鼠麴草醇提物对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

目的:探讨鼠麴草醇提物对大鼠肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)的保护作用及其机制。方法:将90只成年雄性SD大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、鼠麴草醇提物低(0.4 g·kg^-1)、中(0.8 g·kg^-1)、高(1.6 g·kg^-1)剂量组、阳性对照组(联苯双酯滴丸,150 mg·kg^-1),每组15只。除正常对照组外,其余各组大鼠制备HIRI模型。鼠麴草醇提物组和阳性对照组灌胃给予相应药物,正常对照组和模型组给予等量生理盐水,1次/d,连续给药28 d。检测各组大鼠肝脏组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽硫转移酶(GST)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量及血清中ALT、AST和乳酸脱氢酶(LDH)含量,采用蛋白质印迹法检测肝脏组织中核内核因子κB(NF-κB)p65的表达,HE染色观察肝脏病理变化。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠血清中ALT、AST和LDH水平显著升高(P<0.05);大鼠肝脏组织中GSH-Px、GST和SOD活性显著降低(P<0.05),MDA含量和核内NF-κB p65表达水平显著升高(P<0.05);病理切片显示,肝组织表现出炎性细胞浸润和肝细胞坏死等现象。与模型组比较,鼠麴草醇提物各剂量组大鼠血清中ALT、AST和LDH水平显著降低(P<0.05),大鼠肝脏组织中SOD、GSH-Px和GST活性显著升高(P<0.05),MDA含量和核内NF-κB p65表达水平显著降低(P<0.05),且呈剂量依赖性;肝组织炎性反应和肝细胞坏死等病理变化得到了明显改善。结论:鼠麴草醇提物可以减轻大鼠肝缺血再灌损伤的程度,可能通过增强自由基清除作用来减少NF-κB p65的表达。

鼠曲草醇提物改善慢性阻塞性肺疾病模型大鼠气道炎症的实验研究

目的:研究鼠曲草醇提物对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠气道炎症的影响。方法:采用气管内滴注脂多糖(LPS)加烟熏法建立COPD大鼠模型,造模后第15日开始药物干预,实验结束采用细胞计数法,计算肺泡灌洗液(BALF)细胞中巨噬细胞、中性粒细胞及淋巴细胞的比例;采用ELISA法测定BALF中IL-8和TNF-α浓度;同时采用RT-PCR法检测各组大鼠肺组织中IL-8、TNF-α的表达水平。结果:与模型组相比,鼠曲草醇提物组明显减少大鼠BALF中白细胞、巨噬细胞和中性粒细胞百分比(P<0.05),而淋巴细胞百分比无显著性差异。与模型组相比,鼠曲草醇提物组明显降低大鼠BALF中IL-8、TNF-α浓度(P<0.05),同时鼠曲草醇提物组能够显著下调肺组织中IL-8、TNF-αmRNA的表达水平(P<0.05)。结论:鼠曲草醇提组可降低COPD大鼠BALF中白细胞、巨噬细胞和中性粒细胞百分比,降低COPD大鼠BALF中细胞因子IL-8和TNF-α的浓度及mRNA表达水平。

基于斑马鱼模型与分子对接的鼠曲草醇提物抗病毒性肺炎作用研究

目的:探讨鼠曲草醇提物抗斑马鱼病毒性肺炎模型的作用,并借助分子对接预测其质量控制成分与其炎症靶点的结合情况。方法:制备鼠曲草醇提取物,采用高效液相色谱法检测主要的9种成分(原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、1,3-O-二咖啡酰基奎尼酸、金丝桃苷、异毛蕊花糖苷、芹菜素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素、芹菜素)。通过鱼鳔注射聚肌胞苷酸,建立斑马鱼病毒性肺炎模型;实验设置正常对照组、模型对照组、阳性对照组(吲哚美辛)、鼠曲草醇提物低、中、高剂量组(125、250、500μg·mL^(-1)),每组30尾,在测定最大耐受浓度(MTC)的基础上,荧光显微镜下分析统计各组鱼鳔中性粒细胞数量和巨噬细胞的荧光强度及鱼鳔组织病理情况,采用q-PCR检测各组斑马鱼炎症因子IL-1β和TNF-α基因的表达情况。采用AutoDock 1.5.7版进行分子对接,并应用PyMOL软件对结果进行可视化示例,得到分子对接模式图。结果:建立的高效液相多指标测定鼠曲草醇提物的方法稳定、可行;鼠曲草醇提物高剂量组能显著减少鱼鳔中性粒细胞数量;鼠曲草醇提物中、高剂量组,能降低鱼鳔巨噬细胞荧光强度;鱼鳔组织病理结果显示,鼠曲草醇提取物中、高剂量组斑马鱼炎性浸润减少,但低剂量组炎性浸润减少不明显;q-PCR结果显示,鼠曲草醇提物能够下调IL-1β和TNF-α基因相对表达量,特别是高剂量组显著下调IL-1β基因的表达。分子对接结果显示,绿原酸、芹菜素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷和槲皮素与关键靶点IL-1β具有较好的结合能力;1,3-O-二咖啡酰基奎尼酸、芹菜素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷和芹菜素与关键靶点TNF-α具有较好的结合能力。结论:鼠曲草醇提物具有抗病毒性肺炎的作用,可能因其部分成分能够与炎症关键靶点IL-1β和TNF-α紧密结合,竞争性抑制炎症反应,通过减少鱼鳔中性粒细胞和巨噬细胞数量、减少炎性浸润和下调IL-1β和TNF-α基因表达发挥作用。