人鼠嵌合弓形虫免疫球蛋白M重组抗体制备及J链对其聚体形成的影响

目的体外制备人鼠嵌合弓形虫免疫球蛋白M(TOX-IgM)抗体,并验证加入J链对IgM抗体蛋白聚体、效价及稳定性的影响。方法从美国国家生物信息中心数据库获取抗体的重链可变区、轻链可变区以及J链序列,通过DNA重组技术分别将TOX抗体轻重链可变区和人源恒定区进行拼接,构建人鼠嵌合IgM表达载体,转染HEK 293F细胞进行表达。观察J链相关效应。结果J链有利于抗体聚体形成(聚体占比由11.3%提升至75.5%),抗体效价由1∶40提升至1∶160;在37℃热稳定性实验及反复冻融实验中,TOX-IgM(J+)稳定性与TOX-IgM(J-)相当。通过酶联免疫吸附试验鉴定蛋白活性,本实验成功制备人鼠嵌合TOX-IgM抗体,经聚丙烯酰胺凝胶电泳还原显示,重链大小约为75000,轻链大小约为25000,符合预期;效价、稳定性、基质效应均满足需求。结论在连接链J链(15000蛋白)存在下,IgM抗体更易形成五聚体,即5个IgM单体通过二硫键和J链彼此之间相互连接,且经评价效价和稳定性均有了明显提升。

医学寄生虫学

9915725 含有鼠弓形虫的细胞内空泡的结局在其形成时就已确定并取决于进入机制/Mordue D G∥J Immunol.-1997,159(9).-4452～4459

医学寄生虫学

0020176 鼠弓形虫的生长对人类血小板的抑制/Chumpitazi B F∥Clin Exp Immunol.-1998,111(2).-325～333 医科情0020177 克氏锥虫转唾液酸酶的重复区可提高对抗催化区的免疫应答/Buscaglia CA∥J Infect Dis.-1998,177(2).-431～436 医科情0020178 狒狒环孢样微生物的分子特性/Lopez F A∥J Infect Dis.-1999,179(3).-670～676

原虫病

0108623 大肠阿米巴腹壁穿通1例[日]/高桥节∥日临外会志.-2000,61(1).-126～129 冀医情 0108624 CD28/B7相互作用对抵抗大脑处的弓形虫为非必须,但与免疫病理发生有关/Reichmann G∥J Immunol.-1999,163(6).-3354～3362