宫颈癌组织中人类黑色素瘤相关抗原A3表达变化及其意义

目的观察宫颈癌组织中人类黑色素瘤相关抗原A3(MAGE-A3)的表达变化,分析其与肿瘤临床病理参数及预后的关系。方法收集宫颈癌组织76例、宫颈上皮内瘤变(CIN)组织40例、正常宫颈组织标本25例,采用免疫组化SP法检测MAGE-A3,分析MAGE-A3表达与患者年龄、FIGO分期、组织病理学分级、淋巴结转移及阴道残端癌累及的关系。收集70例宫颈癌患者的术后随访资料,采用Kaplan-Meier生存曲线分析MAGE-A3表达与患者预后的关系。结果宫颈癌组织、CIN组织、正常宫颈组织中MAGE-A3阳性表达率分别为53.94%、7.50%、0,组间两两相比,P均<0.05。FIGO分期Ⅱa1期宫颈癌组织中MAGE-A3阳性表达率高于Ⅰ期者(P<0.05)。病理分级为G1、G2、G3的宫颈癌组织中MAGE-A3阳性表达率逐渐增高(P均<0.05)。有淋巴结转移的宫颈癌组织中MAGE-A3阳性表达率高于无淋巴结转移者(P<0.05)。MAGE-A3低表达组患者5年生存率为78.1%(25/32),高表达组患者5年生存率为44.7%(17/38),两者相比,P<0.05。结论宫颈癌组织中MAGE-A3阳性表达率高于CIN组织和正常宫颈组织;MAGE-A3高表达可能与宫颈癌的发生发展及不良预后密切相关。

内皮素3、黑色素瘤优先表达抗原表达水平与子宫内膜癌临床特征及预后的关系

目的探究内皮素3(EDN3)、黑色素瘤优先表达抗原(PRAME)表达水平与子宫内膜癌临床特征及预后的关系。方法选取郑州大学第二附属医院2018年9月至2020年9月收治的80例子宫内膜癌患者为研究对象,在术中收集癌组织和癌旁组织;采用定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和免疫组化法检测EDN3、PRAME表达;EDN3、PRAME与子宫内膜癌患者预后的关系采用Kaplan-Meier生存曲线分析;子宫内膜癌患者预后的影响因素采用COX回归分析。绘制受试者操作特征曲线分析EDN3、PRAME对子宫内膜癌预后不良的预测价值。结果子宫内膜癌组织EDN3信使核糖核酸(mRNA)表达水平和阳性表达率显著低于癌旁组织(P<0.05),PRAME mRNA表达水平和阳性表达率显著高于癌旁组织(P<0.05)。子宫内膜癌组织中EDN3、PRAME表达与国际妇产科联盟(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)分期、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)。EDN3阳性患者生存率高于阴性患者(P<0.05);PRAME阳性患者生存率低于阴性患者(P<0.05)。预后不良组患者EDN3 mRNA表达水平显著低于预后良好组,PRAME mRNA表达水平显著高于预后良好组(P<0.05)。根据受试者操作特征曲线得知,EDN3和PRAME二者联合预测子宫内膜癌预后不良优于各自单独预测(Z_(联合vsEDN3)=2.667、Z_(联合vsPRAME)=2.682,P<0.05)。多因素COX回归分析结果显示,PRAME、FIGO分期、分化程度、淋巴结转移是影响子宫内膜癌患者预后的危险因素(P<0.05),EDN3是保护因素(P<0.05)。结论子宫内膜癌组织中EDN3表达显著降低,PRAME表达显著升高,二者与临床特征及预后密切相关。

黑色素瘤相关抗原A3 E-钙黏蛋白及P53在宫颈癌组织中的表达与意义

目的研究黑色素瘤相关抗原A3(MAGE-A3)、E-钙黏蛋白(E-cad)及P53在宫颈癌组织中的表达与意义,为宫颈癌基因方面的病情检测提供新的思路。方法选取2019年3月—2021年3月义乌市中心医院收治的86例宫颈癌患者为研究对象,应用免疫组织化学法检测患者癌组织及相应的癌旁组织中MAGE-A3、E-cad、P53的表达水平,采用Pearson相关性分析法分析MAGE-A3、E-cad、P53之间的相关性。结果宫颈癌组织中MAGE-A3、E-cad、P53阳性表达率分别为45.35%(39例)、40.70%(35例)、26.74%(23例);癌旁组织中MAGE-A3、E-cad、P53阳性表达率分别为8.14%(7例)、88.37%(76例)、2.33%(2例)。与癌旁组织比较,癌组织中MAGE-A3、P53阳性表达率均升高,E-cad阳性表达率降低,两组比较差异均具有统计学意义(MAGE-A3:χ^(2)=30.388,P<0.05;E-cad:χ^(2)=42.702,P<0.05;P53:χ^(2)=18.721,P<0.05)。不同TNM分期、分化程度、淋巴结转移情况的患者宫颈癌组织中MAGE-A3、E-cad、P53阳性表达率比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。宫颈癌组织中,MAGE-A3与E-cad表达呈负相关(r=-0.261,P<0.05),MAGE-A3与P53表达呈正相关(r=0.871,P<0.05),E-cad与P53表达呈负相关(r=-0.486,P<0.05)。结论宫颈癌组织中MAGE-A3、P53阳性表达呈上调状态,E-cad阳性表达呈下调状态,三者之间紧密相关,并且其表达水平的高低变化与TNM分期、分化程度、淋巴结转移等临床病理特征有关,可能共同参与了宫颈癌的发生、发展。

黑色素瘤相关抗原3、zeste 2多梳抑制复合物2亚基增强子在宫颈癌组织中的表达及与患者预后的关系

目的 探讨黑色素瘤相关抗原3(MAGEA3)、zeste 2多梳抑制复合物2亚基增强子(EZH2)在宫颈癌组织中的表达及与患者预后的关系。方法 选取45例宫颈癌患者的宫颈癌组织、18例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者的CIN组织和17例健康体检者的正常宫颈组织,采用免疫组化法检测MAGEA3、EZH2的表达情况。MAGEA3、EZH2表达的相关性采用Spearman相关分析;宫颈癌患者预后的影响因素采用多因素Logistic回归分析。结果 宫颈癌组织中MAGEA3、EZH2的阳性表达率均高于正常宫颈组织和CIN组织,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。淋巴结转移、肌层浸润深度﹥1/2、临床分期为ⅡA期、组织学分级为G3级宫颈癌患者宫颈癌组织中MAGEA3、EZH2的阳性表达率分别高于无淋巴结转移、肌层浸润深度≤1/2、临床分期为Ⅰ期、组织学分级为G1~2级的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。宫颈癌组织中MAGEA3的表达与EZH2的表达呈正相关(r=0.337,P﹤0.05)。MAGEA3、EZH2阳性表达宫颈癌患者的3年生存率均高于阴性表达患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,淋巴结转移、肌层浸润深度﹥1/2、临床分期为ⅡA期、组织学分级为G3级均是宫颈癌患者预后的独立危险因素(P﹤0.05)。结论 MAGEA3、EZH2在宫颈癌组织中表达上调,且阳性表达患者预后较差,淋巴结转移、肌层浸润深度﹥1/2、临床分期为ⅡA期、组织学分级为G3级均是宫颈癌患者预后的独立危险因素。

表达黑色素瘤抗原-A3重组质粒的免疫原性研究

目的对新型肺癌基因疫苗的免疫原性进行评价。方法利用Furin 2A将黑色素瘤抗原A3(MAGE-A3)基因与GM-CSF基因进行连接,克隆入真核表达载体p VAX1,构建基因疫苗p VAX1-MAGE-A3-F2A-GM-CSF。将该疫苗体外转染293T细胞,利用免疫印迹和ELISA的方法对其表达情况进行检测。然后,将疫苗及对照组分别免疫接种小鼠,通过ELISA和ELISPOT法初步检测其诱导的体液免疫和细胞免疫反应。结果成功克隆并构建了肺癌基因疫苗p VAX1-MAGE-A3-F2A-GM-CSF,并证实了其在真核细胞中表达。疫苗免疫接种小鼠模型后的检测结果显示,与空载体对照组以及单独抗原组相比,p VAX1-MAGE-A3-F2A-GM-CSF能够诱导产生更强的体液免疫反应和细胞免疫反应。结论 p VAX1-MAGE-A3-F2A-GMCSF能够同时诱导较强的体液免疫和细胞免疫反应,其抗肿瘤效应将通过进一步实验深入研究。

miR-506-3p通过靶向结合SART3抑制葡萄膜黑色素瘤恶性表型

目的:探讨miR-506-3p通过靶向结合鳞状细胞癌抗原3(squamous cell carcinoma antigen 3,SART3)抑制葡萄膜黑色素瘤(uveal melanoma,UM)恶性表型的机制。方法:实验将OCM-1A和MUM-213细胞构建miR-506-3p过表达模型(miR-NC组和miR-506-3p组),构建SART3敲低模型(shNC组、shSART31#组和shSART32#组)。生物信息学分析miR-506-3p和SART3与UM不良表型之间的关系并预测两者之间的靶向关系。RT-PCR检测miR-506-3p和SART3在APRE-19、OCM-1A和MUM-213细胞中的表达。CCK-8实验、细胞划痕愈合实验和侵袭实验分别检测细胞增殖、横向迁移和侵袭能力。裸鼠成瘤实验检测瘤体重量、体积。Western Blot实验检测SART3蛋白表达。双荧光酶素实验验证miR-506-3p和SART3的靶标关系。结果:miR-506-3p在UM细胞中低表达,过表达miR-506-3p能抑制细胞增殖、迁移和侵袭能力。上调miR-506-3p表达可以抑制裸鼠移植瘤生长。数据库预测SART3是miR-506-3p的靶基因,双荧光酶素报告实验证实SART3是miR-506-3p作用靶点。SART3在UM中高表达,下调SART3表达可以抑制UM细胞增殖、迁移和侵袭。miR-506-3p靶向结合SART3抑制UM细胞增殖、迁移和侵袭。结论:miR-506-3p能抑制UM细胞增殖、迁移和侵袭,其作用机制可能是通过下调SART3表达实现的。

黑色素瘤相关抗原A基因家族在食管癌患者外周血中的表达及其临床意义

目的:探讨黑色素瘤相关抗原A家族(melanoma antigen A,MAGE-As)在食管癌患者外周血中的表达,分析其与食管癌患者临床病理学指标及预后的关系。方法:采用多重巢式PCR(multiplex semi-nested PCR)法检测153例食管癌患者和30例健康人外周血中MAGE-As m RNA表达水平,并利用酶切的方法鉴定该家族成员MAGE-A1、A2、A3、A4和A6的表达情况。结果:MAGE-As在食管癌患者外周血中阳性表达率为19.61%(30/153),MAGE-A1、A2、A3、A4、A6的阳性表达率分别为10.46%(16/153)、16.34%(25/153)、9.8%(15/153)、11.11%(17/153)和18.30%(28/153)。MAGE-As阳性表达与临床分期、远处转移、淋巴结转移呈正相关(均P<0.05),MAGE-As及其亚型基因的阳性表达均与食管癌患者5年生存率较差相关(均P<0.05);MAGE-As表达、肿瘤大小、淋巴结转移及远处转移可作为食管癌患者生存的独立预后因素(均P<0.01)。结论:MAGE-As在食管癌患者外周血中的表达与食管癌预后相关,有可能作为监测食管癌预后的重要指标。

非小细胞肺癌组织中黑色素瘤相关抗原A家族部分成员的表达及其意义

目的:探讨黑色素瘤相关抗原(melanoma antigen,MAGE)-As在非小细胞肺癌(Non-small cell carcinoma,NSCLC)组织中的表达,并分析其与临床病理学特征和预后的关系。方法:选取河北医科大学第四医院2015年9月至2016年3月住院手术切除的NSCLC组织及相应癌旁组织标本90例,应用免疫组织化学法检测NSCLC组织及相应癌旁组织中MAGE-As蛋白的表达,分析MAGE-As蛋白表达与NSCLC临床病理指标之间的相关性;利用荧光原位杂交技术检测EGFR基因扩增和ALK基因重排情况,Spearman检验MAGE-A表达与EGFR扩增和ALK重排的关系;应用Kaplan-Meier方法对NSCLC患者是否阳性表达MAGE-As蛋白进行生存分析,利用Cox回归模型针对阳性表达MAGE-As及相关的临床病理资料进行单因素和多因素分析。结果:NSCLC组织中MAGE-As蛋白的阳性表达率明显高于癌旁组织(P<0.05)。MAGE-As蛋白的表达与患者的临床病理学特征、EGFR扩增和ALK重排均无关联(P>0.05)。MAGE-As蛋白表达阳性的NSCLC患者生存期显著低于其表达阴性患者(P<0.05),而EGFR扩增和ALK重排与患者的整体生存率无关(P>0.05)。多因素分析结果显示,MAGE-As表达、临床分期和淋巴结转移是NSCLC患者较差预后的独立危险因素。结论:MAGE-As蛋白是NSCLC的相关抗原,MAGE-As蛋白可作为NSCLC患者预后不良的预测指标。

肺腺癌组织中黑色素瘤相关抗原-As的表达及其临床意义

目的探讨黑色素瘤相关抗原(melanoma antigen,MAGE)-As在肺腺癌组织中的表达,并分析其与肺腺癌患者临床病理学特征及预后的关系。方法选取住院手术切除的肺腺癌组织及相应癌旁组织标本各80例,应用免疫组织化学法检测各组织中MAGE-As蛋白的表达,同时选取5例前列腺癌患者术后的睾丸组织作为阳性对照。结果肺腺癌组织中MAGE-As蛋白的阳性表达率为46.25%(37/80),而相应的癌旁组织未发现MAGE-As蛋白的表达。MAGE-As蛋白的表达与肺癌患者的性别、年龄、临床分期、组织学分级、肿瘤大小、淋巴转移均无相关性(P>0.05)。Log rank检验显示,MAGE-As蛋白表达阳性的肺腺癌患者的生存期均显著低于其表达阴性的患者(P=0.007)。多因素分析结果显示,MAGE-As表达、年龄和临床分期是肺腺癌患者较差预后的独立危险因素。结论MAGE-As蛋白是肺腺癌的相关抗原。MAGE-As蛋白可能作为肺腺癌预后不良的指标。

黑色素瘤抗原基因-3在直肠癌的表达及意义

目的检测黑色素瘤抗原基因3(MAGE3)在直肠癌中的表达,探索其与直肠癌临床病理的关系及其在直肠癌免疫治疗中的应用价值。方法采用RT PCR法,对33例直肠癌患者的癌组织及其相应距肿瘤边缘(5±1)cm的癌旁组织和手术切缘(乙状结肠端)以及3例直肠息肉标本(无瘤)的MAGE3的表达情况进行检测,并对RT PCR扩增产物中的目的基因片段进行DNA测序验证。结果33例直肠癌组织中,MAGE3基因的表达阳性率为42.42%(14/33),在癌旁组织和手术切缘组织中,MAGE3基因的表达阳性率分别为18.18%(6/33)和15.15%(5/33),3例直肠息肉标本未见MAGE3表达。肿瘤组织MAGE3基因表达阳性率均显著高于癌旁组织和手术切缘组织(P<0.05);而与患者年龄、性别、肿瘤组织学类型、Dukes分期及淋巴结转移无关(P>0.05)。结论基于MAGE3基因在直肠癌中的高表达率,MAGE3表达的蛋白可以作为一种有前途的靶点用于免疫治疗,同时有望成为一种筛查和随访指标。

人黑色素瘤相关抗原基因-12基因疫苗对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长及体内抗体水平的影响

目的:研究人黑色素瘤相关抗原基因-12(MAGE-12)基因疫苗pEGFP-C3-MAGE-12对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长及体内抗体水平的影响。方法:小鼠80只,随机分为4组,每组20只。疫苗组、空质粒组和生理盐水(NS)组接种Lewis肺癌瘤组织制备Lewis肺癌小鼠模型。接种癌组织前14d、7d、0d,疫苗组按每次每只0.2mL(75ng/L)于右下肢内侧肌肉群内注射pEGFP-C3-MAGE-12;空质粒组和NS组每只每次注入pEGFP-C3空质粒或NS;空白对照组小鼠不做任何处理。每3d观察并记录1次肿瘤大小。接种瘤组织后14d每组取10只小鼠,ELISA法检测血清MAGE-12-Ab,余小鼠(每组10只)自然死亡,记录生存时间。结果:3组7d成瘤率均为100%。空质粒组、NS组及疫苗组生存期分别为(27.0±0.3)d,(27.2±0.3)d和(28.9±0.6)d;肿瘤体积分别为(179.775±9.085)mm3,(173.172±9.085)mm3和(144.923±9.528)mm3;疫苗组血清MAGE-12-Ab水平为(711.16±174.78),其他3组未检测到MAGE-12-Ab;与空质粒组、NS组比较,疫苗组生存期短(P<0.05),肿瘤体积小(P<0.05),体内抗体水平高(P<0.05)。结论:MAGE-12基因疫苗具有免疫治疗作用。

人黑色素瘤抗原-3冲击的树突状细胞诱导抗肿瘤免疫应答

目的 :观察经MAGE - 3蛋白抗原冲击的树突状细胞在体外诱导抗肿瘤免疫应答的能力。方法 :用粒-巨噬细胞集落刺激因子和白介素 - 4从人外周血分化、诱导树突状细胞 ,经MAGE - 3蛋白冲击后 ,与T淋巴细胞共培养 7d ,收集T淋巴细胞进行免疫应答及肿瘤细胞杀伤试验。结果 :与MAGE - 3冲击后的树突状细胞共培养的T淋巴细胞在体外能有效地杀伤MAGE - 3阳性的靶细胞。结论 :经MAGE - 3蛋白抗原冲击的树突状细胞 ,在体外能有效提呈抗原 ,激活抗原特异性CTL 。

黑色素瘤相关抗原-A:食管癌免疫治疗新靶点

黑色素瘤相关抗原(melanoma-associated antigen,MAGE)-A亚家族是MAGE基因家族成员,属于癌睾丸抗原,包括MAGE-A1~MAGE-A12,定位于X染色体。MAGE-A在正常组织中几乎不表达,而在多种肿瘤组织中表达,其在食管癌细胞系和食管癌组织均有较高表达。MAGE-A基因编码的抗原肽可由食管癌细胞MHCⅠ分子提呈至细胞毒性T细胞,能够发挥特异性抗肿瘤活性。因此,以MAGE-A抗原为新靶点,对食管癌患者进行免疫治疗有良好的前景。

人血型B抗原模拟多肽、Mip3β双表达重组质粒体外转染人黑色素瘤细胞B16的抗肿瘤效应

目的:将人血型B抗原模拟多肽、Mip3β双表达重组质粒于人黑色素细胞B16转染,检测其对抗肿瘤效应的影响。方法:选用人黑色素瘤细胞株B16,设4个组:A组,转染P1/Fas-Mip3β-pIRES组;B组,转染P1/Fas-pIRES组;C组,转染Mip3β-pIRES组;D组,转染pIRES组。转染方法采用Invitrogen(美国)公司的LipofectamineTM2000脂质体转染的方法(6孔板,8×105孔,2mL体系)。分别流式细胞仪检测细胞凋亡率,进行体外补体介导的细胞杀伤(CDC)实验和抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC)实验,获得细胞活力并进行统计学分析。结果:重组质粒成功转染人黑色素瘤细胞株B16:(1)流式细胞仪检测双表达组组细胞凋亡率87.6%,明显较其他组别高。(2)CDC试验发现最小均值的组合为20g/L组B肽-MIP-pIRES。(3)ADCC试验发现最小均值的组合为40∶1组B肽-MIP-pIRES。结论:人血型B抗原模拟多肽、Mip3β双表达重组质粒能在人黑色素细胞B16转染,诱导肿瘤细胞凋亡,并通过CDC及ADCC效应增强免疫反应。

胃癌组织中黑色素瘤抗原基因-1,3基因的表达及其意义

目的 了解胃癌组织中黑色素瘤抗原基因 (MAGE) 1、3基因的表达 ,并探讨其作为免疫治疗的靶抗原在胃癌中的应用价值。方法 采用RT PCR法检测 36例胃癌患者的肿瘤组织和相应的癌旁“正常”黏膜中MAGE 1、3基因的表达情况 ,并以 37例慢性胃炎患者的胃镜活检组织和 4株胃癌细胞株作为对照。结果 36例胃癌组织中 ,MAGE 1表达阳性率为 72 .2 2 % (2 6 / 36例 ) ,MAGE 3表达阳性率为 6 9.4 4 % (2 5 / 36例 ) ,MAGE 1、3表达双阳性率为 5 2 .78% (19/ 36例 ) ,MAGE 1、3任一基因表达阳性者 32例 ,阳性率为 88.89% (32 / 36例 )。癌旁“正常”黏膜中MAGE 1、3基因表达阳性率分别为 4 7.2 2 % (17/ 36例 )和 4 4 .4 4 % (16 / 36例 ) ,MAGE 1、3表达双阳性率为 30 .5 6 % (11/ 36例 )。 37例慢性胃炎组织中 ,MAGE 1、3表达阳性率分别为 2 9.73% (11/ 37例 )和2 7.0 3% (10 / 37例 ) ,MAGE 1、3表达双阳性率为 8.11% (3/ 37例 )。胃癌组织MAGE 1、3基因表达阳性率均高于癌旁“正常”黏膜组织和慢性胃炎患者。 4株胃癌细胞株MAGE 1、3基因表达均为阳性。结论 基于MAGE 1、3基因在胃癌中的高表达率 ,可利用其作为靶分子进行免疫治疗 。

食管鳞癌组织中黑色素瘤相关抗原D4b的表达及临床意义

目的:探讨黑色素瘤相关抗原D4b(melanoma associated antigens-D4b,MAGE-D4b)在食管鳞癌(ESCC)组织中的表达及其与临床病理因素之间的关系。方法:采用免疫组织化学法检测75例食管鳞癌石蜡标本和36例正常食管黏膜组织中MAGE-D4b蛋白表达情况。结果:ESCC中MAGE-D4b的表达水平明显高于正常食管黏膜中的表达水平(分别为42.7%和16.7%,P<0.01)。MAGE-D4b蛋白的阳性表达水平与食管鳞癌患者的性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位、浸润深度、肿瘤分化及AJCC分期等临床病理因素均无相关性(P>0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,食管鳞癌组织中MAGE-D4b阳性表达者的3年生存率低于阴性表达者(3年生存率:38.7%和69.2%,P=0.013)。单因素分析及Cox多因素分析均提示年龄、MAGED4b的表达及淋巴结转移是有意义的预后因素(P<0.05)。结论:MAGE-D4b蛋白在食管鳞癌组织中高表达,且其阳性表达与患者的3年生存率相关,MAGE-D4b蛋白可能为食管鳞癌的预后判断提供有意义的生物学指标。

黑色素瘤相关抗原A基因在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的:探讨黑色素瘤相关抗原A家族(MAGE-As)在乳腺癌患者外周血及组织中的表达,并分析其与乳腺癌患者临床病理学指标及预后的关系。方法:采用多重巢式PCR法检测106例乳腺癌患者和30例健康志愿者外周血中MAGE-As m RNA的表达水平,并利用限制性内切酶酶切法,鉴定该家族成员MAGE-A1、A2、A3、A4和A6的表达情况。采用免疫组织化学法检测了106例乳腺癌组织蜡块中MAGE-As蛋白的表达情况,同时分析外周血中MAGE-As mRNA表达与其相应肿瘤组织中MAGE-As蛋白的表达的相关性。结果:MAGE-As mRNA在乳腺癌患者外周血中阳性表达率为40.5%(43/106)。MAGE-A1、A2、A3、A4和A6的表达率分别为10.3%(11/106)、19.8%(21/106)、15.1%(16/106)、13.2%(14/106)和5.7%(6/106),MAGE-As表达率的顺序为A2>A3>A4>A1>A6。MAGE-As mRNA阳性表达与患者年龄、肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移相关(P<0.05)。乳腺癌患者外周血中MAGE-As mRNA表达水平与其相应肿瘤组织中蛋白水平的表达呈正相关(r=0.368,P<0.01)。MAGE-As各亚型(MAGE-A1、A2、A3、A4和A6)阳性表达率与乳腺癌患者5年生存率相关(P<0.01);MAGE-As表达及淋巴结转移可作为乳腺癌患者5年生存率的独立预后影响因素(均P<0.01)。结论:MAGE-As可能作为检测乳腺癌患者外周血中循环肿瘤细胞的特异性生物标志物,其表达与乳腺癌患者预后相关。乳腺癌患者外周血中MAGE-As检测可作为监测乳腺癌预后的重要指标。

黑色素瘤相关性抗原E1基因的克隆与测序

目的 克隆表达人黑色素瘤相关性抗原MAGE E1片段 ,以便研究其对神经系统恶性肿瘤的生物学作用。方法 从人胶质瘤细胞系BT 32 5中提取mRNA ,用RT PCR法从中扩增出MAGE E1片段 ,采用DNA重组技术将其克隆于 pGEM TEasy载体中并测序。 结果 RNA体外扩增得到的片段为 4 0 0bp ,PGEM MAGE E1经酶切鉴定正确 ,测序结果与Genebank比较完全相同。

黑色素瘤抗原基因-1,3基因在肺癌组织中的表达及其意义

目的了解肺癌组织中和黑色素瘤抗原基因(MAGE)1,3基因的表达,并探讨其作为免疫治疗的靶抗原在肺癌中的应用价值。方法采用RTPCR法检测72例肺癌患者的肿瘤组织和相应的癌旁“正常”组织中MAGE1,3基因的表达情况。结果72例肺癌组织中,MAGE1表达阳性率为72%(52/72例)MAGE3表达阳性率为69%(50/72例)MAGE1,3表达双阳性率为52%(38/72例),MAGE1,3任一基因表达阳性者64例,阳性率为89%(64/72例)。癌旁"正常"组织中MAGE1,3基因表达阳性率分别为47%(34/72例)和44%(32/72例),MAGE1,3表达双阳性率为31%(22/72例)。肺癌组织MAGE1,3基因表达阳性率均高于癌旁“正常”组织,5株肺细胞株MAGE1,3基因表达均为阳性。结论基于MAGE1,3基因在肺癌中的高表达率,可利用其作为靶分子进行免疫治疗,同时也可作为一种有临床价值的随访指标。

脑胶质瘤患者血清黑色素瘤相关抗原-A3特异性细胞毒性T淋巴细胞免疫反应水平及临床意义

目的探讨脑胶质瘤组织中黑色素瘤相关抗原-A3(MAGE-A3)蛋白表达和甲基化状态,血清中特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)免疫应答及临床意义。方法采用蛋白质印迹(Western blot)法和甲基化特异性聚合酶链反应(MSP-PCR)技术检测56例脑胶质瘤组织和15例正常脑组织中MAGE-A3蛋白表达和基因甲基化状态,采用Gultured酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测患者外周血单个核细胞(PBMC)中MAGE-A3特异性CTL免疫反应,并明确二者之间的关系,以及与患者临床特征的关系。结果56例脑胶质瘤组织中MAGE-A3蛋白的表达量为(2.26±1.09),明显高于15例正常脑组织中的(0.44±0.18)(P﹤0.01)。脑胶质瘤组织中MAGE-A3基因启动子甲基化率为55.36%(31/56),明显低于正常脑组织的100%(15/15)(P﹤0.01)。脑胶质瘤患者血清MAGE-A3特异性CTL免疫应答阳性率为33.93%(19/56),平均反应强度为(2301.70±560.33)SFC/106 PBMC。同一患者脑胶质瘤组织中MAGE-A3基因启动子甲基化状态与MAGE-A3蛋白高表达结果一致性一般(Kappa=0.679,P﹤0.01)。同一患者血清MAGE-A3特异性CTL免疫应答阳性与组织中MAGE-A3蛋白高表达结果一致性一般(Kappa=0.464,P﹤0.01)。脑胶质瘤患者血清中MAGE-A3特异性CTL免疫反应强度与组织中MAGE-A3蛋白表达量呈正相关(r=0.788,P﹤0.01)。不同肿瘤大小及临床分期的脑胶质瘤患者血清MAGE-A3特异性CTL免疫反应频率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。结论脑胶质瘤组织中MAGE-A3基因启动子区DNA去甲基化导致MAGE-A3蛋白表达量升高,进而刺激机体产生MAGE-A3特异性CTL免疫应答反应,参与肿瘤生长和恶性进展。