人黑素浓集素受体1抗原表位肽的表达、纯化及其在白癜风患者中的检测

目的 表达及纯化人黑素浓集素受体1抗原表位肽,探讨其在白癜风患者自身抗体检测中的应用.方法 人黑素浓集素受体1抗原表位肽编码基因合成后克隆至原核表达载体pGEX-4T-2,转化大肠杆菌BL21菌株,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导蛋白表达,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析和Western印迹鉴定目的 蛋白表达.以提取的黑素细胞膜蛋白作为阻断抗原,进行阻断ELISA分析.以目的 蛋白为抗原,检测100例进展期白癜风患者和30例正常人血清IgG抗体情况.结果 成功构建重组表达载体,重组蛋白成功表达并纯化,上样量低于0.0625μg时纯化率达100%.目的 蛋白与白癜风患者血清IgG抗体间的结合能被天然黑素细胞膜抗原抑制.100例进展期白癜风患者血清中有36例与目的蛋白结合反应呈阳性.结论 成功表达并纯化了人黑素浓集素受体1抗原表位肽,该目的蛋白能够结合白癜风患者血清中IgG抗体,可以用于抗人黑素浓集素受体1抗体的检测.