黑果腺肋花楸叶黄酮的提取工艺优化及抗氧化、结合胆酸盐能力分析

以超声波辅助法提取黑果腺肋花楸叶黄酮(Flavonoids from Aronia melanocarpas’leaves,AMF),探究其体外抗氧化活性和胆酸盐结合能力。以黄酮得率为指标,在单因素(液料比、乙醇浓度、超声功率、超声时间)的基础上,结合响应面法,优化AMF的提取工艺,并以DPPH·、ABTS^(+)·清除率及总还原能力为指标,考察AMF的抗氧化活性;以胆酸钠、牛黄胆酸钠、甘氨胆酸钠为结合对象,考察AMF的胆酸盐结合能力。结果表明,AMF的最优提取工艺为:液料比61:1 mL/g、乙醇浓度60%、超声功率100 W、超声时间59 min,黄酮得率为24.22%±0.29%,与模型预测值(24.27%)接近。最优工艺制备的AMF对DPPH·、ABTS^(+)·清除率较强,其IC_(50)值分别为0.32、0.16 mg/mL;质量浓度为0.5 mg/mL时,总还原能力较好,其吸光值为1.09;AMF对胆酸钠、牛黄胆酸钠、甘氨胆酸钠具有较强结合能力,结合率的IC_(50)值分别为0.76、3.01、6.49 mg/mL。综上,AMF有较强的抗氧化和胆酸盐结合能力。本研究可为AMF进一步开发天然抗氧化剂和降血脂药物提供依据。

不同分子量黑果腺肋花楸叶多糖的单糖组成及抗氧化研究

采用醇沉方法对黑果腺肋花楸叶多糖进行分离,得到HY-40(4.89×10~5)、HY-60(1.17×10~5)、HY-80(8.18×10~4)和HY-90(4.56×10~4)四种不同分子量多糖,对4种不同分子量的多糖进行紫外扫描、单糖组成及抗氧化性能测定。结果表明,4种不同分子量的多糖均不含蛋白质、核酸和多肽;其均由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖7种单糖组成,但构成比例不同;4种不同分子量的多糖均具有较好的抗氧化活性,铁还原力、清除DPPH自由基能力和清除羟自由基能力均表现出一定的质量浓度依赖性;其中HY-90多糖抗氧化性能最优,其铁还原力、清除DPPH自由基和清除羟自由基能力的半数有效质量浓度(EC50)分别为0.313g/L、0.444g/L和0.456g/L。

响应面优化超声提取黑果腺肋花楸叶多糖工艺及抗氧化研究

通过响应面试验设计,获得超声提取黑果腺肋花楸叶多糖的最佳工艺条件,通过TCA法将粗多糖中的蛋白成分除去后得到精制多糖;以清除铁还原力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基能力和清除羟自由基能力为指标,评价黑果腺肋花楸叶多糖的抗氧化活性。结果表明,超声提取黑果腺肋花楸叶多糖的最佳工艺条件为:超声温度67℃,超声时间53 min,超声功率150W,料液比1∶30(g∶mL)在此条件下多糖得率为5.01%。黑果腺肋花楸叶多糖具有较好的抗氧化活性,铁还原力、清除DPPH自由基能力和清除羟自由基能力均表现出一定的质量浓度依赖性;黑果腺肋花楸叶多糖多糖铁还原力、清除DPPH自由基和清除羟自由基能力的半数有效质量浓度(EC50)分别为0.623g/L、0.473g/L和0.147g/L。

不同产地黑果腺肋花楸叶指纹图谱的建立及化学模式识别

目的:建立不同产地10批黑果腺肋花楸叶的HPLC指纹图谱,结合化学模式识别法进行质量评价。方法:采用Agilent TC-C18色谱柱,以乙腈-0.45%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长280 nm,流速1.0 mL/min,采用中药指纹图谱相似度评价系统建立指纹图谱,结合化学模式识别方法对数据进行处理,分析10批黑果腺肋花楸叶的相似性及差异性。结果:10批黑果腺肋花楸叶相似度为0.175~0.921,标定了17个共有峰,指认出没食子酸、绿原酸、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、表儿茶素等4个共有峰。10批样品聚类分析可分为两类,主成分分析得到4个主成分的累计方差贡献率为88.726%,能有效区分不同产地黑果腺肋花楸叶,确定出4种影响其质量的差异性成分。结论:建立了黑果腺肋花楸叶的指纹图谱,本方法科学、准确、稳定,为该药材的质量控制和资源开发提供了科学依据。