黑牛肝菌多糖提取工艺比较及其体外抗氧化活性研究

以得率为标准,从3种多糖提取方法(热水提取法、超声提取法、超声辅助复合酶法)中筛选并优化出黑牛肝菌多糖的最佳提取流程,进而获取黑牛肝功多糖体外抗氧化活性信息。利用单因素实验选出多糖得率最高提取法,利用响应面法进一步优化提取方法,采用分级醇沉法对多糖进行分级,采用DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法、羟自由基清除法以及还原力测定法了解黑牛肝菌多糖的体外抗氧化活性。结果发现:热水提取法、超声提取法、超声辅助复合酶提取法的多糖得率分别为5.64%、6.74%、18.47%。优化后的超声辅助复合酶提取法最佳工艺方案为:复合酶比例(m纤维素酶:m蛋白酶)2:1,酶解温度42.7℃,酶解时间67 min,酶添加量为1.92%,超声时间为20 min,预期得率18.867%;各级醇沉黑牛肝菌多糖均具有良好的抗氧化活性,抗氧化能力与多糖浓度和醇沉浓度呈正比,80%乙醇沉淀获得的多糖综合体外抗氧化活性最佳。超声辅助复合酶提取法可显著提高黑牛肝菌多糖得率,获得的黑牛肝菌多糖具有良好的体外抗氧化活性。

黑牛肝菌多糖对酒精性损伤小鼠心脏及脾脏抗氧化作用的研究

本文旨在研究黑牛肝菌多糖(RPBA)对酒精性损伤小鼠心脏及脾脏的抗氧化保护作用.将小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、RPBA中剂量组(200 mg/kg bw·d)和高剂量组(400 mg/kg bw·d),在给予各受试样品30 d后,各组小鼠禁食不禁水12 h,然后除空白组外其余3个组都灌以50%酒精,灌胃量12 mL/kg·bw,空白对照组灌等体积的蒸馏水.12 h后将各组动物处死,取心脏、脾脏测定各项抗氧化指标.结果发现,黑牛肝菌多糖能有效提高SOD活性,降低MDA含量.结论:黑牛肝菌多糖对急性酒精损伤小鼠的心脏和脾脏有一定的保护作用.

黑牛肝菌多糖对小鼠酒精性肝损伤的改善作用

目的:旨在研究黑牛肝菌多糖(refined polysaccharide from Boletus aereus,RPBA)对小鼠酒精性肝损伤的保护作用。方法:将60只小鼠适应性喂养3 d后,随机分为空白对照组、阳性对照组(联苯双酯滴丸,150 mg/kg·bw)、模型组、RPBA各剂量组(100、200、400 mg/kg·bw),连续灌胃30 d,第31 d禁食不禁水12 h,除空白组外的其余各组灌胃50%乙醇溶液(12 m L/kg·bw),建立动物急性肝损伤模型。结果:小鼠酒精灌胃后,模型组谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)水平及丙二醛(MDA)含量与空白对照组相比显著(p<0.05)升高,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、还原型谷胱甘肽(GSH)含量显著(p<0.05)低于空白对照组,RPBA各剂量组ALT、AST、TG水平及MDA含量与模型组相比明显降低,而以上各抗氧化酶活性明显提高。结论:RPBA能明显降低小鼠血清中AST、ALT及TG水平,提高血清中抗氧化酶活性,减少脂质过氧化,对小鼠酒精性肝损伤具有明显的保护作用。

黑木耳、银耳、黑牛肝菌的红外光谱研究

利用傅里叶变换红外光谱仪对三种食用菌(黑木耳、黑牛肝菌、银耳)样品进行了研究。三种菌的光谱各具特征,黑木耳和银耳光谱主要谱峰相似,但与黑牛肝菌的光谱区别较大;根据吸收强度比可以将黑木耳和银耳区分开。光谱结果还显示,三种食用菌多糖,既有α糖苷键,也有β糖苷键。红外光谱具有快速、简便、不需对样品进行分离提取等优点。

黑牛肝菌多糖对小鼠酒精性肾损伤保护作用的研究

目的:研究黑牛肝菌多糖(RPBA)对酒精所致急性肝损伤小鼠肾损伤的保护作用。方法:小鼠被随机分为空白对照组、模型组、药物组(联苯双酯组,150mg/kg bw)、RPBA各剂量组(100、200、400mg/kg bw),连续灌胃30d,空白对照组按等量生理盐水灌胃。第31d给予50%乙醇(12mL/kg)建立动物急性肝损伤模型。小鼠处死后取肾脏测定各项抗氧化指标。结果:与模型组相比,RPBA各剂量组均能降低肾脏MDA含量(p<0.01),提高肾脏SOD活性、CAT活性、GSH-Px活性及GSH含量(p<0.01)。结论:RPBA能明显提高肾脏中抗氧化酶活性,减少脂质过氧化,对小鼠酒精性肾损伤具有明显保护作用。

黑牛肝菌液体发酵条件的优化

讨论了黑牛肝菌液体的发酵培养基最佳组成及培养条件。采用响应曲面法分析了葡萄糖、蛋白胨、装液量三个关键影响因素对菌丝体生物量的影响。结果表明:黑牛肝菌发酵的最佳培养基为葡萄糖37.5g/L、蛋白胨8.5g/L、KH2PO42g/L、MgSO4.7H2O1g/L、VB10.01g/L、CaCO32g/L;培养条件为装液量96mL,培养温度28℃,转速160r/min,初始pH5.5。此时可达到最大菌丝体生物量25.4801g/L。

高温蒸汽瞬时漂烫对黑牛肝菌酶活和品质影响的研究

研究了高温瞬时蒸汽对黑牛肝菌的过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)活性的影响,并研究了对黑牛肝菌几种重要营养成分的影响,包括总酚、可溶性总糖、VC以及可溶性蛋白。通过时间(s)、物料量(g)、蒸汽压力(MPa)的单因素试验,设计正交试验,对POD、PPO、总酚、总糖、VC、可溶性蛋白进行综合评价分析,得出最佳的试验条件:高温蒸汽瞬时漂烫时间为30 s、物料量300 g、蒸汽压力0.3 MPa,综合评分值最高。高温蒸汽漂烫最优结果与最佳的热水漂烫处理进行比较,体现了高温蒸汽漂烫的优势。

黑牛肝菌降血脂及抗氧化作用的实验研究

目的 :探讨黑牛肝菌的降血脂及抗氧化作用。方法 :雄性SD大鼠40只随机分为高、低两个剂量组和高脂模型组及正常对照组 ,前三个组给予高脂饲料喂养 ,并每日分组灌胃给6.50%、3.25%黑牛肝菌匀浆液和蒸馏水1ml/100g体重 ,连续30d。分别测定血脂及抗氧化指标。结果 :黑牛肝菌高、低剂量组血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯和丙二醛含量明显低于高脂模型组 (P<0.01) ,而血清高密度脂蛋白胆固醇含量和血清及肝脏的超氧化物歧化酶活力明显高于高脂模型组 (P<0.01)。结论 :黑牛肝菌对大鼠有明显的降血脂及抗氧化作用。

黑牛肝菌多糖超声提取工艺优化及抗氧化研究

以云南大理黑牛肝菌为材料,使用超声辅助萃取及水提醇沉法提取多糖,采用单因素试验及正交试验对黑牛肝菌多糖提取工艺进行优化,并对黑牛肝菌多糖进行了提取;对所得多糖进行DPPH自由基、ABTS自由基清除能力及铁氰化钾还原能力试验,对其抗氧化活性进行比较研究。结果表明,黑牛肝菌多糖最佳提取工艺为料液比1∶25(g∶mL)、醇沉浓度80%、超声时间70 min、超声功率90%,在此条件下多糖含量为79.41 mg/g。醇沉浓度为80%时,多糖提取物抗氧化活性最强,多糖对DPPH、ABTS自由基清除率及总还原力吸光度分别为97.92%、99.80%和0.789;醇沉浓度为50%时,所得多糖对DPPH、ABTS自由基清除率及总还原力吸光度分别为85.79%、88.23%和0.713,抗氧化活性最低;表明黑牛肝菌多糖对自由基有较好的清除效果及还原作用。

冻结条件对黑牛肝菌PPO和POD活性的影响

采用喷雾式流态化液氮速冻及缓冻,研究了冻结温度、速度对黑牛肝菌多酚氧化酶(PPO)及过氧化物酶(POD)活性的影响。结果表明:冻结温度、速度对酶的活性有明显的影响,在-100℃、-80℃、-60℃及-35℃(缓冻)下进行冻结,黑牛肝菌的PPO活性分别下降了73.5%、70.6%、65.2%及18.0%,POD活性分别下降了68.4%、62.2%、51.7%及15.8%。

冻结条件对黑牛肝菌营养价值影响的研究

研究了在不同的烫漂温度及时间下黑牛肝菌过氧化物酶(Peroxidase,POD)活性的变化,烫漂及冻藏对黑牛肝菌过氧化物酶活性、氨基酸、矿质元素、维生素及氨基酸态氮等成分的影响。结果表明:采用95～96℃烫漂温度效果最好,在3min内过氧化物酶活性降低了95.5%,烫漂及冻藏都使黑牛肝菌营养成分受到不同程度的损失。建议采用-80℃以下温度不经烫漂而冻结,冻品在-26℃冰箱中贮藏12个月,其营养价值保持很好。

人工培育和野生黑牛肝菌氨基酸成分分析

为研究人工培育与野生黑牛肝菌氨基酸差异,利用氨基酸自动分析仪分别对不同产地野生黑牛肝菌与人工培育牛肝菌进行比较。结果表明,牛肝菌氨基酸含量最高的为Glu和Asp,野生黑牛肝菌各种氨基酸含量均高于人工培育牛肝菌,且Asp,Ala,Cys,Lys,Arg,氨基酸总量(TAA)和非必需氨基酸(NEAA)显著高于人工黑牛肝菌。聚类分析可将人工培育与野生黑牛肝菌进行分类。氨基酸呈味分析表明,牛肝菌中鲜味、甜味、苦味味道强度(TAV)值较大的氨基酸分别为谷氨酸、丙氨酸、组氨酸,除组氨酸外,野生黑牛肝菌TAV值是人工培育牛肝菌的2倍。人工培育牛肝菌需要增加鲜味、甜味氨基酸的含量,从而增加其味道强度。

2种不同来源的黑牛肝菌SOD酶活稳定性研究

本研究分别对野生种PH-16与栽培种PH-20黑牛肝菌进行SOD酶活稳定性研究,通过SOD酶对H2O2及乙醇-氯仿的化学敏感性差异,确定SOD酶类型,以没食子酸自氧化法测定酶活,通过温度、pH以及4℃保藏时间梯度对其SOD酶稳定性进行了探究。结果表明,硫酸铵-丙酮复合沉降法,SOD酶活性最高,PH-20菌丝体蛋白含量是PH-16的1.32倍,而PH-16 SOD比活力最高可达PH-20的1.42倍。两种黑牛肝菌SOD酶活性均对H_(2)O_(2)浓度变化敏感,对乙醇-氯仿浓度变化保持活性稳定,确定SOD酶类型为Cu,Zn-SOD酶。PH-16 SOD酶最高酶活条件为pH=5.5,温度25℃,活性平均衰退速率16.2 U·mL^(-1)·d^(-1)。PH-20 SOD酶最高酶活条件为pH=6.5,温度30℃,活性平均衰退速率8.5 U·mL^(-1)·d^(-1)。

黑牛肝菌液体发酵技术研究

黑牛肝菌是一种已经实现工厂化栽培的食用菌,为服务山西省林下经济发展,拟开发一种新型牛肝菌菌剂。以发酵菌液在600 nm的紫外可见分光光度计的吸收值为指标,筛选出黑牛肝菌液体发酵培养的最佳培养基以及培养条件。结果表明:黑牛肝菌液体发酵的最佳培养基为马铃薯100 g/L、麦麸30 g/L、蔗糖27 g/L、蛋白胨1.4g/L、硫酸镁1 g/L、磷酸二氢钾0.85 g/L;培养条件为装液量为80 mL,培养温度33℃,转速160 r/min。对下一步通过喷雾干燥技术制备出黑牛肝菌干粉菌种,对推动我省“林菌”产业发展具有一定价值。

影响黑牛肝菌新菌株Np0193菌丝生长关键因素研究

为掌握影响黑牛肝菌新菌株Np0193菌丝生长的关键因素,缩短菌种培养时间,降低生产成本,为其液体菌种的研发及高效栽培提供依据,试验研究了营养物质(碳源、氮源、无机盐)和生长条件(温度、pH、含水量)等6个关键因素对其菌丝生长的影响。试验结果表明,黑牛肝菌新菌株Np0193菌丝生长最适碳源是可溶性淀粉,生长速度为2.92 mm/d;适宜氮源为蛋白胨、酵母膏,生长速度分别为2.56 mm/d和2.50 mm/d;温度对黑牛肝菌Np0193菌丝生长作用十分明显,在24~32℃温度下菌丝均能生长,最适温度为28~30℃,30℃时菌丝生长速度最快,达到2.61 mm/d;适宜pH为4.5~5.5,最适为4.5,菌丝生长速度最快为2.72 mm/d;添加1 g/L无机盐均对菌丝的生长有抑制作用,且易出现菌丝老化、菌落褐色,菌丝生长速度均比对照慢;适宜含水量为55%~65%,最适为60%,低于50%或高于70%时菌丝生长缓慢、菌丝稀疏、抗逆性差。

黑牛肝菌调味酱的制作工艺研究

文章提出一种利用野生菌菇黑牛肝菌生产调味酱的工艺,采用影响因素分析的方法对影响黑牛肝菌调味酱风味的因素进行了优化和筛选。结果表明,影响调味酱感观的因子顺序为:菌酱比例>蒜泥量>食盐量。本课题为开发利用野生菌菇资源、提高菌菇的附加值提供了参考。

黑牛肝菌多糖结构及体外抗肿瘤活性研究

目的研究黑牛肝菌多糖结构及体外抗肿瘤活性。方法采用傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、核磁共振氢谱(1H NMR)初步研究了其结构,在体外运用细胞学技术,以MFC、CT26.WT、S180 3种肿瘤细胞为靶细胞研究了黑牛肝菌多糖(BA-1)对肿瘤细胞增殖的影响。结果BA-1的多糖特征结构明显,无其他结构,为均一多糖。与空白组相比,BA-1能在一定程度上抑制MFC、CT26.WT和S180细胞增殖。BA-1浓度为15μg/ml时对MFC、CT26.WT和S180细胞增殖抑制效果最为明显,抑制率分别为30.68%,32.68%和38.90%。结论黑牛肝菌多糖有显著体外抗肿瘤活性,值得进一步研究开发。

松茸、黑牛肝菌、双孢白蘑菇提取物体外抗氧化性试验研究

采用超氧阴离子、羟基自由基、卵磷脂脂质体体系以及测定还原力的方法,研究了松茸、黑牛肝菌、双孢白蘑菇3种食用菌,水提多糖、水提多酚、醇提多酚这3种不同提取方式,所得初提物的抗氧化试验,并测定各种处理的可溶性多糖及多酚含量。结果表明:醇提多酚具有最强的还原力,其中黑牛肝菌还原力最强;3种食用菌醇提多酚的清除超氧阴离子的能力较其他两种提取方式强;3种食用菌清除羟基自由基能力在醇提最大质量浓度下最强,分别达到59.00%、59.12%、57.19%,卵磷脂脂质体清除率分别达到:47.03%、37.84%、25.68%。

不同保存方法对黑牛肝菌菌丝活力的影响

对引进的黑牛肝菌子实体进行组织分离,获得的母种进行不同保存方法比较试验。试验结果:黑牛肝菌母种在常温下保存,90 d后菌丝活力94%;而在4℃冰箱中保存,90 d后,菌丝活力下降至15%。结果表明长期保存黑牛肝菌最好的保存方法是室内常温保存。

响应面法优化黑牛肝菌多酚提取工艺及其抗氧化活性研究

目的:对黑牛肝菌多酚的提取工艺进行优化并对其抗氧化活性进行评价。方法:采用超声波辅助法提取多酚,以乙醇浓度、液料比、提取时间及提取次数为单因素进行试验,以提取率为响应值,利用Box-Behnken方法优化多酚提取条件,并采用清除DPPH自由基、ABTS自由基以及还原三价铁离子能力三种方法进行多酚抗氧化活性评价。结果:黑牛肝菌多酚最佳提取工艺条件为:乙醇浓度60%(v/v)、液料比40∶1(mL/g)、提取时间20 min、提取次数2次。抗氧化活性实验表明,黑牛肝菌多酚提取物清除DPPH自由基、ABTS自由基的能力以及还原三价铁离子的能力均强于对照VC。结论:黑牛肝菌多酚提取物具有强的抗氧化活性,可作为潜在的天然抗氧化剂,具有进一步开发利用价值。