黑色素肿瘤抗原基因-1、3在直肠癌肝转移组织的表达

目的探索黑色素肿瘤抗原基因-1、-3(MAGE-1、MAGE-3)在直肠癌肝转移组织中的表达与直肠癌肝转移的相关性。方法采用RT-PCR法,对30例直肠癌肝转移患者的癌组织和30例直肠癌非肝转移患者的癌组织的MAGE-1、MAGE-3的表达情况进行检测,并对RT-PCR扩增产物中的目的基因片段进行DNA测序验证。结果 30例直肠癌肝转移患者癌组织中,MAGE-1基因的表达阳性率为46.67%,MAGE-3基因的表达阳性率为56.67%,MAGE-1、MAGE-3都表达的阳性率为36.67%,至少表达其中一种的阳性率为66.67%;30例直肠癌非肝转移患者癌组织中,MAGE-1基因的表达阳性率为26.67%,MAGE-3基因的表达阳性率为40.00%,MAGE-1、MAGE-3都表达的阳性率为23.33%,至少表达其中一种的阳性率为43.33%。直肠癌肝转移患者癌组织中MAGE-1、MAGE-3基因表达阳性率均显著高于直肠癌非肝转移患者癌组织(P<0.05)。结论 MAGE-1,MAGE-3有望作为一种新的指标用于直肠癌的转移和预后监测。

4-1BBL联合Hsp70-肿瘤抗原肽抑制小鼠黑色素瘤肺转移

背景与目的正调节性共刺激分子表达偏低是肿瘤逃避机体免疫系统攻击的重要原因之一,增加这些分子的表达是促进抗肿瘤免疫的研究热点。小鼠黑色素瘤B16-F1细胞株是弱免疫原性癌细胞株。本研究旨在观察4-1BBL联合Hsp70-抗原肽对小鼠黑色素瘤肺转移的抑制作用,并探讨其机制。方法建立小鼠黑色素瘤肺转移模型,Hsp70-B16抗原肽小鼠皮下免疫,同时从尾静脉注射4-1BBL表达质粒p4-1BBL。于接种后第17天,解剖小鼠取肺组织,解剖显微镜下计数黑色素瘤肺转移结节的数目,并检测小鼠部分免疫学指标及肝、肾功能。结果4-1BBL联合Hsp70-B16抗原肽治疗组小鼠黑色素瘤肺转移结节数降至50±8,明显少于二者单独治疗组的500±80和450±40;联合治疗组小鼠血清IL-2和IFN-γ的分泌水平分别增加了4倍和3倍,与对照组相比均存在显著性差异(P<0.01);单独应用4-1BBL基因或与Hsp70-B16抗原肽联合应用对小鼠肝、肾的功能均无明显影响。结论表达4-1BBL联合应用Hsp70-B16抗原肽主要通过增强外周T淋巴细胞功能活性而有效抑制小鼠黑色素瘤肺转移。

胃癌组织中黑色素瘤抗原基因-1,3基因的表达及其意义

目的 了解胃癌组织中黑色素瘤抗原基因 (MAGE) 1、3基因的表达 ,并探讨其作为免疫治疗的靶抗原在胃癌中的应用价值。方法 采用RT PCR法检测 36例胃癌患者的肿瘤组织和相应的癌旁“正常”黏膜中MAGE 1、3基因的表达情况 ,并以 37例慢性胃炎患者的胃镜活检组织和 4株胃癌细胞株作为对照。结果 36例胃癌组织中 ,MAGE 1表达阳性率为 72 .2 2 % (2 6 / 36例 ) ,MAGE 3表达阳性率为 6 9.4 4 % (2 5 / 36例 ) ,MAGE 1、3表达双阳性率为 5 2 .78% (19/ 36例 ) ,MAGE 1、3任一基因表达阳性者 32例 ,阳性率为 88.89% (32 / 36例 )。癌旁“正常”黏膜中MAGE 1、3基因表达阳性率分别为 4 7.2 2 % (17/ 36例 )和 4 4 .4 4 % (16 / 36例 ) ,MAGE 1、3表达双阳性率为 30 .5 6 % (11/ 36例 )。 37例慢性胃炎组织中 ,MAGE 1、3表达阳性率分别为 2 9.73% (11/ 37例 )和2 7.0 3% (10 / 37例 ) ,MAGE 1、3表达双阳性率为 8.11% (3/ 37例 )。胃癌组织MAGE 1、3基因表达阳性率均高于癌旁“正常”黏膜组织和慢性胃炎患者。 4株胃癌细胞株MAGE 1、3基因表达均为阳性。结论 基于MAGE 1、3基因在胃癌中的高表达率 ,可利用其作为靶分子进行免疫治疗 。

黑色素瘤抗原基因-1,3基因在肺癌组织中的表达及其意义

目的了解肺癌组织中和黑色素瘤抗原基因(MAGE)1,3基因的表达,并探讨其作为免疫治疗的靶抗原在肺癌中的应用价值。方法采用RTPCR法检测72例肺癌患者的肿瘤组织和相应的癌旁“正常”组织中MAGE1,3基因的表达情况。结果72例肺癌组织中,MAGE1表达阳性率为72%(52/72例)MAGE3表达阳性率为69%(50/72例)MAGE1,3表达双阳性率为52%(38/72例),MAGE1,3任一基因表达阳性者64例,阳性率为89%(64/72例)。癌旁"正常"组织中MAGE1,3基因表达阳性率分别为47%(34/72例)和44%(32/72例),MAGE1,3表达双阳性率为31%(22/72例)。肺癌组织MAGE1,3基因表达阳性率均高于癌旁“正常”组织,5株肺细胞株MAGE1,3基因表达均为阳性。结论基于MAGE1,3基因在肺癌中的高表达率,可利用其作为靶分子进行免疫治疗,同时也可作为一种有临床价值的随访指标。

黑色素瘤抗原编码基因家族新成员MAGE-D1的组织表达谱研究

MAGE D1是黑色素瘤抗原编码基因家族 (MAGE)中MAGE D亚家族的新成员 .为了研究该基因的性质及其可能功能 ,采用Northernblot和Dotblot杂交技术研究了其组织表达谱 .结果发现 ,该基因在多种肿瘤组织和正常组织中均广泛表达 .在所检测的 4 8种肿瘤组织中 ,经与对应正常组织进行比较发现 ,该基因在 13种肿瘤组织中的表达显著增高 ,而在 7种肿瘤组织中的表达则显著降低 .进一步分析提示该基因在多种胚胎组织中的表达高于成年组织 .由于MAGE A、 B、 C亚家族均具有在肿瘤组织 睾丸中特异表达的特点 ,而作为MAGE D亚家族成员的MAGE D1并非在肿瘤组织中特异表达 ,提示需要对MAGE基因家族进行深入的功能研究 .

黑色素瘤相关性抗原E1基因的克隆与测序

目的 克隆表达人黑色素瘤相关性抗原MAGE E1片段 ,以便研究其对神经系统恶性肿瘤的生物学作用。方法 从人胶质瘤细胞系BT 32 5中提取mRNA ,用RT PCR法从中扩增出MAGE E1片段 ,采用DNA重组技术将其克隆于 pGEM TEasy载体中并测序。 结果 RNA体外扩增得到的片段为 4 0 0bp ,PGEM MAGE E1经酶切鉴定正确 ,测序结果与Genebank比较完全相同。

黑色素瘤抗原-1基因在胃癌组织中的表达

①目的 检测黑色素瘤抗原 1(MAGE 1)基因在胃癌组织中的表达 ,为应用MAGE 1基因产物对胃癌病人进行特异性抗肿瘤免疫治疗提供理论依据。②方法 用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测 30例胃癌组织及相应癌旁组织中MAGE 1基因的表达 ,并对 1例RT PCR阳性扩增产物进行DNA序列测定。③结果 30例胃癌组织标本中有 14例 (46 .7% )表达MAGE 1基因 ,而相应的癌旁组织均不表达MAGE 1,两组比较差异有显著性 (P =0 .0 0 1) ;DNA序列测定证实 1例RT PCR扩增产物中的目的基因片段为MAGE 1cDNA序列。④结论MAGE 1基因在胃癌组织中有较高表达 ,这使得以该基因编码蛋白作为疫苗用于胃癌的免疫治疗成为可能。

黑色素瘤抗原基因与肿瘤免疫治疗

黑色素瘤抗原基因 (MAGE)表达产物是一种肿瘤特异性抗原 ,只在肿瘤、睾丸和胎盘组织中表达 ,在其他正常组织不表达 ,其发现有助于肿瘤的早期诊断和微小转移灶的检测。细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)通过识别由MAGE基因编码的抗原而杀伤肿瘤细胞。MAGE抗原为基础的免疫治疗在黑色素瘤和某些实体瘤的治疗中取得良好疗效 。

黑色素瘤抗原-1、3基因在肝内胆管细胞癌中的表达及临床意义

目的研究黑色素瘤抗原(MAGE)-1和MAGE-3基因在肝内胆管细胞癌(IHCC)组织中的表达,探讨MAGE-1、MAGE-3基因与IHCC患者临床指标的关系。方法RT-PCR方法检测20例IHCC患者癌组织及相应癌旁组织MAGE-1、MAGE-3基因表达,对全部RT-PCR扩增产物中目的基因片段进行DNA测序以证实其为MAGE-1、MAGE-3基因。分析MAGE-1、MAGE-3基因表达与患者性别、年龄、肿瘤直径、有无包膜、肿瘤形态以及乙肝病毒表面抗原等临床指标的关系。结果20例IHCC患者癌组织中MAGE-1、MAGE-3基因表达的阳性率分别为35%和45%,显著高于癌旁组织(0)(P<0·01)。IHCC患者癌组织中MAGE-1、MAGE-3基因表达的阳性率与患者性别、年龄、肿瘤直径、有无包膜以及乙型肝炎病毒感染等指标均无关(P>0·05);MAGE-3基因表达的阳性率与肿瘤形态有关(P<0·05)。结论MAGE-1、MAGE-3基因在IHCC患者肝癌组织中特异性高表达,MAGE-1、MAGE-3基因可能成为IHCC患者免疫治疗的攻击靶点。

黑色素瘤抗原基因-A在头颈部肿瘤中的研究进展

黑色素瘤抗原基因(MAGE)-A是黑色素瘤抗原基因家族中的成员,其表达产物是一种肿瘤相关抗原,其编码的抗原肽仅在肿瘤组织、睾丸及胎盘组织表达,与人白细胞抗原-Ⅰ类分子结合后被细胞毒性T淋巴细胞识别,从而特异性杀伤肿瘤细胞。本文对MAGE-A在头颈部肿瘤中的研究现状作一综述。

黑色素瘤特异性抗原基因与血液恶性肿瘤

黑色素瘤特异性抗原(Preferentiallyexpressedantigenofmelanoma,PRAME),是第一个被分离出的人类黑色素瘤抗原,也表达于某些血液恶性肿瘤,包括急性髓性白血病(Acutemyeloidleukemia,AML)、多发性骨髓瘤等。近来的研究证实PRAME基因是对白血病微小残留病(Minimalresidualdisease,MDR)监测的一个有效标志,并且PRAME作为特异性靶抗原用于血液恶性肿瘤免疫治疗是目前研究的热点。现就黑色素瘤特异性抗原和血液恶性肿瘤之间的关系以及它在免疫治疗中的作用做一综述。

肿瘤转移相关基因蛋白1在皮肤恶性黑色素瘤患者组织中的表达及临床意义

目的研究肿瘤转移相关基因蛋白1(MTA-1)在皮肤恶性黑色素瘤(CMM)组织中的表达。方法选取某医院2017年3月至2020年3月收治的78例CMM患者,均检测其MTA-1阳性率,并分析CMM组织中MTA-1表达与病理特征的相关性及其影响因素。结果78例CMM患者中MTA-1表达阳性53例,阴性25例;MTA-1表达与CMM患者性别、年龄、瘤体位置无关(P>0.05);MTA-1表达阳性CMM患者Clark分级为Ⅳ或Ⅴ级、淋巴结转移占比高于MTA-1表达阴性患者(P<0.05);经Logistic回归分析显示,Clark分级为Ⅳ或Ⅴ级、淋巴结转移均为CMM组织中MTA-1表达阳性的危险因素(P<0.05)。结论MTA-1表达与CMM患者Clark分级、淋巴结转移密切相关,有助于临床病情的诊断及预后效果的评估。

乳腺癌易感基因联合癌抗原125动态监测在预测晚期上皮性卵巢癌病人铂敏感性及预后中的价值

目的评估胚系乳腺癌易感基因(BRCA)联合动态监测血清癌抗原125(CA125)在晚期上皮性卵巢癌(EOC)病人初治铂敏感性预测及判断预后中的价值。方法收集并回顾性分析2017年1月至2020年1月在蚌埠医学院第一附属医院行满意减瘤术且术后采用TC(紫杉醇+卡铂)/TP(紫杉醇+顺铂)方案静脉化疗的EOC病人151例的临床病理资料。分析胚系BRCA与EOC病人临床病理特征之间的关系;计算曲线下面积(AUC)值等评估胚系BRCA、治疗早期血清CA125水平及两者联合预测晚期EOC病人初治铂敏感性的效能;分析胚系BRCA、治疗早期血清CA125与晚期EOC病人无进展生存期(PFS)的关系;并对所有EOC病人的PFS进行多因素生存分析。结果胚系BRCA致病突变率为28.5%(43/151)。胚系BRCA与确诊年龄、治疗前血清CA125、遗传性乳腺癌和卵巢癌(HBOC)家族史等具有相关性(P<0.05);胚系BRCA、第一周期化疗后血清CA125单独预测晚期EOC病人初治铂敏感性的AUC为0.63、0.76;胚系BRCA与第一周期化疗后血清CA125串联预测晚期EOC病人初治铂敏感性的效能最高,AUC为0.79,95%CI:(0.69,0.90),灵敏度为69.7%,特异度为89.2%;在晚期EOC病人中,BRCA野生型+第一周期化疗后CA125>35 U/mL组病人的PFS生存曲线显著低于BRCA突变型+第一周期化疗后CA125≤35 U/mL组、BRCA突变型+第一周期化疗后CA125>35 U/mL组、BRCA野生型+第一周期化疗后CA125≤35 U/mL组(P=0.013、0.007、0.003)。多因素Cox回归分析显示第一周期化疗后血清CA125水平是EOC病人肿瘤无进展生存时间(PFS)的独立预后因素。结论胚系BRCA联合血清CA125动态监测对晚期EOC病人铂敏感性及预后有一定的预测价值。胚系BRCA野生型且第一周期化疗后血清CA125水平未正常提示EOC病人铂耐药及易复发的风险高。

人X染色体含有一个黑色素瘤抗原基因亚家族

肿瘤相关基因的研究是肿瘤基因形成学说的核心内容。肿瘤相关基因家族的研究则是其中的重点和难点．从４～６月孕龄人胎肝。ＤＮＡ文库中克隆到１个黑色素瘤抗原基因（ＭＡＧＥ－Ｄ１）。随后发现了一个黑色素瘤抗原基因亚家族，称为ＭＡＧＥ－Ｄ亚家族，其成员包括３个直系同源体（人ＭＡＧＥ－Ｄ１、大鼠ＳＮＥＲＧ－１和小鼠ＤＬＸＩＮ－１）和２个旁系同源体（人ＭＡＧＥ－Ｄ和人ＫＩＡＡ１１１４）。该家族的３个人类成员均定位于染色体Ｘｐ１１．２１－ｐ１１．２３，同时具有独特的基因组结构。分子进化树分析表明，该家族与已知ＭＡＧＥ－Ａ、－Ｂ和－Ｃ ３个亚家族之间具有明显的进化上分歧。该亚家族的发现为研究肿瘤相关基因新功能提供了重要线索。

黑色素瘤抗原基因的检测及其在胃癌中的表达

目的:检测并探讨分析黑色素瘤抗原基因(MAGE)在胃癌中的表达及其分布特点。方法:采用RT-PCR技术检测70 例胃癌组织及相应的癌旁正常组织中MAGE表达。结果:70例胃癌组织中MAGE-1、MAGE-3的阳性率分别为28.6%、35.7%,癌旁正常组织均不表达。基因表达与患者的年龄、性别、Hp感染、肿瘤组织学分型无关(P>0.05)。结论:MAGE基因在胃癌组织中特异性表达,可以此作为靶抗原进行肿瘤免疫治疗。

黑色素瘤相关抗原(MAGE)基因在肺癌中的表达及意义

肺癌是常见的恶性肿瘤之一,因目前诊断易忽略微转移灶,造成肺癌预后极差,黑色素瘤相关抗原(melanoma associate dantigens,MAGE)基因作为一种特异性肿瘤抗原基因,在肺癌的发生、发展和治疗中起着重要作用,其研究为肺癌的诊断和治疗提供了新的方向。

结直肠癌中黑色素瘤抗原基因mRNA的表达及意义

目的检测结直肠癌组织中黑色素瘤抗原基因MAGE-1、3和4的表达,探讨其在结直肠癌免疫治疗及作为免疫分子标志物的可行性。方法采用RT-PCR方法,检测65例结直肠癌组织和相应正常粘膜组织中MAGE-1、3和4的mRNA表达,并对PCR扩增产物进行DNA测序验证。结果65例结直肠癌组织标本中,53.8%(35/65)的患者至少表达一种MAGE基因。MAGE-1、3、4mRNA表达率分别是18.5%(12/65)、33.9%(22/65)和20%(13/65),表达任意两种或以上的MAGE基因的标本为27.7%(18/65),而相应正常粘膜组织均未检测到上述基因的表达。DNA测序结果表明RT-PCR产物确为目的基因片段。MAGE基因表达与患者的年龄(除外MAGE-1,P=0.011)、性别、CEA、肿瘤大小和位置、组织分化程度、淋巴结转移、肿瘤浸润深度及TNM分期无关(P>0.05)。结论结直肠癌中MAGE-3可作为肿瘤疫苗的备选基因和免疫学检测的分子标志物,具有作为肿瘤免疫治疗特异性靶位的潜在价值,而MAGE-1,4因表达率低限制了其应用价值。

黑色素瘤抗原基因在乳腺癌中的表达及临床意义

目的:研究乳腺癌组织中黑色素瘤抗原基因(MAGE)的表达情况,并探讨其临床意义。方法:采用荧光定量逆转录多聚酶链反应(fqRT-PCR)检测55例乳腺癌组织中MAGE基因的表达情况。结果:55例乳腺癌组织中有17例(30.9%)表达MAGE-A1或/和MAGE-A3,9例(16.4%)MAGE-A1阳性,13例(23.6%)MAGE-A3阳性。结论:MAGE基因在乳腺癌中较高表达,推测MAGE抗原可以作为乳腺癌治疗的靶点。

稳定表达人MAGE-1基因小鼠黑色素瘤细胞系的建立

目的:构建真核表达载体,并在小鼠黑色素瘤B16细胞中稳定表达。方法:用PCR方法扩增质粒pUC19-MAGE-1中目的基因MAGE-1,连接到真核表达载体pCDNA3.1中,构建真核表达pCDNA3.1-MAGE-1,脂质体法转染小鼠黑色素瘤B16细胞。G418筛选阳性克隆(B16-MAGE-1),用RT-PCR和Western blot检测阳性克隆中mRNA和蛋白质的表达;分别以2×105个B16细胞和B16-MAGE-1接种于C57BL/6小鼠右侧背部皮下,观察B16-MAGE-1细胞的致瘤能力。结果:用PT-PCR与Western bolt分别在B16-MAGE-1细胞中检测到人MAGE-1基因的mNRA和蛋白质的表达,两组共20只小鼠均皮下成瘤,且肿瘤大小没有明显差异。结论:成功构建了真核表达载体pCDNA3.1-MAGE-1,获得了稳定表达人MAGE-1基因的小鼠黑色素瘤B16细胞系,并保持很好的致瘤能力,为研究MAGE家族在肿瘤免疫治疗中的应用奠定了基础。

MAGE-1与人HSP70融合基因真核表达载体的构建及在小鼠黑色素瘤细胞内的表达

目的:构建MAGE-1(melanomaantigen1)与人HSP70(heatshockprotein70)融合基因的真核表达载体PIRES2-EGFP-MAGE-1-HSP70,并观察在小鼠黑色素瘤细胞内的表达,为肿瘤DNA疫苗研究奠定基础。方法:HSP70基因经酶切后连入真核表达载体PIRES2-EGFP,再通过PCR方法扩增MAGE-1基因,测序后插入PIRES2-EGFP-HSP70中HSP70基因的5'端,构建了MAGE-1与人HSP70融合基因表达载体PIRES2-EGFP-MAGE-1-HSP70。结果:扩增了MAGE-1基因,测序结果表明与GenBank公布的序列一致,成功地构建了PIRES2-EGFP-MAGE-1-HSP70真核表达载体。结论:成功地构建MAGE-1与人HSP70融合基因的真核表达载体PIRES2-EGFP-MAGE-1-HSP70,并在小鼠黑色素瘤细胞系稳定表达,为进一步DNA肿瘤疫苗研究提供了实验基础。