人X染色体含有一个黑色素瘤抗原基因亚家族

肿瘤相关基因的研究是肿瘤基因形成学说的核心内容。肿瘤相关基因家族的研究则是其中的重点和难点．从４～６月孕龄人胎肝。ＤＮＡ文库中克隆到１个黑色素瘤抗原基因（ＭＡＧＥ－Ｄ１）。随后发现了一个黑色素瘤抗原基因亚家族，称为ＭＡＧＥ－Ｄ亚家族，其成员包括３个直系同源体（人ＭＡＧＥ－Ｄ１、大鼠ＳＮＥＲＧ－１和小鼠ＤＬＸＩＮ－１）和２个旁系同源体（人ＭＡＧＥ－Ｄ和人ＫＩＡＡ１１１４）。该家族的３个人类成员均定位于染色体Ｘｐ１１．２１－ｐ１１．２３，同时具有独特的基因组结构。分子进化树分析表明，该家族与已知ＭＡＧＥ－Ａ、－Ｂ和－Ｃ ３个亚家族之间具有明显的进化上分歧。该亚家族的发现为研究肿瘤相关基因新功能提供了重要线索。

黑色素瘤抗原基因的检测及其在胃癌中的表达

目的:检测并探讨分析黑色素瘤抗原基因(MAGE)在胃癌中的表达及其分布特点。方法:采用RT-PCR技术检测70 例胃癌组织及相应的癌旁正常组织中MAGE表达。结果:70例胃癌组织中MAGE-1、MAGE-3的阳性率分别为28.6%、35.7%,癌旁正常组织均不表达。基因表达与患者的年龄、性别、Hp感染、肿瘤组织学分型无关(P>0.05)。结论:MAGE基因在胃癌组织中特异性表达,可以此作为靶抗原进行肿瘤免疫治疗。

黑色素瘤相关抗原(MAGE)基因在肺癌中的表达及意义

肺癌是常见的恶性肿瘤之一,因目前诊断易忽略微转移灶,造成肺癌预后极差,黑色素瘤相关抗原(melanoma associate dantigens,MAGE)基因作为一种特异性肿瘤抗原基因,在肺癌的发生、发展和治疗中起着重要作用,其研究为肺癌的诊断和治疗提供了新的方向。

黑色素瘤抗原基因-3在直肠癌的表达及意义

目的检测黑色素瘤抗原基因3(MAGE3)在直肠癌中的表达,探索其与直肠癌临床病理的关系及其在直肠癌免疫治疗中的应用价值。方法采用RT PCR法,对33例直肠癌患者的癌组织及其相应距肿瘤边缘(5±1)cm的癌旁组织和手术切缘(乙状结肠端)以及3例直肠息肉标本(无瘤)的MAGE3的表达情况进行检测,并对RT PCR扩增产物中的目的基因片段进行DNA测序验证。结果33例直肠癌组织中,MAGE3基因的表达阳性率为42.42%(14/33),在癌旁组织和手术切缘组织中,MAGE3基因的表达阳性率分别为18.18%(6/33)和15.15%(5/33),3例直肠息肉标本未见MAGE3表达。肿瘤组织MAGE3基因表达阳性率均显著高于癌旁组织和手术切缘组织(P<0.05);而与患者年龄、性别、肿瘤组织学类型、Dukes分期及淋巴结转移无关(P>0.05)。结论基于MAGE3基因在直肠癌中的高表达率,MAGE3表达的蛋白可以作为一种有前途的靶点用于免疫治疗,同时有望成为一种筛查和随访指标。

黑色素瘤相关抗原家族新基因restin的组织表达谱

Restin是从维甲酸诱导肿瘤分化细胞中克隆的一种黑色素瘤相关抗原家族(MAGE)的新成员.对该基因在不同组织、不同细胞系的表达水平进行研究,将有利于揭示其生物学功能.使用α3-2P-dCTP标记人restin编码区基因作为探针,针对12种不同成人组织mRNA的Multiple TissueNorthern(MTN)膜和含76种成人、胎儿及常用细胞系mRNA的Multiple Tissue Expression(MTE)Array膜进行杂交分析,同时利用地高辛标记探针对11种常见肿瘤组织进行原位杂交检测.结果显示,MTN膜杂交中,12种组织显示均一杂交条带,约1.8 kb,提示该基因可能不存在剪接变异体;MTE膜杂交中,正常组织中均有不同程度的表达,但在肿瘤细胞系中均低表达或者不表达;原位杂交的结果显示,在8种恶性肿瘤组织中均不表达,而在3种良性肿瘤组织中呈现较低的表达.结果提示,该基因在正常组织中的表达明显高于肿瘤组织和肿瘤细胞系,完全不同于其它MAGE-A、B、C的组织表达方式.结合该基因在维甲酸诱导分化的肿瘤细胞中高表达,推测restin可能与正常细胞的分化、增殖有关.

人黑色素瘤相关抗原基因-12基因疫苗对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长及体内抗体水平的影响

目的:研究人黑色素瘤相关抗原基因-12(MAGE-12)基因疫苗pEGFP-C3-MAGE-12对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长及体内抗体水平的影响。方法:小鼠80只,随机分为4组,每组20只。疫苗组、空质粒组和生理盐水(NS)组接种Lewis肺癌瘤组织制备Lewis肺癌小鼠模型。接种癌组织前14d、7d、0d,疫苗组按每次每只0.2mL(75ng/L)于右下肢内侧肌肉群内注射pEGFP-C3-MAGE-12;空质粒组和NS组每只每次注入pEGFP-C3空质粒或NS;空白对照组小鼠不做任何处理。每3d观察并记录1次肿瘤大小。接种瘤组织后14d每组取10只小鼠,ELISA法检测血清MAGE-12-Ab,余小鼠(每组10只)自然死亡,记录生存时间。结果:3组7d成瘤率均为100%。空质粒组、NS组及疫苗组生存期分别为(27.0±0.3)d,(27.2±0.3)d和(28.9±0.6)d;肿瘤体积分别为(179.775±9.085)mm3,(173.172±9.085)mm3和(144.923±9.528)mm3;疫苗组血清MAGE-12-Ab水平为(711.16±174.78),其他3组未检测到MAGE-12-Ab;与空质粒组、NS组比较,疫苗组生存期短(P<0.05),肿瘤体积小(P<0.05),体内抗体水平高(P<0.05)。结论:MAGE-12基因疫苗具有免疫治疗作用。

结直肠癌中黑色素瘤抗原基因mRNA的表达及意义

目的检测结直肠癌组织中黑色素瘤抗原基因MAGE-1、3和4的表达,探讨其在结直肠癌免疫治疗及作为免疫分子标志物的可行性。方法采用RT-PCR方法,检测65例结直肠癌组织和相应正常粘膜组织中MAGE-1、3和4的mRNA表达,并对PCR扩增产物进行DNA测序验证。结果65例结直肠癌组织标本中,53.8%(35/65)的患者至少表达一种MAGE基因。MAGE-1、3、4mRNA表达率分别是18.5%(12/65)、33.9%(22/65)和20%(13/65),表达任意两种或以上的MAGE基因的标本为27.7%(18/65),而相应正常粘膜组织均未检测到上述基因的表达。DNA测序结果表明RT-PCR产物确为目的基因片段。MAGE基因表达与患者的年龄(除外MAGE-1,P=0.011)、性别、CEA、肿瘤大小和位置、组织分化程度、淋巴结转移、肿瘤浸润深度及TNM分期无关(P>0.05)。结论结直肠癌中MAGE-3可作为肿瘤疫苗的备选基因和免疫学检测的分子标志物,具有作为肿瘤免疫治疗特异性靶位的潜在价值,而MAGE-1,4因表达率低限制了其应用价值。

黑色素瘤抗原基因在乳腺癌中的表达及临床意义

目的:研究乳腺癌组织中黑色素瘤抗原基因(MAGE)的表达情况,并探讨其临床意义。方法:采用荧光定量逆转录多聚酶链反应(fqRT-PCR)检测55例乳腺癌组织中MAGE基因的表达情况。结果:55例乳腺癌组织中有17例(30.9%)表达MAGE-A1或/和MAGE-A3,9例(16.4%)MAGE-A1阳性,13例(23.6%)MAGE-A3阳性。结论:MAGE基因在乳腺癌中较高表达,推测MAGE抗原可以作为乳腺癌治疗的靶点。

胃癌组织中黑色素瘤抗原基因-1,3基因的表达及其意义

目的 了解胃癌组织中黑色素瘤抗原基因 (MAGE) 1、3基因的表达 ,并探讨其作为免疫治疗的靶抗原在胃癌中的应用价值。方法 采用RT PCR法检测 36例胃癌患者的肿瘤组织和相应的癌旁“正常”黏膜中MAGE 1、3基因的表达情况 ,并以 37例慢性胃炎患者的胃镜活检组织和 4株胃癌细胞株作为对照。结果 36例胃癌组织中 ,MAGE 1表达阳性率为 72 .2 2 % (2 6 / 36例 ) ,MAGE 3表达阳性率为 6 9.4 4 % (2 5 / 36例 ) ,MAGE 1、3表达双阳性率为 5 2 .78% (19/ 36例 ) ,MAGE 1、3任一基因表达阳性者 32例 ,阳性率为 88.89% (32 / 36例 )。癌旁“正常”黏膜中MAGE 1、3基因表达阳性率分别为 4 7.2 2 % (17/ 36例 )和 4 4 .4 4 % (16 / 36例 ) ,MAGE 1、3表达双阳性率为 30 .5 6 % (11/ 36例 )。 37例慢性胃炎组织中 ,MAGE 1、3表达阳性率分别为 2 9.73% (11/ 37例 )和2 7.0 3% (10 / 37例 ) ,MAGE 1、3表达双阳性率为 8.11% (3/ 37例 )。胃癌组织MAGE 1、3基因表达阳性率均高于癌旁“正常”黏膜组织和慢性胃炎患者。 4株胃癌细胞株MAGE 1、3基因表达均为阳性。结论 基于MAGE 1、3基因在胃癌中的高表达率 ,可利用其作为靶分子进行免疫治疗 。

黑色素瘤抗原基因-1,3基因在肺癌组织中的表达及其意义

目的了解肺癌组织中和黑色素瘤抗原基因(MAGE)1,3基因的表达,并探讨其作为免疫治疗的靶抗原在肺癌中的应用价值。方法采用RTPCR法检测72例肺癌患者的肿瘤组织和相应的癌旁“正常”组织中MAGE1,3基因的表达情况。结果72例肺癌组织中,MAGE1表达阳性率为72%(52/72例)MAGE3表达阳性率为69%(50/72例)MAGE1,3表达双阳性率为52%(38/72例),MAGE1,3任一基因表达阳性者64例,阳性率为89%(64/72例)。癌旁"正常"组织中MAGE1,3基因表达阳性率分别为47%(34/72例)和44%(32/72例),MAGE1,3表达双阳性率为31%(22/72例)。肺癌组织MAGE1,3基因表达阳性率均高于癌旁“正常”组织,5株肺细胞株MAGE1,3基因表达均为阳性。结论基于MAGE1,3基因在肺癌中的高表达率,可利用其作为靶分子进行免疫治疗,同时也可作为一种有临床价值的随访指标。

黑色素瘤抗原基因在结直肠癌中的表达及意义

目的探讨黑色素瘤抗原基因(MAGE)-1、MAGE-3在结直肠癌组织中的表达及意义。方法采用RT-PCR方法检测MAGE-1和MAGE-3 mRNA在65例结直肠癌组织和相应正常黏膜组织中的表达,并对PCR扩增产物中的基因片段进行DNA测序验证。结果结直肠癌组织标本中,MAGE-1和MAGE-3表达率分别为18.5% (12/65)、33.9%(22/65),MAGE-1和MAGE-3表达均为阳性者占12.3%(8/65);相应正常黏膜组织均未检测到上述目的基因表达,DNA测序结果表明RT-PCR产物确为目的基因片段;除MAGE-1基因表达与患者年龄有相关性外(P=0.007),两基因表达与其他临床病理特征均元相关性(P>0.05)。结论MAGE-1、MAGE-3可作为结直肠癌疫苗的备选基因和免疫学检测的分子标志物,并作为肿瘤免疫治疗的特异性靶位基因。

人黑色素瘤特异性抗原基因的克隆及其在原核系统中的表达

目的:克隆及表达特异性抗原(PRAME)基因的cDNA片段。方法:从人急性髓细胞白血病细胞系HL60提取总RNA,用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)从中扩增出PRAME基因cDNA片段。将PRAME基因cDNA片段插入载体pGEM T easy中,经全自动序列分析仪测序正确后,再克隆至表达载体pGEX4T2中,构建高效表达克隆,并转化大肠杆菌进行表达。结果:1mmol/L异丙基βD硫代半乳糖苷(IPTG)诱导5h,PRAME蛋白表达即达高峰。结论:PRAME基因在极少数正常组织中低表达,而在白血病患者高表达,并编码被自体细胞毒T淋巴细胞识别的抗原,所以该基因有望成为肿瘤免疫治疗的新成员。

黑色素瘤抗原-1基因在胃癌组织中的表达

①目的 检测黑色素瘤抗原 1(MAGE 1)基因在胃癌组织中的表达 ,为应用MAGE 1基因产物对胃癌病人进行特异性抗肿瘤免疫治疗提供理论依据。②方法 用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测 30例胃癌组织及相应癌旁组织中MAGE 1基因的表达 ,并对 1例RT PCR阳性扩增产物进行DNA序列测定。③结果 30例胃癌组织标本中有 14例 (46 .7% )表达MAGE 1基因 ,而相应的癌旁组织均不表达MAGE 1,两组比较差异有显著性 (P =0 .0 0 1) ;DNA序列测定证实 1例RT PCR扩增产物中的目的基因片段为MAGE 1cDNA序列。④结论MAGE 1基因在胃癌组织中有较高表达 ,这使得以该基因编码蛋白作为疫苗用于胃癌的免疫治疗成为可能。

溶剂诱导黑色素瘤抗原基因-2特定表位多肽异构的LC/MS研究

研究乙醇、甲醇两种常用溶剂系统对固相合成的黑色素瘤抗原基因 2 (MAGE 2 )的特定表位多肽 (171 179)异构的影响。分别运用乙醇、甲醇溶剂体系以及极性溶剂二甲基亚砜 (DMSO)作对照预处理固相合成的黑色素瘤抗原特异性MAGE 2表位多肽 (171～ 179) ,然后用反相高效液相色谱 /质谱联用技术 (RP HPLC/MS)对合成的表位多肽的m/z进行Q1正离子监测扫描分析 ,观察其在不同溶剂系统预处理下的异构情况 ,以选择合理的预处理条件。结果发现采用乙醇及甲醇溶样时MAGE 2表位多肽有异构体产生 ,极性溶剂DMSO溶样的表位多肽未有异构现象发生 ,采用 5 0 % (体积分数 )的乙醇及 5 0 % (体积分数 )的甲醇时也未监测到异构体产生 ;同时发现将已发生异构的乙醇及甲醇溶样溶液用三氟乙酸酸化处理后 ,异构多肽可发生较大的逆转。

黑色素瘤抗原基因在胃癌中的表达及其临床意义

目的 探讨黑色素瘤抗原基因(MAGE)在胃癌中的表达及其临床意义。方法 采用RT-PCR技术检测70例胃癌组织中MAGE-1和MAGE-3的表达，研究分析基因表达与临床病理资料之间的相关性，并对其中32例手术病人的基因表达情况与肿瘤分期的关系进行统计研究。结果 70例胃癌组织中MAGE-1、MAGE-3的阳性率分别为28．6％和35．7％。基因表达与病人年龄、性别、Hp感染、肿瘤组织学分型无关(P>0．05)。胃癌Ⅰ～Ⅳ期中，MAGE-1的表达率分别为28．6％、16．7％、30．0％和77．8％(P<0．05)，MAGE-3的表达率分别为0、16．7％、50．0％和77．8％(P<0．01)。结论 MAGE基因在胃癌组织中表达与肿瘤临床分期密切相关。

黑色素肿瘤抗原基因-1、3在直肠癌肝转移组织的表达

目的探索黑色素肿瘤抗原基因-1、-3(MAGE-1、MAGE-3)在直肠癌肝转移组织中的表达与直肠癌肝转移的相关性。方法采用RT-PCR法,对30例直肠癌肝转移患者的癌组织和30例直肠癌非肝转移患者的癌组织的MAGE-1、MAGE-3的表达情况进行检测,并对RT-PCR扩增产物中的目的基因片段进行DNA测序验证。结果 30例直肠癌肝转移患者癌组织中,MAGE-1基因的表达阳性率为46.67%,MAGE-3基因的表达阳性率为56.67%,MAGE-1、MAGE-3都表达的阳性率为36.67%,至少表达其中一种的阳性率为66.67%;30例直肠癌非肝转移患者癌组织中,MAGE-1基因的表达阳性率为26.67%,MAGE-3基因的表达阳性率为40.00%,MAGE-1、MAGE-3都表达的阳性率为23.33%,至少表达其中一种的阳性率为43.33%。直肠癌肝转移患者癌组织中MAGE-1、MAGE-3基因表达阳性率均显著高于直肠癌非肝转移患者癌组织(P<0.05)。结论 MAGE-1,MAGE-3有望作为一种新的指标用于直肠癌的转移和预后监测。

黑色素瘤抗原基因与肿瘤免疫治疗

黑色素瘤抗原基因 (MAGE)表达产物是一种肿瘤特异性抗原 ,只在肿瘤、睾丸和胎盘组织中表达 ,在其他正常组织不表达 ,其发现有助于肿瘤的早期诊断和微小转移灶的检测。细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)通过识别由MAGE基因编码的抗原而杀伤肿瘤细胞。MAGE抗原为基础的免疫治疗在黑色素瘤和某些实体瘤的治疗中取得良好疗效 。

转染针对黑色素瘤抗原编码基因的短发夹RNA真核表达载体对SGC7901细胞增殖及凋亡的影响

目的：观察转染针对黑色素瘤抗原编码基因（NRAGE）的短发夹RNA（shRNA）真核表达载体对SGC7901细胞增殖及凋亡的影响。方法：用特异性shRNA真核表达载体pSuper-EGFP-NRG转染SGC7901胃癌细胞，经G418筛选，应用RT-PCR方法检测转染细胞NRAGE mRNA的表达，应用流式细胞术检测转染细胞增殖与凋亡。结果：体外培养的pSuper-EGFP-NRG转染的SGC7901胃癌细胞中NRAGE基因被沉默，G0～G1期、G2期细胞百分率降低，S期细胞百分率增多（P〈0．05）。结论：NRAGE基因参与了SGC7901细胞周期和细胞凋亡的调控。

黑色素瘤抗原基因-A在头颈部肿瘤中的研究进展

黑色素瘤抗原基因(MAGE)-A是黑色素瘤抗原基因家族中的成员,其表达产物是一种肿瘤相关抗原,其编码的抗原肽仅在肿瘤组织、睾丸及胎盘组织表达,与人白细胞抗原-Ⅰ类分子结合后被细胞毒性T淋巴细胞识别,从而特异性杀伤肿瘤细胞。本文对MAGE-A在头颈部肿瘤中的研究现状作一综述。

黑色素瘤特异性抗原基因与血液恶性肿瘤

黑色素瘤特异性抗原(Preferentiallyexpressedantigenofmelanoma,PRAME),是第一个被分离出的人类黑色素瘤抗原,也表达于某些血液恶性肿瘤,包括急性髓性白血病(Acutemyeloidleukemia,AML)、多发性骨髓瘤等。近来的研究证实PRAME基因是对白血病微小残留病(Minimalresidualdisease,MDR)监测的一个有效标志,并且PRAME作为特异性靶抗原用于血液恶性肿瘤免疫治疗是目前研究的热点。现就黑色素瘤特异性抗原和血液恶性肿瘤之间的关系以及它在免疫治疗中的作用做一综述。