秋水仙素诱导黑喉石斛多倍体研究

以黑喉石斛原球茎为材料,探讨了秋水仙素不同处理对黑喉石斛多倍体诱导的影响.流式细胞仪测定结果表明,适宜四倍体诱导的秋水仙素质量分数在0.01%~0.03%之间,适宜八倍体诱导的秋水仙素质量分数在0.05%~0.10%之间,处理时间均为2~3 d;获得的多倍体在形态、气孔和染色体数目上有明显变化;八倍体与四倍体相比,发育更加迟缓,多表现为整株分叉.

植株成熟度与生长调节剂对黑喉石斛花芽诱导的影响

黑喉石斛在自然条件下从播种到开花需要3年左右的时间。为了研究黑喉石斛的开花过程,缩短开花年限,采用组织培养方法研究不同因素对黑喉石斛试管内花芽诱导的影响。结果表明,(1)植株的成熟度与花芽诱导率相关性明显;(2)植物生长调节剂TDZ+PP333组合可诱导黑喉石斛花芽形成,以0.2mg/LTDZ+0.3mg/LPP333组合诱导90d苗龄的黑喉石斛幼苗试管开花率最高,为40.00%;(3)TDZ+PP333+NAA组合有利于丛生芽的增殖和试管内壮苗培养,以比例1∶5∶2和1∶8∶4的处理效果最佳。由此推测黑喉石斛试管内开花不仅跟植物生长调节剂的种类和浓度有关,还与植株的生理状态相关。

黑喉石(即鸟)雏鸟生长量研究

对黑喉石鹏Saxicola torquata stejnegeri（Parrot）雏鸟的生长量进行了研究，除尾以外雏鸟的体质量生长与各个器官紧密相关，嘴和跗踱在雏鸟生长前期相对较快，翅和尾在雏鸟生长后期相对较快．

黑喉石■雏鸟生长过程观察研究

文章对黑喉石[即鸟]Saxicola torquata stcjnegeri（Parrot）雏鸟的详细生长情况进行了描述包括从0．5d到12．5d雏鸟离巢前的12～13d，同时对雏鸟的体温也进行了测量．结合它们之间的关系提出了雏鸟的三个生长阶段．即变温阶段（0．5～4．5d）、积累阶段（5．5～8．5d）和恒温阶段（9．5～12．5d）．

黑喉石斛叶绿体基因组特征及比较分析

本研究结合Illumina高通量测序和Nanopore测序技术,对黑喉石斛(Dendrobiumochreatum)的叶绿体基因组(cpDNA)进行测序,组装得到其cpDNA全长序列并绘制结构图谱。黑喉石斛cpDNA全长154 935 bp,注释共得到125个基因,其中有unigenes 103种,包含73种蛋白编码基因,26种tRNA基因和4种rRNA基因。特征分析结果表明:黑喉石斛cpDNA中共存在58个SSR(simple sequence repeat)位点,大部分为单核苷酸重复和二核苷酸重复类型,碱基组成以A/T碱基类型为主;其偏好的密码子共32个,其中有30个以A/U碱基结尾。以黑喉石斛与其他13种石斛的cpDNA构建系统发育进化树,结果显示,鼓槌石斛(D. chrysotoxum)和梳唇石斛(D. strongylanthum)与黑喉石斛具有较近的亲缘关系,IR/SC边界分析结果也映证了此结论。以黑喉石斛为参照,与3种近缘石斛的cpDNA进行全序列长对比,结果显示,4种石斛的序列变异主要发生在单拷贝区,基因间隔区的变异明显高于基因编码区。

黑喉石斛DoFT1基因在花发育过程中的表达模式分析及功能验证

FT(FLOWERING LOCUS T)基因是植物开花调控过程中的关键整合基因。为探明黑喉石斛(Dendrobium ochreatum)FT同源基因功能及其在黑喉石斛嫩茎开花过程中扮演的角色,本研究以黑喉石斛为试验材料,基于转录组测序结果,克隆得到黑喉石斛FT同源基因,命名为DoFT1。DoFT1基因编码区长度为537 bp,共编码178个氨基酸;生物信息学分析结果表明,该基因编码的蛋白属于PEBP家族蛋白,其含有关键保守氨基酸位点Tyr84和11个连续保守氨基酸残基序列,为FT同源基因;进化树分析结果显示,DoFT1氨基酸序列与铁皮石斛和小兰屿蝴蝶兰同源基因亲缘关系较近;Real-time PCR分析结果显示,DoFT1主要在黑喉石斛叶片部位表达,其表达量在花芽开始分化阶段出现上调,并在花芽成熟期达到峰值后呈下降趋势;将DoFT1导入烟草中超量表达,可以显著促进烟草提前开花。

黑喉石即繁殖期领域行为的观察

通过１９８５年在大兴安岭呼中林业局飞虎山林场的实地观察，描述并讨论了黑喉石 在繁殖期的领域行为，明确提出了栖息位置是黑喉石 领域争夺中的主要目标。

塞罕坝林区大杜鹃在黑喉石(即鸟)巢中寄生观察

2012～2015年,在河北省塞罕坝机械林场发现9巢黑喉石被大杜鹃寄生,巢寄生率23.08%。发现的大杜鹃的卵色、卵形一致,卵淡灰褐色,其上被有深褐色斑点,形似溅落的墨迹,多集中在钝端,大小平均23.18 mm×17.38 mm,重量平均3.83 g,卵孵化期13 d,雏鸟在巢期19 d。黑喉石卵灰绿色(近鸭蛋青色),其上被有橙褐色斑和淡褐色细纹,橙褐色斑多集中在钝端,卵大小平均17.48 mm×13.80 mm,重量平均1.81g。大杜鹃卵与黑喉石卵的差别明显,均被黑喉石接受。

黑喉石斛DoCOL10基因克隆及在花发育过程中的表达模式分析

CO (CONSTANS)是植物成花诱导中光周期途径的关键基因。为探明黑喉石斛(Dendrobium ochreatum)CO同源基因在其花发育过程中的表达模式,以黑喉石斛不同时期叶片为试验材料,基于转录组测序结果,结合同源克隆和3’RACE克隆技术得到黑喉石斛CO同源基因,命名为DoCOL10。DoCOL10基因编码区长度为1 263 bp,共编码421个氨基酸;该基因编码的氨基酸序列有2个完整且相连的B-box元件和1个CCT结构域,属于CO家族第1类,为CO同源基因;Do COL10不具备跨膜结构域和信号肽,为亲水性蛋白;进化树分析结果显示,DoCOL10与兰科植物如铁皮石斛、小兰屿蝴蝶兰、墨兰等的同源基因的氨基酸序列亲缘关系最为接近,单子叶和双子叶植物之间CO进化较远,处在不同分枝中。Real-time PCR分析结果显示,DoCOL10的表达量在花芽始分化阶段出现显著上调并达到峰值,随着花芽形成呈下降趋势;DoCOL10不仅在叶片中高表达,其在花芽中的表达量也处于较高水平,在花器官中也有一定表达。为深入研究DoCOL10基因在黑喉石斛嫩茎成花机制中的作用提供理论依据。