三裂鼠尾草素对人γδT细胞杀伤结肠癌SW-620细胞的影响

目的探讨三裂鼠尾草素对人γδT细胞杀伤结肠癌SW-620细胞的影响。方法分离健康人外周血单个核细胞,异戊烯焦磷酸法体外扩增γδT细胞,不同浓度三裂鼠尾草素诱导人γδT细胞72 h,CCK8法检测γδT细胞增殖率,乳酸脱氢酶释放法检测诱导后γδT细胞对SW-620细胞的杀伤活性,流式细胞术检测诱导后γδT细胞穿孔素（PFP）、颗粒酶B（Gra B）、CD107a的表达,Western blot检测诱导后γδT细胞p-ERK1/2的表达情况。结果经培养10 d,γδT细胞比例由4.32%增加至83.63%。三裂鼠尾草素浓度为0.047 7-195 pmol/L时γδT细胞增殖率显著升高（P〈0.05）,浓度为0.191-195 pmol/L时γδT细胞对SW-620细胞的杀伤活性显著增加（P〈0.05）。经三裂鼠尾草素诱导72 h,γδT细胞PFP、Gra B、CD107a的表达显著升高（P〈0.05）。三裂鼠尾草素浓度为0.763-195 pmol/L时γδT细胞p-ERK1/2的表达显著增加（P〈0.05）。结论在一定浓度范围内三裂鼠尾草素能够促进人γδT细胞增殖,增强其对结肠癌细胞SW-620的杀伤活性,其机制可能与PFP、Gra B的表达上调和p-ERK1/2信号通路活化有关。

三裂鼠尾草素在CIK细胞增殖及其胃癌细胞杀伤中的作用

目的分析三裂鼠尾草素在CIK细胞增殖中的作用,探讨其在CIK细胞对胃癌细胞SGC-7901杀伤活性的影响及作用机制。方法分离健康人体外周血单个核细胞,体外多种刺激因子共同诱导为CIK细胞;予不同浓度三裂鼠尾草素分别加入CIK细胞,于24、48、72 h后CCK8法检测CIK细胞增殖率;流式细胞术检测CIK细胞颗粒酶B（Granzyme B,Gra B）、穿孔素（Perforin,PFP）、CD107a的表达;Western blotting检测CIK细胞β-catetin、P-ERK1/2和P-AKT的表达;乳酸脱氢酶释放法检测三裂鼠尾草素对CIK细胞杀胃癌细胞株的活性。结果三裂鼠尾草素诱导48 h后,CIK细胞3.2~102.4 pmol/L浓度组增殖明显（P〈0.05）;25.6 pmol/L浓度组Gra B、PFP、CD107a和β-catetin、P-ERK1/2和P-AKT的表达显著高于对照组（P〈0.05）;且对SGC-7901的杀伤活性较对照组增强（P〈0.05）。结论三裂鼠尾草素在一定浓度范围内能够促进CIK细胞增殖,并增强其对胃癌细胞SGC-7901的杀伤活性,其机制可能与活化β-catetin、P-ERK1/2、P-AKT和上调PFP、Gra B、CD107a的表达有关。

肾茶的化学成分

从肾茶 (Clerodendranthusspicatus)的地上部分共分离了 19个化合物 ,分别被鉴定为 5 羟基 7,3′ ,4′ 三甲氧基黄酮 (1) ,鼠尾草素 (2 ) ,5 羟基 6 ,7,3′ ,4′ 四甲氧基黄酮 (3) ,泽兰黄素 (4 ) ,3′ 羟基 5 ,7,8,4′ 四甲氧基黄酮 (5 ) ,异橙黄酮 (6 ) ,黄芪苷 (7) ,异槲皮素 (8) ,咖啡酸 (9) ,对 -羟基苯甲醛 (10 ) ,对 -羟基苯甲酸 (11) ,原儿茶醛 (12 ) ,原儿茶酸 (13) ,3,4 二羟基苯酰甲醇 (14 ) ,迷迭香酸 (15 ) ,迷迭香酸乙酯 (16 ) ,秦皮乙素(17) ,neoorthosipholA (18)和β 谷甾醇 (19)。迷迭香酸和其它酚性化合物可能与该植物的抗菌、消炎的药效有着直接的关系。

通经草的化学成分研究

目的研究通经草Aleuritopteris argentea的化学成分。方法采用硅胶和Sephadex LH-20柱色谱等方法进行分离纯化,通过理化性质和光谱数据确定化合物的结构。结果分离得到8个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇(Ⅰ)、鼠李柠檬素(Ⅱ)、对映-3-羟基-8(17),13E-半日花二烯-15-羧酸(Ⅲ)、鼠尾草素(Ⅳ)、3,5,4′-三羟基-7,8-二甲氧基黄酮(Ⅴ)、槲皮素(Ⅵ)、滨蓟黄素(Ⅶ)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷(Ⅷ)。结论化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ和Ⅷ均为首次从该植物中分离得到。

基于UHPLC-Q-TOF-MS技术和网络药理学的金莲花抗炎药效物质基础及作用机制研究

目的基于超高效液相色谱–四级杆–飞行时间串联质谱(UHPLC-Q-TOF-MS)法、网络药理学和分子对接验证探讨金莲花抗炎的药效物质及机制。方法根据质谱信息结合对照品、文献和数据库指认金莲花中化学成分信息;借助Swiss ADME平台及查询文献来筛选金莲花潜在活性成分;通过Swiss Target Prediction数据库预测金莲花活性成分的作用靶点;采用OMIM、GeneCards、DrugBank、DisGeNET数据库获取炎症的相关靶点;利用Venn图取药物活性成分靶点与疾病靶点交集后,用STRING数据库构建蛋白质相互作用网络(PPI);用Metascape数据库对核心靶点进行基因本体论(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析;借助Cytoscape软件构建“活性成分–炎症靶点–富集通路”网络;采用分子对接技术进行初步验证。结果从金莲花中共鉴别出38个化合物,包括黄酮类23个,有机酸类10个,香豆素类1个,单糖2个以及苯乙素类2个;网络药理学研究表明,金莲花可能通过鼠尾草素、蓟黄素、香叶木素、阿魏酸、槲皮素和芹菜素等成分,作用于肿瘤坏死因子(TNF)、蛋白激酶B1(Akt1)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)、表皮生长因子受体(EGFR)、酪氨酸蛋白激酶(SRC)等核心靶点,来调节癌症中的途径(pathways in cancer)、血脂与动脉粥样硬化(lipid and atherosclerosis)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/Akt、TNF、白细胞介素-17(IL-17)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、晚期糖基化终末产物-糖基化终末产物受体(AGE-RAGE)、缺氧诱导因子-1(HIF-1)等信号通路,从而发挥抗炎作用;分子对接验证结果表明,金莲花抗炎药效成分与疾病靶点蛋白具有较强的结合活性。结论揭示了金莲花通过多成分、多靶点、多通路联合发挥抗炎作用的机制,为后续临床应用提供科学合理的理论基础。