去甲基化酶JMJD6影响BRAF突变型黑色素瘤耐药性形成的机制研究

目的探究去甲基化酶JMJD6影响BRAF突变型黑色素瘤耐药性形成的可能机制。方法利用荷瘤小鼠腹腔给药的方式建立针对BRAF抑制剂(达拉非尼)和MEK抑制剂(曲美替尼)具有稳定耐药表型的BRAF突变型黑色素瘤体内模型,使用TCGA、Oncomine、OSskcm等数据库分析、Western blot和免疫组化研究JMJD6在黑色素瘤中的表达情况及预后价值,同时在下调其表达水平后通过TUNEL凋亡试剂盒与体内成瘤实验检测耐药表型在体内外的逆转情况,最后通过生物信息学分析、shRNA干扰、Western blot和免疫荧光实验验证转录因子E2F2是否为JMJD6潜在靶点。结果在依次建立3代耐药体内模型后,成功获得具有稳定耐药表型的BRAF突变型黑色素瘤体内模型A375-R和SK-Mel-28-R,TCGA、Oncomine、OSskcm等数据库均显示JMJD6在黑色素瘤中的表达较正常健康者明显升高且具有更差的预后(P<0.05)。Western blot和免疫组化结果显示,JMJD6在耐药型BRAF突变型黑色素瘤中出现高表达;利用shRNA下调JMJD6表达水平后,A375-R和SK-Mel-28-R在药物压力下凋亡水平和成瘤能力显著降低(P<0.05),呈现体内外耐药表型逆转现象;通过GeneMANIA、GEPIA数据库分析发现JMJD6与E2F2存在表达相关性(P<0.05),同时Western blot和免疫荧光验证下调JMJD6可以抑制E2F2表达以及RNA聚合酶Ⅱ的结合,并在shRNA下调E2F2表达水平的基础上验证其位于JMJD6分子机制下游。结论JMJD6通过调控E2F2表达进而影响BRAF突变型黑色素瘤对BRAF和MEK抑制剂耐药性的形成。

取食不同寄主植物的二个甜菜夜蛾品系对药剂的敏感性

探讨取食不同寄主植物的2种甜菜夜蛾Spodoptera exigua(Hübner)品系对几种常用药剂的敏感性变化情况。试验结果表明,寄主植物对甜菜夜蛾的生长发育和杀虫剂的敏感性有显著影响,取食不同寄主植物以后,甜菜夜蛾2个品系对溴氰菊酯、毒死蜱、溴虫腈、虫酰肼的敏感性均有不同程度的变化,取食不同寄主植物的甜菜夜蛾蛹黑突变品系较甜菜夜蛾正常品系的抗性均要高,2个品系对溴氰菊酯的敏感性变化均较大,最大LD50之比分别达到13.36、12.30倍,2个品系都对虫酰肼的敏感性变化不明显,最大LD50之比分别达到2.54、2.23倍。