在人类肿瘤中黏蛋白16致癌作用的泛癌分析

目的探究黏蛋白16(MUC16)基因在33种人肿瘤组织内的基因及蛋白表达水平,并探讨其临床意义及在肿瘤发生发展中潜在的机制。方法利用癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)、基因表达综合数据库(gene expression omnibus,GEO)数据集、人类蛋白图谱(human protein atlas,HPA)和一些生物信息学工具来探索MUC16在33种肿瘤类型中的表达情况,分析其与肿瘤预后的关系和相关通路。结果基因表达以及免疫组织化学染色结果显示,MUC16基因在不同肿瘤中表达不同,且在多种常见肿瘤组织中的表达均升高(P均<0.05)。泛癌Cox回归分析表明,MUC16的高表达通常预示着间皮瘤、肺腺癌等6种肿瘤患者的总生存期(OS)更差。对MUC16以及邻近基因进行富集分析显示,MUC16与肿瘤转录失调密切相关。结论MUC16在多种肿瘤中的表达水平与癌旁组织不同,其功能机制与肿瘤转录失调密切相关。

黏蛋白16在神经胶质瘤组织中表达及意义

目的检测黏蛋白16(MUC16)在神经胶质瘤组织中的表达情况,探讨下调MUC16基因表达对U87细胞增殖、迁移和侵袭力的影响。方法选取2013年5月—2019年5月在焦作市人民医院行手术治疗的神经胶质瘤患者86例及因颅脑外伤行手术治疗的患者45例。免疫组织化学法检测神经胶质瘤和正常脑组织中MUC16蛋白表达水平,培养U87细胞并分为MUC16干扰组、阴性对照组和空白组,分别利用实时荧光定量PCR、MTT法、划痕实验和Transwell法检测U87细胞中MUC16表达情况,以及各组细胞增殖、迁移和侵袭能力。结果MUC16蛋白在神经胶质瘤患者中阳性表达率73.26%,正常脑组织为26.67%,两者比较差异有统计学意义(P<0.001);MUC16蛋白在不同WHO分级阳性表达率比较,差异有统计学意义(P<0.05);MUC16干扰组MUC16 mRNA相对表达量,24、48、72和96 h时吸光度(A)值、24和48 h时划痕愈合率、侵袭细胞数均低于阴性对照组和空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论神经胶质瘤组织中MUC16呈高表达,且与WHO分级呈正相关,下调U87细胞中MUC16基因表达可抑制细胞增殖、迁移和侵袭能力。

黏蛋白16基因通过磷酸肌醇3-激酶/蛋白激酶B通路调节胆囊癌细胞活力和迁移

目的探讨黏蛋白16基因(MUC16)是否通过磷酸肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路调节胆囊癌细胞(GBC-SD)活力和迁移。方法过表达MUC16后,通过Real-time PCR筛选相关基质金属蛋白酶(MMP)家族的蛋白质。其次,过表达MUC16、敲低MUC16和PI3K/Akt通路抑制剂BKM120处理后,通过免疫印迹法检测PI3K/Akt通路和MMP-9的蛋白水平。最后,过表达MUC16或敲低MUC16,通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)和刮伤实验检测GBC-SD的活力和迁移情况。结果过表达MUC16后,MMP-9 mRNA的相对表达量显著升高(P<0.05)。过表达MUC16后, MMP-9、p-Akt、PI3K的蛋白水平明显升高(P<0.05),但是PI3K抑制剂BKM120可以避免这现象。而敲低MUC16后,发现MMP-9、p-Akt、PI3K的蛋白水平明显降低(P<0.05)。过表达MUC16后,GBC-SD的细胞活力和迁移能力明显增高(P<0.05),而敲低了MUC16后,GBC-SD的细胞活力和迁移能力明显降低(P<0.05)。另外,敲低MMP-9后,GBC-SD的细胞活力和迁移能力也明显降低(P<0.05)。但是,在过表达MUC16的同时敲低MMP-9,发现GBC-SD的细胞活力和迁移能力与对照组相比差异无显著性(P>0.05)。结论 MUC16激活PI3K/Akt通路促进MMP-9的蛋白表达,进而提升胆囊癌细胞GBC-SD的细胞活力和迁移能力。

黏蛋白16与子宫内膜癌关系的研究进展

黏蛋白16(MUC16)作为编码糖类抗原125的基因,在妇科肿瘤的免疫逃逸及肿瘤的发生发展中均发挥重要作用。子宫内膜癌患者与内膜良性病变患者以及不同临床特点子宫内膜癌患者之间血清MUC16水平比较差异均有统计学意义,血清MUC16水平检测对子宫内膜癌筛查、诊断、预后评估均有重要作用。但目前MUC16与子宫内膜癌关系的研究尚处于起步阶段,MUC16对影响子宫内膜癌发生发展的确切机制及其临床诊治应用还需进行更加深入的研究。

miR-4645-5p通过靶向MUC16调控食管癌细胞的恶性生物学行为

目的 探讨微小RNA(miR)-4645-5p靶向黏蛋白16(MUC16)对食管癌细胞增殖、侵袭、上皮间充质转化的影响及其分子机制。方法 通过TCGA数据库在线分析miR-4645-5p在食管癌组织中的表达。利用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)分析食管癌细胞系中miR-4645-5p的表达水平。通过脂质体转染技术将miR-4645-5p模拟物和阴性对照模拟物转染KYSE-30细胞,作为miR-4645-5p组和对照模拟物组。分别采用CCK-8法、划痕实验、Transwell实验分析转染KYSE-30细胞的增殖能力、迁移能力和侵袭能力。通过生物信息学网站预测miR-4645-5p的靶基因,双荧光素酶报告基因实验检测miR-4645-5p对靶基因的结合。采用qPCR检测MUC16 mRNA的表达水平,Western blotting检测MUC16、转录因子-1(ZEB-1)、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、紧密连接蛋白-1(Claudin-1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白的表达水平。结果 食管癌组织中miR-4645-5p表达水平低于癌旁组织(P<0.01)。与HET-1A比较,食管癌细胞系中miR-4645-5p呈低表达(P<0.05)。miR-4645-5p过表达后,KYSE-30细胞增殖能力降低(P<0.05),迁移能力降低(P<0.01),侵袭能力明显降低(P<0.01)。miR-4645-5p靶向负调控MUC16 mRNA的表达(P<0.01)。miR-4645-5p过表达后,MUC16、ZEB-1、α-SMA蛋白表达均下调,ZO-1、Claudin-1蛋白表达均上调。结论 miR-4645-5p通过靶向MUC16调控食管癌KYSE-30细胞的恶性生物学行为。

黏蛋白16基因在非卵巢癌妇科恶性肿瘤中的研究进展

自1981年癌抗原125(CA125)被发现以后,因其具体生化结构和生物学作用在很长一段时间内尚未明确,致使其临床应用受限。2001年学者们才发现黏蛋白16基因(MUC16)是编码CA125的基因。有研究结果表明,MUC16在多种肿瘤类型中过表达,包括乳腺癌、胰腺癌、结直肠癌及卵巢癌等,且它被发现是多种肿瘤类型中最常见的突变基因之一。MUC16已被广泛作为卵巢癌的血清学标志物,与卵巢癌的发生和不良结局密切相关。

组织和时间特异性表达的钙黏蛋白-16

钙黏蛋白-16(CDH-16)是非典型的钙黏蛋白超家族成员,其表达具有明显的时空特异性,主要分布在肾脏和甲状腺,Cdh-16转录产物也暂时性出现在小鼠胚胎时期的生殖管道和肺上皮。迄今为止的研究表明,CDH-16与组织完整性、胚胎发育密切相关,并参与维持组织正常代谢、影响癌症发生等过程,但其具体的作用机制仍不清楚。本文对CDH-16的结构、功能、组织分布及其基因表达的时空调控进行了综述,以期为将来更深入地探究这一蛋白在不同生物学进程中的作用机制提供理论基础。

ERO1L、MUC16在非小细胞肺癌组织中的表达及临床价值

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中内质网氧化还原酶1α(ERO1A)、细胞表面相关黏蛋白16(MUC16)表达及临床价值。方法以2018年2月至2019年2月于该院就诊的94例NSCLC患者为研究对象。应用荧光定量PCR及免疫组织化学检测癌组织及癌旁组织中ERO1A和MUC16 mRNA及蛋白表达,分析ERO1A、MUC16 mRNA表达与临床病理特征的关系。采用Kaplan-Meier生存曲线分析ERO1A、MUC16 mRNA表达与NSCLC患者预后的关系,单因素及多因素COX回归分析影响NSCLC患者生存预后的因素。结果NSCLC癌组织中ERO1A、MUC16 mRNA表达水平均明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(t=34.472、22.528,均P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,NSCLC中ERO1A与MUC16 mRNA表达呈正相关(r=0.610,P<0.001)。免疫组织化学法检测结果显示,ERO1A和MUC16蛋白均位于细胞膜和细胞质,NSCLC癌组织中ERO1A和MUC16蛋白阳性率明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(χ^(2)=143.323、153.741,均P<0.001)。ERO1A mRNA表达与肿瘤分期、淋巴结转移有关(P<0.05),MUC16 mRNA表达与肿瘤分期、病理分级及淋巴结转移有关(P<0.05)。ERO1A mRNA高表达组患者累积生存明显低于低表达组(Log-rankχ^(2)=8.776,P=0.003),MUC16 mRNA高表达组患者累积生存明显低于低表达组(Log-rankχ^(2)=8.003,P=0.005)。肿瘤分期Ⅲ期、伴淋巴结转移、ERO1A及MUC16 mRNA高表达影响NSCLC患者生存预后的独立危险因素。结论NSCLC癌组织中ERO1A、MUC16表达升高,是影响NSCLC患者生存预后的独立危险因素,二者表达升高与NSCLC患者不良临床病理特征及预后有关。

中性粒细胞弹性蛋白酶、金属基质蛋白酶9对卵巢癌细胞膜E-cadherin、MUC16表达的影响

目的检测中性粒细胞弹性蛋白酶(neutrophil elastase, NE)、金属基质蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9, MMP-9)对体外卵巢癌细胞膜蛋白E-cadherin、黏蛋白16(mucin16,MUC16)表达的影响。方法体外培养人卵巢癌OVCAR3细胞。温控4℃,MMP-9、NE、0.125%胰蛋白酶分别处理OVCAR3细胞,光镜下观察不同时间段细胞形态学变化;采用Western印迹法检测OVCAR3细胞中E-cadherin、MUC16总体表达;免疫荧光技术定位E-cadherin、MUC16。应用酶联吸附测定技术(ELISA)定量培养基中脱落的MUC16胞外段蛋白。结果 NE、MMP9处理细胞后,细胞形态由平铺鹅卵石样呈细长/纺锤状,细胞间逐渐分离、扩散。NE、MMP9处理24h后E-cadherin表达均显著下降,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),而0.125%胰酶组与对照组之间差异无统计学意义。免疫荧光检测结果检测E-cadherin、MUC16主要定位在细胞膜。ELISA结果显示,MMP-9处理细胞后,上清液中MUC16胞外段CA125的含量明显增高。结论中性粒细胞相关蛋白酶NE、MMP9诱导细胞形态由平铺鹅卵石样呈细长/纺锤状,细胞间逐渐分离、扩散。两者通过酶解卵巢癌细胞膜上E-cadherin,促进上皮间叶转化(epithelial mesenchymal transformation, EMT),细胞间接触和极性的丧失,进一步脱落。此外,MMP-9可以降解细胞膜上MUC16蛋白,使MUC16胞外段脱落,揭示局部MMP-9酶浓度升高与血清学CA125水平有一定关联。

MUC1和MUC16在胆囊癌中的研究进展

黏蛋白(MUC)是由上皮细胞分泌的一类高分子化、高度糖基化的糖蛋白,广泛存在于呼吸系统、消化系统、泌尿生殖系统的黏膜上皮及其分泌的黏液中。目前研究表明,黏蛋白家族与肿瘤关系密切。其中MUC1(CA153)及MUC16(CA125)已被证实在胆管癌中异常表达,但未明确二者与胆囊癌的发生发展、侵袭转移及判断预后有密切的关系。本文通过对近年来国内外文献进行回顾性分析,对MUC1和MUC16在胆囊癌中的研究进展进行综述。

MUC16对骨肉瘤细胞增殖和侵袭能力的影响

目的探讨黏蛋白16(MUC16)对人骨肉瘤细胞系U2OS增殖和侵袭能力的影响。方法将U2OS细胞按转染序列的不同分为sh-MUC16组(转染MUC16干扰序列)、sh-Control组(转染阴性对照序列)和空白组(不处理)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测各组MUC16 mRNA表达,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力,免疫印迹法检测细胞中MUC16、上皮型钙黏蛋白(E-Cad)和神经型钙黏蛋白(N-Cad)表达。结果sh-MUC16组MUC16 mRNA相对表达量显著低于sh-Control组和空白组(P<0.05),sh-Control组与空白组之间差异无统计学意义(P>0.05)。sh-MUC16组培养24、48、72和96 h时细胞增殖活性低于sh-Control组和空白组(P<0.05)。sh-MUC16组迁移和侵袭细胞数均低于sh-Control组和空白组(P<0.05)。sh-MUC16组MUC16和N-Cad相对表达量均低于sh-Control组和空白组(P<0.05),E-Cad相对表达量高于sh-Control组和空白组(P<0.05)。结论沉默U2OS细胞中MUC16基因表达可抑制细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与抑制上皮-间质转化有关。

MUC1和MUC16在胆囊癌中的表达及临床意义

目的:研究MUC1和MUC16在正常胆囊黏膜、胆囊腺瘤及胆囊癌中的表达情况,以及胆囊癌中MUC1和MUC16的表达与胆囊癌Nevin分期及组织分化程度的关系。方法 :收集因胆囊息肉行胆囊切除术病例60例、胆囊腺瘤病例60例及胆囊癌病例60例,进行MUC1和MUC16的免疫组织化学染色,结合病理图像,分析其在正常胆囊黏膜组织、胆囊腺瘤及胆囊癌中的表达情况。结果:MUC1在正常胆囊黏膜组、胆囊腺瘤组和胆囊癌组中,阳性表达率分别为6.67%、38.33%、81.67%。MUC16在正常胆囊黏膜组和胆囊腺瘤组中,无阳性表达。在胆囊癌组中,阳性表达率为36.67%。MUC1和MUC16在Nevin分期Ⅰ期组、Ⅱ期组、Ⅲ期及Ⅲ期以上组中,阳性表达率分别为62.50%、80.00%、95.83%和18.75%、30.00%、54.17%。MUC1和MUC16在高分化组、中分化组、低分化组中阳性表达率分别为60.00%、78.95%、96.15%和13.33%、26.32%、57.69%。结论:MUC1和MUC16的阳性表达在胆囊癌的发生发展中起着重要作用,MUC1和MUC16的阳性表达促进胆囊癌的发生发展。MUC1和MUC16作为一种胆囊癌的肿瘤标志物,并且预示胆囊癌的恶性程度及浸润程度。

老年鼻咽癌EB病毒感染及其对癌组织MUC16和AKR1B10表达的影响

目的探究老年鼻咽癌EB病毒(EBV)感染及其对癌组织黏蛋白16(MUC16)和醛酮还原酶家族1成员B10(AKR1B10)表达的影响。方法选择中南大学湘雅医学院附属海口医院2019年9月-2021年9月收治的老年鼻咽癌患者89例为研究组,另随机选择同期因慢性鼻咽炎进行活检的老年患者70例为对照组。采用荧光定量聚合酶链反应检测两组患者全血EB病毒核酸载量,采用免疫组织化学法检测两组患者组织标本中MUC16、AKR1B10蛋白表达情况,比较两组检测结果差异和研究组中不同EBV载量患者检测结果差异。结果研究组与对照组EBV感染率分别为49.44%和5.71%,研究组EBV阳性患者中EBV核酸载量主要集中于500~4999 copies/ml(65.91%);研究组组织标本中MUC16高表达率低于对照组,而AKR1B10高表达率高于对照组(P<0.05);研究组患者组织标本中AKR1B10高表达率为92.13%,高于对照组的12.86%(P<0.05);研究组EBV阳性患者组织标本MUC16表达率低于EBV阴性患者,而AKR1B10高表达率高于EBV阴性患者(P<0.05)。结论MUC16表达下调和AKR1B10表达上调可能与老年鼻咽癌的发生有关,且EBV感染可能导致老年鼻咽癌患者MUC16、AKR1B10表达水平进一步下调或上调。

MUC16对胆囊癌细胞生物学行为的调控作用及机制分析

[目的]探讨黏蛋白16(MUC16)对人胆囊癌细胞NOZ增殖、侵袭、转移的影响以及可能的分子机制。[方法]通过慢病毒转染体系,构建过表达MUC16的人胆囊癌细胞株NOZ,以及空病毒质粒转染细胞。MTT实验检测过表达MUC16对细胞体外增殖能力的影响;划痕实验和Transwell迁移小室实验检测过表达MUC16对细胞体外迁移和侵袭能力的影响;黏附实验检测过表达MUC16对细胞黏附能力的影响;Western blot检测MUC16调控NOZ细胞生物学行为可能的通路机制。[结果] MUC16过表达细胞系生长速度明显高于对照组(P<0.05);并且MUC16转染NOZ细胞系体外迁移能力、划痕愈合能力以及黏附能力均较空质粒对照组细胞增强(P<0.05);MUC16可明显提高MMP2、MMP7、p-Akt蛋白的表达以及PI3K激酶的活性(P<0.05)。[结论] MUC16可以通过激活PI3K/Akt信号通路,增加胆囊癌细胞体外的增殖、侵袭以及转移能力。

口腔鳞癌对顺铂耐药分子机制探讨

目的 Muc16是细胞表面黏蛋白,在多种肿瘤中过表达,Muc16C端可结合β-链蛋白(β-catenin)入核调节原癌基因c-Myc转录,进而调节卵巢癌细胞生长。本研究建立耐顺铂口腔鳞癌模型细胞,探讨Muc16-c-Myc信号通路对其调节作用,为临床治疗口腔鳞癌提供新思路。方法采用逐步增加顺铂(cis-Dichlorodiamineplatinum,DDP)药物浓度、间歇诱导人口腔鳞癌Tca8113细胞的方法建立口腔鳞癌体外耐药细胞模型(Tca8113/CDDP);MTT法检测药物对细胞的抑制率并计算半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50);siRNA转染沉默c-Myc蛋白表达,设立沉默组(c-Myc si)和空载对照组(c-Myc NC);Sh-RNA-Muc16转染细胞以沉默Muc16蛋白表达,设立沉默组(Muc16sh)和空载对照组(Muc16NC),并以嘌呤霉素筛选稳定表达细胞株;应用蛋白质印迹法检测各蛋白表达水平;结晶紫染色观察DDP处理后各组细胞存活率。结果与Tca8113细胞相比,Tca8113/CDDP中多药耐药相关蛋白1(multidrug resistanec-associated protein 1,MRP1)上调(44.5±7.3)%,z=-2.087,P<0.001;P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达上调(30.1±7.7)%,z=-2.016,P<0.001。Muc16沉默后,与Muc16NC组相比,Muc16sh组Tca8113/CDDP中Muc16表达下调(91.8±3.8)%,z=-5.087,P<0.001;与Muc16 NC组相比,Muc16sh组细胞c-Myc表达下调(42.3±5.2)%,z=-4.165,P<0.001。Muc16沉默后Tca8113/CDDP中MRP1表达下调(67.7±6.2)%,z=-3.656,P<0.001;P-gp表达下调(59.6±8.1)%,z=-3.884,P<0.001。Tca8113/CDDP中c-Myc沉默后,其蛋白表达量下降(78.8±4.8)%,z=-5.112,P<0.001;c-Myc沉默后,Tca8113/CDDP细胞MRP1表达下调(53.2±3.2)%,z=-5.745,P<0.001;P-gp表达下调(74.6±7.7)%,z=-3.948,P<0.001。Muc16 NC组DDP的IC50为(165.4±8.5)μg/mL,Muc16sh组为(72.9±4.1)μg/mL,与Muc16NC组相比,Muc16sh组IC50明显降低,z=-3.312,P<0.001;c-Myc NC组DDP的IC50为(157.2±6.3)μg/mL,c-Myc si组IC50为(58.3±3.8)μg/mL,与c-Myc NC组相比,c-Myc si组细胞IC50明显降低,z=-4.606,P<0.001。DDP(165.4μg/mL)处理细胞24h发现,与Muc16NC组相比,Muc16sh组Tca8113/CDDP存活率下降(70.1±8.1)%,z=-2.787,P<0.001;DDP(157.2μg/mL)处理细胞24h发现,与c-Myc NC组相比,c-Myc si组Tca8113/CDDP存活率下降(67.6±7.7)%,z=-3.568,P<0.001。结论Tca8113/CDDP通过活化Muc16-c-Myc信号通路维持细胞耐药蛋白MRP1和P-gp的表达,从而对DDP耐药。