重组腺相关病毒介导黑色素瘤分化相关基因7对人肝癌细胞体内外抑制效应的研究

目的观察PEG启动子调控腺相关病毒介导的黑色素瘤分化相关基因7（MDA-7）在体内外抑制肝癌细胞的生物学活性，探讨重组腺相关病毒介导MDA-7基因用于肝癌基因治疗的应用前景。方法构建重组腺相关病毒rAAV-PEG-MDA-7表达系统，体外感染人肝癌细胞株HepG2细胞。Western印迹检测转染细胞内MDA-7蛋白；MTT法检测细胞增殖抑制率；流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡变化。构建肝癌细胞HepG2裸鼠皮下移植瘤模型，尾静脉注射rAAV-PEG-MDA-7，观察其对肝癌生长的抑制作用；ELISA方法检测血浆MDA-7蛋白浓度；TUNEL法分析MDA-7对肿瘤细胞的凋亡诱导情况；免疫组织化学分析MDA-7在肿瘤组织中的表达。结果重组腺相关病毒rAAV-PEG-MDA-7可特异性转染HepG2细胞，MDA-7蛋白在HepG2细胞中高效表达，并呈时间依赖性。重组腺相关病毒rAAV-PEG-MDA-7可抑制HepG2细胞增殖并诱导其凋亡，G0／G1期细胞百分比明显增多，G2／M期的细胞显著减少（P〈0、05）。全身系统性给予rAAV-PEG-MDA-7后，血清中可持续检测到MDA-7蛋白，且注射后2周浓度达高峰（200ng／ml）；肿瘤生长受抑制，抑瘤率为62％（P〈0、05）；免疫组化结果显示MDA-7在肿瘤组织中表达；TUNEL结果显示rAAV-PEG-MDA-7可诱导肿瘤细胞凋亡。结论构建出的重组腺相关病毒rAAV-PEG-MDA-7表达系统具有良好的肿瘤靶向性，通过抑制肝癌细胞增殖和诱导其凋亡发挥抗肝癌作用。

黑色素瘤分化相关基因-7研究进展

黑色素瘤分化相关基因 7(MDA 7)是一分泌型肿瘤细胞抑制因子。许多肿瘤细胞MDA 7mRNA水平明显高于原发和转移的人黑色素瘤细胞。MDA 7通过抑制血管生成、激活GADD等信号传导途径 ,促进肿瘤细胞的生长抑制和凋亡 ,而对正常细胞无明显影响。MDA 7是第一个被报道的具有白介素作用的肿瘤抑制分子。

携带人黑色素瘤分化相关基因-7／白细胞介素-24基因的溶瘤腺病毒SG600-IL24和干扰素联合治疗裸鼠肝癌

目的利用携带人黑色素瘤分化相关基因（MDA）-7／白细胞介素（IL）-24基因的溶瘤腺病毒SG600-IL24与干扰素（IFN）联合治疗肝癌裸鼠移植瘤。方法构建携带人MDA-7／IL-24基因的溶瘤腺病毒SG600-IL24，单独使用该病毒或IFN以及两者联合治疗裸鼠肝癌模型，观察其抗肿瘤效应。结果成功构建携带人MDA-7／IL-24基因的溶瘤腺病毒SG600-IL24载体，SG600-IL24＋IFN联合治疗组裸鼠平均生存时间为（111．20±2．60）d，与其他3组[对照组为（35．20±1．53）d，IFN组为（67．60±2．10）d，SG600-IL24组为（59．20±1．16）d]比较生存期明显延长（P〈0．01），且有3例生存时间超过120d，达到长期生存；SG600-IL24＋IFN组裸鼠肝癌体积也明显小于SG600-IL24组或IFN组（P〈0．01）。结论溶瘤腺病毒SG600-IL24联合IFN对裸鼠人肝癌移植瘤模型有协同抗肿瘤作用。

黑色素瘤分化相关基因-7逆转上皮-间充质转化抑制肝癌细胞的侵袭转移机制

目的观察黑色素瘤分化相关基因-7／白细胞介素-24（MDA-7／IL-24）基因对肝癌细胞株MHCC97-H侵袭转移及上皮一间充质转化（EMT）特性的影响。方法构建携带MDA-7／IL-24基因的腺病毒载体，转染肝癌细胞株MHCC97-H，噻唑蓝（MTT）、免疫荧光检测转染效率。采用Transwell侵袭实验和迁移实验分别检测未转染细胞（空白对照组）、转染阴性对照组（Ad．vec组）和实验组（转染Ad．MDA-7细胞组）侵袭转移能力。镜下观察转染前后细胞形态的变化，免疫荧光检测转染前后细胞上皮表型蛋白和间质表型蛋白的定位和表达，实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测转染后细胞MDA-7／IL-24基因的表达，Westernblot检测E-钙黏蛋白（E-cad）、N-钙黏蛋白（N-cad）、波形蛋白（Vim）蛋白的表达。结果MDA-7／IL-24可以有效转染肝癌细胞株MHCC97-H，稳定表达MDA-7／IL-24mRNA（空白组：2．042±0．915比Ad．MDA-7组：37．512±2．354，P〈0．05）和蛋白。转染MDA-7／IL-24的肝癌细胞株MHCC97-H较空白对照组和阴性对照组侵袭迁移能力明显受到抑制（实验组迁移率：空白组迁移率=1．00：0．46，实验组侵袭率：空白组侵袭率=1．00：0．61，P〈0．01）。镜下观察肝癌细胞株MHCC97-H转染MDA-7／IL-24后，由成纤维细胞纺锤体样、排列分散，转变为细胞排列紧密如圆形或椭圆形铺路石样。免疫荧光可见肝癌细胞株MHCC97-H转染后细胞膜表达的E-cad荧光由胞质转移至细胞周边浓聚，而Vim的荧光强度较前下降。Westernblot进行蛋白定量分析，转染后MHCC97-H细胞上皮表型标志性蛋白E-cad表达量增高，间质表型标志性蛋白Twist、Vim表达降低，差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论再表达MDA-7／IL-24基因的MHCC97-H细胞可以增加上皮表型蛋白表达，减少间质表型蛋白，改变细胞骨架构型，逆转肝癌细胞EMT过程，使肿瘤细胞侵袭能力减弱。

携带人黑色素瘤分化相关基因-7/白细胞介素-24基因的溶瘤腺病毒SG600-IL24选择性促进肝癌细胞凋亡和增殖阻滞

目的观察携带人黑色素瘤分化相关基因（MDA）-7/白细胞介素（IL）-24的溶瘤腺病毒SG600-IL24对各种不同转移潜能肝癌细胞HepG2、Hep3B、SMMC7721和正常肝细胞L02的作用。方法将携带人MDA-7/IL-24的溶瘤腺病毒SG600-IL24分别感染人肝癌细胞HepG2、Hep3B、SMMC7721和正常肝细胞L02，反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、Western blot检测MDA-7/IL-24基因的表达，噻唑蓝（MTT）观察肝癌细胞的生长抑制，Hoechst 33258和流式细胞仪（FCM）检测细胞的凋亡，FCM检测细胞周期。结果RT-PCR和Western blot显示MDA-7/IL-24在肝癌细胞和正常肝细胞中高效表达，ELISA提示细胞培养上清液中MDA-7/IL-24蛋白也明显增加。MTT和FCM提示MDA-7/IL-24能明显抑制肝癌细胞的生长[生长抑制率分别为（75.0±2.5）%、（85.0±2.0）%、（86.0±3.5）%，HepG2：F=5.860，Hep3B：F=7.210，SMMC7721：F=7.980，均P=0.000]，促进肝癌细胞凋亡[凋亡抑制率分别为（56.5±4.0）%、（34.4±2.0）%、（43.3±2.5）%，HepG2：F=203.400，Hep3B：F=313.200，SMMC7721：F=130.500，均P=0.000]，阻滞肝癌细胞在G2/M期[G2/M期阻滞分别为（35.4±4.2）%、（47.3±6.2）%、（40.5±5.0）%]，而对正常肝细胞没有明显的促进凋亡和增殖阻滞作用。结论溶瘤腺病毒SG600-IL24能选择性杀伤不同转移潜能人肝癌细胞和诱导凋亡，促进肝癌细胞增殖阻滞，而对正常肝细胞无明显促进凋亡和增殖阻滞作用。

腺病毒介导的黑色素瘤分化相关基因-7抑制内质网应激蛋白表达阻滞MHCC-97H血管形成及转移机制的研究

目的 探讨黑色素瘤分化相关基因（MDA）-7抑制内质网应激蛋白表达,以及阻滞MHCC-97H血管形成的机制.方法 以人肝癌细胞株MHCC-97H为实验对象,使用噻唑蓝（MTT）法和流式细胞仪比较Ad.MDA-7及对照组、缺氧组及正氧组的细胞生存率,比较缺氧环境中,MHCC-97H凋亡率的变化.荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测MDA-7、细胞外信号调节激酶（ERK）、E-钙黏蛋白（E-cad）、血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶（MMP）-9 mRNA的变化.Western blot检测MDA-7、蛋白激酶样内质网激酶（PERK）、E-cad、VEGF、MMP-9蛋白表达的变化.结果 MTT表明缺氧条件下,正氧组正常肝细胞LO2生长抑制率分别为（12.60±4.85）％,（7.80±0.61）％,Ad.MDA-7对正常肝细胞LO2无生长抑制作用.肝癌细胞株MHCC-97H生长抑制率缺氧组,正氧组分别为（5.10±0.09）％、（4.80±0.05）％.缺氧环境中,ERK、VEGF和MMP-9空白组及空白对照组mRNA表达量为[（18.042 ±5.915）/（17.512 ±6.354）、（22.654±5.976）/（22.587 ±7.741）、（22.654±2.789）/（22.587±8.551）]高于正氧组[（10.987±2.514）/（12.347±4.385）、（15.321 ±4.262）/（15.634 ±8.521）、（15.321 ±6.384）/（15.634±4.423）].缺氧环境中,E-cad mRNA空白组及空白对照组[（6.427 ±0.512）/（6.042±1.972）]表达低于正氧组[（10.987±2.514）/（12.347 ±4.385）],而Ad.MDA-7干预后,ERK、VEGF和MMP-9 mRNA缺氧组及正氧组表达量降低[（4.117±1.843）/（5.683±0.794）、（5.371 ±0.541）/（4.209 ±0.348）、（5.371 ±0.941）/（4.209±0.265）],E-cad表达量明显增加[（19.573 ±5.971）/（21.309±8.544）].PERK、VEGF和MMP-9蛋白表达与mRNA一致.结论 缺氧环境中,肝癌细胞株MHCC-97H生长抑制率与正氧环境中差异无统计学意义,MDA-7基因明显抑制PERK表达,抑制肝癌细胞血管生成作用.同时,MDA-7基因增强E-cad表达,协同其作用,抑制肿瘤细胞转移.

奥曲肽联合腺相关病毒介导的黑色素瘤分化相关基因7对肝癌的抑制作用

目的观察不同剂量的奥曲肽联合PEG启动子调控的黑色素瘤分化相关基因7表达重组腺相关病毒系统（rAAV－PEG－MDA－7）对非肥胖糖尿病．重症联合免疫缺陷（NOD－SCID）小鼠肝癌移植瘤的抑制作用。方法构建rAAV－PEG－MDA－7表达系统并建立肝癌细胞株HepG2的NOD－SCID小鼠皮下移植瘤模型，以尾静脉注射rAAV－PEG空载体±肿瘤周边皮下注射生理盐水为对照，按照尾静脉注分射不同病毒量的rAAV－PEG－MDA－7及肿瘤周边皮下注射不同剂量的奥曲肽组合为8个实验组。注射药物后21d处死小鼠，比较各组小鼠移植瘤质量。结果单独应用rAAV－PEG－MDA－7或奥曲肽均能抑制小鼠移植瘤的生长。不同剂量的奥曲肽（5μg／kg、30μg／kg）与低剂量MDA－7（1×10＾－11 particles）联用时，可以增加MDA－7的抑制肿瘤作用[（1．14±0．24）g，（0．98±0．11）g比（1．71±0．26）g，均P〈0．05]；不同剂量奥曲肽（5Iμg／kg）与高剂量MDA．7（5×10＾11particles）联用时，亦可增加MDA－7的抑制肿瘤作用[（1．05±0．21）g、（0．90±0．18）g比（1．41±0．20）g，均P〈0．05]。不同剂量MDA－7（1×10＾11 particles、5×10＾11 particles）与低剂量奥曲肽（5pμg／kg）联用时，可以增加奥曲肽的抑制肿瘤作用[（1．14±0．24）g、（1．05±0．21）g比（1．68±0．18）g，均P〈0．05]；不同剂量MDA－7（1×10＾11 particles、5×10＾11 particles）与高剂量奥曲肽（30斗g，l【g）联用时，亦可增加奥曲肽的抑制肿瘤作用[（0．98±0．11）g、（0．90±0．18）g比（1．34±0.12）g，均P〈0．05]。结论MDA－7与奥曲肽联合应用可以增强对小鼠肝癌移植瘤的抑制作用。

MDA-7/IL-24对Burkitt淋巴瘤细胞的诱导分化作用

目的:研究黑色素瘤分化相关基因-7(melanoma differentiation associated gene 7,MDA-7)/IL-24对Burkitt淋巴瘤细胞的促分化作用并探讨其作用机制。方法:构建稳定过表达MDA-7/IL-24的人Burkitt淋巴瘤Raji和Daudi细胞株,MTS法检测稳定转染MDA-7/IL-24对Raji和Daudi细胞活力的影响;Transwell小室实验检测转染MDA-7/IL-24对Raji和Daudi细胞侵袭和迁移能力的影响;流式细胞术检测细胞凋亡水平及免疫表型;Western blotting技术检测转染MDA-7/IL-24对Raji和Daudi细胞表达分化相关蛋白Myb、BLIMP1及BCL-6的影响;建立裸鼠Raji细胞移植瘤模型,检测在体内环境中稳定转染MDA-7/IL-24对Raji细胞生物活性的影响。结果:过表达MDA-7/IL-24的Raji和Daudi细胞其增殖(P<0.05)、侵袭(P<0.01)及迁移(P<0.01)能力均明显下降,但凋亡细胞无明显增加(P>0.05),表达CD45及CD138的水平均明显增加(P<0.01),而表达CD10的水平明显下降(P<0.01)。过表达MDA-7/IL-24的Raji和Daudi细胞表达BLIMP1的水平明显增加(P<0.01),而表达Myb及BCL-6的水平均明显减低(P<0.01)。MDA-7/IL-24过表达组裸鼠模型Raji细胞移植瘤质量明显低于对照组[(1.23±0.21)vs(1.96±0.24)g,P<0.01]。结论:转染MDA-7/IL-24可能通过诱导分化作用抑制Burkitt淋巴瘤细胞的生物活性。

肺癌组织和外周血中p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5和MAGE A1蛋白水平检测及其临床价值探讨

背景与目的:肺癌发病机制具有多样性,但一经确认,往往已错过最佳治疗时机,本文通过探讨肺癌组织和外周血中抑癌基因(p53)、蛋白基因产物(PGP9.5)、转录因子(SOX2)、肿瘤相关基因编码蛋白(GAGE7)、解旋酶(GBU4-5)和黑色素瘤抗原(MAGE A1)蛋白水平的相关性,同时分析其在肺癌诊疗中的应用价值。方法:回顾并分析2018年5月—2020年5月在复旦大学附属肿瘤医院确诊的100例肺癌患者的病历资料,临床TNM分期Ⅰ期25例,Ⅱ期45例,Ⅲa期30例;非小细胞肺癌80例,小细胞肺癌20例;取手术切除的肿瘤组织和癌旁组织,采用免疫组织化学染色法检测上述6种蛋白的水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)法检测其基因表达,采用酶联免疫吸附实验(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)检测外周血中6种蛋白的抗体阳性情况。结果:肿瘤组织中p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5和MAGE A1蛋白的阳性率和基因表达水平均明显高于癌旁组织(P<0.05);将其与肿瘤的临床病理学特征进行相关分析发现,肿瘤组织和外周血中的p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5和MAGE A1蛋白的阳性率和基因表达水平与肿瘤TNM分期和分化级别有关(P<0.05),而与患者性别、年龄、肿瘤直径、病理学类型无关(P>0.05)。肿瘤组织中6种蛋白的表达水平与外周血清表达具有较好的一致性(P>0.05)。结论:肺癌肿瘤组织和外周血中p53、PGP9.5、SOX2、GAGE7、GBU4-5和MAGE A1蛋白表达阳性与肿瘤TNM分期及分化级别密切相关。

MDA-7/IL-24真核表达载体的构建和重组腺病毒的制备及其对肝癌细胞生长抑制作用的研究

目的:构建含有MDA-7基因的的真核表达载体并制备重组腺病毒,转染/感染肝癌细胞后,观察其对细胞增殖的影响。方法:构建MDA-7的真核表达载体,将表达质粒转染肝癌细胞,利用平板克隆形成实验观察MDA-7分子对肿瘤细胞系克隆形成能力的影响。利用Adeasy-1腺病毒重组系统构建、包装并扩增含有MDA-7基因的重组腺病毒。利用MTT实验检测Ad-MDA-7对肿瘤细胞增殖的影响。结果:成功构建了MDA-7真核表达载体,利用平板克隆形成实验证实其可抑制肝癌细胞的克隆形成能力。成功地构建并包装了含有MDA-7基因的重组腺病毒,利用MTT实验证明其可抑制肝癌细胞的增殖。结论:MDA-7对肝癌细胞的增殖具有显著的抑制作用,为进一步研究其在肝癌细胞中的功能提供了重要的实验依据。

MDA-7/IL-24基因联合阿霉素对肝癌模型裸鼠金属基质蛋白酶及血管内皮生长因子的影响

目的探讨MDA-7/IL-24基因联合阿霉素对肝癌模型裸鼠金属基质蛋白酶及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响。方法建立肝癌移植瘤模型裸鼠后分为模型组(A组)、阿霉素组(B组)、MDA-7/IL-24组(C组)、联合干预组(D组),并给予不同条件干预。干预后2周、6周时,测定肿瘤体积和重量、基质金属蛋白酶(MMP)、VEGF表达量。结果干预2周、6周时,B、C、D组小鼠肿瘤体积和重量均明显低于A组(P<0.05),D组小鼠肿瘤的体积和重量显著低于B组和C组(P<0.05),B、C、D组小鼠肿瘤组织中MMP3、MMP mRNA含量明显低于A组(P<0.05),D组小鼠肿瘤组织中MMP3、MMP9mRNA含量显著低于B组和C组(P<0.05),B、C、D组小鼠肿瘤组织中VEGF-C、VEGFR2 mRNA含量明显低于A组(P<0.05),D组小鼠肿瘤组织中VEGF-C、VEGFR2 mRNA含量显著低于B组和C组(P<0.05)。结论 MDA-7/IL-24基因联合阿霉素能够有效地抑制肝癌模型裸鼠的肿瘤生长,减少MMP和VEGF的表达量。

腺病毒介导mda-7基因联合阿霉素治疗裸鼠移植肝癌的作用

目的将重组腺病毒介导的黑色素瘤分化相关基因-7(melanomadifferentiation-associatedgene-7,mda-7)/IL-24与阿霉素(adriamycin,ADM)联合治疗裸鼠肝癌,探索基因治疗和化疗相结合治疗肿瘤的新方法。方法构建携带人mda-7/IL-24的重组腺病毒载体(Ad.mda-7),单独使用该载体或ADM以及两者联合使用对实验性肝癌裸鼠进行治疗(分别为Ad.mda-7组、ADM组及Ad.mda-7+ADM组,并设立对照组),观察抗肿瘤效果。用免疫组化方法检测各组肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)与转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达情况。结果成功构建重组腺病毒并实现体内表达,Ad.mda-7+ADM组裸鼠平均生存时间为(83.8±4.82)d,较其他3组〔对照组为(43.4±1.67)d,ADM组为(64.2±4.14)d,Ad.mda-7组为(61.4±1.67)d〕生存时间明显延长(P<0.01)。Ad.mda-7+ADM组裸鼠平均肿瘤大小与单独使用ADM或Ad.mda-7相比明显缩小(P<0.01)。Ad.mda-7组肿瘤组织VEGF和TGF-β1的表达分别为(56.2±7.7)%和(35.2±4.5)%,抑制作用明显优于ADM组〔(70.7±6.5)%,P<0.05;(52.6±7.4)%,P<0.01〕;Ad.mda-7+ADM组肿瘤组织VEGF的表达为(37.3±5.0)%,较其余各组显著下降(P<0.01);Ad.mda-7+ADM组肿瘤组织TGF-β1的表达为(31.2±3.1)%,仍明显低于对照组和ADM组(P<0.01),而与Ad.mda-7组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论重组腺病毒介导mda-7/IL-24联合ADM对裸鼠人肝癌转移模型有明显的抗肿瘤作用及协同效应,其机理可能与抗肿瘤侵袭、转移有关。

癌特异性的细胞凋亡诱导因子MDA-7/IL-24的研究进展

黑色素瘤分化相关基因7（melanoma differ-entiation-associatedgene-7，MDA-7）最初是由Jiang等^[2]利用消减杂交法从β干扰素（IFN-β）和瑞香素（MEZ）诱导的终末分化人类黑色素瘤细胞中克隆到的基因。后来根据其结构序列的同源性，染色体的定位及类细胞因子的特点，被国际人类基因组织（HUGO）重新命名为IL-24。MDA-7／IL-4位于人类染色体的lq32-33，

Mage-H1在PC12细胞分化前后的表达变化及其对细胞周期的影响

目的:探讨黑色素瘤相关抗原H1(Mage-H1)在细胞增殖和分化调控中的作用。方法:神经生长因子(nerve growth factor,NGF)诱导PC12细胞分化后用相差显微镜对其形态学进行观察。通过RT-PCR、Western blotting检测分化前后Mage-H1表达变化情况。流式细胞技术分析PC12细胞瞬时表达Mage-H1对细胞周期的影响。结果:经NGF诱导8d后,92%以上PC12细胞属于已分化细胞。分化后的PC12细胞与对照组相比,Mage-H1表达上调。PC12细胞瞬时表达Mage-H1后被明显阻滞在G0-G1期。结论:Mage-H1可抑制PC12细胞增殖并促进细胞的分化。

抗MDA5抗体阳性皮肌炎并发快速进展性间质性肺病的影响因素及其预测效能分析

目的探讨抗黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)抗体阳性皮肌炎(DM)并发快速进展性间质性肺病(RP-ILD)的影响因素,并分析其预测价值。方法收集初诊抗MDA5抗体阳性的DM患者78例,其中并发RP-ILD 35例,无RP-ILD 43例。比较两组临床资料,采用单因素和多因素Logistic回归分析MDA5^(+)-DM并发RP-ILD的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析各影响因素对MDA5^(+)-DM并发RP-ILD的预测效能。结果与无RP-ILD患者比较,并发RP-ILD患者皮肤溃疡发生率、D-二聚体、C反应蛋白、红细胞沉降率、癌胚抗原(CEA)、抗Ro52抗体阳性率升高,淋巴细胞计数(LYM)降低(P均<0.05)。单因素Logistic回归分析结果显示,皮肤溃疡、LYM、D-二聚体、CEA、抗Ro52抗体是RP-ILD的影响因素(P<0.05或<0.01);多因素Logistic回归分析结果显示,D-二聚体、CEA、抗Ro52抗体是MDA5^(+)-DM患者并发RP-ILD的独立影响因素(P均<0.05)。ROC曲线分析显示,D-二聚体、CEA、抗Ro52抗体预测DM-RPILD的曲线下面积分别为0.714、0.753、0.654,三者联合预测RP-ILD的曲线下面积为0.864,联合指标的预测效能高于单独指标。结论高D-二聚体水平、高CEA水平、抗Ro52抗体阳性是MDA5^(+)-DM患者发生RP-ILD的独立危险因素;三者联合对MDA5^(+)-DM并发RP-ILD具有一定的预测价值。

全反式维甲酸对乳腺癌MCF-7细胞MAGE家族分子表达的影响

研究全反式维甲酸(ATRA)在诱导乳腺癌MCF-7细胞分化和凋亡过程中黑色素瘤相关抗原基因(MelanomaAssociatedAntigen,MAGE)家族分子的表达水平的变化,从而为其功能研究提供线索。六孔培养板培养乳腺癌MCF-7细胞至对数生长期,给以终浓度为10-6mol/L的ATRA的刺激,于不同时间点(0h,12h,18h,24h,36h,48h)收集细胞,RT-PCR检测MAGE家族中(MAGE-A1、MAGE-C1、MAGE-D1、Necdin)分子的表达水平。结果ATRA诱导不同时间的MCF-7细胞MAGE家族分子表达水平呈现MAGE酸性亚家族(Ⅰ型抗原)表达逐步下调,而MAGE碱性亚家族(Ⅱ型抗原)表达逐步上升的趋势。说明MAGE家族酸性和碱性分子均参与ATRA诱导MCF-7细胞分化、凋亡,而且可能发挥作用是相反的。

抑癌基因mda-7/IL-24研究现状及进展

在肿瘤治疗研究领域中,一个有效策略是发现并利用肿瘤细胞特异基因改变和（或）信号转导通路改变,从而能选择性地杀伤破坏肿瘤细胞,而对正常细胞和组织无毒副作用[1]。而一个理想的基因治疗要求该基因只在促进肿瘤细胞生长抑制和凋亡时,

癌胚抗原和抗MDA5抗体阳性皮肌炎相关间质性肺疾病预后相关性研究

目的观察血清癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)与抗黑色素瘤分化相关基因5(melanoma differentiation associated gene 5,MDA5)抗体阳性皮肌炎相关间质性肺疾病(interstitial lung disease,ILD)患者预后相关性关系。方法回顾性收集四川大学华西医院2017年2月—2019年9月确诊为抗MDA5抗体阳性皮肌炎214例患者临床资料,实验室检查,影像学检查并进行随访。根据CEA水平将患者分为CEA升高组(CEA≥4.63 ng/mL)和CEA正常组(CEA<4.63 ng/mL)。采用R4.1.2软件对所有数据进行统计分析,Kaplan-Meier法绘制生存曲线。对合并ILD患者采用Cox比例风险模型进行生存分析,探索抗MDA5抗体阳性皮肌炎合并ILD患者的死亡影响因素。结果符合纳入排除标准的合并ILD患者共180例,57例为快速进展肺间质纤维化(rapidly progressive pulmonary interstitial fibrosis,RPILD),123例为非RPILD;其中女121例,男59例,平均年龄(50.2±10.7)岁;平均随访23.5个月,死亡52例。单因素分析提示CEA≥4.63 ng/mL、吸烟、合并RPILD、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)≥321 IU/L、白蛋白<30 g/L及伴有呼吸困难是抗MDA5皮肌炎合并ILD患者死亡危险因素。多因素Cox回归分析提示CEA≥4.63 ng/mL[风险比(hazard ratio,HR)=3.01,95%可信区间(confidence interval,CI)1.23~7.32,P=0.015]、合并RPILD(HR=3.87,95%CI 2.09~7.19,P<0.001)、吸烟(HR=2.37,95%CI 1.25~4.47,P=0.008)、LDH≥321 IU/L(HR=2.47,95%CI 1.23~4.96,P=0.011)、白蛋白<30 g/L(HR=2.57,95%CI 1.38~4.78,P=0.003)是影响患者远期预后的独立因素。结论CEA升高可作为抗MDA5抗体阳性皮肌炎合并ILD患者不良预后的临床指标。合并RPILD、吸烟、LDH≥321 IU/L、白蛋白<30 g/L是抗MDA5抗体阳性皮肌炎相关间质性肺炎患者死亡的独立危险因素。

成人抗MDA5抗体阳性皮肌炎临床特征

目的分析成人抗黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)抗体阳性皮肌炎(DM)的临床特征,并与抗MDA5抗体阴性DM进行比较。方法收集2021年1月1日至12月31日郑州大学第一附属医院101例成人DM患者资料,根据抗MDA5抗体阳性与否分为抗MDA5抗体阳性(MDA5^(+))组和抗MDA5抗体阴性(MDA5^(-))组,对两组数据进行比较。收集抗MDA5抗体水平定量检测结果,分析其与其他实验室指标的相关性。结果MDA5^(+)组较MDA5^(-)组初诊住院时间长,1 a内住院次数多,发热和咳嗽咳痰症状出现频率较高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与MDA5^(-)组相比,MDA5^(+)组红细胞沉降率、涎液化糖链抗原-6(KL-6)、铁蛋白水平升高,中性粒细胞、淋巴细胞、血小板、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析显示,抗MDA5抗体水平与D-二聚体、免疫球蛋白G、免疫球蛋白M水平呈正相关,与肌酸激酶同工酶水平呈负相关(P<0.05)。高分辨率CT显示,MDA5^(+)组肺间质性改变较MDA5^(-)组发生率高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论MDA5^(+)DM较MDA5^(-)DM患者发热、咳嗽咳痰发生率高,肌肉受累较轻,易发生肺间质改变,病情较重,治疗较复杂。KL-6、铁蛋白、抗MDA5抗体水平可作为评估MDA5^(+)DM病情活动的指标。

重组腺相关病毒介导的MDA-7基因对人肝癌细胞的选择性凋亡诱导效应

目的探讨PEG启动子调控腺相关病人毒介导的黑色素瘤分化相关基因MDA-7对肝癌细胞的选择性凋亡诱导效应。方法以重组腺相关病人毒rAAV-PEG-MDA-7表达系统感染人肝癌细胞株HepG2细胞和正常人肝细胞株L02细胞，Westerm Blot检测转染细胞内MDA-7蛋白，MTT法检测细胞增殖抑制率，流式细胞术分析细胞周期、Annexin—V、线粒体跨膜电位（△ψm），RT—PCR检测bcl-2基因mRNA。结果重组腺相关病毒rAAV-PEG-MDA7可特异性转染HepG2细胞，MDA7蛋白在HepG2细胞中高效表达，并呈时间依赖性；重组腺相关病毒rAAV-PEG-MDA-7可抑制HepG2细胞增殖并诱导其凋亡，细胞周期分析处于G0／G1期细胞百分比明显增多，处于G2／M期的细胞减少，并且可见到较明显的凋亡峰的形成，从24h开始Annexin-V阳性细胞比例增多，△ψm降低，抗凋亡基因bcl-2mRNA表达降低。而重组腺相关病毒rAAu-PEG-MDA-7对LO2细胞无类似效应。结论构建出的重组腺相关病毒rAAV-PEG-MDA-7表达系统可选择性抑制肝癌细胞增殖和诱导其凋亡，其诱导凋亡机制受到bcl-2家族经线粒体途径的调节。