芍药苷调节丝氨酸/苏氨酸激酶/鼠双微基因2/p53信号通路对弥漫大B细胞淋巴瘤细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响实验研究

目的:探讨芍药苷(PAE)调节丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)/鼠双微基因2(MDM2)/p53信号通路对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法:以OCI-LY3细胞为研究对象,分别设置PAE低浓度组(15μmol/L PAE)、PAE中浓度组(30μmol/L PAE)、PAE高浓度组(60μmol/L PAE)、PAE高浓度+SC79(AKT激活剂)组(60μmol/L PAE+8μg/ml SC79),同时以未经处理的细胞为对照组。48 h后,分析细胞增殖、克隆形成能力及细胞周期和凋亡变化,检测AKT/MDM2/p53信号通路相关蛋白的表达水平。结果:与对照组比较,PAE低浓度组、PAE中浓度组、PAE高浓度组细胞凋亡率、p53表达、G_(0)/G_(1)期增加,细胞克隆形成数和细胞增殖率,p-AKT/AKT和p-MDM2/MDM2表达水平,以及G_(2)/M、S期降低(均P<0.05)。与PAE高浓度组比较,PAE高浓度+SC79组细胞凋亡率、p53表达、G_(0)/G_(1)期降低,细胞克隆形成数和细胞增殖率,p-AKT/AKT和p-MDM2/MDM2表达水平,以及G_(2)/M、S期增加(均P<0.05)。结论:PAE通过抑制AKT/MDM2上调p53表达,抑制DLBCL细胞增殖、细胞周期进展,诱导其凋亡。

POK红骨髓性致癌因子和鼠双微基因2蛋白在大鼠肺鳞状细胞癌发生中的表达及意义

目的探讨POK红骨髓性致癌因子(Pokemon)和鼠双微基因2(MDM 2)蛋白在大鼠肺鳞状细胞癌发生、发展中的关系及意义。方法 90只大鼠分为实验组75只和对照组15只,通过建立大鼠不同阶段肺组织鳞状细胞癌模型,采用免疫组织化学法检测肺鳞状细胞癌、癌前病变及正常肺组织中Pokemon和MDM 2蛋白的表达。结果 Pokemon和MDM 2蛋白从正常组织到鳞状细胞癌呈现逐渐增高的趋势。对照组的Pokemon和MDM 2蛋白表达与增生组比较差别无统计学意义(P>0.05),但低于非典型增生组及鳞状细胞癌组,差别有统计学意义(P<0.05);鳞状细胞癌组的Pokemon和MDM 2蛋白表达明显高于增生组和非典型增生组,差别有统计学意义(P<0.05)。转移癌组的Pokemon和MDM 2蛋白表达高于非转移癌组,差别有统计学意义(P<0.05)。Pokemon与MDM 2蛋白表达呈正相关(r=0.692,χ2=43.080,P<0.05)。结论 Pokemon和MDM 2蛋白在大鼠正常肺组织到肺鳞状细胞癌组织的演变过程中表达逐渐增高,Pokemon和MDM 2蛋白可能共同参与了肺癌的发生、发展和转移过程。

槲皮素通过调控miR-431-5p/鼠双微基因4信号通路抑制类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞侵袭和促进凋亡

目的 探讨槲皮素对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA-FLSs)侵袭和凋亡的影响以及分子机制。方法 收集27例RA患者和25例非RA患者的滑膜组织。分析miR-431-5p和鼠双微基因4(MDM4) mRNA表达及其蛋白表达。将miR-431-5p抑制剂、miR-NC、MDM4过表达载体和pcDNA 3.1(+)载体转染至RA-FLSs,转染后48 h,在每孔中添加槲皮素,并收集细胞,测定细胞活力、细胞凋亡率和侵袭细胞数。采用双荧光素酶实验分析miR-431-5p和MDM4的结合关系。结果 miR-431-5p在RA滑膜组织和RA-FLSs中表达下调,在槲皮素诱导的RA-FLSs中上调,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-431-5p低表达或者MDM4过表达减弱了槲皮素对RA-FLSs凋亡的促进作用及对侵袭的抑制作用(P<0.05)。miR-431-5p在RA-FLSs中结合MDM4,且miR-431-5p通过MDM4调控RA-FLSs的凋亡和侵袭(P<0.05)。结论 槲皮素通过介导miR-431-5p/MDM4信号通路来调控RA-FLSs侵袭和凋亡,提示槲皮素可能是治疗RA的替代药物。

鼠双微基因2和多肿瘤抑制基因P16在大肠癌中的表达及临床意义

目的探讨鼠双微基因2(murine double mimute 2,MDM2)和多肿瘤抑制基因P16在大肠癌中的表达及临床意义。方法纳入2006年10月2007年3月收治的67例大肠癌患者,另取距肿瘤10cm以上癌旁组织30例、腺瘤组织20例、正常黏膜20例作为对照。采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测肠黏膜MDM2和P16基因蛋白表达。结果 MDM2在大肠癌组织中的阳性表达率为71.6%(48/67),明显高于结肠腺瘤组织、癌旁组织和正常黏膜(P<0.05)。P16在大肠癌组织中的阳性表达率为38.8%(26/67),与结肠腺瘤组织75.0%,癌旁组织83.3%,正常黏膜组织90.0%比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。大肠癌组织中MDM2在不同分化程度中表达差异无统计学意义(P>0.05)。P16在不同分化程度中表达差异有统计学意义(P<0.05),MDM2和P16在不同Dukes分期中,有无淋巴结转移之间表达差异有统计学意义(P<0.05)。MDM2与P16基因蛋白在不同年龄组,不同性别组中,表达差异无统计学意义(P>0.05)。在大肠癌中MDM2蛋白与P16蛋白表达无明显相关性(P>0.05)。结论 MDM2和P16的异常表达与大肠癌的发生、发展有关,联合检测MDM2和P16对大肠癌的临床诊断、治疗和判断预后有实际意义。

磷酸酶与张力蛋白同源物/蛋白激酶B/鼠双微体基因2信号通路相关蛋白表达及与胃癌复发转移的关联

目的探究磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)/蛋白激酶B(AKT)/鼠双微体基因2(MDM2)信号通路相关蛋白表达及与胃癌复发转移的关联。方法回顾性分析2017年6月至2019年6月江苏大学附属医院收治的130例胃癌患者手术切除胃癌组织及癌旁组织。采用GEPIA数据库分析PTEN、p-AKT、p-MDM2在胃癌组织中的表达,比较癌旁组织、胃癌组织PTEN、p-AKT、p-MDM2蛋白表达水平。随访至2022年6月,按照复发转移情况将患者分为复发转移组和无复发转移组。比较两组患者胃癌组织PTEN、p-AKT、p-MDM2蛋白表达水平。采用Logistic回归分析法分析胃癌复发转移的影响因素。结果GEPIA分析TCGA数据库和GTEx项目来源的数据发现,胃癌组织的PTEN水平低于正常组织,p-AKT、p-MDM2水平均高于正常组织(P<0.05)。与癌旁组织比较,胃癌组织PTEN蛋白表达水平降低,p-AKT、p-MDM2蛋白表达水平升高(P<0.05)。与无复发转移组比较,复发转移组胃癌组织PTEN蛋白表达水平降低,p-AKT、p-MDM2蛋白表达水平升高(P<0.05)。对130例患者进行随访,随访时间36~60个月,平均随访时间(49.31±8.35)个月,中位随访时间为46个月。其中复发转移患者59例,无复发转移患者71例。与无复发转移组比较,复发转移组Ⅲ-Ⅳ期、中低分化、浸润深度T 3-T 4构成比升高(P<0.05)。Logistic回归分析显示,TNM分期(OR=2.125,95%CI:1.101~3.150)、分化程度(OR=2.659,95%CI:1.365~3.953)、浸润深度(OR=3.037,95%CI:1.254~4.821)、p-AKT(OR=3.142,95%CI:2.379~3.906)、p-MDM2(OR=6.666,95%CI:3.241~10.091)均是胃癌复发转移的危险因素;PTEN是胃癌复发转移的保护因素(OR=0.394,95%CI:0.014~0.774,P<0.05)。结论胃癌中PTEN/AKT/MDM2信号通路PTEN表达下调,p-AKT、p-MDM2表达上调,与胃癌复发转移密切相关,可能作为候选治疗靶点。

卵巢癌荷瘤裸鼠鼠双微体扩增基因siRNA分子探针显像研究

目的:探究放射性核素^(99)Tc^(m)标记siRNA制备的鼠双微体扩增基因(murine double minute 2,MDM2)分子探针特性及卵巢癌荷瘤裸鼠显像效果。方法:将针对目的基因MDM2设计的siRNA1及对照组NC siRNA与^(99)Tc^(m)通过HYNIC链接,合成分子探针^(99)Tc^(m)-siRNA1、^(99)Tc^(m)-NC siRNA,检测探针的标记率、放射性化学纯度、稳定性、生物活性、细胞摄取率。应用TurboFect体内转染试剂包裹^(99)Tc^(m)-siRNA1、^(99)Tc^(m)-NC siRNA探针,进行高表达MDM2的荷瘤裸鼠显像,测量不同时间点肿瘤/对侧肌肉组织(T/M)的放射性计数比值,并分析探针在小鼠体内分布的情况。结果:^(99)Tc^(m)-siRNA1、^(99)Tc^(m)-NC siRNA标记率分别为(62.17±3.16)%、(61.56±4.08)%,P>0.05(n=3),^(99)Tc^(m)-siRNA1的放化纯度为(94.5±3.8)%,经体外孵育2 h、4 h、6 h后分子探针并未发生明显解离,放化纯度均达到90%以上,稳定性好。经^(99)Tc^(m)-siRNA1探针干扰后MDM2基因mRNA相对表达量为0.34±0.06(n=3),蛋白相对表达量为0.46±0.09(n=3)。体外摄取试验中,SKOV3细胞在不同时间段对探针的摄取率持续上升,在体内显像中,^(99)Tc^(m)-siRNA1探针组1 h、4 h、10 h各时间点的T/M比值分别为3.079±0.568、2.927±0.140、3.465±0.432(n=4),^(99)Tc^(m)-NC siRNA组1 h、4 h、10 h各时间点的T/M比值分别为:1.472±0.272、1.272±0.165、1.804±0.165(n=4),^(99)Tc^(m)-siRNA1不同时间点在肿瘤组织中分布均较高。结论:^(99)Tc^(m)-siRNA1探针的标记方法、递呈方式可行,能够在肿瘤内特异性聚集,可为卵巢癌的诊断提供一种实时无创显像的方式。

鼠双微体基因在肝癌组织中表达的意义

目的:探讨肝癌中鼠双微体基因(MDM2)表达的临床病理意义。方法:免疫组织化学法检测MDM2在172例肝癌组织中的表达,分析MDM2表达与病人临床病理特征的关系,并对临床数据进行分析。log-rank行生存检验,Cox比例风险模型分析MDM2在肝癌组织中预后。siRNA下调Hep G2肝癌细胞MDM2蛋白,观察对HepG2细胞增殖、克隆形成影响。结果:肝癌病人中MDM2阳性率为53.2%,高MDM2表达与病人肝内淋巴结转移、肿瘤级别高、微血管浸润均有一定关系(P<0.05~P<0.01),与病人性别、年龄、乙型肝炎状态、肿瘤大小、包膜完整性、肿瘤是否多发、BCLC分期及肿瘤复发均无明显关系(P>0.05)。单因素分析显示高MDM2表达与病人较差的生存率有一定关系(P<0.05~P<0.01),而Cox比例风险模型分析提示高MDM2表达在肝癌生存预测中提示预后较差(P<0.01)。siRNA下调Hep G2肝癌细胞MDM2蛋白表达可抑制细胞增殖、克隆形成。结论:肝癌病人中MDM2高表达与肿瘤进展有关,MDM2可能与肝癌病人预后较差有关。

鼠双微体基因2与恶性肿瘤相关性的研究进展

鼠双微体基因2（murine doubleminute 2,MDM2）是一种癌基因,MDM2基因的扩增或过度表达与多种恶性肿瘤的发生和发展密切相关,本文主要对MDM2基因与恶性肿瘤的相关性进行综述。1 MDM2基因MDM2是1987年克隆出来的一个高度扩增的基因[1],存在于一个含有双微体（double minutes,DM）的自发转化小鼠Balb/c3T3成纤维细胞系中。

微小RNA-520a-5p通过靶向调控鼠双微体基因影响胶质瘤细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭

目的探讨微小RNA-520a-5p(miR-520a-5p)在胶质瘤发生发展中的作用和机制。方法选取2016年5月至2018年11月在宝鸡高新人民医院治疗的胶质瘤病人肿瘤组织作56例为研究对象。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测56例胶质瘤组织和56例正常脑组织中miR-520a-5p表达水平。体外培养胶质瘤U251细胞,转染miR模拟对照序列(miR-NC)、miR-520a-5p9模拟物(miR-520a-5p mimics)至U251细胞,分别采用四甲基噻唑蓝染色法(MTT)、流式细胞仪、Transwell和蛋白质印迹法检测过表达miR-520a-5p对U251细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭及细胞中鼠双微体基因(MDM2)、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、P21、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达的影响。双萤光素酶报告基因实验验证miR-520a-5p与MDM2靶向关系,蛋白质印迹法检测转染miR-520a-5p mimics、miR-520a-5p抑制剂(anti-miR-520a-5p)对U251细胞中MDM2蛋白表达的影响。共转染miR-520a-5p mimics和MDM2过表达载体(pcD⁃NA3.1-MDM2)至U251细胞,上述相同方法观察过表达MDM2能否逆转过表达miR-520a-5p对U251细胞增殖、迁移和侵袭及相关蛋白表达的影响。结果与正常脑组织相比,胶质瘤组织中miR-520a-5p表达降低(P<0.05)。与转染miR-NC的U251细胞比较,转染miR-520a-5p mimics的U251细胞24 h、48 h和72 h的OD值[(0.36±0.04)比(0.50±0.05)、(0.49±0.05)比(0.95±0.09)、(0.71±0.07)比(1.36±0.13)]、迁移细胞数[(67±6.26)比(144±13.38)]、侵袭细胞数[(59±5.47)比(135±13.12)]均降低(P<0.05),凋亡率[(21.17±2.06)%比(7.82±0.77)%]升高(P<0.05),细胞中cyclinD1、Bcl-2和MMP-2的蛋白表达水平均降低(P<0.05),而P21、Bax和E-cadherin的蛋白表达水平均升高(P<0.05)。miR-520a-5p可与MDM2的3’UTR靶向结合,同时转染miR-520a-5p mimics的U251细胞中MDM2蛋白水平显著低于转染miR-NC的细胞,而转染anti-miR-520a-5p的U251细胞中MDM2的蛋白水平显著高于转染anti-miR-NC的细胞。与共转染miR-520a-5p mimics与pcDNA3.1的U251细胞比较,共转染miR-520a-5p mim⁃ics与pcDNA3.1-MDM2的U251细胞24 h、48 h和72 h的OD值、迁移细胞数、侵袭细胞数均升高(P<0.05),凋亡率降低(P<0.05),细胞中cyclinD1、Bcl-2和MMP-2的蛋白表达水平均升高(P<0.05),而P21、Bax和E-cadherin的蛋白表达水平均降低(P<0.05)。结论miR-520a-5p在胶质瘤组织中表达降低,过表达miR-520a-5p可能通过靶向负调控MDM2抑制胶质瘤U251细胞增殖、迁移和侵袭,并诱导其凋亡。

萎胃康治疗大鼠慢性萎缩性胃炎的Akt-Mdm2-P53机制

目的研究中药萎胃康治疗慢性萎缩性胃炎(CAG)的疗效及其对蛋白激酶B(Akt)-鼠双微基因(Mdm)2-P53信号通路的影响。方法健康雄性SD大鼠60只,按随机数字表分为正常组,模型组,萎胃康高、中、低剂量组,西药组各10只。造模成功后,正常组和模型组灌胃生理盐水,治疗组分别给予不同浓度的萎胃康水溶液及维酶素。治疗30 d后,苏木素-伊红(HE)法染色观察各组胃黏膜组织形态学变化,免疫组化法检测各组胃黏膜Akt、Mdm2、P53蛋白的表达情况。结果与正常组相比,模型组Akt和Mdm2的表达明显增加(P<0.05),P53表达明显降低(P<0.05)。与模型组相比,各治疗组Akt和Mdm2表达明显减少(P<0.05);P53表达明显上调(P<0.05),其中以萎胃康高剂量组变化最为明显。药物治疗后,各治疗组与高剂量组相比差异显著(P<0.05)。结论中药萎胃康对CAG具有治疗作用,其作用机制可能与调控Akt-Mdm2-P53信号通路,抑制Akt和Mdm2蛋白的表达,提高P53蛋白的表达有关。

miR-513a-3p靶向鼠双微体基因2对胃癌细胞增殖迁移侵袭的影响

目的探讨miR-513a-3p靶向鼠双微体基因2(MDM2)对胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法采用脂质体法将miR-NC、miR-513a-3p、anti-miR-NC、anti-miR-513a-3p、si-NC、si-MDM2、miR-513a-3p+pcDNA3.1和miR-513a-3p+pcDNA3.1-MDM2转染至BGC-823细胞中,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-513a-3p的表达水平,采用Western blot检测cyclin D1、MMP-2、p21、E-cadherin和MDM2蛋白的表达水平,四甲基偶氮唑蓝法检测各组胃癌细胞BGC-823的活性,Transwell法检测各组胃癌细胞BGC-823的迁移和侵袭能力,双荧光素酶报告基因检测实验检测miR-513a-3p与MDM2的靶向关系。结果胃癌细胞BGC-823、MGC-803中miR-513a-3p的表达水平分别为0.21±0.02和0.34±0.03,与胃上皮细胞GES-1(0.76±0.08)比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。培养24、48和72 h后,miR-NC组细胞的吸光度(A)值分别为0.57±0.05、1.03±0.10和1.43±0.14,miR-513a-3p组细胞的A值分别为0.36±0.03、0.48±0.05和0.63±0.06,差异均有统计学意义(均P<0.05);miR-NC组细胞的迁移和侵袭数分别为(130±11.80)个和(117±10.60)个,miR-513a-3p组细胞分别为(58±5.64)个和(50±5.13)个,差异均有统计学意义(均P<0.05)。培养24、48和72 h后,si-NC组细胞的A值分别为0.53±0.05、0.95±0.10和1.36±0.14,si-MDM2组细胞的A值分别为0.39±0.04、0.57±0.06和0.80±0.08;si-NC组细胞的迁移和侵袭数分别为(141±12.02)个和(109±10.60)个,si-MDM2组的迁移和侵袭数分别为(66±6.67)个和(61±6.18)个,差异均有统计学意义(均P<0.05)。培养24、48和72 h后,miR-513a-3p+pcDNA3.1组细胞的A值分别为0.34±0.03、0.46±0.05和0.61±0.06,miR-513a-3p+pcDNA3.1-MDM2组细胞的A值分别为0.48±0.05、0.82±0.08和1.17±0.12,差异均有统计学意义(均P<0.05);miR-513a-3p+pcDNA3.1组细胞的迁移和侵袭数分别为(56±5.71)个和(51±5.16)个,miR-513a-3p+pcDNA3.1-MDM2组分别为(113±10.28)个和(104±10.02)个,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miR-513a-3p可抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能与靶向调控MDM2的表达有关,可为胃癌的预防和治疗提供新靶点。

微小RNA-339-5p通过靶向鼠双微体基因调节乳腺癌MCF-7细胞p53肿瘤抑制通路的研究

目的 观察微小RNA（miRNA,miR）-339-5p通过鼠双微体基因（MDM2）对乳腺癌MCF-7细胞p53肿瘤抑制通路调节的效果.方法 建立高通量筛选方法,将hsa-miR-339-5p前体miRNA、hsa-miR-192-5p前体miRNA、hsa-miR-605前体miRNA、小干扰RNA（siRNA） p53和siRNA MDM2转染至MCF-7、HEK293、ACNH和BJ-人端粒酶反转录酶（hTERT）细胞中,5-氟尿嘧啶（5-Fu）水溶液或雷公藤甲素处理转染细胞,Western blot和实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测MDM2表达.结果 转染miR-339-5p后,MCF-7和HCT116细胞系中p53蛋白水平分别升高2.60倍及2.48倍;在无遗传毒性应激情况下,MDM2蛋白水平显著降低.5-Fu处理后,p53蛋白及目标MDM2和p21水平均上调.miR-339-5p与siRNA MDM2可降低MDM2 mRNA水平.MCF-7细胞株中,与对照组比较,MDM2mRNA水平均由于转染siRNA MDM2或miR-339-5p而分别降低至0.48±0.15和0.47±0.08.雷公藤甲素处理后,MDM2 mRNA水平下降更加明显,分别为0.19±0.05和0.23 ±0.10.p53敲除试验则表明miR-339前体水平升高不依赖于p53.MDM2基因3＆#39;端非编码区域（3＆#39;-UTR）包含有能与miR-339-5p结合的功能位点,正是这些位点的存在介导了转录本抑制.结论 miR-339-5p通过靶向MDM2调节乳腺癌MCF-7细胞p53肿瘤抑制通路.

鼠双微体基因2和锌指转录因子Snail在甲状腺癌组织的表达及其临床意义

目的探讨鼠双微体基因2(MDM2)和锌指转录因子Snail在甲状腺癌组织的表达及其临床意义。方法收集2016年3月至2021年2月吉林省肿瘤医院病理确诊的125例甲状腺肿瘤患者的组织标本,其中94例甲状腺癌组织、31例甲状腺瘤组织,同时选择24例正常甲状腺组织为对照组。采用免疫组织化学法检测各组织中MDM2和Snail表达水平,进行χ^(2)检验统计学分析MDM2和Snail的表达与甲状腺癌临床病理学参数之间的关系。结果甲状腺瘤组织、正常甲状腺组织和甲状腺癌组织中MDM2表达率分别为35.48%(11/31)、8.33%(2/24)和82.98%(78/94),两两之间比较差异有统计学意义(χ^(2)=25.645、48.793、5.525,P<0.05);MDM2表达水平与甲状腺癌TNM分期、组织学分级、颈淋巴结转移、包膜浸润明显相关(χ^(2)=7.592、8.516、5.829、5.048,P<0.05),差异有统计学意义。甲状腺瘤组织、正常甲状腺组织和甲状腺癌组织中Snail表达率分别为38.71%(12/31)、12.50%(3/24)和67.02%(63/94),两两之间比较差异有统计学意义(χ^(2)=7.786、23.057、4.685,P<0.05);Snail表达水平与甲状腺癌颈淋巴结转移、TNM分期和包膜浸润明显相关(χ^(2)=5.966、5.457、4.250,P<0.05),差异有统计学意义。结论 MDM2和Snail在甲状腺癌组织过表达,MDM2和Snail的表达与甲状腺癌的发生、发展及预后密切相关。

MDM2-309T/G基因多态性与食管癌易感性关系的Meta分析

目的探讨MDM2基因多态性与食管癌易感性关联性。方法计算机检索PubMed、中国生物医学期刊网、中国知网、万方、维普数据库,收集有关双微体基因2(MDM2)基因多态性与食管癌易感性关系的病例对照研究,提取纳入文献的相关数据进行Meta分析,以病例组与对照组MDM2各种模型的比值比(OR)为效应指标,Egger's检验和Bggerg检验发表偏倚。结果共7篇研究符合纳入标准,累计病例组2 206例,对照组3 327例。荟萃分析结果显示:与野生型纯合子(309T/T)基因型个体相比,变异纯合子(309G/G)与杂合子(309G/T)基因型个体中食管癌风险增高且有统计学意义[GG vs.TT:OR=11.64,95%CI10.17~13.31;GT vs.TT:OR=11.07,95%CI10.02~12.22]。在隐性遗传模型中(GG vs.GT/TT)食管癌风险增高有统计学意义[GG vs.GT/TT:OR=1.17,95%CI 1.03~1.32],但在显性遗传模型中(GG/GT vs.TT)发病率风险增高无统计学意义[GG/GT vs.TT:OR=1.02,95%CI0.94~1.11]。在按地区分组的亚组分析中,Meta分析结果显示:MDM2-309T/G基因多态性与中国人群食管癌风险显著相关[GG vs.TT:OR=10.77,95%CI9.35~I2.42,P=0.000;GTvs.TT:OR=10.11,95%CI9.11~11.23,P=0.000;GG vs.GT/TT:OR=7.03,95%CI6.44~7.67,P=0.000;GG/GT vs.TT:OR=5.86,95%CI5.12~6.69,P=0.000]。结论MDM2-309T/G基因多态性与中国人群食管癌风险显著相关,MDM2-309G/G基因型个体食管癌患病风险可能增高。

上调NDRG1基因表达对肺腺癌细胞增殖与凋亡的影响

目的:建立稳定转染N-myc下游调节基因1(N-myc downstream-regulated gene 1,NDRG1)的A549细胞株,探讨NDRG1对A549细胞增殖与凋亡的影响及其可能的分子机制。方法:经脂质体介导将含有NDRG1的重组表达质粒转染人肺腺癌A549细胞株,采用G418筛选阳性细胞克隆并进行实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质印迹鉴定;qRT-PCR和蛋白质印迹检测阳性细胞克隆P21及鼠双微体基因2(murine doubleminute 2,MDM2)的表达;MTT比色法检测阳性细胞克隆的增殖活性;流式细胞仪检测阳性细胞克隆凋亡率。结果:成功建立高表达NDRG1的阳性A549细胞克隆(N11);N11细胞P21表达及细胞凋亡率显著增高(P<0.05),而MDM2表达及细胞增殖显著降低(P<0.05)。结论:上调A549细胞NDRG1表达后,细胞凋亡增加而细胞增殖降低,其作用机制可能与P21表达增高而MDM2表达降低有关。

RNA干扰生存素基因表达对肺腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的采用RNA干扰技术探讨生存素(survivin)对人肺腺癌细胞增殖及凋亡的影响及其可能的分子机制。方法采用脂质体介导将pGCsi-sh survivin与pGCsi质粒转染人肺腺癌细胞株A549,经G418筛选获得稳定抑制survivin表达的肺腺癌细胞模型;Western blot检测转染细胞survivin、p21、鼠双微体基因2(MDM2)蛋白表达;MTT比色法检测阳性细胞克隆的增殖活性;流式细胞仪检测各组细胞凋亡。结果成功构建稳定抑制survivin表达的肺腺癌细胞模型。与对照组相比,反义组p21表达及细胞凋亡率显著增加,而MDM2表达及细胞增殖显著降低。结论下调A549细胞survivin表达后,细胞增殖降低而细胞凋亡增加,其作用机制与p21表达增加和MDM2降低有关。

miR-758-3p通过靶向作用鼠双微体基因2对胃癌细胞MGC803侵袭和增殖的影响

目的观察微小RNA(miR)-758-3p对鼠双微体基因2(MDM2)表达的调控作用及对胃癌细胞MGC803侵袭和增殖的影响。方法采用生物信息学软件预测MDM2为miR-758-3p靶基因,分别将野生型MDM2基因3’端非翻译区荧光素酶报告基因载体和miR-758-3p靶序列突变型载体及相应的miRNA转染至胃癌细胞MGC803,双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性。采用脂质体转染法将miR-758-3p模拟物转入胃癌细胞MGC803,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测转染效果,Real-time PCR和Western blotting检测转染miR-758-3p后在胃癌细胞中MDM2的表达水平。TransweU实验和CCK.8实验检测细胞侵袭和增殖。采用SPSS 20.0进行统计分析。结果双荧光素酶报告基因检测系统证实miR.758.3p能够靶向调控MDM2基因(P<0.05)。胃癌细胞MGC803转染miR-758-3p模拟物后,miR-758-3p的表达水平(6.68±0.53)明显高于miR-NC组(0.84±0.12),差异有统计学意义(P<0.01)。与miR.NC组比较,转染miR-758-3p模拟物后MGC803细胞中MDM2的表达下调(P<0.05)。miR-NC组和miR-758-3p组侵袭细胞数量分别为(136.00±16.62)个和(79.49±6.42)个,敲减MDM2之后,细胞的侵袭能力明显下降(P<0.05)。CCK-8结果显示,与miR-NC组的增殖比较,转染miR-758-3p组胃癌细胞MGC803的增殖能力明显降低,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-758-3p能够通过靶向调控MDM2而降低胃癌细胞MGCS03的侵袭和增殖能力。

富含脯氨酸蛋白11和鼠双微体基因2在结直肠癌组织的表达及其临床意义

目的:探讨结直肠癌组织中富含脯氨酸蛋白11(PRR11)和鼠双微体基因2(MDM2)的表达及临床意义。方法:选取青岛市中医医院(青岛市海慈医院、青岛大学附属青岛市海慈医院)2019年1月至2022年12月收治的125例结直肠癌组织样本作为研究对象,采用免疫组织化学法检测结直肠癌组织和癌旁组织中PRR11和MDM2的表达,采用χ^(2)检验分析PRR11和MDM2表达与结直肠癌患者病理特征及预后的相关性。结果:结直肠癌组织中PRR11表达率为79.20%(99/125),明显高于癌旁组织[28.80%(36/125)],两者比较差异有统计学意义(χ^(2)=63.913,P<0.01)。结直肠癌组织中MDM2表达率为63.20%(79/125),明显高于癌旁组织[21.60%(27/125)],两者比较差异有统计学意义(χ^(2)=44.287,P<0.01)。PRR11表达水平与结直肠癌患者组织学分化程度、淋巴结转移、TNM分期(TNM stage)、浸润深度明显相关(χ^(2)=4.636、5.900、4.616、5.007,P<0.05),PRR11表达水平与结直肠癌患者性别、年龄、肿瘤部位无相关(χ^(2)=0.024、0.019、0.075,P>0.05)。MDM2表达水平与结直肠癌患者TNM分期、淋巴结转移、浸润深度明显相关(χ^(2)=5.871、4.952、5.566,P<0.05),MDM2表达水平与结直肠癌患者组织学分化程度、性别、年龄、肿瘤部位无相关(χ^(2)=0.021、0.028、0.183、0.005,P>0.05)。结论:结直肠癌组织中PRR11和MDM2呈高表达,PRR11和MDM2表达水平在结直肠癌的发生发展过程中起促进作用,两者表达的检测可为结直肠癌的诊断及预后提供判断依据。

MDM2和p53基因在胶质瘤中表达及与其发生发展关系的荟萃分析

目的系统评价鼠双微染色体2基因（MDM2）基因和抑癌基因p53在脑胶质瘤的表达及其对肿瘤发生发展的影响。方法从国内外数据库检索关于MDM2和p53的表达与胶质瘤的关系的对照研究，符合条件的研究结果采用Revman5．3软件以优势比（OR）和95％置信区间（CI）为效应指标进行Meta分析。结果最终纳入文献10篇，Meta分析的结果显示：胶质瘤和对照组中p53表达的差异（OR=29．0；95％CI=10．63—79．13；P〈0．01）I、胶质瘤和对照组中MDM2表达的差异（OR=24．83；95％CI=8．86—69．63；P〈0．01）、p53表达情况与胶质瘤病理分级关系的表达差异（OR=0．26；95％CI=0．18—0．38；P〈0．01）、MDM2表达情况与胶质瘤病理分级关系的表达差异（OR=0．52；95％CI=0．35—0．77；P〈0．01）均有统计学意义。结论p53与MDM2表达异常与脑胶质瘤发生、发展过程中密切相关。对脑胶质瘤中MDM2、p53表达的检测分析将有利于进一步探讨脑胶质瘤发生发展的分子机制，以期为临床的预防、诊断和治疗提供理论依据。

鼠双微体同源基因2SNP309多态性与亚洲人群消化道肿瘤遗传易感性研究的Meta分析

目的综合评价鼠双微体同源基因2（MDM2）基因启动子区309位点单核苷酸多态（SNP309T〉G）与亚洲人群消化道肿瘤易感性的关系。方法检索中国学术期刊全文数据库（CNgI）、万方数据库、SpringerLink数据库和PubMed数据库，以得到MDM2SNP309T〉G和消化道肿瘤易感性关系的所有病例对照研究文献（2005年至2012年），并用RevMan4．2软件中Meta分析法合并SNP309T〉G与亚洲人群消化道肿瘤易感性关系的OR值，然后对入选文献的所有数据进行敏感性分析和发表偏倚检验。结果共有国内外17篇合格文献纳入研究，累计病例和对照病例分别为5183例和6660例。合并结果显示，携带MDM2SNP309GG基因型者患消化道肿瘤的危险性相对于携带TG＋TT基因型的合并0R值是2．23[95％可信区间（95％CI）=1．73～2．89，P〈0．01]。发表偏倚评估未发现明显的偏倚。结论MDM2SNP309GG基因型可能是亚洲人群消化道肿瘤易感性的危险因素。