岷县黑裘皮羊一场七群保种繁育体系模式运行效果观察

岷县黑裘皮羊是甘肃省特有的绵羊品种,生长在高海拔、空气稀薄、气候多变、枯草期长的自然条件下,由于生长环境和羊群特点,存在着群体规模小、饲养分散、经营效益低下,种群的家系血统来源单一,造成品种退化严重,种质资源存在灭绝的风险。岷县黑裘皮羊保种扩繁关键技术研究项目通过构建“一场七群保种繁育体系模式”进行品种选育扩繁提高,经过3年运行,在种群数量,品种质量等方面取得了明显的成效。本文详述了项目实施的体系构架、运行情况、运行成果、项目措施,并提出了保种建议。希望能进一步推动岷县黑裘皮羊的保护与利用工作。

贵德黑裘皮羊电刺激采精及精液品质分析研究

本试验选择40只生长发育良好的贵德黑裘皮公羊,按电刺激法成功采集到36只公羊精液,对其精液品质进行评定分析。结果表明,7只公羊精液品质不达标,其余29只公羊平均射精量为1.3 mL,精子密度为1.68×10^(9)个/毫升,鲜精精子活力均在65%以上,符合《DB63/T 1436-2015藏羊细管冷冻精液技术规程》标准,经灌装冷冻后,解冻后精子活力均在35%以上。

贵德黑裘皮羊耳成纤维细胞系的建立和生物学特性的研究

以贵德黑裘皮羊耳缘组织为材料，采用组织块贴壁培养法和细胞冷冻技术成功构建了成纤维细胞系，并对培养细胞进行了形态学、生长动力学观察、细胞活力测定、核型分析和微生物检测。结果表明：细胞群体倍增时间（PDT）约为36h，冻存前细胞活力为96．2％，以DMEM／F-12＋20％FBS中添加10％DMSO冻存成纤维细胞，解冻后细胞活力为93．6％，24h后的贴壁率为85％。在传代10次之前，细胞染色体中二倍体（2n=54）占主体，约为82％～90％，细菌、真菌、病毒、支原体检测为阴性。该细胞系的建立，使贵德黑裘皮羊这一国家重要种质资源在细胞水平上保存下来，也为体细胞克隆等研究提供了理想的生物材料。

贵德黑裘皮羊血液指标测定

[目的]为贵德黑裘皮羊的开发、利用及其疾病诊断和防治提供依据。[方法]采集青海省贵南县黑羊场15只成年健康贵德黑裘皮羊的血样,测定其红细胞、白细胞、血小板3分类18个血液指标。[结果]贵德黑裘皮羊的白细胞数为(7.52±2.72)×109个/L,红细胞数为(13.04±2.81)×1012个/L,血红蛋白含量为85.36±27.05g/L,红细胞平均容量为37.22±1.93fl,红细胞平均血红蛋白量13.19±0.96pg,血小板数为(370.67±139.60)×109个/L,淋巴细胞绝对值为(14.11±9.36)×109/L,中间细胞绝对值为(0.79±0.46)×109个/L,中性粒细胞绝对值(0.81±0.71)×109个/L。[结论]该研究为保护贵德黑裘皮羊以及发挥其优良生产性能奠定了基础。

岷县黑裘皮羊群体遗传结构的微卫星DNA多态性分析

为了研究岷县黑裘皮羊的微卫星DNA多态性,了解该品种的遗传多样性,利用15对微卫星引物,以岷县黑裘皮羊为研究对象,通过计算基因频率、多态性信息含量、有效等位基因数和杂合度来评估其品种内的遗传变异。结果表明:在15个座位中,共检测到160个等位基因,每个座位平均10.67个等位基因;座位平均杂合度为0.882 6;平均有效等位基因数为9.248;平均多态性信息含量为0.861 5。说明岷县黑裘皮羊群体存在丰富的遗传多样性,所选微卫星标记可用于绵羊的遗传多样性评估。

黑裘皮羊毛中微量元素含量的测定

利用原子吸收光谱测定法(AAS)对甘肃岷县地区的25只黑裘皮羊毛中的锌、铜、镉、铁、锰、镁、钴7种微量元素含量进行了测定,分析了其变异程度和代表性,以及矿物元素与羊类疾病的关系。结果表明,铜、锰、钴、镉的标准差相对较小,其平均值代表性较强;锌、铁、镁标准差相对较大,其平均值代表性较差。为相关研究提供参考数据,在兽医临床中具有实用价值。

岷县黑裘皮羊遗传资源现状及发展建议

对岷县黑裘皮羊遗传资源现状进行了调查分析,针对保种培植特色产业、产业带动资源保护的可持续发展模式提出了岷县黑裘皮羊产业发展的建议,即政府扶持促进产业发展,畜牧管理部门加强技术指导,产业化运作扩大养殖规模。

岷县黑裘皮羊肾组织成纤维细胞系的建立及其生物学特性研究

采集岷县黑裘皮羊肾组织,用胰蛋白酶热消化法制备原代细胞,通过差速消化和差速贴壁法进行继代培养和细胞纯化,并对复苏细胞的形态、活力、生长曲线、荧光蛋白质粒转染表达、核型以及乳酸脱氢酶同工酶等生物学特性进行了分析。结果显示:原代和传代细胞生长形态均好,群体倍增时间为28.3 h;染色体2 n=54,二倍体占主体(84%)乳酸脱氢酶同工酶电泳图谱有明显特征,未见LDH4、LDH5谱带,与其它羊有明显区别;外源性荧光蛋白转染质粒在该细胞中能进行复制和表达;细菌、真菌、病毒、支原体检测呈阴性。表明该研究已成功建立岷县黑裘皮羊肾组织成纤维细胞系,为在细胞水平上保存岷县黑裘皮羊种质资源以及进行相关研究提供了理想的生物材料。

岷县黑裘皮羊微卫星遗传多样性分析

试验旨在分析岷县黑裘皮羊群体内遗传多样性,筛选出理想的遗传标记,为岷县黑裘皮羊的选育保种提供理论依据。选取144只岷县黑裘皮羊,颈静脉采血并提取DNA,对24对微卫星引物进行PCR扩增,用毛细管电泳技术进行基因分型,计算其等位基因数、等位基因大小及频率、有效等位基因数、杂合度和多态信息含量。结果显示,24个位点共检测到210个等位基因,平均等位基因数为8.75;群体等位基因频率为0.0104~0.7396,等位基因片段大小为97~285 bp;有效等位基因数为1.7581~8.2433个;群体平均观测杂合度为0.4839;平均期望杂合度为0.6959;平均多态信息含量为0.6527。其中MAF70位点等位基因数、有效等位基因数、期望杂合度和多态信息含量最高;OarFCB128位点观测杂合度最高;OarAE129位点等位基因数最少,SRCRSP9位点期望杂合度、多态信息含量最低;OarFCB304位点观测杂合度最低。Hardy-Weinberg平衡分析结果表明,所选位点中有19个处于非平衡状态。结果表明,岷县黑裘皮羊的遗传背景复杂,群体内遗传多样性丰富,可为其遗传资源的评估和选育保种工作提供理论依据。

岷县及贵德黑裘皮羊遗传多样性和系统进化的研究与保护

为加强岷县黑裘皮羊及贵德黑裘皮羊种质资源的合理利用及保护,本研究对6个岷县黑裘皮羊样本以及5个贵德黑裘皮羊样本线粒体DNA的Cytb、COI、ND2、ND4四对线粒体基因序列进行PCR扩增及序列分析。结果表明:岷县黑裘皮羊与贵德黑裘皮羊之间、岷县黑裘皮羊与国内外绵羊品种之间以及贵德黑裘皮羊与国内外绵羊品种之间均存在一定的基因流。其中,岷县黑裘皮羊的样本M1与样本M4受到外来杂交品种基因的冲击较大。基于上述结果,本研究对于岷县及贵德黑裘皮羊提出了保种建议:一是避免岷县及贵德黑裘皮羊与其他绵羊品种产生基因流;二是加强岷县及贵德黑裘皮羊的品种提纯工作。

岷县黑裘皮羊微卫星多态性及与生产性状的关联分析

分析10个微卫星位点在岷县黑裘皮羊群体中的遗传多样性及与生产性状的关联效应,为该品种种质资源的保护、利用和性状改良提供理论依据。选取12、24和36月龄的岷县黑裘皮羊各48只,测定其体重、体高、体长、胸宽、胸深和胸围性状,利用10对微卫星引物,采用PCR扩增和毛细管电泳技术,对岷县黑裘皮羊进行遗传多样性检测,并分析各位点基因型与生产性状的关联效应。10个位点在该群体中共检测到112个等位基因,平均等位基因数为11.2个,平均有效等位基因数为4.4508,平均观测杂合度为0.5218,平均期望杂合度为0.7657,平均多态信息含量为0.7289;且10个位点均与不同月龄岷县黑裘皮羊体重、体高、体长、胸宽、胸深及胸围具有不同程度的关联效应。所选的10个微卫星位点多态性丰富,可用于评估岷县黑裘皮羊的遗传资源。此外,所选位点与生产性状均具有不同程度的关联性,可用于指导岷县黑裘皮羊的性状改良及育种工作。

贵德黑裘皮羊mtDNA COI基因系统进化分析

当前贵德黑裘皮羊品种资源形势较为严峻。试验研究利用所设计的一对引物对5个贵德黑裘皮羊样本线粒体DNA的COI基因片段进行PCR扩增并对产物进行直接测序,基于mtDNA COI基因探究贵德黑裘皮羊种群遗传现状。结果显示,贵德黑裘皮羊与国际上乌珠穆沁羊、滩羊、青海藏羊等18个绵羊品种有较近的亲缘关系,存在基因流。研究表明,对贵德黑裘皮羊种质资源进行保护,应该要避免其与其他绵羊品种之间的基因流。

青海黑裘皮羊的保种与利用

从保护区的自然生态条件、黑藏羊现状和发展角度,分析了当前黑藏羊保护区存在的问题,提出了青海今后黑裘皮羊保护区的发展对策。

22个高繁殖力SNP位点在贵德黑裘皮羊群体中的分布特征

贵德黑裘皮羊是青藏高原藏羊群体中的一种特殊的地方品种资源,以生产黑紫羔皮而闻名。同其他藏羊一样,贵德黑裘皮羊胎产仔数多为单羔,极少见两羔及多羔。为提高其繁殖性能,本研究对其群体繁殖性能相关基因位点进行了研究。实验选取BMPR1B、GDF9、BMP15、ESR1、GnRHR、FSHR、LHR和PRLR等基因中的22个高繁殖力相关基因位点,采用多重单碱基延伸SNP分型技术(SNaPshot)对348只贵德黑裘皮羊群体中以上8个基因的22个SNP位点的多态性进行了检测分析。检测结果发现在该群体中存在以下突变位点:BMPR1B的FecB(g.746A>G)、GDF9的G1(g.260 G>A)、ESR1外显子1的c.106A>T、FSHR外显子10的c.904T>G、LHR外显子11的c.1020C>A和c.1425T>A、PRLR外显子10位点的g.304A>G和g.585C>G,以及BMP15外显子1的c.28-30del缺失,共8个SNP和1个缺失突变,且每个位点的最小等位基因频率分别为0.003、0.014、0.342、0.103、0.227、0.414、0.132、0.092和0.129。其中LHR外显子11的c.1020C>A和c.1425T>A位点呈完全连锁遗传。本研究结果为采用分子标记辅助选育方法提高贵德黑裘皮羊的繁殖力提供了依据。

岷县黑裘皮羊遗传资源保护与开发利用探讨

岷县黑裘皮羊为著名地方优良绵羊品种,又称岷县黑紫羔羊。主要分布于洮河沿岸的岷县、卓尼、临潭、宕昌、漳县、临洮、渭源等地,核心产区为岷县的清水、西江等17个乡镇。

岷县黑裘皮羊体尺与体重的多元线性回归分析

为了有效保护和利用国家二级濒危动物--岷县黑裘皮羊这一地方畜禽品种,试验选取116只3～12月龄的岷县黑裘皮羊为研究对象,其中公羊42只,母羊74只。测量岷县黑裘皮羊的体长、体高、胸围、胸宽、尾宽和尾长等体尺指标,并称量其体重;采用逐步线性回归的方法建立岷县黑裘皮羊体重与体尺的多元线性回归方程。结果表明:各性状之间的表型相关均达到了显著水平(P<0.05);岷县黑裘皮公羊和母羊的多元线性回归方程分别为y=-30.672+0.033x1+0.147x2+0.729x3-0.241x4,y为体重x1,为体高,x2为体长,x3为胸围,x4为胸宽;y=-33.715+0.273x1+0.366x2+0.255x3,y为体重,x1为体高,x2为体长,x3为胸围,回归方程x与y的关系极显著。试验表明,研究所得多元线性方程可以应用于岷县黑裘皮羊良种选育实践。

岷县黑裘皮羊MSTN基因第一外显子的生物信息学分析

采用PCR和测序技术以及生物信息学方法,预测和分析岷县黑裘皮羊MSTN基因第一外显子编码产物的理化特性、高级结构、信号肽、N-糖基化位点及其同源进化关系。结果表明:岷县黑裘皮羊MSTN基因第一外显子编码69个氨基酸,产物为一种不稳定的水溶性蛋白,二级结构为混合型,且以无规则卷曲(Cc)为主,并且不存在N-糖基化位点。从同源进化关系来看,绵羊的MSTN基因与牛的亲缘关系最近。该研究结果可为进一步全面分析和研究岷县黑裘皮羊MSTN基因及其应用研究奠定基础。

岷县黑裘皮羊品种资源现状及发展对策

岷县黑裘皮羊是我省裘皮用地方绵羊品种,原产甘肃岷县,是我国珍贵的地方绵羊品种资源,所产二毛裘皮产品名贵,深受高寒阴湿地区群众的喜爱;据2014年底对岷县中心产区乡(镇)黑裘皮羊饲养现状的调查,近20多年来,岷县黑裘皮羊的数量在不断缩减、质量严重退化、生产性能逐渐下降,将面临着濒危现状,急需加强保护和选育;岷县黑裘皮羊是经过长期进化选育而形成的地方绵羊品种,是宝贵的地方绵羊品种资源,是在当地自然生态条件下形成的优秀绵羊品种,是构成绵羊遗传育种水平和生物技术的物质基础,是保持生产长期持续发展的遗传基础;因此,加强对现有黑裘皮羊品种资源的保护和合理利用具有重大意义;本文针对目前岷县黑裘皮羊品种资源现状,养殖条件,生产性能,提出了存在的问题及发展建议。

岷县黑裘皮羊种群减少和退化的原因及对策

本文在分析岷县黑裘皮羊种群现状及退化原因的基础上,提出了加大种群选育力度、建立活体保护区和保种核心群、建立人工授精站等保护岷县黑裘皮羊的对策,以供参考。