黑线仓鼠及其白化突变系血液生理生化值的测定与分析

目的测定黑线仓鼠及其白化突变系的血液生理生化参数,比较两者的差异,为医学实验研究提供参考。方法用眼球取血的方法采集动物全血,分别制备抗凝血和血清,应用全自动生化分析仪和全自动血细胞分析仪进行测定。用SPSS10.0软件包对测定结果进行分析。结果测定了黑线仓鼠及其白化突变系的血液生理生化正常值范围,并与其它动物的数据进行了比较。结论确定了黑线仓鼠与其白化突变系的血液生理生化正常值范围,两者在多项指标上存在差异。而且,黑线仓鼠及其白化突变系的血小板计数均高于小鼠,约高出3倍,这一差异可能有利于两者作为血液凝集实验模型的研究。

黑线仓鼠及其白化突变系酪氨酸酶基因的克隆与序列分析

目的对黑线仓鼠及其白化突变系酪氨酸酶基因进行比较研究,揭示黑线仓鼠白化突变系白化性状产生的分子机理。方法根据小鼠与大鼠的酪氨酸酶基因保守区设计3对引物,利用RT-PCR方法 ,从黑线仓鼠及其白化系皮肤总RNA中扩增得到酪氨酸酶的cDNA基因,并对其二者进行克隆测序。结果成功获得了黑线仓鼠及其白化突变系的酪氨酸酶基因,对二者的序列比较分析结果表明,二者的编码区没有差异。结论黑线仓鼠白化突变系白化性状产生的原因与已知小鼠的白化性状产生原因不同,并不是由酪氨酸酶基因编码区突变造成的,其白化性状产生的机理有待进一步的研究。

旋毛虫感染黑线仓鼠及其白化突变系后细胞因子变化比较分析

目的比较旋毛虫感染黑线仓鼠及其白化突变系后两种动物免疫状态的变化,建立适合感染寄生虫的动物模型。方法用旋毛虫感染黑线仓鼠及其白化突变系后,通过检测血细胞生理值、脾脏IL-2蛋白浓度和脾脏IL-6基因表达水平,分析两种动物在感染旋毛虫前后免疫应答水平及免疫调控状态的变化。结果黑线仓鼠在感染旋毛虫后免疫细胞及细胞因子的水平高于白化突变系,反应程度更加剧烈。结论黑线仓鼠是旋毛虫感染的较为适宜的模型动物。

黑线仓鼠及其白化突变系毛囊中黑色素细胞的组织学分析

目的黑线仓鼠白化突变系是一种新的实验动物模型,本研究旨在组织水平上观察黑线仓鼠与白化突变系皮肤组织中黑色素细胞的分布与定位,以揭示黑线仓鼠白化突变系发生的细胞学机制。方法本实验选择黑线仓鼠和白化突变系各6只,取背部皮肤,制备石蜡切片,分别采用多巴染色、多巴-甲苯胺蓝复染,光镜观察、拍照。结果 Dopa染色显示,在黑线仓鼠与白化突变系皮肤组织中均有成熟黑色素细胞的分布,主要存在于毛囊毛乳头中,且黑线仓鼠黑色素阳性区要明显高于白化突变系。结论黑线仓鼠的酪氨酸酶活性要高于白化突变系。

黑线仓鼠白化突变系抑制差减文库的构建及初步分析

目的构建黑线仓鼠白化突变系的抑制差减文库，分离获得黑线仓鼠发生被毛突变的相关基因片段，并进行初步分析。方法以黑线仓鼠作为实验组（tester），以其白化突变系作为驱动组（driver），采用抑制差减杂交技术构建差减文库（SSH）。对阳性克隆进行测序并分析。结果共获得126个有生物学意义的表达序列标签（ESTs），包括21个骨架蛋白，42个转录因子，24个代谢酶基因，25个转运分子及其调节蛋白和4个未知基因。差异基因中没有发现常见的白化疾病相关基因，发现多种与溶酶体的形成及内吞作用相关的基因，推测黑线仓鼠白化突变性状的产生可能与黑色素的运输障碍有关。结论成功构建了黑线仓鼠白化突变的抑制差减文库，获得126个白化突变的相关基因，为进一步寻找白化突变相关基因，揭示其分子机制奠定了基础。

黑线仓鼠白化突变系的生物学特性与应用

黑线仓鼠白化突变系是我们在驯育野生黑线仓鼠时,对发现的6只该鼠白化突变体,通过6年半人工繁育建成的、目前国内外唯一的黑线仓鼠白化品系。培育过程中我们对其遗传、解剖、生理及生长发育等生物学特性进行了观察,并作了医学生物学的试验应用。遗传研究表明,黑线仓鼠的白化性状属单一隐性遗传,是由位于染色体上一个隐性基因控制的,测定试验结果符合孟德尔分离法则。白化型黑线仓鼠染色体G带核型与正常型黑线仓鼠类相同(2n=22)。

黑线仓鼠及其白化突变系肌张力异常蛋白变体X1基因的克隆与序列分析研究

目的将黑线仓鼠及其白化突变系肌张力异常蛋白变体X1基因编码区进行序列比对分析,试揭示黑线仓鼠及其白化突变系肌张力异常蛋白变体X1基因编码区之间是否存在变异。方法根据小鼠与大鼠的同种型肌张力异常蛋白变体X1段基因设计6对引物,采用RT-PCR的方法,从黑线仓鼠及其白化系皮肤中扩增得到cDNA基因,并对其二者进行克隆测序。结果将由RT-PCR方法获得的基因序列进行比对后可知,二者编码区共有17处差异,氨基酸差异共24处,但无关键核酸蛋白出现变异现象。结论黑线仓鼠白化突变系白化性状产生,并不是由肌张力异常蛋白变体X1的这段基因编码区突变造成的,其白化性状产生的机制尚需要进一步的研究。

Frizzled 3、Frizzled 4基因对黑线仓鼠A:CHA白化性状产生影响的初步分析

为了比较Wnt通路重要结合受体Frizzled家族的Frizzled 3、Frizzled 4受体蛋白基因在黑线仓鼠及其白化突变系(A:CHA)皮肤组织的表达差异,分析这两种基因对白化性状产生的影响,试验提取黑线仓鼠和A:CHA的皮肤组织总RNA,利用普通PCR方法筛选引物,通过实时荧光定量PCR技术比较黑线仓鼠和A:CHA皮肤组织Frizzled 3、Frizzled 4基因表达量的差异。结果表明:黑线仓鼠皮肤中的Frizzled 3、Frizzled 4基因mRNA的相对表达量分别是A:CHA组织中的4倍、5倍。Frizzled 3、Frizzled 4基因在A:CHA皮肤组织中的表达量下调。说明Frizzled 3、Frizzled 4基因与A:CHA白化性状的产生存在一定关联。

黑线仓鼠白化突变群的遗传特性和应用

黑线仓鼠白化突变群是我们在驯育野生黑线仓鼠过程中,对发现的6只该鼠白化突变体,通过8年人工繁育建成的目前国内外唯一的黑线仓鼠白化种群。培育期间对动物白化性状的遗传方式和染色体核型进行了观察。试验表明,白化黑线仓鼠特别适用于辐射和化学诱变的细胞遗传学研究,是评价抗辐射药效价及测定新药致突变遗传效应研究的理想的实验动物。

白化黑线仓鼠血液生化正常值测定

白化黑线仓鼠系本中心徐植岚等人驯育黑线仓鼠时建立的该鼠白化突变系,迄今国内外未见有报导。由于黑线仓鼠具有染色体数少(2n=22)颊囊薄和睾丸大等独特的生物学特性,现已广泛应用于遗传学,实验肿瘤,流行病,糖尿病及分子生物学等研究;为医学生物学提供新的动物模型。为探寻白化黑线仓鼠的品系特点,提供医学生物学应用的必要基础资料。

白化黑线仓鼠的繁殖

白化黑线仓鼠(Cricetulus barabensis)是我们驯育黑线仓鼠时发现的该鼠白化突变体,通过遗传选育建立了黑线仓鼠白化突变系,迄今国内外未见报道。为进行该品系的生物学特性研究,提供医学生物学应用的必要基础资料,我们对其繁殖性能作了观察。