猪繁殖与呼吸综合征病毒感染对猪肺泡巨噬细胞外源性抗原加工递呈相关分子和共刺激分子的影响

采用定量竞争PCR技术对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染后不同时相猪肺泡巨噬细胞(PAM)中外源性抗原加工递呈相关分子SLA-DRI、i链和SLA-DM分子及共刺激分子CD40、CD80、CD86的mRNA转录动态进行了定量检测。结果表明,PRRSV感染后PAM的SLA-DR mRNA转录水平在3、7和14 d下调,低于对照组;感染后3 d,Ii链、SLA-DM和CD40的mRNA转录水平极显著下调(P<0.01);CD80和CD86mRNA转录水平也在感染后3 d明显下调(P<0.05)。用流式细胞术检测PAM表面的SLA-DR抗原的结果表明,在感染后3 d短暂上升,7 d之后一直低于对照组。由此说明,PRRSV感染早期对猪肺泡巨噬细胞的外源性抗原加工和递呈功能产生显著影响,导致其外源性抗原递呈功能下降,进而影响机体的体液免疫应答。

固本化痰通脉方对痰阻血脉大鼠主动脉巨噬细胞和黏附分子表达的影响

目的:观察固本化痰通脉方对痰阻血脉大鼠主动脉巨噬细胞和黏附分子表达的影响,探讨痰邪的致病机制。方法:7周龄正常雄性Wistar大鼠50只随机分为正常对照组、模型组、固本化痰通脉方低剂量组、固本化痰通脉方高剂量组、辛伐他汀对照组5组,在高脂饮食基础上建立痰证模型,比较各组大鼠血脂代谢的改变,免疫组化方法观察主动脉内皮巨噬细胞和细胞间黏附分子-1(intercellularadhesionmolecule-1,ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(vascularcelladhesionmolecule-1,VCAM-1)、P-选择素、E-选择素的表达,并经图像分析定量。结果:与正常对照组相比,模型组血脂水平、巨噬细胞和黏附分子的表达差异有统计学意义(P<0.01);各治疗组与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:固本化痰通脉方能降低血清胆固醇、甘油三酯,升高高密度脂蛋白水平,抑制主动脉内皮巨噬细胞、ICAM-1、VCAM-1、P-选择素和E-选择素的表达。

神经支配对兔后肢缺血诱导侧支血管生长过程中巨噬细胞标记物、细胞间黏附分子和血管细胞黏附分子表达的影响

目的:通过比较去除支配血管壁的神经,观察神经支配对侧支血管巨噬细胞标记物(RAM11)、细胞间黏附分子(ICAM)和血管细胞黏附分子(VCAM)表达的影响。方法:20只新西兰大白兔,左侧行股动脉结扎,右侧行股动脉结扎加坐骨神经和股神经切除,7d后将动物处死,应用免疫荧光组织化学技术,观察单纯结扎和结扎加去神经侧RAM11、ICAM和VCAM在侧支血管的表达变化,兔前肢大小相似的正常血管用作正常对照。结果:正常血管ICAM和VCAM的表达非常低,外膜中可见数目很少的RAM11阳性细胞;股动脉结扎侧,侧支血管ICAM、VCAM和RAM11的表达均明显上调,RAM11阳性细胞主要在外膜聚集,在中膜也可见,ICAM表达主要在血管内皮细胞,而VCAM除了在血管内皮细胞有表达外,在外膜也有表达;股动脉结扎加去神经侧,ICAM、VCAM和RAM11的表达比股动脉结扎侧有所下调,其荧光强度的比较有统计学意义。结论:在缺血诱导的兔后肢侧支血管生长模型中,去除血管壁的神经导致了炎症分子ICAM、VCAM和RAM11的阳性细胞减少,表明血管壁神经对RAM11、ICAM和VCAM的表达调节有重要影响。

猪苓多糖/卡介苗诱导的热休克蛋白对巨噬细胞表面分子的影响

目的:观察猪苓多糖/卡介苗诱导T24膀胱癌细胞产生的细胞外热休克蛋白对J774A.1巨噬细胞TLR、共刺激分子、粘附分子、活化分子表达的影响,探讨猪苓多糖/卡介苗灌注治疗膀胱癌的天然免疫启动机制。方法:(1)ELISA检测猪苓多糖/卡介苗与T24膀胱癌细胞共培养上清中HSP90、HSP70、HSP60、HSP27的表达。(2)流式细胞术检测含HSP共培养上清(eHSP)对小鼠J774A.1巨噬细胞表面分子CD14、TLR2/4、MHCⅠ/Ⅱ;活化分子CD25;共刺激分子CD80、CD86、CD40;粘附分子CD44、CD62L、CD11b、CD18表达的影响。(3)用流式细胞术检测TLR4/MD2抗体复合物阻断J774A.1巨噬细胞表面TLR4后,eHSP对其表面分子MHCⅠ/Ⅱ、CD25、CD80、CD86、CD40、CD44、CD62L、CD11b、CD18的表达。结果:(1)猪苓多糖/卡介苗诱导T24膀胱癌细胞产生的热休克蛋白呈剂量和时间依赖性,猪苓多糖(2mg/ml)和卡介苗(250μg/ml)作用48小时时HSP的表达至峰值,其中HSP70呈优势表达;(2)含HSP的共培养上清可上调J774A.1巨噬细胞TLR4、MHCⅠ、CD86、CD40、CD25分子的表达,增强粘附分子CD44、CD62L荧光强度;(3)含HSP的共培养上清作用于用TLR4/MD2阻断后的巨噬细胞,其表面分子CD86、MHCⅠ、CD40、CD25的表达降低。结论:猪苓多糖/卡介苗可诱导T24膀胱癌细胞产生危险信号热休克蛋白,并且热休克蛋白可通过激活小鼠J774A.1巨噬细胞TLR4信号通路,上调其表面分子的表达,启动抗膀胱癌天然免疫应答。

血浆血管细胞黏附分子-1与巨噬细胞游走抑制因子水平与糖尿病患者肾脏功能损害的关联性研究

目的探讨血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)和巨噬细胞游走抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)对糖尿病患者的临床意义及其在糖尿病肾病诊断过程中的作用。方法选取2型糖尿病患者126例和20例健康体检者(健康对照组),测量VCAM-1、MIF、尿肌酐、血清肌酐等指标,估算糖尿病患者的肾小球滤过率(eGFR)。比较不同研究对象的VCAM-1与MIF水平,采用Pearson相关分析探讨VCAM-1及MIF与尿白蛋白/肌酐、eGFR的关联。结果糖尿病患者的VCAM-1、MIF水平明显高于健康对照组,尿白蛋白/肌酐越高,VCAM-1、MIF越高(P<0.05);VCAM-1和MIF水平与eGFR均呈明显的负相关关系(r2=0.240 5,r2=0.516 2,P<0.05);VCAM-1和MIF水平与尿白蛋白/肌酐值均呈正相关关系(r2=0.069 5,r2=0.059 5,P<0.05);VCAM-1和MIF水平与eGFR变化均呈负相关(r2=0.048 2,r2=0.071 7,P<0.05)。结论糖尿病及糖尿病肾病患者血浆中VCAM-1及MIF水平升高,对糖尿病肾病诊断及病情判断具有一定的参考价值。

从肺虚痰阻大鼠肺泡巨噬细胞黏附分子的表达探讨痰邪致病机理

目的:探讨肺泡巨噬细胞黏附分子CD11a、CD11b、CD18、CD54、CD62L在肺虚痰阻慢性支气管炎大鼠中发生的作用。方法:采用烟熏法建立肺虚痰阻慢性支气管炎动物模型,应用流式细胞仪检测正常及肺虚痰阻大鼠肺泡巨噬细胞CD11a、CD11b、CD18、CD54、CD62L的表达。结果:CD11a、CD11b、CD18、CD54、CD62L的表达升高在痰邪致病中起了重要作用。

口腔鳞癌中血管细胞黏附分子-1的表达与巨噬细胞浸润的关系

目的:探讨血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)在口腔鳞癌巨噬细胞浸润、聚集中的作用及意义。方法:应用免疫组化二步法检测口腔鳞癌组织中VCAM-1的表达和巨噬细胞的浸润情况,光镜下进行巨噬细胞计数和VCAM-1表达的分级。结果:口腔鳞癌组织中VCAM-1的表达率(64.58%)和巨噬细胞计数(81.04±12.00)显著高于正常口腔黏膜组织(P<0.05);口腔鳞癌组织中VCAM-1的表达与肿瘤的浸润和转移有关(P<0.01),并与肿瘤组织中巨噬细胞浸润有关(P<0.01)。结论:VCAM-1可能对巨噬细胞在口腔鳞癌中的浸润、聚集起调节作用,参与肿瘤的浸润和转移。

类猪圆环病毒因子P1感染对猪肺泡巨噬细胞外源性抗原加工递呈相关分子和共刺激分子的影响

采用实时定量PCR技术对类猪圆环病毒因子P1感染猪不同时相猪肺泡巨噬细胞中外源性抗原加工递呈相关分子SLA-DR、SLA-DM和CD74及共刺激分子CD40、CD80和CD86 mRNA的表达进行了检测。结果表明,病毒感染后3 d,上述分子的mRNA表达皆低于对照组相应分子的mRNA表达。其中,CD80 mRNA的表达呈下调趋势(P<0.1),CD40、CD74和SLA-DR的mRNA的表达显著下调(P<0.05);感染后8 d的SLA-DR和SLA-DM以及感染后17 d SLA-DM的mRNA的表达有下调趋势(P<0.1);感染后24 d的CD86 mRNA的表达呈上调趋势(P<0.1);感染后40 d的CD74 mRNA的表达显著下调(P<0.05)。结果揭示,类猪圆环病毒因子P1感染对猪肺泡巨噬细胞的外源性抗原加工和递呈功能有显著影响,导致其外源性抗原递呈功能下降及紊乱,进而使机体的体液免疫应答功能受到影响。

双歧杆菌DNA对小鼠腹腔巨噬细胞表面分子表达及分泌功能的影响

目的 探讨双歧杆菌DNA对小鼠腹腔巨噬细胞表面分子表达及分泌功能的影响。方法 纯化提取双歧杆菌基因组DNA ,并鉴定DNA制品CpG基序甲基化程度。用双歧杆菌DNA (10 μg ml)体外诱导培养小鼠腹腔巨噬细胞 ,流式细胞仪检测小鼠腹腔巨噬细胞MHCⅡ类分子、共刺激分子和粘附分子的表达 ,ELISA法检测培养上清中细胞因子的含量。结果 双歧杆菌DNA组巨噬细胞表达Ia、CD4 0、CD86和CD5 4分子的平均荧光强度分别为 4 3 176± 5 5 6、4 7 6 8± 4 6 5、15 6 4 9± 2 0 6 8和 6 9 37± 4 10高于PBS对照组 15 0 2± 2 31、15 72± 3 2 1、88 5 1± 6 38和 4 8 81± 3 2 1;双歧杆菌DNA组巨噬细胞产生IL 1β的水平为 2 70 12± 31 5 1pg ml高于PBS对照组 138 12± 9 2 4 pg ml;两组之间的差别均具有显著性的意义 (均P <0 0 5 )。结论 双歧杆菌DNA能增强小鼠腹腔巨噬细胞共刺激分子、MHCⅡ类分子和粘附分子的表达 ,增强巨噬细胞IL 1的分泌水平。

细胞间黏附分子-1、巨噬细胞炎性蛋白-2在吸烟诱导的支气管炎大鼠模型中的变化及其意义

目的:制备吸烟诱导的慢性支气管炎大鼠模型,探讨细胞间黏附分子-1(ICAM-1),巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)在慢性支气管炎大鼠模型气道炎症中的作用。方法:雄性Wistar大鼠随机分为两组,对照组、模型组。采用单纯吸烟的方法建立慢性支气管炎大鼠模型。光镜下观察支气管肺组织病理形态学改变。分析支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数和分类;用ELISA法测定肺组织匀浆MIP-2的含量;用免疫组化方法检测ICAM-1在各组支气管肺组织中的表达。结果:模型组病理形态学改变符合人类慢性支气管炎的特点。模型组支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞及肺毛细血管内皮细胞ICAM-1表达强度与BALF中白细胞总数、中性粒细胞数成显著正相关(分别为r=0.882及r=0.843;均P<0.01);肺组织匀浆MIP-2与BALF中白细胞总数、中性粒细胞数成显著正相关(分别为r=0.706及r=0.819;均P<0.01)。与对照组比较,模型组支气管上皮细胞,肺泡上皮细胞及肺毛细血管内皮细胞ICAM-1表达强度明显增强(P<0.01);肺组织匀浆MIP-2含量明显升高(P<0.01)。结论:ICAM-1表达上调及MIP-2的特异性趋化作用可能参与了吸烟诱导的慢性支气管炎大鼠模型的气道炎症过程。

肺虚痰阻大鼠巨噬细胞功能和黏附分子CD11b的表达研究

探讨肺虚痰阻病理模型大鼠巨噬细胞功能和黏附分子CD11b的表达 ,将 48只Wastar大鼠随机分为对照组、肺虚痰阻组和化痰治疗组 3组 ,肺虚痰阻组给予二氧化硫烟熏、化痰治疗组在二氧化硫烟熏同时进行化痰治疗 ,检测 3组大鼠肺泡巨噬细胞功能、肺泡巨噬细胞CD11b表达和血中淋巴、中性、单核细胞的CD11b表达。结果表明 ,肺虚痰阻大鼠巨噬细胞功能增强 ,肺泡巨噬细胞和血中单核细胞CD11b表达明显增多 ,而血中淋巴、中性粒细胞CD11b表达增多不明显 ,提示肺虚痰阻大鼠以单核—巨噬系统细胞黏附分子表达增多和吞噬功能增强为主。

巨噬细胞移动抑制因子和细胞间黏附分子-1在慢性牙周炎合并动脉粥样硬化大鼠模型中的表达分析

目的分析慢性牙周炎(CP)合并动脉粥样硬化(AS)大鼠血清及动脉组织中巨噬细胞移动抑制因子(MIF)以及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达。方法24只成年雄性SD大鼠用随机数字表法分为四组,分别为正常对照(NC)组、CP组、AS组及CP+AS组,每组各6只。采用钢丝结扎双侧上颌第二磨牙联合口腔内接种牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)建立牙周炎模型;高脂饮食、腹腔注射维生素D3联合左侧颈动脉球囊损伤法建立AS模型。四组分别接受相应的建模处理。12周后,组织病理学观察颈动脉组织的病理改变;体视显微镜下观察各组大鼠牙槽骨吸收面积;全自动生化分析仪检测大鼠血清血脂的表达水平;酶联免疫吸附测定(ELISA)和免疫组织化学法分析血清中和主动脉组织中MIF及ICAM-1的表达水平。结果组织病理学检查发现:NC组颈动脉组织未见明显异常,CP组血管壁较NC组略增厚,AS组、CP+AS组颈主动脉组织中出现动脉粥样硬化斑块病变;AS组、CP+AS组血清三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白(LDL)水平较NC组、CP组明显升高(P<0.05),AS组、CP+AS组血清高密度脂蛋白(HDL)水平较NC组、CP组明显降低(P<0.05)。两项检测结果提示AS模型建立成功。ELISA检测血清MIF表达水平,AS组(50.88±4.20)μg/L、CP+AS组(59.40±3.92)μg/L明显高于NC组(42.93±2.63)μg/L及CP组(45.57±2.59)μg/L(P<0.05),且CP+AS组表达水平最高(P<0.05);CP组(3.99±0.44)μg/L、AS组(4.19±0.89)μg/L、CP+AS组(6.77±1.47)μg/L血清ICAM-1表达水平明显高于NC组(1.33±0.25)μg/L(P<0.05),且CP+AS组表达水平最高(P<0.05),CP与AS组间差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组织化学法检测动脉组织中MIF表达(吸光度),AS组(0.127±0.011)、CP+AS组(0.152±0.022)明显高于NC组(0.096±0.010)、CP组(0.010±0.011)(P<0.05),且CP+AS组表达水平最高(P<0.05);AS组(0.183±0.025)、CP+AS组(0.197±0.033)动脉组织中ICAM-1表达(吸光度)明显高于NC组(0.133±0.012)、CP组(0.156±0.006)(P<0.05),AS组与CP+AS组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论同CP组和AS组相比,CP+AS组血清及主动脉组织中MIF的表达水平及血清中ICAM-1的表达水平明显增高,提示慢性牙周炎可能通过升高炎性因子MIF及ICAM-1表达的方式促进AS病变的形成过程。

鹅脱氧胆酸(CDCA)在巨噬细胞中增加细胞间黏附分子-1的表达

目的通过检测鹅脱氧胆酸(CDCA)刺激下,小鼠巨噬细胞中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达变化,探讨胆汁酸对巨噬细胞中相关炎性反应分子表达的影响。方法采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)及Western blot测定在不同浓度CDCA刺激下,小鼠巨噬细胞株RAW264.7中ICAM-1的mRNA和蛋白水平的变化情况。结果同对照组相比,在CDCA浓度为25、50μmol/L的刺激下,ICAM-1的mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05),两者的表达变化趋势较一致。结论在CDCA的刺激下,小鼠巨噬细胞中ICAM-1的表达明显增加,对于CDCA作为药物在临床上使用的作用研究方面具有重要意义。

佛波酯对猪中性粒细胞巨噬细胞表面分子抗原-1的作用及有关信号机制研究

【目的】研究佛波酯诱导猪中性粒细胞黏附分子巨噬细胞表面分子抗原-1表达的作用及有关信号机制。【方法】采用密度梯度离心法分离纯化猪外周血中性粒细胞,以流式细胞术检测中性粒细胞巨噬细胞表面分子抗原-1表达,分别以实时荧光定量PCR、Western Blot法检测信号蛋白p38丝裂原活化蛋白激酶、胞外信号调控激酶的基因表达和磷酸化活性。【结果】20、30 nmol/L的佛波酯能极显著促进猪中性粒细胞巨噬细胞表面分子抗原-1的表达(P<0.01)。与对照相比,佛波酯在0.5、6 h可明显增加猪中性粒细胞p38丝裂原活化蛋白激酶的基因表达量(P<0.05,P<0.01);在0.5、3和6 h可极显著增加猪中性粒细胞胞外信号调控激酶的基因表达量(P<0.01)。与对照相比,佛波酯在1、5和30 min可极显著促进p38丝裂原活化蛋白激酶磷酸化活性(P<0.01);在0.5、1、5和30 min可明显促进胞外信号调控激酶磷酸化活性(P<0.05,P<0.01)。【结论】佛波酯能诱导猪中性粒细胞黏附分子巨噬细胞表面分子抗原-1的表达,其机制至少与上调p38丝裂原活化蛋白激酶、胞外信号调控激酶的基因表达与磷酸化活性有关。

DENV-2作用于HUVECs和人巨噬细胞对黏附分子表达的影响

目的:研究登革Ⅱ型病毒(DENV-2)感染人脐静脉内皮细胞(HUVECs)和人巨噬细胞,且感染后共培养对主要黏附分子表达的影响。方法:水平密度梯度离心法提取浓缩白细胞中的外周血单核细胞(PBMC),贴壁分离单核细胞,用巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)刺激5~7 d,流式细胞术鉴定细胞表面CD14和CD11b分子。用10 3 TCID50 DENV-2分别感染HUVECs和人巨噬细胞,且感染后两者共培养,qRT-PCR检测细胞内不同时间点DENV NS1、VCAM-1、ICAM-1和E-selectin mRNA相对表达量。双抗体夹心ELISA法分别检测不同时间点各组培养上清液中可溶性分子ICAM-1、VCAM-1和E-selectin的表达水平变化。结果:流式细胞术鉴定人巨噬细胞纯度为(92.15±1.24)%。DENV-2感染HUVECs后病毒基因NS1的相对表达量呈先升后降趋势,在24 h达到峰值后下降,DENV-2感染人巨噬细胞的DENV NS1基因相对表达量呈先递减后增加趋势,共培养组HUVECs的NS1 mRNA各时间点表达水平均高于HUVECs单独感染组。DENV-2感染巨噬细胞后,ICAM-1 mRNA相对表达量于4、8 h高于巨噬细胞未感染组,12、24、48、72 h相对表达水平与未感染组相比差异无统计学意义;E-selectin mRNA相对表达量于4 h明显高于巨噬细胞未感染组,8 h与未感染组相比表达量无统计学意义差异,12、24、48、72 h与未感染组相比表达量下调;但未检测到VCAM-1 mRNA的表达。共培养组HUVECs的ICAM-1和VCAM-1 mRNA相对表达量与HUVECs单独感染组相比8 h后均上调,且均在24 h达峰值。感染后的HUVECs E-selectin mRNA于4 h表达水平最高,且各组相对表达量均低于共培养组。共培养组中感染DENV-2的HUVECs培养上清液中ICAM-1表达量均高于HUVECs单独感染组;共培养组中感染DENV-2的HUVECs中E-selectin表达量随时间呈先增后降趋势,且在24 h表达量达峰值;但未检测到培养上清液中VCAM-1的表达。结论: DENV-2能在HUVECs和人巨噬细胞中复制且能激活内皮细胞,被DENV-2感染的巨噬细胞能增强被感染的HUVECs的细胞活化并增加其黏附分子的表达。

血清巨噬细胞移动抑制因子、可溶型细胞间黏附分子-1及甲胎蛋白水平与慢性乙型肝炎患者肝纤维指标的关联性分析

目的探讨慢性乙型肝炎患者血清巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、可溶型细胞间黏附分子-1(sICAM-1)及甲胎蛋白(AFP)水平与肝纤维化指标关联性。方法我院收治的110例慢性乙肝肝炎患者(研究组)及同期104例健康体检者(对照组),两组均测定血清MIF、sICAM-1、AFP水平及透明质酸(HA)、层黏蛋白(LN)、Ⅳ型前胶原(Ⅳ-C)水平,评估研究组肝纤维化程度。比较两组血清三指标水平及肝纤维化指标水平,比较不同肝纤维化程度患者血清三指标水平,分析血清三指标水平与肝纤维化指标及纤维化程度的相关性,分析血清三指标水平对患者肝纤维化预测价值。结果研究组血清MIF、sICAM-1、AFP水平及HA、LN、Ⅳ-C水平高于对照组(P<0.05);随着肝纤维化程度加重,血清MIF、sICAM-1及AFP水平上升(P<0.05);血清MIF、sICAM-1、AFP水平与HA、LN、Ⅳ-C、肝纤维化程度正相关(P<0.05);血清MIF、sICAM-1、AFP水平预测慢性乙型肝炎患者肝纤维化的AUC分别为0.792、0.806、0.813。结论慢性乙型肝炎患者血清MIF、sICAM-1及AFP水平与患者肝纤维指标关系密切,可用于预测患者肝纤维化情况。

结核分枝杆菌Hsp60影响小鼠巨噬细胞抗原提呈相关分子表达的研究

目的:探讨结核分枝杆菌热休克蛋白60(MTB Hsp60)对小鼠骨髓巨噬细胞MHCⅡ类分子表达的影响。方法:采用50 ng/ml、100 ng/ml的MTB Hsp60刺激小鼠骨髓巨噬细胞,分别在24 h、48 h、72 h收集细胞提取mRNA,采用实时荧光定量PCR检测PⅣ、PⅢ、PⅠ、IL-27、CⅡTA的mRNA表达水平;分别用50 ng/ml、100 ng/ml、200 ng/ml的MTB Hsp60刺激小鼠骨髓巨噬细胞,流式细胞术检测巨噬细胞MHCⅡ/F4/80、CD86/F4/80的百分比。结果:50 ng/ml MTB Hsp60刺激后CⅡTA、PⅣ、IL-27、PⅠ在3个时间点的总体比较差异有统计学意义(P<0.05),3个时间点两两比较,CⅡTA在72 h的表达与24 h的表达相比明显降低(0.543±0.034 vs 1.859±0.689,P<0.017),PⅣ在48 h的表达与24 h的表达相比明显降低(0.442±0.061 vs 0.834±0.030,P<0.017),IL-27在48 h的表达与24 h的表达相比明显降低(1.519±0.041 vs 1.711±0.016,P<0.017),72 h的表达与24 h的表达相比明显增高(2.606±0.193 vs 1.711±0.016,P<0.017),PⅠ在48 h的表达与24 h的表达相比明显降低(1.221±0.019 vs 1.567±0.037,P<0.017);100 ng/ml MTB Hsp60刺激后CⅡTA、IL-27、PⅠ在3个时间点的总体比较差异有统计学意义(P<0.05),3个时间点两两比较,IL-27在48 h、72 h的表达与24 h的表达相比明显增高(2.609±0.246/0.867±0.049 vs 0.602±0.096,P<0.017),PⅠ在72 h、48 h的表达与24 h的表达相比明显增高(0.811±0.085/1.361±0.199 vs 0.526±0.140,P<0.017)。100 ng/ml MTB Hsp60刺激后的PⅢ、PⅠ、CⅡTA的mRNA表达水平相较于50 ng/ml MTB Hsp60刺激后有所下调(P<0.05),而PⅣ的mRNA表达水平增高(P<0.05)。MHCⅡ/F4/80的表达百分比在3个不同浓度刺激后比较差异具有统计学意义(P<0.05):MHCⅡ/F4/80的表达在200 ng/ml MTB Hsp60刺激后相较于50 ng/ml MTB Hsp60的刺激有所下调,而CD86/F4/80的mRNA表达水平增高。结论:MTB Hsp60刺激小鼠骨髓巨噬细胞后CⅡTA、PⅣ、IL-27、PⅠ、PⅢ的mRNA表达有显著变化且受到MTB Hsp60浓度和时间的影响,MHCⅡ类分子随MTB Hsp60刺激浓度的增加而减少,CD86随MTB Hsp60刺激浓度的增加而增加,提示MTB Hsp60抑制小鼠骨髓巨噬细胞MHCⅡ类分子的表达,促进黏附分子的表达,即Hsp60可能抑制巨噬细胞抗原提呈功能从而影响其抗原提呈相关分子的表达,使MTB逃避巨噬细胞的免疫杀伤,进一步导致MTB慢性感染和潜伏感染。

上皮细胞黏附分子和滋养层细胞表面抗原2在大鼠梗阻性肝损伤动物模型中的研究

目的探讨上皮细胞黏附分子(EpCAM)及滋养层细胞表面抗原2(TROP2)与大鼠梗阻性肝组织损伤进程的关系。方法 48只实验大鼠分对照组、结扎组和再通组3组,各16只。对照组行开关术,结扎组行硅胶管置入胆管结扎术,再通组硅胶管置入胆管结扎术后7 d行再通。观察3组血清酶学变化、大鼠胆管结扎及再通前后肝脏形态组织学改变以及EpCAM和TROP2的表达分布情况。结果结扎组中EpCAM和TROP2含量随结扎时间延长,其阳性细胞比率逐渐上升,而再通组中EpCAM和肝损伤组织变化进程不完全一致。结论 EpCAM可作为判断梗阻性肝损伤中损伤进程的指标,而TROP2与梗阻性肝损伤中修复进程密切相关。

细胞间黏附分子-1在高血压左室肥厚发病中的作用及丹参酮ⅡA对其表达的影响

目的 :探讨细胞间黏附分子- 1(ICAM-1)在高血压左室肥厚发生中的作用及丹参酮 A对其表达的影响。方法 :12周龄雄性 Wistar-Kyoto(WKY)大鼠和自发性高血压大鼠 (SHR)共 30只 ,随机分为对照组、高血压组、丹参酮 ⅡA组。丹参酮 Ⅱ A组经尾静脉连续注射丹参酮 Ⅱ A治疗 12周。断头处死大鼠后留取心肌标本 ,进行苏木素伊红 (HE)、范吉逊 (VG)染色 ,观察心肌细胞形态和胶原分布情况 ;免疫组化染色及 ED1标记显示心肌巨噬细胞浸润 ;逆转录聚合酶链反应检测心肌 ICAM -1m RNA表达 ;酶联免疫吸附试验(EL ISA)检测 ICAM -1的蛋白表达。结果 :与对照组 WKY大鼠比较 ,SHR组肥厚心肌中 ICAM-1的 m RNA及蛋白表达均显著增加 (P<0 .0 1和 P<0 .0 5 ) ,巨噬细胞浸润明显 (P<0 .0 1)。应用丹参酮 A治疗后 ,SHR组的心肌 ICAM-1的 m RNA及蛋白表达水平均显著下调 (P<0 .0 1和 P<0 .0 5 ) ,巨噬细胞浸润数减少(P<0 .0 5 ) ,心肌细胞肥大和间质纤维化程度明显减轻。结论 :心肌 ICAM-1过度表达及其介导的炎性细胞浸润在高血压左室肥厚的发病过程中具有重要作用 ;丹参酮 A抑制左室肥厚的效应可能与其下调 ICAM-1表达 ,减少炎性细胞的心肌浸润有关。