黑色素瘤相关抗原-A9在结直肠癌中的表达及临床意义

目的探讨黑色素瘤相关抗原(MAGE)-A9在结直肠癌中的表达情况,并分析其在结直肠癌发生发展中的作用及预后价值。方法收集65例结直肠癌标本及35例正常对照组织进行免疫组化法检测,应用Kaplan-Meier统计方法和Cox比例风险回归模型进行生存分析,评价MAGE-A9表达及各临床指标与患者总生存期的关系。结果结直肠癌中MAGE-A9阳性表达率为43.1%,正常组织阳性率为3.1%,二者比较差异有统计学意义(χ~2=15.123,P=0.000);MAGE-A9的表达与结直肠癌组织中肿瘤分化程度、淋巴结转移及TNM分期(P<0.05)有关。单因素生存分析显示MAGE-A9表达、肿瘤分化程度、淋巴结转移及TNM分期均与患者预后密切相关(P<0.05),多因素Cox回归分析显示MAGE-A9高表达是结直肠癌独立的预后因素(P=0.047)。结论 MAGE-A9在结直肠癌组织中异常高表达,可能在结直肠癌的发生发展过程中起了重要的作用,MAGE-A9高表达的患者预后差,可作为结直肠癌预后的独立预测指标。

贲门腺癌组织黑色素瘤相关抗原-A9和-A11表达临床意义研究

目的黑色素瘤相关抗原(melanoma antigen,MAGE)在肿瘤的发生发展中起重要作用,而MAGE-A9和MAGE-A11在贲门腺癌组织中表达与临床病理学特征之间的关系仍不清楚。本研究旨在探讨MAGE-A9和MAGE-A11在贲门腺癌组织中的表达,分析其与贲门腺癌患者临床病理学特征及其预后的关系。方法选取河北医科大学第四医院2010-09-15-2010-11-15住院手术切除的贲门腺癌组织及距离癌组织边缘>5cm且外观正常的相应癌旁组织标本各60例,同时选取5例该院同期前列腺癌住院患者术后的睾丸组织作为阳性对照。应用免疫组织化学法检测贲门腺癌组织及相应癌旁组织中MAGE-A9和MAGE-A11蛋白的表达。结果贲门腺癌组织中MAGE-A9和MAGE-A11蛋白的阳性表达率分别为40.0%(24/60)和51.7%(31/60),而相应的癌旁组织未发现MAGE-A9和MAGE-A11蛋白的表达。MAGE-A9蛋白表达与贲门腺癌患者的性别(χ2=0.062,P=0.803)、年龄(χ2=0.179,P=0.673)、临床分期(χ2=2.791,P=0.248)、肿瘤大小(χ2=0.014,P=0.993)和淋巴转移(χ2=0.128,P=0.721)均无相关性,但与组织学分级相关(χ2=10.437,P=0.005)。MAGE-A11蛋白表达与贲门腺癌患者的性别(χ2=0.020,P=0.887)、年龄(χ2=2.530,P=0.190)、肿瘤大小(χ2=2.550,P=0.279)和淋巴转移(χ2=2.550,P=0.110)均无相关性,但与临床分期(χ2=15.095,P=0.001)和组织学分级(χ2=13.424,P=0.001)呈正相关。Log-Rank检验结果显示,MAGE-A9和MAGE-A11蛋白表达阳性的贲门腺癌患者的生存期均显著低于其表达阴性的患者,χ2值分别为5.317和6.082,P值分别为0.021和0.014。Cox多因素分析提示,MAGE-A9蛋白表达(HR=3.304,P=0.015)、MAGE-A11蛋白表达(HR=2.933,P=0.006)、组织学分级(HR=2.018,P=0.034)及临床分期(HR=2.532,P=0.004)可作为整体生存的独立预后因素。结论 MAGE-A9和MAGE-A11蛋白是贲门腺癌的特异性抗原。MAGE-A9和MAGE-A11蛋白可作为贲门腺癌预后不良的预测指标。

肺腺癌组织中黑色素瘤相关抗原-As的表达及其临床意义

目的探讨黑色素瘤相关抗原(melanoma antigen,MAGE)-As在肺腺癌组织中的表达,并分析其与肺腺癌患者临床病理学特征及预后的关系。方法选取住院手术切除的肺腺癌组织及相应癌旁组织标本各80例,应用免疫组织化学法检测各组织中MAGE-As蛋白的表达,同时选取5例前列腺癌患者术后的睾丸组织作为阳性对照。结果肺腺癌组织中MAGE-As蛋白的阳性表达率为46.25%(37/80),而相应的癌旁组织未发现MAGE-As蛋白的表达。MAGE-As蛋白的表达与肺癌患者的性别、年龄、临床分期、组织学分级、肿瘤大小、淋巴转移均无相关性(P>0.05)。Log rank检验显示,MAGE-As蛋白表达阳性的肺腺癌患者的生存期均显著低于其表达阴性的患者(P=0.007)。多因素分析结果显示,MAGE-As表达、年龄和临床分期是肺腺癌患者较差预后的独立危险因素。结论MAGE-As蛋白是肺腺癌的相关抗原。MAGE-As蛋白可能作为肺腺癌预后不良的指标。

黑色素瘤相关抗原-A:食管癌免疫治疗新靶点

黑色素瘤相关抗原(melanoma-associated antigen,MAGE)-A亚家族是MAGE基因家族成员,属于癌睾丸抗原,包括MAGE-A1~MAGE-A12,定位于X染色体。MAGE-A在正常组织中几乎不表达,而在多种肿瘤组织中表达,其在食管癌细胞系和食管癌组织均有较高表达。MAGE-A基因编码的抗原肽可由食管癌细胞MHCⅠ分子提呈至细胞毒性T细胞,能够发挥特异性抗肿瘤活性。因此,以MAGE-A抗原为新靶点,对食管癌患者进行免疫治疗有良好的前景。

黑色素瘤相关抗原-As在食管鳞状细胞癌和贲门腺癌组织中的表达及其意义

目的:探讨黑色素瘤相关抗原(melanoma antigen,MAGE)-As在食管鳞癌和贲门腺癌组织中的表达,分析其与食管鳞癌和贲门腺癌患者临床病理学特征及其预后的关系。方法:选取河北医科大学第四医院2010年9月至2010年11月住院患者手术切除的食管鳞癌和贲门腺癌组织及距离癌组织边缘5 cm以上且外观正常的相应癌旁组织标本各60例,同时选取5例该院前列腺癌住院患者术后的睾丸组织作为阳性对照,应用免疫组织化学法检测食管鳞癌和贲门腺癌组织及相应癌旁组织中MAGE-As蛋白的表达。结果:食管鳞癌和贲门腺癌组织中MAGE-As蛋白表达率分别为68.33%(41/60)和58.33%(35/60),而相应的癌旁组织未发现MAGE-As蛋白的表达。MAGE-As蛋白的表达与食管鳞癌患者的性别、年龄、临床分期、组织学分级、肿瘤大小、淋巴转移均无相关性(P>0.05);MAGE-As蛋白表达与贲门腺癌患者的性别、年龄、临床分期、肿瘤大小、淋巴转移均无相关性(P>0.05),但与组织学分级呈正相关(P<0.05)。Log-Rank检验显示,MAGE-As蛋白表达阳性的食管鳞癌(P=0.036)和贲门腺癌(P=0.045)患者的生存期均显著低于表达阴性的患者。结论:MAGE-As蛋白是食管鳞癌和贲门腺癌的相关抗原,可作为食管鳞癌和贲门腺癌预后不良的指标。

非小细胞肺癌组织中黑色素瘤相关抗原A家族部分成员的表达及其意义

目的:探讨黑色素瘤相关抗原(melanoma antigen,MAGE)-As在非小细胞肺癌(Non-small cell carcinoma,NSCLC)组织中的表达,并分析其与临床病理学特征和预后的关系。方法:选取河北医科大学第四医院2015年9月至2016年3月住院手术切除的NSCLC组织及相应癌旁组织标本90例,应用免疫组织化学法检测NSCLC组织及相应癌旁组织中MAGE-As蛋白的表达,分析MAGE-As蛋白表达与NSCLC临床病理指标之间的相关性;利用荧光原位杂交技术检测EGFR基因扩增和ALK基因重排情况,Spearman检验MAGE-A表达与EGFR扩增和ALK重排的关系;应用Kaplan-Meier方法对NSCLC患者是否阳性表达MAGE-As蛋白进行生存分析,利用Cox回归模型针对阳性表达MAGE-As及相关的临床病理资料进行单因素和多因素分析。结果:NSCLC组织中MAGE-As蛋白的阳性表达率明显高于癌旁组织(P<0.05)。MAGE-As蛋白的表达与患者的临床病理学特征、EGFR扩增和ALK重排均无关联(P>0.05)。MAGE-As蛋白表达阳性的NSCLC患者生存期显著低于其表达阴性患者(P<0.05),而EGFR扩增和ALK重排与患者的整体生存率无关(P>0.05)。多因素分析结果显示,MAGE-As表达、临床分期和淋巴结转移是NSCLC患者较差预后的独立危险因素。结论:MAGE-As蛋白是NSCLC的相关抗原,MAGE-As蛋白可作为NSCLC患者预后不良的预测指标。

脑胶质瘤患者血清黑色素瘤相关抗原-A3特异性细胞毒性T淋巴细胞免疫反应水平及临床意义

目的探讨脑胶质瘤组织中黑色素瘤相关抗原-A3(MAGE-A3)蛋白表达和甲基化状态,血清中特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)免疫应答及临床意义。方法采用蛋白质印迹(Western blot)法和甲基化特异性聚合酶链反应(MSP-PCR)技术检测56例脑胶质瘤组织和15例正常脑组织中MAGE-A3蛋白表达和基因甲基化状态,采用Gultured酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测患者外周血单个核细胞(PBMC)中MAGE-A3特异性CTL免疫反应,并明确二者之间的关系,以及与患者临床特征的关系。结果56例脑胶质瘤组织中MAGE-A3蛋白的表达量为(2.26±1.09),明显高于15例正常脑组织中的(0.44±0.18)(P﹤0.01)。脑胶质瘤组织中MAGE-A3基因启动子甲基化率为55.36%(31/56),明显低于正常脑组织的100%(15/15)(P﹤0.01)。脑胶质瘤患者血清MAGE-A3特异性CTL免疫应答阳性率为33.93%(19/56),平均反应强度为(2301.70±560.33)SFC/106 PBMC。同一患者脑胶质瘤组织中MAGE-A3基因启动子甲基化状态与MAGE-A3蛋白高表达结果一致性一般(Kappa=0.679,P﹤0.01)。同一患者血清MAGE-A3特异性CTL免疫应答阳性与组织中MAGE-A3蛋白高表达结果一致性一般(Kappa=0.464,P﹤0.01)。脑胶质瘤患者血清中MAGE-A3特异性CTL免疫反应强度与组织中MAGE-A3蛋白表达量呈正相关(r=0.788,P﹤0.01)。不同肿瘤大小及临床分期的脑胶质瘤患者血清MAGE-A3特异性CTL免疫反应频率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。结论脑胶质瘤组织中MAGE-A3基因启动子区DNA去甲基化导致MAGE-A3蛋白表达量升高,进而刺激机体产生MAGE-A3特异性CTL免疫应答反应,参与肿瘤生长和恶性进展。

负载乙肝核心抗原-黑色素瘤抗原-A3融合蛋白的外周血单个核细胞对人非小细胞肺癌细胞体外杀伤作用的实验

目的研究经负载乙肝核心抗原(hepatitis B core antigen,HBVc)-黑色素瘤抗原-A3(melanoma antigen gene-A3,MAGE-A3)融合蛋白的外周血单个核细胞(peripheral blood monocyte cell,PBMC)激活的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)对MAGE-A3高表达人非小细胞肺癌细胞的特异性体外杀伤作用。方法从健康人外周血中分离出单个核细胞(peripheral blood monocyte cell,PBMC),使用白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)刺激PBMC,将负载HBVc-MAGEA3融合蛋白的PBMC与正常PBMC共培养,诱导出特异性细胞毒性T淋巴细胞,以该共培养后的PBMC作为效应细胞,以高表达MAGE-A3抗原的人非小细胞肺癌细胞株NCI-H358为靶细胞,低表达MAGE-A3抗原的细胞系HEK-293T作为对照,进行肿瘤细胞杀伤试验。结果负载HBVc-MAGE-A3融合蛋白抗原的外周血单个核细胞能够成功诱导出特异性的细胞毒性T淋巴细胞,并且对非小细胞肺癌细胞有显著的杀伤作用,其杀伤率显著高于对照组(P<0.05)。当使用MAGEA3高表达的NCI-H358细胞作为靶细胞,效靶比(E∶T)=10∶1时,HBVc-MAGE-A3组的杀伤率约为60%,HBVc组和空白对照(no template control,NTC)组的杀伤率约为35%;E∶T=20∶1时,HBVc-MAGE-A3组的杀伤率约为90%,HBVc组和NTC组的杀伤率约为45%。当使用MAGE-A3低表达的HEK-293T作为靶细胞时,三组间杀伤率差异无统计学意义。结论 MAGE-A3融合蛋白抗原负载的外周血单个核细胞可以在体外成功诱导出特异性针对非小细胞肺癌细胞的细胞毒性T淋巴细胞,并具有特异性免疫杀伤作用。

结直肠癌组织中HMGB2、MAGE-A9、MMR蛋白表达及其临床意义

目的探讨结直肠癌组织中高迁移率族蛋白B2(HMGB2)、黑色素瘤相关抗原-A9(MAGE-A9)、DNA错配修复基因(MMR)蛋白表达情况,以及其在评估患者预后中的临床价值。方法选取52例结直肠癌患者作为研究对象,术中采集所有患者肿瘤标本及癌旁组织标本,检测HMGB2、MAGE-A9、MMR蛋白表达水平,并分析各指标表达情况与病理特征、预后间的关系。结果肿瘤组织内HMGB2、MAGE-A9、MMR阳性表达高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。肿瘤分期Ⅲ期、分化程度低分化、淋巴结转移患者HMGB2、MAGE-A9、MMR阳性表达率高于Ⅰ期、Ⅱ期、中高分化、无淋巴结转移患者,差异有统计学意义(P<0.05)。随访3年,52例患者存活率为71.15%(37/52);HMGB2阳性组存活率[61.76%(21/34)]低于HMGB2阴性组[88.89%(16/18)],差异有统计学意义(χ^(2)=4.219,P=0.040);MAGE-A9阳性组存活率[58.62%(17/29)]低于MAGE-A9阴性组[86.96%(20/23)],差异有统计学意义(χ^(2)=5.018,P=0.025);MMR阳性组存活率[52.00%(13/25)]低于MMR阴性组[88.89%(24/27)],差异有统计学意义(χ^(2)=8.606,P=0.003)。结论HMGB2、MAGE-A9、MMR在结直肠癌中呈高表达状态,其表达与肿瘤分期、分化程度、淋巴结转移关系密切,且不同表达患者存活率存在较大差异,可作为评估预后的重要指标。

黑素瘤相关抗原-A9和-A11在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨黑素瘤相关抗原(melanoma antigen,MAGE)-A9和-A11在食管鳞状细胞癌组织中的表达情况,分析其与食管癌患者临床病理学特征及其预后的关系。方法:选取河北医科大学第四医院2010年9月至2010年11月住院手术切除的食管癌组织及距癌组织边缘5 cm以上且病理诊断证实为正常组织的癌旁组织标本各60例,同时选取5例该院前列腺癌住院患者术后的睾丸组织作为阳性对照,应用免疫组织化学法检测食管鳞状细胞癌组织及相应癌旁组织中MAGE-A9和-A11蛋白的表达。结果:食管鳞状细胞癌组织中MAGE-A9和MAGE-A11蛋白的阳性表达率分别为45%(27/60)和66.67%(40/60),而相应的癌旁组织未发现MAGE-A9和-A11蛋白的表达。MAGE-A9蛋白的表达与食管鳞状细胞癌患者的年龄、临床分期、肿瘤大小、淋巴转移均无相关性(P>0.05),但与组织学分级相关(P<0.05);MAGE-A11蛋白表达与食管鳞状细胞癌患者的年龄、组织学分级、淋巴转移均无相关性(P>0.05),但与临床分期、肿瘤大小呈正相关(P<0.05)。Log-Rank检验显示,MAGE-A9(P=0.037)和-A11(P=0.039)蛋白表达阳性的食管鳞状细胞癌患者和贲门腺癌患者的生存期均显著低于其表达阴性的患者。Cox多因素分析提示,MAGE-A9(P=0.026)和MAGE-A11(P=0.038)蛋白表达、组织学分级(P=0.026)、临床分期(P=0.008)及淋巴结转移(P=0.010)可作为整体生存的独立预后因素。结论:MAGE-A9和-A11蛋白是食管鳞状细胞癌的特异性抗原,似可作为食管鳞状细胞癌预后不良的预测指标。

黑色素瘤相关抗原-A3蛋白激活树突状细胞诱导CD8＋细胞毒性T淋巴细胞免疫治疗肝细胞癌

目的探讨黑色素瘤相关抗原-A3（MAGE-A3）蛋白激活树突状细胞（DC），然后诱导产生CD8＋细胞毒T淋巴细胞（CTL）进行免疫治疗肝细胞癌（简称肝癌）的效果。 方法利用MAGE-A3蛋白诱导DC成熟并检测DC表面标志物及白细胞介素（IL）-10、IL-12表达，然后利用成熟的MAGE-A3-DC诱导MAGE-A3特异性CD8＋CTL，并检测MAGE-A3-DC-CD8＋CTL对正常肝细胞L02和肝癌细胞HepG2的杀伤作用。建立BALB/c-nu/nu肝癌模型，检测MAGE-A3-DC-CD8＋CTL对小鼠肿瘤的抑制作用，并通过病理学切片观察肿瘤组织变化。 结果MAGE-A3蛋白刺激能够显著上调DC表面标志物DC80、DC83、DC86和人类白细胞抗原DR基因（HLA-DR）水平（97.45±2.58比48.33±1.68，92.81±2.36比52.92±1.90，94.00±3.01比53.97±2.05，92.16±1.87比34.13±1.32；t＝35.680，P＝0.013；t＝29.440，P＝0.021；t＝24.580，P＝0.012；t＝56.690，P＝0.009）；与磷酸盐缓冲液（PBS）刺激的DC比较，MAGE-A3蛋白能够显著促进DC释放IL-12[（338.44±18.15） pg/ml比（243.23±16.56） pg/ml；t＝8.670，P＝0.005]和显著抑制IL-10的释放[（207.21±10.89） pg/ml比（327.58±14.36） pg/ml；t＝14.930，P＝0.009]。MAGE-A3-DC-CD8＋CTL和DC-CD8＋CTL展示了相近的L02细胞杀伤效果[（9.10±1.40）%比（9.71±1.58）%；t＝0.650，P＝0.120]，与DC-CD8＋CTL比较，MAGE-A3-DC-CD8＋CTL展示了显著的HepG2细胞杀伤效果[（58.84±5.27）%比（9.63±1.61）%；t＝19.970，P＝0.008]。BALB/c-nu/nu肝癌小鼠经过MAGE-A3-DC-CD8＋CTL治疗后，肿瘤体积比显著低于PBS组和DC-CD8＋CTL组（5.43±1.22比21.81±2.01比22.85±2.40；t＝22.030，P＝0.010；t＝20.460，P＝0.012）。苏木素-伊红（HE）染色结果显示，经过MAGE-A3-DC-CD8＋CTL处理的肿瘤组织细胞核固缩，细胞间隙增大，出现空泡和水肿现象，而PBS组和DC-CD8＋CTL组肿瘤组织无病理学改变。结论MAGE-A3蛋白能够刺激DC细胞成熟并诱导产生MAGE-A3蛋白特异性CD8＋CTL，MAGE-A3-DC-CD8＋CTL具有特异性的肿瘤杀伤能力。

MAGE-A9、MAGE-A11和Ki67在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨黑色素瘤相关抗原A9(MAGE-A9)、MAGE-A11-和Ki67在喉鳞状细胞癌组织中的表达,并分析其与喉鳞状细胞癌患者临床病理学特征及预后的关系。方法:选取河北医科大学第四医院2012-2014年住院手术切除的喉鳞状细胞癌组织及相应癌旁组织标本各73例,同时选取该院3例前列腺癌住院患者去势治疗术后的睾丸组织作为阳性对照,应用免疫组织化学法检测喉鳞状细胞癌组织及相应癌旁组织中MAGE-A9、MAGE-A11和Ki67蛋白的表达水平。结果:喉鳞状细胞癌组织中MAGE-A9、MAGE-A11蛋白和Ki67的表达率[47.94%(35/73)]、[49.32%(36/73)]和[46.58%(34/73)]均显著高于相应的癌旁组织[0(0/75)(P<0.01)],MAGE-A9和MAGE-A11蛋白的表达与喉鳞状细胞癌患者的临床分期和淋巴转移有关(P<0.05),Ki67LI表达与喉鳞状细胞癌患者的肿瘤大小、临床分期和淋巴转移有关(P<0.05)。相关性分析显示,MAGE-A9和MAGE-A11蛋白表达均与Ki67指数呈正相关(r=0.258,P=0.027;r=0.672,P=0.001)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,MAGE-A9、MAGE-A11和Ki67LI蛋白高表达阳性患者的生存率均显著低于低表达的患者,而且MAGE-A9和Ki67LI均高表达或MAGE-A11和Ki67LI均高表达患者的生存期均显著低于其单一高表达或均低表达的患者(P<0.05或P<0.01)。单因素和多因素Cox回归模型分析进一步提示,MAGE-A9蛋白和MAGE-A11蛋白是喉鳞状细胞癌患者总体生存的独立预后因素(P<0.05)。结论:MAGE-A9、MAGE-A11和Ki67是喉鳞状细胞癌的肿瘤相关抗原,其可作为预测喉鳞状细胞癌患者的预后指标。

人类黑色素瘤相关抗原A9在人食管鳞状细胞癌中的表达及其与预后的关系

目的探讨人食管鳞状细胞癌中人类黑色素瘤相关抗原A9（MAGE—A9）的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学检测53例食管鳞癌和30例正常食管组织中MAGE—A9蛋白表达水平，实时定量反转录聚合酶链反应（RT—qPCR）检测食管鳞癌癌组织和正常食管黏膜组织叶JMACE—A9基因表达水平。结果MAGE—A9在正常食管黏膜中微弱表达，而在食管鳞癌组织中显著离表达；癌组织中MACE—A9蛋白相对表达量（3．620±2．009）明显高于正常食管黏膜组织（0．300±0．652），差异有统计学意义（P〈0．05）。MAGE—A9mRNA表达水平（0．722±0．352）显著高于正常食管组织（0．223±0．292），差异有统计学意义（P〈0．05）。结论MAGE．A9在食管鳞癌中高表达，且与临床病理因素及预后相关。

基因芯片技术筛查并鉴定乳腺癌细胞中MAGE-A11的相关基因

目的:应用高通量基因芯片技术筛查乳腺癌细胞中黑色素瘤相关抗原(melanoma antigen,MAGE)-A11的相关基因,并从数量和功能两方面加以验证。方法:采用基因芯片技术筛选乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231和BT-549中MAGE-A11下游靶基因的m RNA的差异表达,对有代表性的基因进行了聚类分析,并利用q RT-PCR进行验证。以CCK-8法、细胞划痕实验和Transwell实验检测MAGE-A11对乳腺癌细胞中增殖、迁移和侵袭功能的影响。结果:3种乳腺癌细胞过表达MAGE-A11导致1 608个下游基因差异表达,主要涉及蛋白泛素化、细胞增殖和凋亡、肿瘤侵袭和转移。基因芯片中典型高表达的ZNF-451、CENPTJ、CDK13、API5和LMO7在q RT-PCR在验证结果中也显著高于对照组(P<0.01),低表达的SHPRH、PML、MARK2、LIMA1和ANGPTL4也显著低于对照组(P<0.01)。转染MAGE-A11组的乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231和BT-549 72 h的增殖能力较对照组明显增强(均P<0.01),培养48 h后与对照组相比,转染MAGE-A11的3种细胞划痕出现明显愈合(P<0.05或P<0.01),穿膜数较对照组明显增多(均P<0.01)。结论:在MCF-7、MDA-MB-231和BT-549三种乳腺癌细胞中筛查到涉及蛋白泛素化、细胞增殖和凋亡、肿瘤侵袭和迁移等生物功能众多的表达差异基因,对其中10种典型差异基因从数量和功能两方面进行验证,并得到初步确认。

人类黑色素瘤相关抗原A9检测对早期宫颈癌的诊断价值

目的探讨早期宫颈癌患者癌变组织中人类黑色素瘤相关抗原A9(MAGE-A9)检测对疾病诊断的价值。方法选取2017年1月至2018年9月间武汉市江夏区中医院病理科的30例正常宫颈组织标本、30例宫颈上皮内瘤变组织标本和50例宫颈癌组织标本,检测各组织中MAGEA9表达情况,分析宫颈癌组织标本中MAGE-A9表达阳性和患者年龄、临床分期、病理分级、病理类型及淋巴结转移的关系。结果宫颈癌组织标本中MAGE-A9检测阳性率为80. 0%(40/50),高于正常宫颈组织的30. 0%(9/30例)和宫颈上皮内瘤变组织的36. 7%(11/30),差异均有统计学意义(均P <0. 05)。宫颈癌患者组织标本中临床分期ⅡA期、病理分级G3级和淋巴结转移的MAGE-A9阳性表达率高,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论 MAGE-A9在早期宫颈癌患者组织中检测阳性率高,且与宫颈癌组织病理类型及转移情况有关。

MAGE-A9对人乳腺癌MDA-MB-231细胞中P53转录活性及功能的影响

目的:探讨黑素瘤相关抗原-A9(melanoma-associated antigen,MAGE-A9)对人乳腺癌细胞中P53转录活性及功能的影响。方法:通过LipofectamineTM2000体外转染质粒pcDNA3.0、pcDNA3.0-p53、pCMV6-MAGE-A9和pcDNA3.0-p53/MAGE-A9至人乳腺癌MDA-MB-231细胞,RT-PCR和Western blotting检测细胞中p21WAF1mRNA和蛋白的表达,荧光素酶报告基因分析检测细胞中p21WAF1启动子介导的荧光素酶表达活性,MTT法检测转染不同质粒对MDA-MB-231细胞增殖的影响。结果:转染pcDNA3.0-p53/MAGE-A9组MDA-MB-231细胞中p21WAF1mRNA和蛋白表达水平均明显低于pcDNA3.0-p53组[(0.15±0.01)vs(0.18±0.02),(0.03±0.00)vs(0.06±0.01);均P<0.05]。转染pcDNA3.0-p53质粒可以增强MDAMB-231细胞中p21WAF1启动子介导的荧光素酶的表达[(58.56±3.47)vs(1.00±0.12),P<0.01],转染pcDNA3.0-p53/MAGE-A9后,MDA-MB-231细胞中p21WAF1启动子介导的荧光素酶的表达较转染pcDNA3.0-p53组明显降低[(22.02±4.91)vs(58.56±3.47),P<0.05]。与pcDNA3.0组相比,pcDNA3.0-p53组MDA-MB-231细胞增殖率明显明显降低[(228.89±22.39)%vs(337.23±23.67)%,P<0.05];而pcDNA3.0-p53/MAGE-A9组MDA-MB-231细胞增殖率明显高于pcDNA3.0-p53组[(291.51±5.91)%vs(228.89±22.39)%,P<0.05]。结论:MAGE-A9可抑制MDA-MB-231细胞中P53的转录活性及细胞增殖。

MAGE-A4在肿瘤诊断与免疫治疗中的作用研究进展

肿瘤免疫治疗已成为继放化疗、靶向治疗后最终攻克癌症的希望之一,而肿瘤相关性抗原是免疫治疗的重要靶点。黑色素瘤相关抗原-A4(MAGE-A4)作为癌睾丸抗原,是MAGE-A亚家族的重要成员,具有很好的组织学特异性,在多种肿瘤组织中呈高表达,在正常组织(除睾丸、胎盘外)中均呈低表达。MAGE-A4参与细胞功能的调节,具有调控细胞周期、诱导细胞分化和生长、参与上皮-间质转化等重要作用,与肿瘤的发生、发展、转移及预后密切相关。目前,以MAGE-A4为靶点的T细胞受体转基因T细胞(TCR-T)免疫治疗,其Ⅰ期临床试验结果显示总体反应率(ORR)为23.7%、病情稳定率为47.4%,Ⅱ期临床试验正在开展,提示以MAGE-A4为靶点的TCR-T免疫治疗具有较高的临床应用价值。本文总结了MAGE-A4的结构和生物学功能及其在多种实体肿瘤中的最新研究进展和临床应用,旨在为MAGE-A4的临床转化及免疫靶向治疗提供理论基础。

MAGE-A家族在胃癌中作用的研究进展

胃癌(gastric cancer,GC)是全世界消化系统中最常见的恶性肿瘤之一,患者确诊时多为进展期,其治疗方案多为综合性治疗,其中免疫治疗起越来越重要的作用。黑色素瘤相关抗原基因-A(melanoma antigen-associated gene-A,MAGE-A)家族是一类癌睾抗原,除在睾丸的生殖细胞和胎盘的滋养层细胞中表达外,还在癌变组织中高表达,参与癌细胞的增殖、分化、转移等多种生物学过程,具有高度的组织限制性。此外,癌睾抗原还具有良好的免疫原性,可引发机体产生体液免疫和细胞免疫反应,是良好的免疫治疗靶点,对GC的诊断、治疗、预后判断等具有良好的应用价值。针对MAGE-A的多种靶向治疗药物处在I期或II期临床试验阶段,试验证明其具有良好的安全性和潜在的临床应用价值。针对GC中MAGE-A靶点的临床试验和基础研究的不断推进,未来有望为MAGE-A的临床转化和免疫治疗提供理论基础。

MAGE-As蛋白及mRNA在肺癌中的表达水平变化及其临床意义

目的探讨黑色素瘤相关抗原(MAGE)-As蛋白及mRNA在肺癌中的表达水平变化及其临床意义,旨在为临床预后预测提供指导。方法回顾性选取2018年7月至2020年12月于该院经手术病理组织检查确诊的91例肺癌患者作为研究对象,比较癌组织、癌旁正常组织及不同临床病理特征肺癌的患者MAGE-As蛋白、mRNA,分析MAGE-As蛋白、MAGE-As mRNA与临床病理特征的预后相关性,探讨肺癌预后的影响因素。结果肺癌组织MAGE-As蛋白及mRNA高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);MAGE-As蛋白及mRNA与淋巴结转移、临床分期、远处转移均呈正相关,与分化程度呈负相关性(P<0.05);MAGE-As蛋白阳性表达、MAGE-As mRNA高水平表达者3年生存率低于MAGE-As蛋白阴性表达、MAGE-As mRNA低水平表达者(P<0.05);临床分期、分化程度、淋巴结转移、远处转移、MAGE-As蛋白及mRNA是肺癌预后的重要影响因素(P<0.05)。结论MAGE-As蛋白阳性表达及mRNA高水平表达可能与肺癌发生、发展相关,可为临床评估肺癌病理特征,改善预后提供指导。

MAGE-As蛋白及mRNA在肺癌患者的表达水平变化及其临床意义

目的:探讨黑色素瘤相关抗原(MAGE)-As蛋白及mRNA在非小细胞肺癌中的表达及临床意义。方法:选取2015年1月至2020年1月在我院治疗的非小细胞肺癌患者88例,同时选取癌旁组织作为对照,采用Western blot检测肺癌和癌旁组织MAGE-As蛋白表达,RT-PCR检测肺癌和癌旁组织MAGE-As mRNA表达。结果:非小细胞肺癌组织MAGE-As蛋白及mRNA相对表达量分别为(0.343±0.101)和(0.728±0.112),明显高于癌旁组织(P<0.05);临床分期Ⅲ~Ⅳ期肺癌组织MAGE-As蛋白相对表达量为(0.385±0.102),明显高于Ⅰ~Ⅱ期肺癌组织(P<0.05);不同性别、年龄、肿瘤直径、病理类型、分化程度肺癌组织MAGE-As蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);临床分期Ⅲ~Ⅳ期、中低分化程度肺癌组织MAGE-As mRNA相对表达量为(0.762±0.112)和(0.742±0.107),明显高于Ⅰ~Ⅱ期和高分化肺癌组织(P<0.05);不同性别、年龄、肿瘤直径、病理类型肺癌组织MAGE-As mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);肺癌组织MAGE-As mRNA高表达和低表达患者中位总生存期为33个月和44个月,MAGE-As mRNA高表达和低表达患者生存率有所差异(P<0.05)。MAGE-As蛋白高表达和低表达患者中位总生存期差异比较无统计学意义(P>0.05)。结论:MAGE-As蛋白及mRNA在非小细胞肺癌中表达上调,与病情严重程度有关,同时MAGE-As mRNA高表达患者预后较差。