黑水缬草抗老年痴呆活性部位的研究

目的筛选黑水缬草抗老年痴呆的主要活性部位。方法利用腹腔注射半乳糖促老化与反复结扎双侧颈总动脉致脑缺血及大鼠侧脑室一次性注射Aβ1-40造成复合型老年痴呆大鼠模型。将Wistar大鼠随机分成8组:空白组、假损伤组、模型组、95%乙醇粗提物低剂量组、95%乙醇粗提物高剂量组、50%乙醇洗脱物低剂量组、50%乙醇洗脱物高剂量组、中药对照健脑胶囊组,各给药组于术后3d开始灌胃给药7d。采用Mor-ris水迷宫系统测试各组大鼠的学习记忆能力,并测定大鼠血浆中SOD、MDA和羟自由基的含量。结果黑水缬草95%乙醇粗提物低、高剂量组,50%乙醇洗脱物低、高剂量组,中药对照健脑胶囊组均可增强模型大鼠的学习记忆能力,SOD活力显著增加,MDA含量降低,抑制羟自由基能力增强,尤以50%乙醇洗脱物高剂量组效果最佳。结论50%乙醇洗脱物组分为黑水缬草抗老年痴呆的主要活性部位。

黑水缬草提取物对老年痴呆大鼠脑内神经元中β-APP、Aβ_(1-40)和Caspase-3表达的影响

目的:探讨黑水缬草提取物对老年痴呆模型大鼠大脑皮质神经元和海马神经元中β-APP、Aβ1-40和Caspase-3表达的影响。方法:利用多因素造成大鼠老年痴呆病理复合模型,采用免疫组化法观察老年痴呆大鼠大脑皮质神经元和海马神经元中β-APP、Aβ1-40和Caspase-3蛋白表达变化。结果:黑水缬草各给药组和中药对照组显示出一定的疗效(P<0.05),其中以50%乙醇树脂洗脱高剂量效果尤为显著(P<0.05或P<0.01)。结论:黑水缬草50%乙醇树脂洗脱物能有效抑制神经元细胞内β-APP和Aβ1-40阳性细胞过表达,阻止其聚集脑内形成老年斑和神经纤维缠结,并能有效抑制Caspase-3的活化而减少神经元细胞的凋亡。

黑水缬草挥发油对中枢神经系统药理作用的研究

目的:观察黑水缬草挥发油对中枢神经系统的作用。方法:考察黑水缬草挥发油对小鼠自主活动的影响、对阈下和催眠剂量戊巴比妥钠的睡眠协同作用、对大鼠睡眠时相的影响、对醋酸所致小鼠扭体反应的影响以及对硫代氨基脲诱发小鼠惊厥的影响。结果:黑水缬草挥发油对小鼠的自主活动具有显著的抑制作用,与戊巴比妥钠有较好的催眠协同作用,可提高小鼠的入睡率,延长小鼠睡眠时间,明显延长大鼠睡眠周期中的慢波睡眠Ⅱ期(SW S2)和快动眼睡眠期(REMS)两个时相,同时能明显减少小鼠扭体反应次数,对抗硫代氨基脲诱发的小鼠惊厥。结论:黑水缬草挥发油具有显著的镇静、镇痛和抗惊厥等中枢神经系统抑制作用,预示了良好的新药开发前景。

黑水缬草治疗老年痴呆有效部位化学成分研究

目的:研究黑水缬草(Valeriana amurensis Smir.ex Kom.)治疗老年痴呆有效部位化学成分。方法:采用大孔树脂吸附柱色谱、正相硅胶柱色谱、ODS反相柱色谱、HPLC等分离方法及各种波谱学鉴定方法。结果:从大孔树脂吸附柱色谱的50%乙醇洗脱组分中分离并鉴定了13个化合物,分别为:(+)松脂素-4,4'-O-β-D-双葡萄吡喃糖苷(1),(+)8-羟基-松脂素-4'-O-β-D-葡萄吡喃糖苷(2),(+)8-羟基-松脂素-4-O-β-D-葡萄吡喃糖苷(3),(+)松脂素-8-O-β-D-葡萄吡喃糖苷(4),(+)松脂素-4-O-β-D-葡萄吡喃糖苷(5),(+)8-羟基-松脂素(6),(+)8,9'-二羟基-松脂素-4'-O-β-D-葡萄吡喃糖苷(7),(+)8-羟基-松脂素-4,4'-O-β-D-双葡萄吡喃糖苷(8),橄榄树脂素-4'-O-β-D-葡萄糖苷(9),落叶松脂醇-4,4'-O-β-D-双葡萄吡喃糖苷(10),橄榄树脂素-4-O-β-D-葡萄吡喃糖苷(11),8-羟基-落叶松脂醇-4'-O-β-D-葡萄吡喃糖苷(12),落叶松脂醇-4-O-β-D-葡萄吡喃糖苷(13)。结论:13个化合物全部为该植物中首次发现,其中包括8个双环氧木脂素(1～8)和5个单环氧木脂素(9～13)。

气相色谱法测定黑水缬草挥发油中乙酸龙脑酯的含量

目的建立黑水缬草挥发油中乙酸龙脑酯的含量测定方法。方法采用气相色谱法,萘为内标物,DB-17毛细管柱,载气为氦气,电子轰击（EI）离子源检测器。结果在该色谱条件下,乙酸龙脑酯在进样量0.109 6-1.753 6μg范围内呈良好线性关系,r=0.999 6;乙酸龙脑酯的加样回收率为101.33%,RSD=1.79%。结论该法能准确测定黑水缬草挥发油中乙酸龙脑酯的含量。

黑水缬草对老年痴呆模型大鼠脑内iNOS、COX-2和IκB-α表达的影响

目的:探讨黑水缬草提取物对老年痴呆大鼠大脑皮质神经元和海马神经元炎性反应的影响。方法:利用多因素造成大鼠老年痴呆病理复合模型,采用免疫组化法观察老年痴呆大鼠大脑皮质神经元和海马神经元一氧化氮合酶(iNOS)、环氧合酶-2(COX-2)及核因子NF-κB(IκB-α)表达的变化。结果:黑水缬草各剂量及阳性对照药均显示出一定的疗效,效果显著优于模型组和对照组(P<0.05),其中50%乙醇树脂洗脱高剂量组效果尤为显著(P<0.05或P<0.01),且作用呈量效关系。结论:黑水缬草50%乙醇树脂洗脱高剂量能有效抑制痴呆大鼠脑内神经元炎性反应,其作用机制可能是通过减轻iNOS过表达,抑制COX-2活性及减少对核因子NF-κB的激活来实现的。

黑水缬草提取物对阿尔茨海默病模型小鼠治疗作用的代谢组学研究

目的运用超高效液相色谱-质谱联用技术(UPLC-MS)探讨黑水缬草提取物对阿尔茨海默病(AD)的治疗机制。方法将雄性昆明小鼠分为3组,分别为对照组(2%吐温80)、AD模型组(2%吐温80)和治疗组(95%黑水缬草粗提物2 g/kg),灌胃给药30 d。运用Morris水迷宫实验和UPLC-MS技术对小鼠进行研究。结果 Morris水迷宫定位航行实验显示,与对照组比较,AD模型组小鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.05),治疗组小鼠逃避潜伏期明显缩短(P<0.05)。空间探索实验显示,与对照组比较,AD模型组小鼠单位时间目标象限停留时间短,穿台次数减少(P<0.05),治疗组小鼠单位时间内目标象限停留时间长,穿台次数增加(P<0.05)。通过UPLC-MS/MS技术,确定了10种AD的血浆生物标志物,分别为组氨酸、溶血磷脂酰胆碱C16∶0、溶血磷脂酰胆碱C18∶2、溶血磷脂酰胆碱C18∶1、溶血磷脂酰胆碱C20∶4、溶血磷脂酰胆碱C22∶6、十六碳鞘磷脂、二氢神经鞘氨醇、4-羟双氢(神经)鞘氨醇C18、4-羟双氢(神经)鞘氨醇C20,与对照组比较,AD模型组小鼠血浆中10种标志物的含量均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。治疗组小鼠血浆中10种标志物的含量均明显上升(P<0.05或P<0.01)。结论黑水缬草提取物可提高AD小鼠的认知功能,其作用机制与氨基酸、磷脂和鞘脂代谢等相关代谢通路有关。

黑水缬草组织培养与快速繁殖研究

目的对黑水缬草愈伤组织诱导培养基和生长的培养条件进行研究,构建黑水缬草快速繁殖体系。方法通过筛选外植体,添加不同种类及浓度的生长调节剂对黑水缬草进行愈伤组织诱导、芽增殖培养及生根培养。结果诱导愈伤组织适宜培养基:MS+0.5mg/LNAA+5.0mg/L6-BA。芽增殖培养以MS+0.2mg/LNAA+10.0mg/L6-BA为宜。生根培养以MS+0.1mg/LNAA为佳。结论利用组织培养技术能够实现黑水缬草快速繁殖。

黑水缬草治疗阿尔茨海默病活性成分研究

目的:研究黑水缬草(Valeriana amurensis Smir.ex Kom.)治疗阿尔茨海默病的活性成分。方法:采用大孔树脂吸附柱色谱、正相硅胶柱色谱、ODS反相柱色谱、HPLC等分离方法及各种波谱学鉴定方法。结果:从大孔树脂吸附柱色谱的50%乙醇洗脱组分中分离并鉴定了10个化合物,分别为:(+)环合橄榄树脂素-6-O-β-D-葡萄吡喃糖苷(1),黄花龙牙苷(2),kanokoside A(3),苯乙醇-O-α-L-阿拉伯吡喃糖基-(1→6)-β-D-葡萄吡喃糖苷(4),苯乙醇-O-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→6)-β-D-葡萄吡喃糖苷(5),苯甲醇-O-α-L-阿拉伯吡喃糖基-(1→6)-β-D-葡萄吡喃糖苷(6),香草醛(7),5-羟甲基-2-糠醛(8),二十二烷酸(9),β-谷甾醇(10)。结论:化合物1～5首次在该植物中发现。

黑水缬草种子萌发特性研究

目的:探讨不同处理方法对黑水缬草种子发芽率的影响。方法:采用不同化学试剂和温水浸种等方法对黑水缬草种子进行常规发芽试验和正交试验,计算不同萌发条件下的种子发芽率。结果:不同化学试剂处理的黑水缬草种子发芽率有较大差异,适当的浸泡时间能提高黑水缬草的种子发芽率,不同的处理时间、不同的处理温度、不同的萌发温度等因素对黑水缬草种子发芽率均会产生影响。结论:为提高黑水缬草种子的发芽率,播种前应对黑水缬草种子进行适当的处理;种子繁育要在适宜的时间和温度等条件下进行。

黑水缬草药材质量标准研究

目的建立黑水缬草中缬草素的薄层色谱鉴别方法和缬草烯酸的含量测定方法。方法采用薄层色谱法(TLC)对黑水缬草进行定性鉴别。采用高效液相色谱法(HPLC)测定缬草烯酸含量,采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.5%磷酸梯度洗脱;检测波长:268 nm;柱温:35℃;流速:1 mL/min。结果各批黑水缬草药材TLC中均能检出缬草素;缬草烯酸HPLC色谱峰与其他色谱峰分离良好,进样量在0.074 7～1.195 2μg范围内呈良好线性关系(r=0.9999);缬草烯酸的加样回收率为99.33%,RSD=1.36%。结论本法简便快捷,结果可靠,为控制黑水缬草药材的质量提供了依据。

RAPD法构建黑水缬草基因组DNA指纹图谱

目的采用RAPD技术对黑水缬草、缬草、毛节缬草及黄花败酱等4种药用植物进行分子水平的鉴定,并获得清晰可靠的DNA指纹图谱。方法采用植物基因组DNA快速提取试剂盒提取4种供试材料基因组DNA,以随机引物进行随机扩增。结果 4种供试材料DNA指纹图谱具有共同的位点,但又有各自的特征性位点。结论 RAPD法能有效的将4种药用植物区分开。

超声法萃取黑水缬草精油的试验研究

目的 :研究超声法萃取黑水缬草精油的实验条件。方法 :采用正交实验设计法。结果 :影响萃取的因素依次为萃取温度、萃取浓度、萃取时间。结论 :优选了超声法萃取黑水缬草精油的实验条件。

黑水缬草的生药鉴定

目的:对黑水缬草Valeriana amurensis Smir.ex Kom.进行鉴定。方法:性状鉴定与显微鉴定。结果:描述了黑水缬草的性状和显微鉴别特征。结论:研究结果可作为黑水缬草的鉴别依据。

黑水缬草和毛节缬草中缬草素的含量测定

目的:测定黑龙江省黑水缬草和毛节缬草中主要活性成分缬草素的含量.方法:RP-HPLC法.采用岛津ODSC18色谱柱(150 mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-水(体积比40:60);流速为1.0 mL/min;检测波长为256nm.结果:缬草素在12.5～300 μg/mL范围内线形良好,回归方程式为y=1 006.17X-748.90(r=0.999 3),平均回收率为97.4%,RSD为2.33%(n=5).结论:该方法简便快速、结果准确,适用于黑水缬草和毛节缬草中缬草素的定量分析.

黑龙江省栽培黑水缬草的显微鉴别研究

目的:研究黑龙江省鸡西地区栽培黑水缬草根和根茎的显微构造。方法:采用石蜡切片技术并进行显微成像。结论:为进一步制定黑水缬草的质量标准和开发利用提供科学依据。

黑水缬草野生变家植及其栽培技术

本文描述了黑水缬草的植物形态及生活习性;重点介绍了黑水缬草野生转家植的研究与实践,文章中叙述的套袋收集种子的方法很有实用价值;采用变温结合赤霉素处理种子,打破黑水缬草的种子休眠技术,提高了出芽率,取得了较为理想的效果:文章中还阐述了二次移栽和病虫害防治及采收加工的关键技术。