雌激素对去卵巢Parkinson病模型大鼠黑质-纹状体系统多巴胺能神经元的影响

本研究的目的是观察雌激素对多巴胺(DA)能神经元是否具有保护作用。去卵巢(OVX)大鼠分别给予生理盐水(NS)和苯甲酸雌二醇(EB)处理,1周后6OHDA造模,造模2周后灌注取材;利用免疫组化法观察黑质内DA阳性神经元的数量、纹状体中DA能末梢的变化;用TUNEL法观察黑质凋亡细胞的数目并对纹状体中胆碱能神经元进行乙酰胆碱酯酶(AChE)染色,观察其退变情况。结果显示和NS组相比,EB组黑质内DA能神经元数量多、凋亡细胞数少(P<0.05);NS组纹状体内DA能神经元末梢减少60%左右,胆碱能神经元退变明显。结果提示雌激素对DA能神经元具有保护作用,在很大程度上可能与抑制神经元凋亡有关。

可卡因对6-羟基多巴胺所致大脑单侧黑质纹状体系统损伤的大白鼠的旋转行为的影响

本实验观察了Holtzman种系雌性大白鼠34只。以6-OHDA制备单侧大脑黑质纹状体系统损伤的旋转行为模式。在特殊的和自动的球形旋转仪中共进行3次行为观察。以伤侧多巴胺的耗竭率在85％以上,以及具有优势地同侧性的旋转行为的实验动物的实验数据作为分析和讨论的依据。34只雌性大白鼠均符合上述条件。本实验所观察到的盐酸可卡因对动物的旋转行为的影响,其主要结果如下: 可卡因可使实验动物引起刻板的同侧性的旋转行为,其作用迅速。不同剂量的可卡因对动物的旋转行为有不同的影响。 单冷注射可卡因对动物的旋转行为能明显地引起长的至少持续一个星期的促进作用。这就提示,对脑和行为具有持久作用的心理运动的兴奋药,没有必要反复给药。

百草枯对小鼠黑质纹状体多巴胺能系统的影响

目的 探讨百草枯对小鼠黑质纹状体通路的影响。方法 将 39只新生C5 7BL小鼠随机分为 5组 ,分别于出生后第 10、11天每天喂食单剂量MPTP、百草枯和生理盐水。 (1)MPTP 0 .3mg/kg组 ,n =8;(2 )MPTP2 0mg/kg组 ,n =8;(3)百草枯 0 .0 7mg/kg组 ,n =8;(4 )百草枯 0 .36mg/kg组 ,n =8;(5 )等量生理盐水 /kg组 ,n =7。正常饲养至 4月龄观察小鼠自发性行为的变化 ,采用HPLC测定各组小鼠纹状体中多巴胺 (DA)、5 羟色胺 (5 HT)及其代谢产物含量 ,免疫组化方法检测中脑黑质细胞数量的变化。结果 MPTP 2 0mg/kg组及百草枯 0 .36mg/kg组C5 7BL小鼠的自发性活动减少 ,纹状体中DA及其代谢产物含量降低 ,中脑黑质细胞数量减少。结论 新生期的C5 7BL小鼠暴露于大剂量的百草枯可产生类似于帕金森病 (PD)的行为 。

百草枯及其与代森锰、鱼藤酮联合暴露对小鼠黑质纹状体多巴胺能系统的影响

目的探讨百草枯(PQ)及PQ与代森锰(MB)、鱼藤酮(R)对小鼠的联合暴露与帕金森病(PD)病因的关系。方法将48只健康清洁级5周龄昆明种小鼠随机分为生理盐水组(Saline组)、助溶对照组(Z组)、PQ(5 mg/kg)组、PQ(5 mg/kg)+MB(15 mg/kg)组、PQ(5 mg/kg)+R(0.8mg/kg)组、PQ(5 mg/kg)+MB(15 mg/kg)+R(0.8 mg/kg)组,每组8只。采用腹腔注射方式进行染毒,染毒剂量为10 ml/kg,每周染毒2次,连续染毒6 w。采用爬杆试验和开阔试验检测小鼠运动行为的变化;对SNc区域进行组织病理学观察和神经元细胞计数;荧光分光光度法检测纹状体(Caudate putamen,CPu)脑区中DA的含量。结果单独PQ暴露的小鼠没有引起黑质-纹状体(SN-CPu)通路的病理性改变;而PQ与MB或R的联合暴露仅导致SNc区域的病理变化,没有引起CPu中DA含量和行为学上的改变;PQ、MB及R三者的联合暴露可引起SN-CPu通路的改变(P<0.05),但是没有导致小鼠产生临床上类PD症状。结论成年小鼠低剂量亚慢性的PQ暴露不会引起SN-CPu通路的损伤,而和其他环境毒物共同作用下会对SN-CPu的DA能系统产生一定的影响。

大鼠黑质损毁后多巴胺能神经元形态及纹状体c-fos表达的变化

目的:观察毁损黑质后,多巴胺(DA)能神经元形态学变化和纹状体内相关神经元c-fos表达情况,探讨c-fos表达与毁损程度的关系。方法:利用6羟多巴胺(6OHDA)特异毁损大鼠黑质DA能神经元,采用阿朴吗啡(APO)诱导旋转实验观察术后1、7、14和21d行为学变化;利用HE染色、Nissl染色、免疫组织化学方法和电镜,观察各时间点黑质DA能神经元形态学变化和纹状体c-fos表达。结果:毁损侧DA能神经元逐渐减少,超微结构损伤逐渐加重;DA神经元丢失比例≥80%时,纹状体毁损侧c-fos表达上调,APO诱导的旋转实验>7r/min。结论:黑质DA能神经元丢失是毁损大鼠行为改变的病理学基础;cfos的表达与DA能神经元的毁损程度、行为改变有一定的关系。

银杏内酯和银杏叶提取物对纹状体和边缘系统多巴胺及其代谢产物含量的影响

应用高效液相色谱电化学检测方法，发现银杏内酯10mg／kg给大鼠灌胃6d，能够升高纹状体多巴胺（DA）含量和DA与二羟苯乙酸（DOPAC）和高香草酸（HVA）比值，降低边缘系统HVA含量，但升高DA／DOPAC，DA／HVA比值。银杏叶提取物50mg／kg给大鼠灌胃6d，对纹状体和边缘系统DA／HVA比值有升高作用。提示银杏内酯和银杏叶提取物对大鼠纹状体和边缘系统DA代谢有一定抑制作用。

松果菊苷对6-羟基多巴胺急性损伤大鼠纹状体细胞外液中单胺类递质的影响

目的研究松果菊苷(ECH)对6-羟基多巴胺(6-OH-DA)急性损伤大鼠纹状体细胞外液中单胺类递质的影响,以探讨ECH对脑神经保护作用的可能机制。方法30只大鼠随机分为对照组、模型组、ECH高、低剂量组和美多芭(MD)组。除对照组纹状体内注射等量生理盐水外,其余各组注射6-OHDA4μl(3g·L-1)制作大鼠多巴胺(DA)能神经元损伤的急性模型,术后给予各组动物相应药物或生理盐水腹腔注射,每天1次,于d7进行微透析试验,将透析液注入高效液相—电化学检测器(HPLC-ECD)测定各组纹状体细胞外液中DA、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)的含量。结果与对照组相比,模型组动物纹状体细胞外液中DA、DOPAC和HVA含量均明显降低(P<0.01);而ECH高、低剂量组(3.5、7mg.kg-1)和美多芭(MD)组3种物质的含量则高于模型组,两两相比差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论ECH对6-OHDA急性损伤所致大鼠纹状体细胞外液中的DA及其代谢产物含量减少具有较好的预防作用。

雌激素对6-羟基多巴胺损伤黑质多巴胺能神经元的保护作用

本研究以P50听觉诱发电位(P50auditory evoked potential,P50)和酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)阳性细胞计数作为黑质功能和形态学指标,动态追踪研究雌激素对6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)损伤黑质多巴胺(dopamine,DA)能神经元的作用。将大鼠分为4组:(1)正常雌性大鼠对照组;(2)单纯帕金森氏病(Parkinson's disease,PD)模型组;(3)双侧去卵巢PD模型组;(4)去卵巢回补3d雌激素的PD模型组。在大鼠清醒和安静的生理状态下连续14d记录黑质的P50,并检测黑质TH+细胞数目的变化。结果显示:单纯PD模型大鼠黑质P50的T/C值较正常雌鼠降低40.60%(P<0.01),其损伤侧黑质TH+细胞数目减少64.74%(P<0.01);去卵巢PD模型大鼠黑质P50的T/C值较单纯PD模型大鼠进一步降低45.88%(P<0.01),同时其黑质TH+细胞数目值也进一步减少57.26%(P<0.01),表明急性缺乏生理水平性腺雌激素将增大6-OHDA损伤黑质DA能神经元的程度,同时使黑质的感觉门控(sensory gating,SG)功能明显受损;去卵巢后回补3d生理剂量雌激素,可明显改善大鼠黑质的SG功能,提高TH+细胞数量(与去卵巢PD模型大鼠比较,P<0.01),其黑质损伤程度与单纯PD模型大鼠相当。以上结果提示,生理水平的雌激素具有提高黑质DA能神经元对伤害性刺激耐受性的神经保护作用。缺乏性腺源性的雌激素时,及时给予生理剂量的雌激素可以减轻神经毒素6-OHDA对黑质DA能神经元结构和功能的损伤。

热应激对大鼠纹状体多巴胺介导的磷脂酰肌醇信号系统的影响

目的探讨热应激对纹状体多巴胺 (DA)介导的磷脂酰肌醇 (PI)信号转导系统的影响。方法将雄性Wistar大鼠随机分为对照组和热应激组 ,大鼠在加热小仓中受热 ,达到设定肛温 (Tr)时即刻取出 ,取纹状体 ,分别用荧光分光光度法、酸碱滴定法、高压液相法和Fura 2 /AM荧光标记法测DA含量、PLA2活性、PI含量和 [Ca2 +]i。结果 41 .0℃Tr以上时 ,随Tr升高DA含量有持续增高趋势 ,并在 43.0℃Tr时 ,比对照显著增加 ;在 41 .0℃Tr时 ,PLA2 活性较对照显著增强 ,热应激组PI含量显著低于对照 ;在42 .0℃Tr时 ,[Ca2 +]i 比对照显著增高 ,热应激前 1h给予D2R拮抗剂氯氮平 ,则可减弱热应激引起的[Ca2 +]i 的升高 ,并延长肛温到达 42 .0℃的时间。结论热应激可能激动了DA介导的PI信号转导系统 ,[Ca2 +]i 升高可能经D2R介导 ,用D2R拮抗剂 ,可以提高机体耐热性。

“黑质/苍白球-丘脑-皮质”通路5-羟色胺_(1B)受体及多巴胺1型受体在大鼠运动疲劳调控中的作用

目的:通过观察运动大鼠力竭前后"黑质/苍白球-丘脑-皮质"通路各核团5-羟色胺1B受体(5-HT_(1B))及多巴胺1型受体(D_1DR)的蛋白表达水平,探讨"黑质/苍白球-丘脑-皮质"通路调控运动疲劳发生、发展的中枢机制。方法:24只雄性Wistar大鼠,随机分为安静对照组、力竭即刻组、恢复90min组,每组8只。采用免疫组织化学技术对不同组别5-HT_(1B)和D_1DR的蛋白表达水平进行检测。结果:与安静组对照组相比,力竭即刻组、恢复90min组大鼠黑质网状部及苍白球内侧部5-HT_(1B)受体阳性细胞R值及平均光密度(AOD)值均显著减少(P<0.05),D_1DR受体阳性细胞R值及AOD值均显著增加(P<0.05);力竭即刻组、恢复90min组大鼠丘脑腹外侧核5-HT_(1B)受体阳性细胞R值及AOD值均显著增加(P<0.05,P<0.01);在大鼠皮质辅助运动区,力竭即刻组、恢复90min组5-HT_(1B)受体阳性细胞R值及AOD值均显著增加(P<0.05),D_1DR受体阳性细胞R值及AOD值均显著减少(P<0.05)。结论:力竭运动过程中"黑质网状部/苍白球内侧部-丘脑-皮质"各核团5-HT_(1B)及D_1DR受体蛋白表达变化引起神经递质释放量改变,进而影响神经元电活动兴奋性,可能是"黑质网状部/苍白球内侧部-丘脑-皮质"通路调节运动疲劳及运动能力的重要途径之一。

6-羟多巴胺损毁中脑边缘多巴胺能系统抑制药物点燃诱导的大鼠吗啡条件性位置偏爱消退后重建(英文)

目的 :考察中脑边缘多巴胺能系统在小剂量吗啡点燃诱导吗啡觅药行为重建中的作用。方法 :将小剂量儿茶酚胺能神经毒素 6 羟多巴胺微量注射到双侧伏核 (1g·L-1)或腹侧背盖区 (5g·L-1) ,观察其对已消退的吗啡条件性位置偏爱之点燃重建的作用。结果 :6 羟多巴胺微量注射到腹侧背盖区选择性地损毁多巴胺能神经元的胞体 ,或注射到伏核以损毁多巴胺能纤维的末梢 ,均可完全消除小剂量吗啡 (0 .2 5mg·kg-1,s.c.)的点燃效应。结论 :中脑边缘多巴胺能系统功能的完整性是药物点燃导致条件位置偏爱重建的必要条件。

重组α-突触核蛋白对SD大鼠黑质多巴胺能神经元的作用

目的:研究重组人全长α-突触核蛋白对大鼠黑质多巴胺能神经元的毒性作用。方法:原核表达、鉴定α-突触核蛋白;雄性SD大鼠30只,随机分为α-突触核蛋白注射组、六羟多巴注射组及α-突触核蛋白和六羟多巴联合注射组。用立体定位的方法分别右侧黑质注射α-突触核蛋白,六羟多巴及α-突触核蛋白+六羟多巴,左侧黑质注射等量的生理盐水,测定大鼠纹状体多巴胺含量和黑质酪氨酸羟化酶阳性神经元数目。结果:六羟多巴和α-突触核蛋白+六羟多巴注射使注射侧多巴胺分别减少到对照侧的36.98%和21.79%,多巴胺能神经元数减少到30.81%和28.05%。而α-突触核蛋白注射对纹状体多巴胺和黑质多巴胺能神经元数目无显著影响。结论:没有发现重组α-突触核蛋白对大鼠黑质多巴胺能神经元有明显的毒性作用。

雌激素对6-羟基多巴胺诱导的黑质多巴胺神经元损伤作用的影响

目的 研究雌激素对 6 羟基多巴胺所致的黑质多巴胺神经元损伤作用的影响。方法 将 2 0只成年雌性大鼠切除双侧卵巢后分为卵巢切除组 (非替代组 )和卵巢切除 +雌二醇替代组 (替代组 ) ,分别采用酪氨酸羟化酶 (TH)和胶质酸性纤维蛋白 (GFAP)免疫组化法检测两组大鼠黑质神经元及反应性星形胶质细胞的数目 ,采用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测纹状体区肿瘤坏死因子 α(TNF α)的水平。结果 替代组损伤侧黑质TH阳性细胞数较未损伤侧明显减少 (P <0 0 1) ,但较非替代组损伤侧显著增多 (P <0 0 1) ;替代组损伤侧黑质GFAP阳性细胞数较非替代组损伤侧明显减少 (P <0 0 5 ) ;替代组损伤侧纹状体TNF α水平较非替代组损伤侧纹状体TNF α明显降低 (P <0 0 5 )。结论 雌激素可能通过降低TNF α水平 ,减轻炎性反应 ,对黑质多巴胺神经元起保护作用。

乐果对大鼠纹状体和血清中多巴胺-β-羟化酶活性的影响

目的观察乐果染毒对大鼠大脑纹状体和血清中多巴胺-β-羟化酶(dopamine--βhydroxylases,DβH)活性变化的影响,对乐果中毒机制作进一步的探讨。方法 56只雄性SD大鼠随机分为对照组(生理盐水,n=8)和乐果染毒低(38.9mg/kg,n=8)、中(83.7mg/kg,n=8)和高(180mg/kg,n=32)3个剂量组,腹腔一次注射染毒。高剂量组大鼠分别在给药后0.5、2、8、24h断头处死取血制备血清待测,并分离脑组织纹状体,生理盐水匀浆待测。其他组动物在给药后2h断头处死,同样方式取样供分析。利用DβH将酪胺代谢为真蛸胺原理检测DβH活性。另取正常大鼠血清和纹状体匀浆,体外乐果染毒,观察其对DβH抑制状况。结果给予不同剂量乐果对大鼠纹状体和血清DβH活性均有抑制作用,并随剂量增加而加深,存在剂量-效应关系(r=-0.996 7,P<0.05)。乐果高剂量(180mg/kg)染毒后大鼠大脑纹状体和血清中DβH活性与对照组相比,在不同时程观察点差异均有统计学意义(P<0.05),随时程增加抑制也加深,24h内时程效应关系(P<0.05)明确。体外乐果对纹状体和血清DβH活性均有抑制作用,并随剂量增加而加深,有剂量-效应关系(r=-0.891 2,P<0.05),但在高浓度有饱和现象。结论大鼠大脑纹状体和血清中DβH水平有随染毒剂量和时程的增加而抑制加深的趋势,存在剂量效应和时程效应关系。

黑质内注射FeCl_3对大鼠纹状体多巴胺释放量及含量的影响

①目的 探讨黑质 (SN)内注射不同剂量的FeCl3对大鼠纹状体 (CPu)多巴胺 (DA)释放量和含量的影响。②方法 实验用SD大鼠 32只 ,分成 4组 :6只大鼠为正常对照组 ;9只大鼠左侧SN内注射FeCl3溶液 10 μg(Ⅰ组 ) ;8只大鼠左侧SN内注射FeCl3溶液 2 0 μg(Ⅱ组 ) ;9只大鼠左侧SN内注射FeCl3溶液 4 0 μg(Ⅲ组 ) ,3周后采用快速周期伏安法 (FCV)监测纹状体DA的释放量 ,高效液相色谱法 (HPLC)检测纹状体DA含量。③结果 在FeCl3单侧损毁大鼠中 ,损毁侧CPuDA释放量的减少和DA含量的降低与注射FeCl3剂量之间有明显剂量依赖关系 (F =93.78,16 4 .5 1,q=3.5 0～ 2 9.79,P <0 .0 5 )。Ⅲ组损毁侧CPuDA的更新率 [以 (DOPAC +HVA) DA表示 ]明显加快 ,与其他组比较差异有显著性 (F =136 .2 2 ,q =2 2 .32～ 2 2 .72 ,P <0 .0 5 ) ;而Ⅰ ,Ⅱ组变化较小 ,与正常大鼠相比差别无统计学意义 (q=0 .2 5 ,2 .0 4 ,P >0 .0 5 )。④结论 黑质内Fe3+ 含量升高可使CPu内DA释放量和含量均降低 ,铁含量高可能参与帕金森病的病理改变。

阿扑吗啡对6-羟基多巴胺毁损纹状体鼠的神经保护和神经营养作用

目的在6-羟基多巴胺毁损纹状体鼠模型上,探讨阿扑吗啡的神经保护和神经营养作用。方法用6-羟基多巴胺毁损大鼠单侧纹状体,在毁损前15 m in注射阿扑吗啡(10 mg/kg,s.c.),连续注射11 d。毁损2周后,分别进行行为学(苯丙胺引起的旋转数目)、组织学(黑质和腹侧被盖区的酪氨酸羟化酶阳性细胞计数)的观察。结果阿扑吗啡降低苯丙胺引起的向损伤侧旋转的次数,显著降低黑质神经元的损伤(从50%降至30%)。且多巴胺细胞形状可恢复到类似正常组;阿扑吗啡对正常鼠黑质细胞数无影响,但可使腹侧被盖区细胞数显著增高37%。结论阿扑吗啡对6-羟基多巴胺毁损纹状体模型鼠的黑质和腹侧被盖区神经细胞具有显著的保护作用,且改善运动功能。同时,对正常鼠的腹侧被盖区也显示神经营养作用。

微电泳多巴胺对大鼠黑质-尾壳复合体单位放电的影响

形态学证实:脑内存在黑质-新纹状体多巴胺能系统。但对该系统在新纹状体内的作用迄今仍有争议。York等用细胞外记录的方法证明:发自黑质的多巴胺能系统对尾壳复合体的单位放电主要起抑制性调节作用。

环加氧酶-2对帕金森病小鼠黑质多巴胺能神经元的影响

目的和方法 :选用C5 7BL种系环加氧酶 2 (cyclooxygenase 2 ,COX 2 )缺陷小鼠 ,腹腔注射 1 甲基 4 苯基 1,2 ,3,6 四氢吡啶 (MPTP)制备帕金森病小鼠模型 ,用免疫组织化学方法观察COX 2对帕金森病小鼠黑质多巴胺能神经元的影响。结果 :行为学及免疫组织化学观察显示 ,野生型帕金森病小鼠的死亡率明显高于COX 2缺陷杂合子帕金森病小鼠 (P <0 .0 1) ,野生型帕金森病小鼠黑质致密部酪氨酸羟化酶 (tyrosinehydroxylase,TH)免疫反应阳性神经元数目较杂合子帕金森病小鼠明显减少 (P <0 .0 1)。结论 :COX

环加氧酶-2对帕金森病模型小鼠黑质多巴胺能神经元的影响

目的 观察COX 2对帕金森病小鼠黑质多巴胺能神经元的影响。方法 选用C5 7BL种系环加氧酶 2 (Cyclooxygenase 2 ,COX 2 )缺陷小鼠 ,腹腔注射 1 甲基 4 苯基 1,2 ,3,6 四氢吡啶 (MPTP)制备帕金森病小鼠模型 ,用免疫组织化学方法。结果 行为学及免疫组织化学观察显示 ,野生型帕金森病小鼠的死亡率明显高于COX 2缺陷杂合子帕金森病小鼠 (P <0 0 1) ;野生型帕金森病小鼠黑质致密部酪氨酸羟化酶 (Ty rosineHydroxylase ,TH)免疫反应阳性神经元数目较杂合子帕金森病小鼠明显减少 (P <0 0 1)。结论 COX