香烟烟雾提取物对鼠成肌细胞分化的影响的研究

目的:为了探讨COPD患者周围骨骼肌萎缩的可能的分子机制,用香烟烟雾的提取物(CSE)对鼠成肌细胞系(C2C12)进行了体外实验研究。方法:把C2C12细胞按150个/ml的浓度接种在12孔的平底塑料盘里,分为对照组和实验组,24小时后,在实验组的细胞中加入不同浓度(1%,2.5%,3.5%,5%)的CSE.我们把加入CSE的当天记录为第0天(day 0),第二天记录为第1天(day1),依次类推。CSE作用24小时后,用温的杜氏磷酸缓冲液(PBS)洗涤两次后换为10%马血清细胞分化生长液使细胞分化,而对照组更换新鲜的细胞生长液即可。并观察细胞的变化,并在加入CSE后的第0、3、6天,分别检测各组的肌酸激酶(CK)活性,并用激光扫描共焦荧光显微镜技术,观察各组的肌球蛋白重链(MHC)的生成情况。结果:重复相同实验4次后,对各组数值进行单因素方差分析的统计学处理,结果发现1%,2.5%组与对照组比较无显著差异(P>0.05);3.5%实验组与对照组比较day3有显著差异(P<0.05),day6无显著差异(P>0.05);5%实验组与对照组比较,day3,day6均有显著差异(P<0.05);并且激光扫描共焦荧光显徽镜技术观察对照组和实验组(3.5%)的MHC的照片显示CSE对MHC的形成有影响。结论:体外研究显示,CSE对C2C12的分化有影响。