响应面法优化黑种草皂苷A双水相提取工艺研究

目的优化黑种草皂苷A双水相提取工艺。方法采用响应面法,以黑种草皂苷A提取率为指标,考察料液比、硫酸铵用量、乙醇浓度和超声时间对黑种草皂苷A提取的影响。结果黑种草皂苷A最佳提取工艺为:料液比1∶40,硫酸铵浓度0.35g/mL,乙醇浓度47%,超声时间30min,在此条件下黑种草皂苷A的提取率为3.15%。结论该工艺简单、可靠,适用于黑种草皂苷A的提取。

黑种草子中黑种草皂苷A的结构鉴定及含量测定

目的对从黑种草子中分离得到的黑种草皂苷A进行结构鉴定,并建立其含量测定方法。方法采用大孔吸附树脂、硅胶柱等方法分离纯化得到黑种草皂苷A,综合理化性质和波谱学数据进行结构鉴定。用HPLC法测定其在药材中的含量,用Agilent Eclipse XDB-C 18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水(28∶72);柱温:35℃;流速:1.0 mL·min-1;检测波长:210 nm。结果黑种草皂苷A在0.02012~1.00600 mg·mL^-1范围内,峰面积与质量浓度呈良好的线性关系(r=0.9999);平均回收率为104.51%,RSD值为1.46%(n=6)。结论该含量测定方法操作简便、准确度高、重复性好,可控制黑种草子药材的质量。

HPLC-ELSD法测定黑种草总皂苷提取物中黑种草皂苷A的含量

目的:建立测定黑种草总皂苷提取物中黑种草皂苷A含量的方法。方法:采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)法。色谱柱为Cosmosil C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为1.0ml/min,柱温为30℃,进样量为10μl,ELSD的漂移管温度为65℃,气体流速为2.0L/min。结果:黑种草皂苷A的质量浓度在0.183～2.562mg/ml范围内与其峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9990);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均<2%;平均加样回收率为99.93%,RSD=1.60%(n=6)。结论:该方法操作简便、重复性好、准确性高,可用于黑种草总皂苷提取物中黑种草皂苷A的含量测定。