弱敲低PVT1对TMD8细胞恶性生物学行为的抑制作用(P<0.05)。过表达PVT1 mRNA增高CDK6蛋白表达、细胞增殖率、S期细胞比例、迁移和侵袭数量,降低miR-145-5p表达、G0/G1期的细胞比例(F=38.025~327.887,P<0.05)。miR-145-5p是PVT1的靶基因,且miR-145-5p可靶向下调CDK6表达。结论 敲低PVT1可抑制DLBCL细胞恶性生物学行为,其作用机制可能与调控miR-145-5p/CDK6轴有关。

组织学结合分子生物学参数诊断早期胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤

背景:胃黏膜相关淋巴组织(MALT)是幽门螺杆菌(M,pylori)感染的特殊征象,临床上较为常见,而胃MALT淋巴瘤则极为少见,两者在形态学上难以鉴别。目的:建立胃活检组织胃MALT淋巴瘤的阶梯式诊断流程,为H．pylori 根除治疗提供依据。方法:收集31例胃淋巴样增生(GLH)病例,行组织学、蛋白质、DNA和染色体水平的阶梯式检查。GLH组织学分级参照Isaacson标准,以免疫组化方法检测L26、UCHL-1、免疫球蛋白轻链κ、λ和Ki-67,半巢式聚合酶链反应(PCR)检测免疫球蛋白重链(IgH)基因重排,逆转录(RT)-PCR检测API2-MALT1融合。29例H．pylori感染者接受根除治疗,比较治疗前后的内镜和组织学表现。结果:23例GLH病例组织学分级为Ⅱ或Ⅲ级,仅2例为胃 MALT淋巴瘤(组织学Ⅴ级)。1例胃MALT淋巴瘤表达λ轻链限制,10例GLH(包括2例胃MALT淋巴瘤)检测到单克隆IgH基因重排．2例胃MALT淋巴瘤检测到API2-MALT1融合。随着GLH组织学分级的递增,Ki-67标记率和单克隆IgH基因重排检出率显著增高(P<0．05)。根除H．pylori后随访1．5-37个月,18例内镜和组织学完全缓解,4例部分缓解．7例无变化。结论:组织学结合Ki-67、IgH基因重排和API2-MALT1融合检测的阶梯式诊断流程有助于诊断早期胃MALT淋巴瘤．亦有助于药物治疗后的随访。

肺内异位胸腺瘤伴胸膜转移PET-CT图像1例报告

1病例资料患者女,67岁,因“无明显诱因间断喘息3个月”于2021年1月23日收治于武警特色医学中心。患者入院前2周喘息症状加重,活动后明显,伴头痛、头晕、纳差、胸部闷胀感及少量咳嗽,不能平卧(左侧卧位时症状可减轻、右侧卧位时症状加重),无明显咳痰,无咯血,无发热,无恶心、呕吐,无腹痛、腹泻,无尿急、尿频、尿痛等其他伴随症状。

伴有cyclinD1阳性免疫表型的CD5阴性弥漫大B细胞淋巴瘤病理及分子特点1例报道

众所周知,由于染色体t（11;12）（q13;q32）异位不同程度地影响CyclinD1基因,而后者特异性地表达于套细胞淋巴瘤。本文介绍了一例罕见的表达CyclinD1而原位杂交荧光标记检测到染色体异位且CD5阴性的弥漫性大B细胞淋巴瘤。

石蜡包埋组织提取RNA检测API2-MALT1融合基因的研究

目的研究从石蜡包埋组织中提取RNA检测黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤T(11,18)易位所致API2-MALT1(凋亡抑制蛋白2-黏膜相关淋巴瘤转位基因1)融合基因。方法采用酸性酚氯仿法从石蜡包埋组织中提取RNA,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增API2-MALT1融合基因,并通过转染测序检测基因。结果全部病例均检测到葡糖6磷酸脱氢酶(G6PD)重排;101例MALT淋巴瘤中API2-MALT1融合基因阳性率为21.8%,其中低度恶性的阳性率为25.0%,转化型的阳性率为13.8%;80例弥漫大B细胞淋巴瘤仅1例阳性;DNA测序结果与国际报道的序列相符。结论石蜡包埋组织中提取RNA方法稳定,可为疾病相关基因检测提供有效手段,在科研和临床方面有广阔的应用前景。

MALT1基因2种转录本在正常人和B细胞白血病患者中的表达特点

目的:比较正常人和B细胞白血病患者外周血中黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤转位基因1(MALT1)2种异构体的分布和表达差异。方法:根据MALT1基因的结构特点,设计2对引物,通过建立2种转录本的逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法分析8例B细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL)、8例B细胞慢性淋巴细胞白血病(B-CLL)和8例正常人的外周血单个核细胞(PBMC)中MALT1的表达情况。实时定量PCR分析各组样本的MALT1 mRNA表达水平。结果:所有样本中均能得到所预期的PCR产物,其中第1对引物可以扩增出2条片段,分别为MALT1转录本1(包含第5、6、7、8、9外显子)和MALT1转录本2(包含第5、6、8、9外显子),第2对引物只能扩增出1条包含转录本1的片段,所有PCR产物均通过核苷酸序列分析证实。MALT1 2种转录本均在外周血中有表达,并且MALT1转录本2表达水平高于转录本1。通过灰度分析发现,在B-ALL中,MALT1转录本1的灰度与正常人相比显著增高(P<0.05),而MALT1转录本2显著降低(P<0.05);在B-CLL中,MALT1 2种转录本的灰度与正常人相比无显著差异(P>0.05)。此外,B-ALL中,MALT1 mRNA表达水平(中位数:1.253)低于正常人(中位数:1.976)(P=0.05);而B-CLL中,MALT1 mRNA的表达水平与正常人相比无显著差异(P>0.05)。结论:MALT1 2种转录本均表达于正常和B细胞白血病样本中,但B-ALL中两者的表达水平有所差异,同时,B-ALL的MALT1 mRNA表达水平也有所降低。B-ALL中MALT1基因表达的异常可能影响MALT1信号通路而与疾病的发生发展相关。

MALT1-A20-NF-κB信号分子在MM中的表达特点

目的:了解多发性骨髓瘤(MM)患者外周血中黏膜相关组织淋巴瘤异位基因1(MALT1)、A20与核转录因子κB(NF-κB)基因的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光实时定量PCR和相对定量分析法检测20例MM患者(Ⅰ期7例,Ⅱ期3例,Ⅲ期10例)及21例健康人外周血单个核细胞(PBMC)中MALT1、A20和NF-κB基因的表达情况。以β2微球蛋白基因(β2m)作为内参;采用相对定量公式:α^(-△Ct)×100%,分别计算MALT1、A20和NF-κB基因的表达水平。结果:MM患者PBMC中的MALT1和A20基因的表达水平较健康人都有明显的降低(P=0.000),而MM中NF-κB基因的表达水平较正常人有所升高,但无统计学差异(P>0.05)。在健康人组,MALT1和NF-κB的表达水平呈现正相关(P=0.001,r=0.666),而在MM组,MALT1、A20与NF-κB 3种基因均不存在明显相关性。同时,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期MM患者MALT1基因的表达量较健康人明显降低(P<0.05),A20基因的表达量较健康人明显降低(P<0.01),而Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期MM患者MALT1、A20和NF-κB之间的表达情况均无统计学差异。结论:当MALT1-A20介导的细胞免疫和炎症的信号通路发生异常改变时,可能与MM的发生发展有着密切关系。

MALT1及Bcl2在MALT和DLBCL中的表达及意义

目的:了解MALT1和Bcl2表达对黏膜相关组织结外边缘区B细胞淋巴瘤(MALT)和弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的影响及肿瘤中两种蛋白表达的相互关系。方法:收集MALT和DLBCL64例,常规HE及免疫组织化学染色,观察两种淋巴瘤的组织形态学特点,检查肿瘤细胞的免疫表型和MALT1、Bcl2的表达,收集临床病理资料并随访,对所有资料进行统计学分析。结果:MALT1和Bcl2两种蛋白表达在MALT和DLBCL差异无显著性,较晚临床分期病例的表达明显多于较早分期病例,有淋巴结累及病例的表达明显多于无累及病例,肿瘤中两种蛋白的表达有明显的相关关系,生存状况MALT1阳性病例较阴性病例差、Bcl2阳性病例较阴性病例差,但无统计学意义。结论:Bcl2在MALT和DLBCL的表达可能与MALT1引起的NFκB异常活化有关,两种蛋白的表达对MALT和DLBCL的临床病理特征有明显影响。

黄芩总黄酮对大鼠类风湿性关节炎的缓解作用及BCL10/MALT1信号通路的影响

目的:探讨黄芩总黄酮对大鼠类风湿性关节炎的缓解作用及B细胞淋巴瘤因子10(BCL10)/黏膜相关淋巴瘤易位基因1(MALT1)信号通路的影响。方法:90只SD大鼠随机分成5组:正常对照组、模型组、阳性对照组(依那西普,0.5 mg·kg^-1)、黄芩总黄酮低、高剂量组(50,100 mg·kg^-1),每组18只。除正常对照组外,其余各组建立类风湿性关节炎模型。建模成功后依那西普组和黄芩总黄酮组腹膜内施用相应药物(10 ml·kg^-1),正常对照组和模型组给予等体积生理盐水,1次/d,连续给药4周。实验结束后,测定大鼠关节炎指数和踝关节肿胀度,观察大鼠踝关节滑膜结构病理变化,酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清炎症因子,实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法及蛋白免疫印迹法(Western Blot)法测定踝关节滑膜BCL10、MALT1 mRNA和蛋白表达水平。结果:模型组滑膜增厚,中性粒细胞弥漫性浸润,形成血管翳;依那西普组及黄芩总黄酮高剂量组大鼠踝关节滑膜细胞结构正常,可见较少的炎性细胞,无血管翳形成。与模型组比较,依那西普组和黄芩总黄酮组大鼠关节炎指数、踝关节肿胀度、血清白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平、踝关节滑膜中BCL10、MALT1 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05),且黄芩总黄酮低剂量组以上各指标与高剂量组及依那西普组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:黄芩总黄酮能明显抑制炎症反应,对类风湿性关节炎具有缓解作用;其机制可能与黄芩总黄酮抑制大鼠踝关节滑膜BCL10、MALT1 mRNA和蛋白表达进而抑制BCL10/MALT1信号通路激活有关。

CARMA蛋白家族与疾病关系的研究进展

含半胱天冬酶募集结构域的膜相关鸟苷酸激酶蛋白(CARMA),属于膜相关鸟苷酸激酶家族成员。CARMA蛋白家族有三个成员,分别是CARMA1、CARMA2和CARMA3。CARMA蛋白家族三个成员均可通过与B细胞淋巴瘤10(BCL10)、黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤基因1(MALT1)组成CARMA1-BCL10-MALT1(CBM)复合体参与人核转录因子κB(NF-κB)的激活过程,从而发挥其生物学功能,广泛参与各种人类疾病的发生、发展过程。

长链非编码RNA在肝纤维化发生发展中的作用研究进展

肝纤维化是指肝细胞外基质的弥漫性过度沉积与异常分布,是肝脏对慢性损伤的病理性修复反应,肝星状细胞(HSCs)的激活是其发生的重要环节。非编码RNA(ncRNA)已成为细胞信号传导和相关人类疾病的重要调节因子,长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度超过200个核苷酸的ncRNA,过去认为其不具备蛋白编码能力,近年认为其可通过编码小肽调控细胞增殖。lncRNA参与各种器官的纤维化,包括肝脏、心脏、肺和肾脏。在肝纤维化过程中,lncRNA参与调节多种细胞生物学过程,根据作用可分为三类。大部分lncRNA发挥肝纤维化促进作用,如肺腺癌转移相关转录本1、肝纤维化相关的lncRNA1、浆细胞瘤变型异位因子1等;少部分lncRNA发挥抑制作用,如母系表达基因3、生长停滞特异转录因5等;极少数lncRNA具备促进和抑制肝纤维化发生的双重作用。

PKCδ与MALT1对HIV-TB共感患者细胞免疫应答的作用

目的分析艾滋病与结核病双重感染(HIV-TB)患者外周血单个核细胞中PKCδ与MALT1对Th17细胞水平、炎症因子水平及mRNA表达水平的影响。方法收集2021年6月-2022年8月喀什地区第一人民医院收治的HIV-TB共感患者4例,分离外周血单个核细胞(PBMC)培养后分为空白对照组和B106组[PKCδ抑制剂(B106)处理细胞]、MI-2组[MALT1抑制剂(MI-2)处理细胞]、B106+MI-2组[PKCδ抑制剂(B106)与MALT1抑制剂(MI-2)共同处理细胞]3个试验组。应用流式细胞术检测Th17细胞水平;采用ELISA法检测IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ、TNF-α、IL-10以及IL-22的水平及运用qPCR检测MALT1、Iκbα、P65以及IL-17、IL-23的mRNA表达水平,探讨PKCδ与MALT1对HIV-TB共感患者中细胞免疫应答的影响,并初步分析其作用机制。结果3个试验组中Th17细胞的数量均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);3个试验组中IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ、TNF-α、IL-10以及IL-22的浓度均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),但3个试验组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05);3个试验组中IL-17、IL-23的mRNA表达水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);B106组MALT1、P65表达低于对照组,Iκbα表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),MI-2组Iκbα表达高于对照组,P65表达低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);B106+MI-2组与其他2个试验组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论抑制PKCδ或MALT1可拮抗HIV-TB共感患者的Th17细胞数量下降,抑制HIV-TB的炎症反应,抑制SYK/PKCδ/CARMA1-Bcl10-MALT1(CBM)复合物通路,可通过抑制NF-κB炎症通路拮抗HIV-TB的炎症反应。

活化诱导的胞苷脱氨酶在肿瘤发生中的作用

活化诱导的胞苷脱氨酶(AID)具有潜在的基因突变活性,异位表达或高表达,可直接导致肿瘤发生和转移,在不同组织中的异常表达可引起不同靶基因的突变,进而引发多种炎症相关的肿瘤。AID可能参与结肠炎相关的结肠直肠癌及与胆道炎症相关胆管癌的发病过程,在人淋巴瘤和白血病,肝癌细胞和肝硬化高表达。AID在肺上皮细胞中异位表达而诱导突变,亦为肺癌发生的原因之一。