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大豆异黄酮对大鼠乳腺癌细胞内cAMP/PKA信号途径的影响 被引量:11
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作者 林成招 马海田 +3 位作者 邹思湘 王国杰 陈伟华 韩正康 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期517-522,共6页
本实验研究了大豆异黄酮对SHZ-88大鼠乳腺癌细胞内cAMP/PKA信号途径的影响。实验设3组:空白对照组、50μg/ml大豆黄酮及15μg/ml染料木素组。采用放射免疫测定法(RIA)检测了胞内cAMP的浓度、腺苷酸环化酶(adenylatecyclase,AC)和磷酸二... 本实验研究了大豆异黄酮对SHZ-88大鼠乳腺癌细胞内cAMP/PKA信号途径的影响。实验设3组:空白对照组、50μg/ml大豆黄酮及15μg/ml染料木素组。采用放射免疫测定法(RIA)检测了胞内cAMP的浓度、腺苷酸环化酶(adenylatecyclase,AC)和磷酸二酯酶(phosphodiesterase,PDE)的活性,用(γ-32P)ATP掺入法测定cAMP依赖性PKA的活性,半定量RT-PCR法分析cAMP反应元件结合蛋白(cAMPresponseelementbindingprotein,CREB)mRNA表达的变化。结果表明:在处理后5min,大豆黄酮组和染料木素组细胞的cAMP浓度分别比对照组升高了9.5%和11.0%(P<0.05);10min时,分别比对照组升高31.0%和40.3%(P<0.01)。3组细胞的AC活性在处理时间内没有明显变化。但在处理后5min,大豆黄酮组和染料木素组细胞的PDE活性分别降至对照组的71.8%和71.6%(P<0.05)。处理后20min,大豆黄酮组和染料木素组细胞PKA活性分别上升到对照组的125.8%和122.3%(P<0.05);到40min时仍维持在高水平。大豆黄酮组和染料木素组细胞CREBmRNA的表达量在处理后3h分别比对照组增加31.6%和51.1%(P<0.05);6h后开始下降。这些结果提示,大豆异黄酮能够激活大鼠乳腺癌细胞内cAMP/PKA信号途径;而且是通过抑制磷酸二酯酶的活性,导致胞内cAMP浓度升高而实现的。 展开更多
关键词 大豆黄酮 染料木素 鼠乳腺癌细胞 cAMP/PKA信号途径
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王瓜葫芦素D的提取及其对大鼠乳腺癌细胞增殖、凋亡和体内成瘤作用的影响 被引量:4
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作者 史若诗 姚万军 +3 位作者 郝新才 夏中元 柯昌斌 刘菊英 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第31期20-23,共4页
目的从王瓜中提取葫芦素D,并观察其对大鼠乳腺癌细胞增殖、凋亡和体内成瘤作用的影响。方法采用硅胶柱层析、葡聚糖凝胶柱层析,结合硅胶柱色谱、高效液相色谱法(HPLC)对王瓜果实进行分离纯化,运用现代光谱技术(~1H-NMR)对提取化合物(葫... 目的从王瓜中提取葫芦素D,并观察其对大鼠乳腺癌细胞增殖、凋亡和体内成瘤作用的影响。方法采用硅胶柱层析、葡聚糖凝胶柱层析,结合硅胶柱色谱、高效液相色谱法(HPLC)对王瓜果实进行分离纯化,运用现代光谱技术(~1H-NMR)对提取化合物(葫芦素D)的结构进行鉴定。培养大鼠乳腺癌细胞株Walker256,将细胞分为实验1、2、3组和对照组,分别加入2、4、8μmol/L的葫芦素D和等量培养液。采用Ed U法观察细胞增殖情况,TUNEL法观察凋亡情况。将80只雌性SPF大鼠随机分为Con组、Sham组、IP-L组和IP-H组,各20只。Sham组、IP-L组和IP-H组取Walker256细胞制作大鼠乳腺癌骨转移瘤模型,Con组不制作模型;IP-L组经腹腔注射0.75mg/(kg·d)的葫芦素D,IP-H组经腹腔注射1.5 mg/(kg·d)的葫芦素D,Sham组腹腔注射等量生理盐水,每天1次,连续21 d。观察各组大鼠左侧胫骨组织病理变化,测量胫骨肿瘤瘤体大小,观察毒性反应发生情况。结果从王瓜提取物中分离出1个化合物,鉴定为葫芦素D。对照组及实验1、2、3组细胞增殖抑制率分别为5.32%±4.54%、46.17%±4.87%、57.37%±5.15%、64.61%±5.33%,细胞凋亡率分别为6.24%±4.31%、35.43%±5.09%、44.79%±4.92%、73.19%±4.86%,组间两两相比,P均<0.05。Con组、Sham组、IP-L组、IP-H组大鼠转移瘤代谢体积平均值分别为0、2.1、1.7、1.2 cm^3;IP-L组、IP-H组与Sham组相比,P均<0.05;IP-L组与IP-H组相比,P<0.05。Sham组大鼠胫骨骨组织结构紊乱,多处骨皮质缺损,骨髓腔内可见大量肿瘤细胞,骨小梁破坏明显;IP-L组与IP-H组骨质破坏较Sham组轻,IP-H组可见部分正常骨髓组织。Con组、Sham组、IP-L组、IP-H组分别有0、0、6、13只大鼠死亡;IP-L组、IP-H组死亡率与Con组、Sham组相比,P均<0.05;IP-L组死亡率与IP-H组相比,P<0.05。结论在王瓜中分离得到葫芦素D,其可抑制大鼠乳腺癌细胞株Walker256增殖,诱导其凋亡;葫芦素D对大鼠乳腺癌骨转移瘤有生长抑制作用,但可导致大鼠死亡率增加。 展开更多
关键词 王瓜 葫芦素D 四环三萜 鼠乳腺癌细胞 骨转移瘤 动物实验
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葡萄籽和皮萃取物对小鼠乳腺癌细胞迁移的影响 被引量:2
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作者 梁志强 陈秋宇 孙向军 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第1期239-243,共5页
目的:研究葡萄籽和皮萃取物对乳腺癌细胞迁移的抑制作用,以及对细胞活力的影响。方法:以小鼠乳腺癌细胞4T1为研究对象,四甲基偶氮唑盐(MTT)实验检测细胞增殖活性;细胞迁移实验检测细胞迁移能力;结果:质量浓度为5μg/mL的葡萄籽和皮萃取... 目的:研究葡萄籽和皮萃取物对乳腺癌细胞迁移的抑制作用,以及对细胞活力的影响。方法:以小鼠乳腺癌细胞4T1为研究对象,四甲基偶氮唑盐(MTT)实验检测细胞增殖活性;细胞迁移实验检测细胞迁移能力;结果:质量浓度为5μg/mL的葡萄籽和皮萃取物对乳腺癌细胞的迁移具有明显的抑制作用,该抑制作用与药物质量浓度呈现剂量依赖关系;萃取物对癌细胞的活力有明显的抑制作用,葡萄籽和皮萃取物的半数有效质量浓度(IC50)分别为65.427μg/mL和72.408μg/mL。 展开更多
关键词 葡萄籽和皮萃取物 鼠乳腺癌细胞 细胞活力 细胞迁移
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表达白细胞介素-23基因的小鼠乳腺癌细胞系的建立及其对肿瘤的抑制作用 被引量:1
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作者 刘爽 陈砚凝 +1 位作者 冯永路 单保恩 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1132-1134,共3页
目的利用逆转录病毒作为载体将小鼠白细胞介素(IL)-23基因转染小鼠乳腺癌细胞(MA-891),建立分泌IL-23的肿瘤细胞株(IL-23/MA-891),观察对其生长特点及体内成瘤情况。方法应用逆转录病毒载体(LXSN)将IL-23基因质粒经ψ2(ecotropic)和PA31... 目的利用逆转录病毒作为载体将小鼠白细胞介素(IL)-23基因转染小鼠乳腺癌细胞(MA-891),建立分泌IL-23的肿瘤细胞株(IL-23/MA-891),观察对其生长特点及体内成瘤情况。方法应用逆转录病毒载体(LXSN)将IL-23基因质粒经ψ2(ecotropic)和PA317(amphotropic)两种包装细胞包装后,转染MA-891细胞,经G418筛选后获得表达IL-23的IL-23/MA-891细胞。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定转染细胞mRNA的表达;激光共聚焦显微镜(LSCM)观察其蛋白表达;用ELISA法检测IL-23/MA-891细胞培养上清诱导脾细胞分泌IFN-γ的能力;用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞体外增殖能力;用流式细胞仪检测细胞周期与凋亡。小鼠皮下接种转染IL-23的IL-23/MA-891细胞观察其体内致瘤性的变化,小鼠实体瘤模型研究基因转染对肿瘤的生长抑制作用。结果IL-23转染MA-891细胞后,在mRNA水平水平可获得稳定表达;LSCM可观察到其细胞内表达。IL-23基因转染MA-891细胞后,与对照组比较,其体外增殖能力不受影响,致瘤率也无改变,但IL-23基因转染组肿瘤生长明显受到抑制(P<0.05)。结论成功建立表达小鼠IL-23基因的小鼠乳腺癌细胞系(IL-23/MA-891);在体内,IL-23转染组具有明显的抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 细胞介素23 基因转染 鼠乳腺癌细胞
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逆转录病毒介导的小鼠IL-23基因在鼠高转移性乳腺癌细胞系MA-891中的表达
5
作者 刘爽 冯永路 单保恩 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期219-223,共5页
目的:建立表达小鼠IL-23基因的鼠乳腺癌细胞系IL-23/MA-891,探讨外源性IL-23基因对MA-891细胞生长及其生物学性状的影响。方法:将插入IL-23基因的质粒,应用逆转录病毒载体LXSN经感染ψ2(ecotropic)和PA317(amphotropic)两种包装细胞包装... 目的:建立表达小鼠IL-23基因的鼠乳腺癌细胞系IL-23/MA-891,探讨外源性IL-23基因对MA-891细胞生长及其生物学性状的影响。方法:将插入IL-23基因的质粒,应用逆转录病毒载体LXSN经感染ψ2(ecotropic)和PA317(amphotropic)两种包装细胞包装,经G418筛选获得表达IL-23分子的PA317阳性细胞克隆,用IL-23/PA317培养上清转染MA-891细胞,获得表达IL-23的IL-23/MA-891细胞。分别用RT-PCR法、ELISA法和免疫组化染色法分析IL-23/MA-891细胞表达IL-23的mRNA和蛋白的水平,筛选出高表达IL-23的IL-23/MA-891细胞克隆用于下层研究中;用流式细胞仪检测MA-891细胞中MHCⅠ、MHCⅡ、CD80、CD86以及FAS蛋白的表达、细胞周期变化及细胞凋亡情况;用ELISA法检测IL-23/MA-891细胞培养上清诱导脾细胞分泌IFN-γ的能力,用MTT比色法检测细胞增殖反应。结果:外源性IL-23基因转染的小鼠乳腺癌细胞系IL-23/MA-891,在mRNA水平和蛋白水平均可获得稳定表达;IL-23/MA-891细胞与LXSN/MA-891和MA-891比较,细胞周期及细胞凋亡率无显著性差异(P>0.05),H-2Kb(MHCⅠ类分子)、I-Ab(MHCⅡ类分子)、CD80、CD86以及FAS蛋白的表达水平无显著性差异(P>0.05);IL-23/MA-891细胞的增殖反应与LXSN/MA-891和MA-891细胞相比虽有所降低,但无显著性差异(P>0.05)。然而,IL-23/MA-891细胞的培养上清可明显促进小鼠脾细胞分泌IFN-γ(P<0.01)。结论:建立的稳定表达IL-23的IL-23/MA-891细胞,具有较强的免疫学调节活性,其生物学形状与MA-891和LXSN/MA-891细胞相比较没有明显差异,但可进一步用于肿瘤相关免疫基因治疗的研究。 展开更多
关键词 逆转录病毒载体 IL-23基因 转染 鼠乳腺癌细胞
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西黄丸氯仿提取物对荷瘤大鼠免疫清除功能的影响 被引量:9
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作者 关硕 杨伟 +4 位作者 胡俊霞 马杰 曾常茜 高文斌 梁文波 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 2014年第2期144-148,共5页
目的研究西黄丸氯仿提取物对Walker256荷瘤大鼠免疫清除功能的影响,探讨其抗肿瘤作用机制。方法 70只Wistar大鼠随机选取10只作为空白对照组,剩余60只建立荷瘤大鼠模型后随机分为阴性对照组、香菇多糖对照组、西黄丸氯仿提取物高、中、... 目的研究西黄丸氯仿提取物对Walker256荷瘤大鼠免疫清除功能的影响,探讨其抗肿瘤作用机制。方法 70只Wistar大鼠随机选取10只作为空白对照组,剩余60只建立荷瘤大鼠模型后随机分为阴性对照组、香菇多糖对照组、西黄丸氯仿提取物高、中、低剂量组、西黄丸组。各实验组灌胃给药14 d后腹主动脉采血;ELISA法检测外周血白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)水平的变化;流式细胞术检测外周血黏附分子B7-1、CD3+、CD4+、CD8+T细胞的变化,观察西黄丸氯仿提取物对荷瘤大鼠免疫清除功能的影响。结果与阴性对照组比较,西黄丸氯仿提取物中剂量组大鼠外周血IL-2、IFN-γ含量明显增高,黏附分子B7-1、CD3+、CD4+、CD8+T细胞比例显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);氯仿提取物中、低剂量组荷瘤大鼠外周血中CD3+、CD4+T细胞比例明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论西黄丸氯仿提取物能通过促进T淋巴细胞的增殖与活化增强荷瘤机体的免疫清除功能。 展开更多
关键词 西黄丸氯仿提取物 W256大鼠乳腺癌细胞 荷瘤大 免疫清除
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Effect of Liuweidihuang pill and Jinkuishenqi pill on inhibition of spontaneous breast carcinoma growth in mice 被引量:8
7
作者 Zheng Lixiang Liu Hongning +5 位作者 Gong Yan Meng Xianming Jiang Runde Wang Xiaomin Wang Qiaofeng Wang Yue 《Journal of Traditional Chinese Medicine》 SCIE CAS CSCD 2015年第4期453-459,共7页
OBJECTIVE: To investigate the preventing and treating action of Liuweidihuang pill(LP) and Jinkuishenqi pill(JP) on spontaneous breast carcinoma in mice.METHODS: A model of spontaneous breast carcinoma was derived fro... OBJECTIVE: To investigate the preventing and treating action of Liuweidihuang pill(LP) and Jinkuishenqi pill(JP) on spontaneous breast carcinoma in mice.METHODS: A model of spontaneous breast carcinoma was derived from 11.5-month-old female Kunming breeding mice following the delivery of several litters. The mice were randomly divided into five groups: model control group(C),Liuweidihuang pill high-dose group(LH; 4.6 g·kg1·d1),Liuweidihuang pill low-dose group(LL;2.3 g·kg1·d﹣1),Jinkuishenqi pill high-dose group(JH; 4.6 g·kg﹣1·d1) and Jinkuishenqi pill low-dose group(JL;2.3 g·kg﹣1·d﹣1). Cancer tissue volume was measured by water immersion. Histopathology was analyzed by hematoxylin and eosin staining. Vascular endothelial growth factor(VEGF),extracellular signal-regulated kinase(ERK) and cyclin D1 protein expression in cancer tissue was assayed by western blotting.RESULTS: Compared with the control group,cancer tissue volume and weight were lower in the LP and JP groups,and survival time was longer. The expression of VEGF,ERK and Cyclin D1 were inhibited in the LP and JP groups(P < 0.05),and cell differentiation was increased. Tumor weights and volumes and VEGF,ERK and Cyclin D1 expression in LL or LH were significantly lower than in JL and JH(P < 0.01).CONCLUSION: Both LP and JP could restrain cancer growth and promote cancer cell differentiation;moreover,LP was more effective than JP The likely mechanism of action was via inhibition of VEGF,ERK and cyclin D1. 展开更多
关键词 Breast neoplasms Pathology Vascular endothelial growth factors Extracellular signal-reg-ulated MAP kinases Cyclin D1 Liuweidihuang pill Jinkuishenqi pill
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