鸽黑素皮质素受体3、4(MC3R、MC4R)基因多态性与生长性状的相关分析

利用PCR-SSCP技术和DNA测序方法检测广东石岐肉鸽和哈尔滨地区灰色家鸽MC3R和MC4R基因部分编码区序列的单核苷酸多态性,分析了MC3R基因T91G突变位点和MC4R基因A903G突变位点导致的基因型与两群体鸽生长和体组成性状的关系。结果表明,这两个多态位点所导致的基因型对石岐肉鸽活重、屠体重、全净膛重均有显著影响(P<0.05);另外,利用这两个突变位点所产生的合并基因型在鸽群体中与生长和体组成性状作最小二乘分析,结果表明,两位点合并后的基因型对全净膛重影响显著(P<0.05)。多重比较结果表明,BBAA型全净膛重显著大于AABB型,BBAA型对于体重增长是有利基因型。

兔黑素皮质素受体4(MC4R)基因多态性及其与体重及屠体性状的关联研究

以哈尔滨白兔、天府黑兔、比利时兔、齐卡巨型兔以及加利福尼亚兔5个肉兔品种共220个个体为研究对象,采用PCR-SSCP技术和克隆测序技术进行SNPs检测和基因型的分析。结果发现兔MC4R基因237位发生转换突变(A→G),5个品种内的AA基因型和A等位基因频率均分别高于AG基因型和G等位基因,而哈尔滨白兔、比利时兔以及齐卡巨型兔3个品种兔的AG基因型频率和G等位基因频率明显高于天府黑兔和加利福尼亚兔。单位点基因型与屠体性状、饲料转化率以及熟肉率的最小二乘分析表明;AG基因型与兔的体重、全净膛重以及饲料转化率有显著的关系(P<0.05),而与熟肉率的关系不显著(P>0.05)。结果表明,MC4R基因可以作为影响和控制兔体重及屠体性状的候选基因。

鹅黑素皮质素受体-4基因的克隆与序列分析

黑素皮质素受体-4（Melanocortin receptor-4,MC4R）是其黑素皮质素受体MCR（MC1-5R）家族成员之一,属G蛋白偶联受体。它可与瘦蛋白、神经肽、α-黑素细胞刺激素等一起调节动物体重和采食量。参考鸡MC4R基因序列设计引物,克隆并测序了鹅MC4R基因。结果表明,鹅MC4R基因编码区全长996 bp,其核苷酸序列与鸡的同源性为95.3%,与人、牛、猪等哺乳动物同源性在75%-79%;其氨基酸序列与鸡的同源性达到98.5%。构建哺乳类、鸟类和鱼类MC4R基因核苷酸进化树显示,鹅较早地与哺乳类动物分化开来。分析MC4R蛋白的氨基酸残基特性参数表明,MC4R的7次跨膜结构与MC4R的亲水性区域、电荷密度以及氨基酸残基位于表面概率的变化规律相一致。

参考家系鸡黑素皮质素受体3基因多态性与体重关系研究

鼠遗传学研究显示黑素皮质素受体 3(melanocortin 3receptor,MC3R)和MC4R在能量平衡控制中具有互补作用。敲除MC3R基因鼠表现为独有的代谢综合征和增加脂肪重量。以 8周龄高体重或低体重独立选择的高体重系 (highweight,HW)和低体重系 (lowweight,LW)白洛克鸡 3代参考家系群体作为实验材料 ,发现了 5个新的MC3R基因单核苷酸多态性 (singlenucleotidepolymorphisms,SNPs) ;建立了基于限制性内切酶DdeⅠ的MC3R基因型的PCR RFLP分子检测方法。方差分析结果显示MC3R基因型显著影响公鸡和母鸡的体重 ,以及公鸡腹脂含量。

飞行时间质谱法检测水牛黑素皮质素受体4基因多态性

应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF-MS)检测水牛黑素皮质素受体4(MC4R)基因的多态性(SNPs),为今后建立水牛辅助标记选择策略奠定基础。以水牛MC4R基因序列为模板,利用PCR扩增测序法筛查了水牛MC4R基因13个SNPs。为进一步验证筛选的可靠性,应用MALDI-TOF-MS针对380头水牛检测了8个标记的基因型。结果显示,平均检出率为98.0%,能够准确的检测出3种常见的基因型。所检SNP位点的平均最小等位基因频率(MAF)为0.24,平均杂合度为0.28,平均多态信息含量(PIC)为0.23。本研究建立的基于PCR测序法联合MALDI-TOF-MS检测水牛MC4R基因多态性的方法,具有快速、可靠和准确的特点,为今后开展水牛生产性状基因的SNP分型和检测等研究奠定了基础。

4个黄牛群体黑素皮质素受体1(MC1R)基因变异研究

为了评价E(extension)座位对牛毛色性状的影响,采用DNA序列分析和PCR-RFLP技术对云南地区4个黄牛群体(3个本地群体和1个引进品种)的黑素皮质素受体1(MC1R)基因的编码区进行了基因特征分析和群体变异检测。结果,在文山黄牛、昭通黄牛和短角牛中发现E+和e2种等位基因,检测到E+/E+、E+/e和e/e3种基因型。在文山黄牛中E+和e等位基因的频率分别为0.54和0.46,在昭通黄牛中分别为0.70和0.30;而在迪庆黄牛中共检测到E+、ED和e3种等位基因,它们的频率分别为0.76、0.14和0.10,该群体存在E+/E+、ED/ED、E+/ED、E+/e和ED/e5种基因型,未发现e/e型个体。与所研究个体的毛色性状相联系,发现E座位对牛的毛色有重要影响,E+和ED等位基因与黑色表型有关,而e等位基因与红色表型有关,但黄色、棕色和红色表型还与其它座位基因相关联。

山羊黑素皮质素受体-3基因转录水平差异分析

【目的】开展贵州地区不同山羊品种的黑皮质素受体-3(MC3R)基因转录水平研究,为研究山羊MC3R的作用部位、特点及功能提供理论参考。【方法】以黔东南小香羊、贵州白山羊、贵州黑山羊、黔北麻羊和南江黄羊5个山羊品种为研究对象,利用双标准曲线法和Taq Man实时荧光定量PCR对肝脏、肾脏、心脏、肺脏、背最长肌、半膜肌和皮下脂肪中MC3R基因的转录水平进行检测。【结果】MC3R基因在山羊的心脏、肝脏、肺脏、肾脏、背最长肌、半膜肌、皮下脂肪中均转录成m RNA,其中在皮下脂肪、肾脏、肝脏高度转录,在肺脏中度转录,而在心脏、背最长肌、半膜肌中的转录水平较低。7个组织中,MC3R基因转录水平均以贵州白山羊最高。【结论】山羊MC3R基因的转录水平存在组织及品种间差异,在非肌肉类组织中的转录水平高于在肌肉类组织,且在贵州白山羊组织中转录水平高于其他品种,在今后研究MC3R基因与生长和肉质性状关联性时应注意取材品种和部位对其转录水平的影响。

野猪黑素皮质素受体3基因的克隆及变异初步研究

为了揭示黑素皮质素受体3群体遗传变异，寻找新的遗传标记，对野猪黑素皮质素受体3基因进行了克隆和序列分析，并对发现的突变位点进行PCR—SSCP多态性检测。序列分析结果表明：野猪与家猪相比存在5个SNPs，其中有3个是在家猪中没有发现的；利用PCR—SSCP方法在各多态位点均检测到3种基因型，且基因型分布符合Hardy-weinberg定律，说明野猪具有独特的遗传信息。

波尔山羊黑素皮质素受体4C端基因单核苷酸多态性与体质量的关联分析

为了探讨黑素皮质素受体4(Melanocortin receptor-4,MC4R)基因多态性对波尔山羊生长性状的影响,对波尔山羊MC4R基因进行了克隆和测序,并利用建立的PCR-RFLP检测方法对164只波尔山羊的MC4R基因进行多态性检测。结果显示,在受检波尔山羊中,编码区A946C位点检测出2种基因型(AA和AC),且2种基因型间各月龄波尔山羊体质量差异均不显著(P>0.05);C986T位点检测出3种基因型(CC、CT和TT),CT型六月龄体质量和六月龄日增质量均极显著高于CC型(P<0.01),CT型周岁龄体质量和周岁日增质量均显著高于CC型(P<0.05)。表明MC4R基因C986T位点可以作为山羊体质量性状标记辅助选择的候选分子标记。

α-促黑激素类似物与黑素皮质素受体3和4亲和活性的筛选

目的:筛选具有中枢黑素皮质素受体3和4(melanocortin 3 and 4 receptors,MC3R,MC4R)高亲和活性和选择性的新化合物(α-促黑激素类似物)。方法:从大鼠下丘脑及周围组织中提取富含MC3R和MC4R的膜蛋白,进行放射标记的α-促黑激素([125I]-NDP-α-MSH)配体与MC3R,MC4R的结合实验,求出受体最大结合容量(Bmax)和平衡解离常数(Kd)。用10 nmol.L-1浓度的与MC3R和MC4R高亲和活性的已知激动剂(PT141)和已知阻滞剂(SHU9119)及各受筛化合物进行竞争结合或抑制实验,比较并找出与MC3R和MC4R具有高亲和活性的新化合物。结果:饱和实验求出Bmax=64.81 pmol.g-1蛋白,Kd=0.768 2 nmol.L-1。受筛化合物中LK-FS024与MC3R和MC4R的亲和活性最高,与PT141几乎相同(相对结合率为97%)。结论:LK-FS024与MC3R和MC4R有较高亲和活性,可能是一个具有较好药理研究价值的α-MSH类似药。

鸽黑素皮质素受体4基因多态性与生长性状及体组成的相关研究

通过比对GenBank中鸡、鹅黑素皮质素受体4(melanocortin-4 receptor,MC4R)基因DNA序列,找出保守序列设计引物,克隆了鸽的MC4R基因编码区985 bp序列,与鹅?鸡?短尾猊?北极狐和犬类的同源性分别为94%、93%、82%、82%和82%。利用PCR-SSCP技术和DNA测序方法检测两群体鸽MC4R基因编码区序列的单核苷酸多态性,共检测出2个多态位点,最小二乘分析表明,A903G基因型对肉鸽群体活重、屠体重、全净膛有显著影响(P<0.05),对野生鸽群体生长性状无影响(P>0.2),多重比较显示,该位点AA基因型个体的活重、屠体重、全净膛显著高于BB基因型个体(P<0.05)。MC4R基因可能是影响鸽生长性状和体组成的主效基因或与主效基因相连锁。

黑皮质素受体4基因rs17782313位点基因多态性与减重手术治疗肥胖症患者的减重效果的关系

目的:研究我国北方汉族肥胖症患者黑皮质素受体4(melanocortin-4 receptor,MC4R)基因的rs17782313位点基因多态性对腹腔镜Roux-en-Y胃旁路术(1aparoscopic Roux-en-Y gastric bypass,LRYGB)减重效果的影响。方法:回顾性分析中国医科大学附属盛京医院2011年1月至2013年12月收治的81例病态性肥胖接受LRYGB治疗的患者临床资料,提取患者外周血DNA,PCR扩增目的基因后应用直接测序法,对rs17782313位点基因型进行检测。根据基因型分组:风险基因携带组和非携带组,比较分析2组代谢指标、体质指数(body mass index,BMI),多余体质量减少率(excess weight loss,EWL)等术后变化,评价该基因对减重效果的影响。结果:(1)rs17782313位点的3种基因型TT、TC、CC,基因频率分别为50.62%(41例)、35.80%(29例)、13.58%(11例)。(2)不同基因型的各组间,体质量、BMI、血脂、空腹血糖、糖化血红蛋白等指标无明显差异。(3)风险基因携带者术后BMI、EWL下降少于非携带者,但未达到统计学差异(女性患者BMI术后6个月P=0.296,12个月P=0.179;EWL P=0.139,0.094。男性患者BMI术后6个月P=0.295,12个月P=0.072;EWL P=0.106,0.077)。结论:MC4R基因rs17792313位点C等位基因(风险基因)携带者与非携带者的减重效果相似。

黑素皮质素受体4(MC4R)基因多态性与动物生长性能的相关性研究

黑素皮质素受体4(Melanocortin 4 receptor,MC4R)是G蛋白偶联受体(G Protein coupled receptors,GPCRs)超家族的一个成员,在动物的体重、能量稳态和采食量的调控中具有重要作用。综述了MC4R基因的结构与定位、生物学功能以及MC4R基因与动物生长性能的相关性研究进展。

哺乳动物黑素皮质素受体4的生物学功能及其基因多态性研究进展

黑素皮质素受体4(Melanoeortin receptor-4,MC4R)主要是由动物下丘脑分泌的一种肽类物质,是调节哺乳动物摄食和体重的重要信号分子。介绍了MC4R基因的结构与生物学功能,重点阐述了MC4R基因多态性与哺乳动物生产性能的相关性,为应用MC4R进行哺乳动物分子标记辅助育种提供借鉴。

团头鲂黑素皮质素3型受体基因克隆及表达分析

黑素皮质素3型受体(MC3R)系统与动物摄食行为以及能量调控密切相关。为丰富鱼类MC3R相关基础研究,探索鱼类摄食行为与能量调控机制,本研究克隆了团头鲂(Megalobrama amblycephala)mc3r基因,采用分子生物信息学和相对荧光定量PCR方法分别对氨基酸序列保守结构域、组织表达分布和禁食条件下的表达变化等开展分析研究。结果显示,团头鲂mc3r基因编码区全长984 bp,编码327个氨基酸,与现有报道的MC3R氨基酸序列高度相似,具有典型的7次跨膜结构域。组织表达图谱分析表明,mc3rmRNA在下丘脑、垂体、肝脏和卵巢有相对较高的表达。禁食试验结果显示,下丘脑和垂体中的转录变化与周期性摄食信号相关,其中下丘脑mc3r mRNA在禁食72 h和14 d的表达显著上调(P<0.05),垂体mc3r mRNA在禁食72 h和禁食72 h后恢复投喂6 h表达量显著升高(P<0.05),而肝脏中mc3r mRNA在禁食48 h和14 d的表达量显著上调(P<0.05)。此外,对血液皮质醇和血糖的监测结果显示,两者均在禁食14 d有显著变化,其中皮质醇水平显著高于对照组(P<0.05),而血糖水平显著低于对照组(P<0.05)。综合本研究结果表明,MC3R在鲤科鱼类中具有高度相似的氨基酸序列和结构域;在组织中的转录表达变化与食物摄取有明显相关性,对调控鱼体摄食行为和能量代谢具有重要作用。

猪黑素皮质素受体4基因的单倍型检测与分析

黑素皮质素受体4(melanocortin 4receptor,MC4R)是G蛋白耦联受体超家族的一个成员,在人和许多动物的体重、能量稳态和采食量的调控中发挥重要作用。现采用直接克隆测序的方法对23头长白猪、25头大白猪、19头民猪和7头野猪的MC4R基因进行了测序与分型。共检测到SNP位点72个,其中发生频率在2次以上的SNP位点有6个,有3个为错义突变,引起了多肽链氨基酸的替代;6个SNP位点共组成了14种单倍型,其中H1、H3、H5、H6、H7、H9、H11和H14为首次发现的单倍型。

黑素皮质素受体4基因多态性及与肌内脂肪含量相关性研究

利用PCR-RFLP技术检测75头乌金猪和41头长白猪黑素皮质素受体4(MC4R)基因的第7跨膜结构功能域D298N主效位点的遗传变异,并用最小二乘法模型分析MC4R基因对猪肌内脂肪含量的遗传效应。结果:乌金猪和长白猪MC4R基因第7跨膜结构功能域TaqⅠ-RFLP位点均存在多态性,基因型为AA、Aa和aa。长白猪AA基因型肌内脂肪含量高于Aa和aa基因型,但差异不显著(P>0.05);AA基因型对PCR-RFLP的最小二乘值最大,证明该基因在该位点对肌内脂肪(IMF)含量的效应值最大。乌金猪肌内脂肪含量aa基因型显著高于AA和Aa基因型(P<0.05),aa基因型对PCR-RFLP的最小二乘值最大,证明该基因在该位点对IMF含量的效应值最大。提示,乌金猪和长白猪的MC4R基因对肌内脂肪的调控是由不同的基因型所控制的。乌金猪可通过提高MC4R基因aa基因型的频率来增加肌内脂肪含量,达到改善乌金猪猪肉品质的目的。

河北省汉族人群冠心病患者黑素皮质素受体4基因突变的情况及意义

目的研究黑素皮质素受体4(MC4R)基因rs17782313位点与河北汉族冠心病患者遗传易感性的关系。方法选取已确诊的冠心病患者385例为冠心病组,同期正常体检的非冠心病患者364例作为对照组,采用聚合酶链式反应(PCR)分析技术及DNA直接测序技术,对2组研究对象的MC4R基因rs17782313(T/C)多态位点进行分型,按等位基因T和C的出现情况分为TT、CT、CC 3种基因型。采用非条件逻辑回归分析统计MC4R基因多态位点与冠心病易感的相关性。同时检测2组血脂水平、体质量指数(BMI)等指标。结果冠心病组血脂指标中TC、TG、LDL-C与对照组比较明显升高,而HDL-C明显低于对照组;冠心病组吸烟、饮酒及阳性家族史的比例均高于对照组(P均<0.05)。TT、CT、CC基因型在冠心病组中的分布频率分别为52.5%,33.5%和14.0%,在对照组中分别为65.9%,28.8%和5.0%,2组间基因型频率分布比较有显著性差异(X2=7.554,P=0.009)。多因素研究发现,rs17782313(T/C)多态位点C变异等位基因与冠心病的遗传易感有显著的相关性(OR=5.37,95%CI(2.68,20.67),P<0.01)。结论 MC4R基因rs17782313(T/C)位点基因突变可能是导致河北地区汉族人群冠心病的原因之一。

黑素皮质素受体-4的研究进展

黑素皮质素受体 4 (MC4R)是人类中枢神经系统中参与调节肥胖症发生的重要因素 ,可调节动物的体重和采食量。自MC4R基因克隆以来 ,学者们对MC4R的结构 ,生理功能 ,调控 ,作用机制及其基因突变与体重的关系等方面进行了大量的研究。

促肾上腺皮质激素对不同黑素皮质素受体2基因型婴儿痉挛症疗效及高度失律缓解的影响研究

背景婴儿痉挛症为婴幼儿期常见的灾难性癫痫,对多种抗癫痫药物反应欠佳。促肾上腺皮质激素(ACTH)作为其首选用药,有效率在60%~80%。寻找影响ACTH疗效的因素,并加以利用而提高ACTH有效率,成为当前该领域研究的热点及难点之一。目的探讨ACTH对不同黑素皮质素受体2(MC2R)基因型婴儿痉挛症疗效及高度失律缓解的影响,进而指导临床治疗。方法选取2016年10月-2018年10月在河北省儿童医院住院部行ACTH治疗且符合入组标准的婴儿痉挛症56例,进行体格检查、视频脑电图、基因全外显子检查等。根据MC2R基因启动子区4个单核苷酸多态性(SNP)构成的单体型类型分为TCCT携带组(n=46)即TCCT/TCCT或TCCT/0,TCCT非携带组(n=10)即0/0型。均给予ACTH治疗:1 U/kg×3 d+2 U/kg×25 d(共28 d,最大量不超过25 U)。观察两组患儿治疗有效率及高度失律缓解率。结果治疗28 d后,TCCT携带组有效36例,无效10例,有效率为78.2%;TCCT非携带组有效3例,无效7例,有效率为3/10。TCCT携带组有效率高于TCCT非携带组(χ^2=9.26,P<0.05)。视频脑电图检查结果显示高度失律检出率为43例,占76.8%(43/56),TCCT携带组36例,治疗28 d后,缓解24例,未缓解12例,缓解率为66.7%;TCCT非携带组7例,治疗28 d后,缓解3例,未缓解4例,缓解率为3/7。两组高度失律缓解率比较,差异无统计学意义(χ^2=1.46,P>0.05)。结论在婴儿痉挛症治疗中,ACTH对MC2R基因TCCT携带型的痉挛发作治疗效果显著,而两组高度失律缓解率无明显差异。