胚胎大鼠脑室下区神经细胞体外培养和向黑质细胞定向诱导的实验研究

本研究目的在于探寻体外培养和定向诱导胚胎大鼠脑室下区(SVZ)神经细胞向黑质细胞分化的新方法.采用成年大鼠黑质匀浆上清液(HSN)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及HSN+ bFGF对取自胎龄期12～16 d(E12～E16)胚胎大鼠SVZ培养的神经细胞(经nestin抗体免疫组化及透射电镜识别)进行体外诱导培养48 h后,以TH单抗免疫组化方法检测其是否向黑质细胞分化;并用荧光分光光度法测定HSN+bFGF诱导后0、24、48 h SVZ神经细胞培养液中多巴胺含量.结果显示:(1)HSN+bFGF诱导组,TH单抗免疫组化出现阳性细胞;(2)HSN+bFGF诱导后0、24、48 h多巴胺含量对比分析:48 h与24 h(P<0.01)、48 h与0 h(P<0.05)相比,多巴胺含量明显增加,而24 h与0 h相比则无增加趋势(P>0.05).以上结果表明:(1)用成年大鼠HSN+ bFGF能定向诱导胚胎大鼠SVZ神经细胞向黑质细胞分化,诱导而成的黑质细胞已具有多巴胺分泌功能,诱导后24～48 h为多巴胺分泌的一个高峰;(2)透射电镜显示胚胎大鼠SVZ神经细胞超微结构是除免疫组化外识别该神经细胞的另一种新方法.