内皮素3、黑色素瘤优先表达抗原表达水平与子宫内膜癌临床特征及预后的关系

目的探究内皮素3(EDN3)、黑色素瘤优先表达抗原(PRAME)表达水平与子宫内膜癌临床特征及预后的关系。方法选取郑州大学第二附属医院2018年9月至2020年9月收治的80例子宫内膜癌患者为研究对象,在术中收集癌组织和癌旁组织;采用定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和免疫组化法检测EDN3、PRAME表达;EDN3、PRAME与子宫内膜癌患者预后的关系采用Kaplan-Meier生存曲线分析;子宫内膜癌患者预后的影响因素采用COX回归分析。绘制受试者操作特征曲线分析EDN3、PRAME对子宫内膜癌预后不良的预测价值。结果子宫内膜癌组织EDN3信使核糖核酸(mRNA)表达水平和阳性表达率显著低于癌旁组织(P<0.05),PRAME mRNA表达水平和阳性表达率显著高于癌旁组织(P<0.05)。子宫内膜癌组织中EDN3、PRAME表达与国际妇产科联盟(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)分期、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)。EDN3阳性患者生存率高于阴性患者(P<0.05);PRAME阳性患者生存率低于阴性患者(P<0.05)。预后不良组患者EDN3 mRNA表达水平显著低于预后良好组,PRAME mRNA表达水平显著高于预后良好组(P<0.05)。根据受试者操作特征曲线得知,EDN3和PRAME二者联合预测子宫内膜癌预后不良优于各自单独预测(Z_(联合vsEDN3)=2.667、Z_(联合vsPRAME)=2.682,P<0.05)。多因素COX回归分析结果显示,PRAME、FIGO分期、分化程度、淋巴结转移是影响子宫内膜癌患者预后的危险因素(P<0.05),EDN3是保护因素(P<0.05)。结论子宫内膜癌组织中EDN3表达显著降低,PRAME表达显著升高,二者与临床特征及预后密切相关。

黑色素瘤优先表达抗原在骨肉瘤组织中的表达及其临床意义

目的了解黑色素瘤优先表达抗原(PRAME)在骨肉瘤组织中的表达状况及其表达变化与疾病预后的关系。方法应用免疫组化技术检测95例骨肉瘤患者治疗前肿瘤穿刺活检标本中PRAME蛋白的表达水平,并分析骨肉瘤组织标本中PRAME表达变化与患者临床病理指标及疾病进展、预后关系。结果 95例骨肉瘤患者治疗前穿刺活检组织标本中,PRAME蛋白阴性26例,弱阳性37例,强阳性32例。经分析发现,PRAME蛋白强阳性患者较PRAME蛋白阴性或弱阳性患者预后差(P<0.05),且发生肺转移的风险增加(P<0.05)。结论多数骨肉瘤患者标本组织中出现PRAME基因及蛋白异常表达,而且PRAME基因和蛋白在骨肉瘤组织中表达变化与疾病进展、预后有关。

黑色素瘤优先表达抗原免疫组织化学染色在子宫内膜癌及宫颈腺癌鉴别诊断中的应用

目的探讨黑色素瘤优先表达抗原(PRAME)免疫组织化学染色在子宫内膜癌及宫颈腺癌鉴别诊断中的应用价值。方法收集南京大学医学院附属鼓楼医院病理科2018年5月至2023年11月全子宫切除标本中确诊的子宫内膜癌病例87例和宫颈腺癌病例63例,分别进行PRAME免疫组织化学染色,比较其在子宫内膜癌和宫颈腺癌中的表达差异。结果子宫内膜癌87例,年龄35~71岁(平均59岁,中位59岁);宫颈腺癌63例,年龄28~80岁(平均49岁,中位47岁)。78例(78/87,89.7%)子宫内膜癌和2例(2/63,3.2%)宫颈腺癌表现为PRAME阳性表达,且2例宫颈腺癌均为透明细胞癌。PRAME在鉴别子宫内膜癌及宫颈腺癌的灵敏度和特异度分别为89.7%和96.8%,在鉴别子宫内膜和宫颈的非透明细胞癌的灵敏度和特异度高达91%和100%。结论PRAME免疫组织化学染色在子宫内膜癌及宫颈腺癌中表达差异具有统计学意义,可作为鉴别原发宫颈腺癌和原发子宫内膜癌(尤其是非透明细胞癌)的辅助诊断标志物。

黑色素瘤优先表达抗原免疫组织化学染色在良恶性皮肤黑色素细胞肿瘤鉴别中的应用

目的探讨黑色素瘤优先表达抗原(PRAME)免疫组织化学染色在良恶性皮肤黑色素细胞肿瘤鉴别中的应用价值。方法收集北京大学第三医院病理科2018年10月至2020年12月间常规及会诊确诊的黑色素瘤病例59例(皮肤原发性黑色素瘤50例,转移性黑色素瘤9例),黑色素细胞痣48例(普通型痣40例,非典型性痣8例),进行PRAME免疫组织化学染色,比较黑色素瘤和黑色素细胞痣中PRAME免疫组织化学表达的差异。结果皮肤原发性黑色素瘤患者50例,男性23例,女性27例;年龄33~87岁(平均年龄62.4岁,中位年龄64.5岁)。转移性黑色素瘤9例,男性7例,女性2例;年龄40~82岁(平均年龄64岁,中位年龄65岁)。26例(26/50,52.0%)皮肤原发性黑色素瘤和4例(4/9)转移性黑色素瘤均表现为PRAME弥漫阳性;40例(40/40,100%)普通型痣和8例(8/8)非典型性痣均表现为PRAME阴性。黑色素瘤组中PRAME弥漫阳性病例数所占比例显著高于黑色素细胞痣组(P<0.05)。本组病例中,PRAME鉴别良恶性皮肤原发性黑色素细胞肿瘤的灵敏度和特异度分别为52.0%和100%。结论PRAME免疫组织化学染色在黑色素瘤和黑色素细胞痣中表达的差异,可作为良恶性皮肤黑色素细胞肿瘤鉴别的辅助诊断手段。

WT1、PRAME和ERG基因在儿童急性白血病中的表达

目的研究肾母细胞瘤基因(WT1)、黑色素瘤优先表达抗原(PRAME)和ETS相关基因(ERG)在儿童急性白血病(AL)中的表达特点,并分析其在白血病微小残留病灶(MRD)监测中的意义。方法收集92份AL标本(84例患儿),其中初发标本28份,包括急性淋巴细胞白血病(ALL)标本18份,急性髓系白血病(AML)标本10份;AL完全缓解标本63份,包括ALL标本45份,AML标本18份;AL复发标本1份。采用Real-time PCR法检测AL患者骨髓中WT1、PRAME和ERG mRNA的相对表达量,并以同期住院的10例非恶性血液病患儿为对照。结果 AL初发组患儿的WT1、PRAME和ERG mRNA相对表达量均显著高于缓解组和对照组(P<0.05),但缓解组和对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);AML初发组的PRAME mRNA相对表达量显著高于ALL初发组(P<0.05)。28例初发组WT1、PRAME和ERG mRNA的阳性表达率分别为82.4%、92.9%和64.3%,三者间比较差异有统计学意义(P<0.05);三种基因联合检测的阳性率为100%。跟踪15例AL初发患者,诱导化疗缓解后三种基因的相对表达量均显著低于诱导化疗前(P<0.05)。1例复发患者初发时三种基因均呈阳性表达,缓解后转为阴性,复发时又变为阳性。结论与非白血病患者相比,WT1、PRAME和ERG mRNA在AL初发患者的骨髓中高度表达,三种基因联合检测可提高阳性率。AL患者的WT1、PRAME、ERG mRNA表达水平与疾病状态相关,适用于MRD的监测。

急性白血病患者WT1、PRAME、ERG、TRX-2基因表达的检测及其与疾病分型、疗效的关系

目的:研究急性白血病患者肾母细胞瘤基因(WT1)、黑色素瘤优先表达抗原(PRAME)、ETS相关基因(ERG)、硫氧还蛋白-2(TRX-2)基因表达及其与疾病分型、疗效的关系。方法:将本院收治的90例白血病患者纳入研究的白血病组,将同期体检健康者纳入健康组;进一步根据分型将白血病患者分为ALL组和AML组,根据化疗后疗效将白血病患者分为完全缓解组和复发组。采集患者的外周血,检测WT1、PRAME、ERG、TRX-2基因的mRNA含量。结果:白血病组血液中WT1、PRAME、ERG、TRX-2基因的mRNA含量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);AML组血液中WT1、PRAME、ERG、TRX-2基因的mRNA含量高于ALL组,差异有统计学意义(P<0.05);复发组的血液中WT1、PRAME、ERG、TRX-2基因的mRNA含量高于完全缓解组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:WT1、PRAME、ERG、TRX-2基因异常高表达与白细胞的发生有关,也与疾病的分型、化疗的效果密切相关。

甲基化特异性PCR检测PRAME基因启动子低甲基化30例及其临床应用

目的建立实时定量甲基化特异性PCR（RQ-MSP）法检测急性髓系白血病（AML）患者黑色素瘤优先表达的抗原（PRAME）基因低甲基化水平,初步评价其临床意义。方法用亚硫酸氢盐修饰后的基因组DNA为模板,建立EvaGreen染料法RQ-MSP检测PRAME基因低甲基化水平方法 ,检测18例（对照组）和30例（AML组）患者的骨髓单个核细胞中PRAME基因启动子低甲基化水平。结果 RQ-MSP融解曲线呈单一峰,标准品5×10^7-5×10^2copy/μL重复性良好;AML患者PRAME基因低甲基化水平（0.96-4 508.96,中位772.42）明显高于对照组（0-100.00,中位25.29）,差异有统计学意义（P=0.002）。结论建立的PRAME基因低甲基化RQ-MSP法特异性、重复性和灵敏性良好,可用于AML初诊和病情监测。

肿瘤睾丸抗原PRAMEF12在肾细胞癌的表达研究

目的肿瘤睾丸抗原(cancer-testis antigens,CTAs)可限制性表达于睾丸生殖细胞及肿瘤细胞,并具有高免疫原性等特点,可激发肿瘤患者机体免疫应答,被认为是抗原特异性免疫治疗的潜在靶点。本实验分析和鉴定黑色素瘤优先表达抗原家族成员12(preferentially expressed antigen ofmelanoma family member 12,PRAMEF12)是否为一个新的肿瘤睾丸抗原,并探究其在肾癌组织中的表达。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析PRAMEF12 mRNA在成人多器官正常组织及肾癌组织中的表达特点。蛋白印迹法(Western Blot)及免疫组织化学分析PRAMEF12蛋白在肾癌组织中的表达特点。运用统计学方法分析PRAMEF12蛋白的表达量和病例临床特点之间的关系。结果PRAMEF12显著表达于正常成人睾丸组织及肾癌组织中,但在其他正常组织中未见表达。PRAMEF12在70例肾癌组织中阳性表达率为60%(42/70),并与患者的年龄、性别及病理分期之间无显著统计学意义(P=0.758,P=0.837,P=0.457)。结论 PRAMEF12是一个新的肿瘤睾丸抗原,异常表达于部分肾癌患者,可能促进肾癌的发生与发展。

急性髓系白血病PRAME基因转录本的定量研究

目的探讨黑色素瘤优先表达抗原（preferentially expressed antigen of melanoma，PRAME）基因转录本在急性髓系白血病（acute myeloid leukemia，AML）患者中的表达和临床意义。方法建立荧光染料EvaGreen实时定量聚合酶链反应（real—time quantitative PCR，RQ～PCR）对56例初诊AMI，患者和20例对照的骨髓单个核细胞标本中PRAME转录本进行检测，分析其临床相关性。结果PRAME转录本含量在对照组和AMI，患者中分别为0～1．46％（中位0．18％）和0～21618．09％（中位9．79％）（P〈0．01）；FAB亚型中M1、M2、M3和M4患者中PRAME转录本含量较对照组明显增高，而M5患者与对照组差异无统计学意义。PRAME转录本含量与染色体预后分组显著负相关（r=-0．438，P=0．001），低危组患者中PRAME转录本含量显著高于中危组和高危组患者。AML—M2患者中t（8；21）易位阳性者PRAME转录本含量（135．06％～21618．09％，中位2201．88％）明显高于无t（8；21）易位者（0．14％～1696．30％，中位17．97％）（P=0．002）。对1例AML患者不同阶段的标本检测发现诱导缓解后PRAME转录本明显下降，复发时又明显升高。结论PRAME转录本在AML患者中高表达，是患者预后良好的一个标记，可用于AML患者的随访监测。