黑色素瘤缺失因子2通过调控MMP9表达影响滋养细胞的迁移能力

目的:探讨黑色素瘤缺失因子2(AIM2)通过调控基质金属蛋白酶的表达水平,从而影响滋养细胞的迁移参与反复自然流产可能的发生机制。方法:采用Real-Time PCR和Western blot技术检测21例反复自然流产患者胎盘组织中AIM2的表达水平,同时以30例正常胎盘组织为对照组。采用激动剂poly(dA:dT)刺激滋养细胞系HTR-8/SVneo,通过Real-Time PCR和Western Blot检测滋养细胞中AIM2、基质金属蛋白酶2(MMP2)和基质金属蛋白酶9(MMP9)基因和蛋白的表达情况。随后,利用小干扰RNA技术基因沉默AIM2,Western blot、明胶酶谱和细胞划痕实验进一步研究抑制AIM2对MMP9表达和滋养细胞迁移能力的影响。结果:反复自然流产患者胎盘组织中AIM2的表达水平显著低于正常对照组(P<0.001),poly(dA:dT)可显著激活HTR-8/SVneo细胞中AIM2、MMP9 mRNA和蛋白上调表达,而基因沉默AIM2后,滋养细胞MMP9的表达水平、明胶水解能力以及细胞迁移能力均显著降低(P<0.001)。结论:滋养细胞中AIM2的下调表达可引起MMP9表达水平降低,从而导致滋养细胞迁移能力下降,与反复自然流产发生具有较高的相关性。

黑色素瘤缺失因子炎性小体通路相关蛋白在类风湿关节炎与骨关节炎滑膜差异表达分析

目的比较RA与OA滑膜标本黑色素瘤缺失因子(AIM2)炎性小体通路的表达水平差异。方法收集膝关节炎滑膜组织标本,RA 41例与OA 26例,采用辣根过氧酶免疫组织化学染色法,检测AIM2炎性小体通路相关蛋白,包括:AIM2、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶-1(caspase-1)、IL-1β的表达水平差异。并根据阳性程度进行半定量评分(H评分)。H评分结果与临床指标ESR、CRP进行相关性分析。采用t检验分析RA与OA滑膜染色H评分,H评分与ESR、CRP的相关性分析采用Spearman相关性分析。结果RA滑膜组织中AIM2的H评分为(132±7),高于OA滑膜组织中AIM2的H评分(54±8),2组间比较差异有统计学意义(t=7.42,P<0.01);RA滑膜组织中ASC的H评分为(107±9)分,高于OA滑膜组织中ASC的H评分(74±6),2组间比较差异有统计学意义(t=2.36,P<0.05);RA滑膜组织中caspase-1的H评分为(99±5),高于OA滑膜组织中caspase-1的H评分(74±10),2组间比较差异有统计学意义(t=2.15,P<0.05);RA滑膜组织中IL-1β的H评分为(118±11),高于OA滑膜组织中IL-1β的H评分(76±7),2组间比较差异有统计学意义(t=3.30,P<0.05)。AIM2与ESR呈中等强度相关性[r=0.74,P<0.01,95%置信区间(95%CI)(0.38,0.9)]、CRP呈中等强度相关性[r=0.65,P<0.05,95%CI(0.25,0.86)]。ASC与ESR[r=0.5,P<0.05,95%CI(0.16,0.74)],CRP[r=0.42,P<0.05,95%CI(0.05,0.69)]呈中等强度相关性。IL-1β与ESR[r=0.62,P<0.01,95%CI(0.31,0.81)],CRP[r=0.41,P<0.05,95%CI(0.05,0.67)]呈中等强度相关性。caspase-1与ESR、CRP未见明显相关性(P>0.05)。结论RA滑膜中AIM2炎性小体通路相关蛋白包括AIM2、ASC、caspase-1和IL-1β表达高于OA,并且与活动度呈正相关;AIM2炎性小体通路的激活可能是RA活动的机制。

益肠散结颗粒对结肠癌小鼠肠道菌群及免疫功能的调节作用及机制研究

【目的】观察益肠散结颗粒对结肠癌小鼠肠道菌群及免疫功能的调节作用及机制。【方法】将60只小鼠随机分为6组,即正常组,模型组,益肠散结颗粒低、中、高剂量组,过表达黑色素瘤缺失基因2(AIM2)质粒(pcDNA-AIM2)干预组,每组10只。除正常组,其他各组采用氧化偶氮甲烷(AOM)/葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导法制备结肠癌模型。给药后,绘制各组小鼠生存曲线,计算肿瘤体积;酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血清中免疫球蛋白(Ig)G、IgM、白细胞介素(IL)-1β和IL-18水平;流式细胞仪检测外周血T细胞CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)水平;测定脾指数;苏木素-伊红(HE)染色法观察结肠组织病理学变化;16S-rDNA肠道菌群测序检测肠道菌群α多样性及肠道菌群群落结构;蛋白免疫印迹(Wetsern Blot)法检测结肠组织中AIM2、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶1(caspase-1)蛋白表达。【结果】与正常组比较,模型组小鼠生存率,血清中IgG、IgM水平,外周血中CD3^(+)、CD4^(+)水平和CD4^(+)/CD8^(+)比值,结肠组织AIM2、ASC、caspase-1蛋白表达水平显著降低,肿瘤体积,血清中IL-1β、IL-18水平,外周血CD8^(+)水平,脾指数显著增加(均P<0.05),HE染色结果可见结肠癌组织特征表现;与模型组比较,益肠散结颗粒低、中、高剂量组和pcDNA-AIM2组小鼠生存率,血清中IgG、IgM水平,外周血中T细胞CD3^(+)、CD4^(+)水平和CD4^(+)/CD8^(+)比值,结肠组织AIM2、ASC、caspase-1蛋白表达水平显著升高,肿瘤体积,血清中IL-1β、IL-18水平,外周血CD8^(+)水平,脾指数显著降低(均P<0.05),HE染色结果可见结肠癌组织病理改变减轻。与正常组比较,模型组小鼠Observed指数、Chao1指数、Shannon指数,拟杆菌门、变形菌门、杆菌科、毛螺菌属、瘤胃梭菌属菌落相对丰度显著降低,厚壁菌门、放线菌门和Patescibateria、乳杆菌属、臭杆菌属、别样杆菌属、未培养的瘤胃球菌科和拟杆菌属菌落相对丰度升高(P<0.05);与模型组比较,益肠散结颗粒低、中、高剂量组和pcDNA-AIM2组小鼠Observed指数、Chao1指数和Shannon指数,拟杆菌门、变形菌门、杆菌科、毛螺菌属、瘤胃梭菌属菌落相对丰度显著升高,厚壁菌门、放线菌门和Patescibateria、乳杆菌属、臭杆菌属、别样杆菌属、未培养的瘤胃球菌科和拟杆菌属菌落相对丰度降低(均P<0.05)。【结论】益肠散结颗粒可增强结肠癌小鼠自身免疫力,改善肠道菌群结构,其作用机制与激活AIM2炎性小体有关。

非晶状体βγ-晶状体蛋白的研究进展

βγ-晶状体蛋白是主要分布于脊椎动物眼睛晶状体内的水溶性结构蛋白。非晶状体βγ-晶状体蛋白从微生物到高等哺乳动物都有过报道。微生物中发现的非晶状体βγ-晶状体蛋白主要作为环境胁迫应急蛋白,在恶劣环境中发挥对细菌的自我保护作用,如ProteinS。在哺乳动物中,非晶状体βγ-晶状体蛋白被推测能够参与胚胎的皮肤发育与分化调节,具有肿瘤抑制等重要的生理功能,如黑色素瘤缺失蛋白。但是,对于它们的生化特性、生理功能和作用机制知之甚少。本文从蛋白结构、基因起源和生物学功能等方面简要介绍目前非晶状体βγ-晶状体蛋白的相关研究进展。

白化病并发视网膜脱离1例报道

眼皮肤白化病(oculocutaneous albinism,OCA)患者由于虹膜、脉络膜等缺乏黑色素,一旦发生视网膜脱离,诊断和手术干预极其困难。OCA患者眼底黑色素缺失,“红色眼底”缺乏对比度,视网膜组织难以辨认,无论是眼底检查还是手术操作都非常困难。术后视网膜愈合时间长,处理并发症需要非常谨慎。本文对1例白化病患者孔源性视网膜脱离的发病、诊断及治疗过程进行报道。患者经过治疗,视网膜成功复位,随访3个月无复发。因为发生继发性青光眼,视神经损害,预后视力差。本例提示,对于OCA患者的视网膜脱离,尽管通过手术使视网膜成功复位,但预后视力仍不佳,因此需要继续探索更为有效的诊治策略。