西黄丸对大鼠乳腺上皮细胞凋亡及ER、PR表达的影响

目的研究西黄丸(xihuang pills)对雌二醇(estradiol,E2)、孕酮(progesterone,P)诱导的大鼠乳腺上皮细胞凋亡和雌、孕激素受体表达的影响,探讨其抗乳腺增生机制。方法采用不同浓度西黄丸含药血清处理E2、P诱导增殖后的大鼠乳腺上皮细胞,CCK-8法检测(24、48、72 h)细胞增殖情况;Annexin V-FITC/PI双染后结合流式细胞术检测细胞凋亡;免疫组化法检测Bax、Bcl-2光密度值;蛋白免疫印迹技术检测雌二醇受体α(ERα)、雌二醇受体β(ERβ)、孕激素受体(PR)蛋白表达量。结果西黄丸含药血清可明显抑制E2、P处理后的大鼠乳腺上皮细胞增殖(P<0.05),并诱导其发生凋亡,影响凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达(P<0.05),并有效抑制雌激素受体ERα、ERβ的表达。结论西黄丸通过调节相关凋亡蛋白诱导乳腺上皮细胞凋亡,并能调节乳腺组织雌孕激素分泌,影响乳腺的增生与复旧,对治疗乳腺增生有重要意义。

牛坏死杆菌对EPH4细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用

为探究牛坏死杆菌对小鼠乳腺上皮细胞系(EPH4细胞)增殖和凋亡的影响,本研究将坏死杆菌(牛A25菌株)以感染复数(MOI)为100感染EPH4细胞,用EdU细胞增殖法检测细胞增殖率,用Hoechst染色以及DNA Ladder检测细胞凋亡,并用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测凋亡基因的mRNA相对表达量变化。EdU检测结果显示,坏死杆菌可抑制EPH4细胞增殖;Hoechst染色以及DNA Ladder检测结果均显示,坏死杆菌可促进细胞凋亡的发生;RT-qPCR结果显示,与对照组相比,坏死杆菌感染EPH4细胞2 h时,促凋亡基因Bax、Bax/Bcl-2的mRNA相对表达量显著上调(P<0.05),感染4 h时,促凋亡基因Caspase-3和Caspase-9的mRNA相对表达量极显著上调(P<0.001),感染6 h时,促凋亡基因AIF的mRNA相对表达量极显著上调(P<0.001)。由此可见,牛坏死杆菌能够抑制EPH4细胞增殖且诱导细胞凋亡,为进一步研究坏死杆菌致病机制提供了相关数据支持。