IgA肾病大鼠肾组织中T细胞免疫球蛋白与黏蛋白域基因1的表达和意义

目的观察Ig A肾病(Ig AN)大鼠肾组织中T细胞免疫球蛋白与黏蛋白域基因1(TIM-1)的表达,探讨TIM-1在Ig AN大鼠发病中的作用。方法 20只雄性SD大鼠随机分成Ig AN模型组和对照组,每组10只。在复制模型完成后处死大鼠,取肾脏,肾组织切片行PAS染色,免疫荧光观察大鼠肾脏病理变化,并行免疫组织化学法检测肾组织中TIM-1的表达,实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测TIM-1 m RNA的表达。结果 Ig AN组TIM-1主要分布在肾小球和肾小管,表达量较对照组增加(P<0.05)。Ig AN组肾组织中TIM-1 m RNA表达量均较对照组升高。TIM-1 m RNA相对表达量和肾脏病理Katafuchi评分呈正相关,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 TIM-1可能参与了Ig AN的发生发展。

不同遗传背景猪群体黏病毒耐药蛋白1基因多态性分析

为探讨不同遗传背景猪黏病毒耐药蛋白1(myxovirus resistance,Mx1)基因的遗传多态性,本试验采用RT-PCR方法扩增克隆出猪Mx1基因并进行生物信息学分析,采用高分辨率熔解曲线法(HRM)对民猪、长白山野猪与民猪杂交猪(简称野杂猪)和大白猪3个群体Mx1基因外显子2区多态性进行分析。结果显示,从民猪及野杂猪中成功克隆出4条Mx1基因mRNA序列。该序列含有1个1 992bp的完整开放阅读框(ORF),编码663个氨基酸。比较发现4条Mx1基因序列中共含有30个SNPs位点,其中17个SNPs位点引起了氨基酸序列的变异。功能结构域分析发现,大部分氨基酸突变位点位于Mx1基因功能结构域两侧。HRM多态性分析显示,Mx1基因外显子2区DD基因型作为优势基因型在3个群体中具有最高的基因型频率,其中大白猪中DD基因型频率为100%,野杂猪为62.5%,民猪为56.2%。基因多态性分析还发现该区域存在更多的核苷酸及氨基酸突变位点,表明民猪和野杂猪Mx1基因存在更丰富的基因多态性。

急性白血病中黏蛋白1基因的表达及其临床意义

目的:观察各型急性白血病(AL)中黏蛋白1(MUC1)基因的表达及其与疗效及复发的关系,为MUC1基因成为监测病情变化、判断预后的分子生物学指标提供理论依据。方法:采用逆转录-PCR(RT-PCR)方法检测292例AL患者初治、治疗后获完全缓解(CR)时MUC1基因的表达,并观察MUC1已转阴性的患者再次转阳时与临床复发的关系。结果:292例初治AL患者中MUC1阳性156例(53.4%),其中215例急性髓细胞白血病(AML)中MUC1阳性123例(57.2%),M1阳性率为42.9%,M2为50%,M3为46.4%,M4为75%,M5为73.9%,M6为33.3%。69例急性淋巴细胞白血病(ALL)中MUC1阳性30例(43.5%)。8例急性混合细胞白血病(AMLL)中MUC1阳性3例(37.5%)。156例MUC1阳性者治疗后CR112例(71.8%),136例阴性患者CR 125例(91.9%),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。选取治疗前为MUC1阳性的112例CR患者中56例AML及17例ALL患者进行观察,CR时MUC1均由阳性转阴性,其中5例AML及6例ALL随后再出现MUC1转阳性,9例行异基因造血干细胞移植后无复发,2例未移植者临床复发。结论:MUC1基因在AML-M4、M5的表达最高;MUC1阳性者CR率低,治疗效果差;通过检测MUC1基因可提前监测AL复发。

哮喘关联基因血清类黏蛋白1样蛋白3的研究进展

哮喘是一种慢性支气管炎性疾病，其发病受到遗传和环境等多种因素的共同影响，全球约有1．5亿人患病。目前，这一疾病的发病机制尚不清楚，其中从遗传角度探索哮喘易感基因是近年来的研究热点。伴随着分子生物学技术的不断革新，哮喘易感基因的研究取得了很大进步，特别是人类基因组计划以及国际人类基因组单体型图计划的完成，全基因组关联分析（GWAS）在复杂遗传性疾病的研究中得到广泛应用，这为疾病易感基因的研究提供了更大希望。

非小细胞肺癌组织中上皮钙黏着蛋白、黏蛋白1、PINCH mRNA的表达变化及其临床意义

目的观察非小细胞肺癌组织中上皮钙黏着蛋白(E-cadherin)、黏蛋白1(MUC1)、半胱氨酸-组氨酸富裕蛋白(PINCH)mRNA的表达变化,并探讨其临床意义。方法非小细胞肺癌患者77例,均于术中取癌组织及癌旁组织,采用实时荧光定量PCR法检测癌组织及癌旁组织中E-cadherin mRNA、MUC1 mRNA、PINCH mRNA,分析癌组织中E-cadherin mRNA、MUC1 mRNA、PINCH mRNA表达与非小细胞肺癌患者临床病理参数的关系。结果非小细胞肺癌癌组织中E-cadherin mRNA、MUC1 mRNA、PINCH mRNA的相对表达量分别为1.33±0.27、7.67±1.25、11.33±2.61,癌旁组织中分别为10.33±2.38、0.71±0.15、2.56±0.58,两组比较,P均<0.05。非小细胞肺癌组织中E-cadherin mRNA、MUC1 mRNA、PINCH mRNA表达与肿瘤TNM分期和淋巴结转移相关(P均<0.05)。E-cadherin与MUC1、PINCH表达呈负相关(P均<0.05)。结论在非小细胞肺癌组织中,E-cadherin mRNA表达降低,MUC1、PINCH mRNA表达升高;E-cadherin mRNA、MUC1 mRNA、PINCH mRNA表达均与非小细胞肺癌TNM分期和淋巴结转移有关,可能参与非小细胞肺癌的发生发展。

非小细胞肺癌患者纵隔淋巴结和外周血中MUC1基因的检测及意义

目的探讨非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer,NSCLC)患者纵隔淋巴结和外周血中黏蛋白-1基因(MUC1mRNA)作为肺癌微转移标志的可行性。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,首先检测30例肺良性病变患者的外周血及其67枚纵隔淋巴结,以及30枚病理报告为NSCLC的纵隔淋巴结的MUC1mRNA,以证实RT-PCR技术的敏感度和特异度;然后检测158例NSCLC患者的外周血和97例手术患者的病理报告阴性的296枚纵隔淋巴结的MUC1mRNA的表达,以了解和比较NSCLC患者的外周血和纵隔淋巴结肺癌微转移情况。结果在30例肺良性病变患者外周血中未检测到MUC1mRNA,158例NSCLC患者有49例在外周血中检测到MUC1mRNA,阳性率为31.0%,两者差异显著(P<0.01);经χ2检验,Ⅰ、Ⅱ期NSCLC患者的外周血中MUC1mRNA阳性率无明显差异(P>0.05),Ⅰ期或Ⅱ期与Ⅲ期间差异显著(P<0.05),与Ⅳ期间差异明显(P<0.01),Ⅲ、Ⅳ期间差异显著(P<0.05)。对Ⅲa期以下的97例手术患者,术中所取的296枚病理报告为阴性的淋巴结进行MUC1mRNA检测,结果显示112枚为MUC1mRNA阳性,阳性率37.8%;30例肺良性病变的67枚淋巴结中有1枚MUC1mRNA阳性,假阳性率为1.5%,与前者比较阳性率的差异有统计学意义(P<0.01)。结论用RT-PCR法对患者淋巴结和外周血中MUC1mRNA的检测具有较高的敏感度和特异度,可作为肺癌微转移的一个诊断标准,同时与预后相关。

<3岁反复喘息患儿外周血血清ORMDL3基因在不同临床表型中的表达及其与IL-17和ECP的关系

目的探讨<3岁反复喘息患儿外周血血清类黏蛋白1样蛋白3(ORMDL3)基因在不同临床表型中的表达及其与血清白介素-17(IL-17)和嗜酸性细胞阳离子蛋白(ECP)的关系。方法选取该院儿科就诊<3岁反复哮喘的患儿87例,根据患儿是否存在高危因素分成特应性哮喘组(64例)和非特应性哮喘组(23例),再选取同期在儿科体检的健康儿童30例。分析3组研究对象ORMDL3基因表达水平、血清IL-17和ECP含量和ORMDL3基因频率分布的差异,并对3组研究对象ORMDL3基因表达水平和血清IL-17和ECP含量的相关性进行分析。结果特应性哮喘组ORMDL3基因表达水平(11.57±1.96)%,血清IL-17(1 354.46±873.48)pg/ml和血清ECP(45.65±12.76)μg/L均高于非特应性哮喘组和对照组(P=0.000);3组的ORMDL3基因AA、AG和GG 3种基因型的频率分布差异有统计学意义(χ~2=12.84,P=0.012)。特应性哮喘组的ORMDL3基因表达水平与血清IL-17(r=0.318,P=0.000)、血清ECP(r=0.540,P=0.000)均呈正相关。结论不同临床类型的哮喘患儿血清中的ORMDL3基因表达水平、IL-17和ECP含量不同。特应性哮喘患儿的血清ORMDL3基因表达水平与血清IL-17、ECP含量存在正相关性。

外周血Lunx mRNA、Muc1 mRNA、CEA联合检测对非小细胞肺癌微转移的诊断价值

目的检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者外周血中肺特异性X蛋白(LunxmRNA)、黏蛋白基因1(Muc1 mRNA)及CEA,探讨其对NSCLC微转移的诊断价值及临床意义。方法 72例NSCLC癌患者、10例肺良性疾病患者及12例健康志愿者,以逆转录-聚合酶链反应(reserve transcriptase-polymerasechain reaction,RT-PCR)方法,对其外周血进行Lunx mRNA和Muc1 mRNA的检测;以免疫化学发光测定法,检测其血清的CEA水平。结果 Lunx mRNA和Muc1 mRNA在NSCLC患者外周血中的表达率与肺良性病变组和正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);其表达与NSCLC组织分化程度和临床分期相关(P<0.05),Muc1 mRNA的表达还与组织学类型有关(P<0.05)。以多种指标多种方法联合检测阳性率为最高。结论 Lunx mRNA和Muc1 mRNA是检测NSCLC微转移的良好指标。两者联合CEA检测可以提高肺癌检出率。

IgA肾病大鼠肾组织中TIM-1、IFN-γ、IL-4表达的变化及意义

目的观察IgA肾病(IgAN)大鼠肾组织中T细胞免疫球蛋白与黏蛋白域基因-1(TIM-1)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)的表达,探讨TIM-1和IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4的关系及其在IgAN大鼠发病中的作用。方法 20只雄性SD大鼠随机分成IgAN模型组和对照组,每组10只。在造模完成后处死大鼠,取肾脏,肾组织切片行PAS染色、免疫荧光观察大鼠肾脏病理变化,并行免疫组化法检测肾组织中TIM-1、IFN-γ、IL-4的表达。结果成功建立IgAN动物模型。第9周末IgAN模型组24 h尿蛋白定量显著高于对照组,血浆Alb显著低于对照组(均P<0.01)。免疫荧光显示,IgAN模型组大鼠系膜区可见团块状或颗粒状绿色IgA荧光。PAS染色的肾小球内可见明显的系膜细胞增多,系膜基质中到重度增生,肾间质内可见明显的炎性细胞浸润。Katafuchi评分IgAN模型组明显高于对照组(P<0.01)。IgAN模型组肾组织中TIM-1的表达量为7.50±1.58,较对照组(1.02±0.82)显著增加(P<0.01)。IgAN模型组IFN-γ的表达量为2.63±0.97,与对照组(2.82±1.03)比较,差异无统计学意义(P>0.01)。IgAN组IL-4的表达量为7.54±1.58,较对照组(3.43±1.35)显著增加,差异有统计学意义(P<0.01)。TIM-1表达量与IL-4呈正相关(r=0.99,P<0.01);与IFN-γ/IL-4呈负相关(r=-0.751,P<0.01)。结论 TIM-1可能通过调控Th免疫而参与IgAN的发生发展。

ORMDL3基因与哮喘病因关系的最新研究进展

哮喘是一种常见的气道慢性炎症性疾病,有明显的家族聚集遗传倾向,目前公认是由遗传因素和环境因素相互作用而导致的疾病。至今约有100多个候选基因证实与哮喘的发病相关,全基因组关联研究证实ORMDL3基因与哮喘强烈相关。该文将对ORMDL3基因的最新研究进展做一综述,概述其与哮喘的相关性及其可能的作用机制,ORMDL3基因多态性rs7216389与各种族、各地区人群发病,不同年龄人群发病的相关性,以及ORMDL3基因甲基化致病与环境因素的关系,为临床早期预防、发现、治疗哮喘提供新的研究位点和研究方向。

过敏性哮喘患儿外周血ORMDL3 mRNA与T细胞亚群Th1/Th2失衡的关系

目的分析过敏性哮喘患儿外周血中血清类黏蛋白1样蛋白3(ORMDL3)基因与辅助性T细胞亚群Th1/Th2失衡的关系。方法选取2018年3月—2019年10月海南省儋州市人民医院儿科治疗过敏性哮喘患儿83例(哮喘组)为研究对象,选取同期于医院健康体检儿童76例作为健康对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测外周血ORMDL3 mRNA水平,流式细胞术检测外周血Th1、Th2表达水平,检测肺功能指标、嗜酸粒细胞(EOS)、血清免疫球蛋白E(IgE)水平。Pearson法分析外周血ORMDL3与Th1/Th2表达水平相关性,ORMDL3、Th1/Th2与肺功能指标、EOS、血清IgE水平相关性。Logistic回归分析影响过敏性哮喘的危险因素。结果哮喘组外周血ORMDL3 mRNA、Th2、FeNO、EOS、血清IgE水平均显著高于健康对照组(t=10.011、12.712、7.249、6.464、21.940,P均=0.000),Th1、Th1/Th2、达峰时间比(TPTEF/TE)、达峰容积比(VPEF/VE)水平显著低于健康对照组(t=5.484、21.151、9.796、9.372,P均=0.000);外周血ORMDL3与Th1/Th2水平呈负相关(r=-0.587,P<0.05),与TPTEF/TE、VPEF/VE亦呈负相关(r=-0.563、-0.489,P均<0.01),与FeNO、EOS、血清IgE水平呈正相关(r=0.442、0.516、0.547,P均<0.01);Th1/Th2与TPTEF/TE、VPEF/VE呈正相关(r=0.496、0.537,P均<0.01),与FeNO、EOS、血清IgE水平呈负相关(r=-0.642、-0.536、-0.518,P均<0.01);ORMDL3、血清IgE是影响过敏性哮喘发生的危险因素,Th1/Th2是影响过敏性哮喘发生的保护因素。结论过敏性哮喘患儿外周血辅助性T细胞亚群Th1/Th2处于失衡状态,且T细胞亚群Th1/Th2状态与ORMDL3水平密切相关。外周血ORMDL3、Th1/Th2在过敏性哮喘发病中有重要作用,可作为评估过敏性哮喘病情的指标。

5岁以下喘息患儿ADRβ2、ORMDL3基因SNP与API的相关性研究

目的探讨肾上腺素能受体β2(ADRβ2)、血清类黏蛋白1样蛋白3(ORMDL3)基因单核苷酸多态性(SNP)与哮喘预测指数(API)阳性婴幼儿喘息的相关性。方法将124例5岁以下喘息患儿分为API阳性组(66例)与API阴性组(58例)。选取儿童哮喘易感基因SNP位点:ADRβ2 R16G、ORMDL3 rs12603332,采用TaqMan探针法对2组患儿进行基因分型,分别比较上述SNP位点在2组间的分布差异。结果ORMDL3 rs12603332基因型在API阳性组与API阴性组之间的分布差异无统计学意义(χ^(2)=2.524,P>0.05)。ADRβ2 R16G基因型在API阳性组以AA占比最高,AG次之,GG最少;在API阴性组以AG占比最高,GG次之,AA最少;API阳性组AA占比高于API阴性组(χ^(2)=25.358,P<0.05)。ADRβ2基因型AG和GG是API阳性的保护因素,与AA比较,AG、GG是API阳性的概率分别为18.8%和6.4%。结论ADRβ2 R16G基因型分布在API阳性与阴性的5岁以下喘息患儿中存在差异,携带基因型AA的喘息患儿或更具进展为哮喘的危险性。ADRβ2或可联合API作为预测儿童哮喘的临床指标。ORMDL3 rs12603332基因型或与API预测哮喘发生无一致性。

血清类黏蛋白1样蛋白质3基因多态性与急性下呼吸道感染的关联性

目的探究血清类黏蛋白1样蛋白质3(CDHR3)基因多态性与急性下呼吸道感染(ALRI)的关联性。方法将湖州中心医院2019年1月-2020年12月呼吸与危重症医学科收治的152例ALRI患者作为研究对象,对患者进行CDHR3基因扩增后分析rs6967330位点基因型,按rs6967330位点基因型分为AA、AG和GG三组,比较不同基因型患者的临床特征及实验室指标检测结果差异。结果 ALRI患者中,AA基因型占比最高,为84例占55.26%,同时携带A型基因的患者高于G基因。AA基因型及AG基因型患者出现喘息症状,患支气管肺炎、大叶性肺炎及间质性肺炎的风险更高,组间对比有统计学意义(P<0.05)。三组患者白细胞计数、中性粒细胞、血小板计数指标对比无统计学差异,AA基因型患者CRP水平高于GG基因型患者,组间对比有统计学意义(P<0.05)。结论 CDHR3基因单核苷酸多态性与ALRI产生存在明显联系,提示携带A基因型患者患病风险及病情加重风险相对更高,对患者进行基因分型检测有利于预测患者患病情况为临床治疗提供借鉴信息。

17q21位点基因在儿童哮喘中的研究进展

哮喘是一种由遗传和环境因素共同影响的常见的气道慢性炎性疾病,其分子遗传学基础复杂多样,目前临床上仍无疗效显著的治疗方法.全基因组相关联研究通过寻找哮喘发病机制的基因靶点,从分子遗传学角度为儿童哮喘的精准化医疗提供新思路.现研究证明17q21位点上血清类黏蛋白1样蛋白3基因(ORMDL3)和gasdermin B (GSMDB)基因的表达影响儿童哮喘的易患性、严重性、及种族特异性.该文对17q21染色体位点上与儿童哮喘相关的基因进行综述.

ORMDL3基因多态性与哮喘相关性的研究进展

支气管哮喘是一种有明显家族聚集倾向的多基因遗传病，它的发生既受遗传因素又受环境因素的影响，至今约有100多个哮喘候选基因被发现，且多个已得到可靠的实验验证。Miram等。于2007年首次通过全基因组关联研究发现血清类黏蛋白1样蛋白3（ORMDL3）基因是同年研究中与哮喘相关度最高的易感基因，且该基因与哮喘的关联性已在多个种族中得到验证。了解ORMDL3与哮喘的相关性及其作用机制可能为哮喘的发生机制、早期诊断、治疗及一级预防提供新方向。现就该哮喘易感基因及其研究进展综述如下。

ORMDL3基因第一内含子中新启动子区的鉴定

目的构建表达血清类黏蛋白1样蛋白3(ORMDL3)基因第一内含子中新启动子区的质粒,并研究其功能特征。方法以人基因组DNA为模板,PCR扩增ORMDL3基因第一内含子内新转录起始位点上下游776bp启动子区片段,酶切并连接此片段至pGL3-basic载体,构建含有ORMDL3基因第一内含子中新启动子区的基因重组体,并转染人胚肾293细胞。荧光素酶检测报告基因启动子的活性,计算相对活性单位。生物信息学方法分析转录因子结合位点。结果成功构建含有新启动子的重组质粒。与pGL3-basic空载体相比,新启动子活性明显增强,并定位于转录起始位点-363bp至-63bp之间,且该区域存在Sp1、GATA-1等转录因子的结合位点。结论 ORMDL3基因第一内含子中新转录起始位点上游具有启动子活性,在-363bp至-63bp区域存在转录调控元件,且Sp1、GATA-1等转录因子可能参与其转录调控。