鼠李糖乳杆菌(ATTC53103)高密度生产工艺研究

以鼠李糖乳杆菌(ATTC 53103)为出发菌株,通过单因素试验和正交实验筛选优化基础培养基:12%脱脂乳粉、10%的葡萄糖、1%的酵母粉、2%的酪蛋白水解物、0.15%的吐温80。10 L自动发酵罐补料高密度培养条件为:葡萄糖浓度低于4 g.L-1时补加葡萄糖,使罐内葡萄糖浓度稳定在4～6 g.L-1之间,在此条件下发酵20 h,最大活菌数可达到3.75×1010cfu.mL-1,而发酵罐分批培养最大活菌浓度仅为3.8×109cfu.mL-1,前者比后者提高近10倍。

鼠李糖乳杆菌(ATTC 53103)产细菌素的研究

试验对鼠李糖乳杆菌LGG无细胞发酵上清液进行了系统研究,通过中和以及酶解的方法,排除了其中的有机酸以及过氧化氢的干扰,证明了LGG无细胞发酵上清液可以产生细菌素,并研究了LGG无细胞发酵上清液中细菌素的部分特性。该细菌素抑菌广谱,可抑制多种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,对热(121℃,30min)和pH值(pH2.0～10.0)稳定,可被多种蛋白酶,如胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、α-糜蛋白酶和蛋白酶K失活,不能被过氧化氢酶失活。

鼠李糖乳杆菌(ATTC53103)产细菌素的研究

对鼠李糖乳杆菌(ATTC53103)无细胞发酵上清液进行了系统的研究,通过中和以及酶解的方法,排除了其中的有机酸以及过氧化氢的干扰,证明了鼠李糖乳杆菌(ATTC53103)无细胞发酵上清液可以产生细菌素,并研究了该无细胞发酵上清液中细菌素的部分特性。该细菌素抑菌广谱,可抑制多种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,对热(121℃,30min)和pH值(pH2.010.0)稳定,可被多种蛋白酶如胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、α-糜蛋白酶和蛋白酶K失活,不能被过氧化氢酶失活。

LGG预防油/脂致小鼠肥胖及调控肠道菌群作用

选用玉米油(油)与猪油(脂)探究不同油脂导致BALB/c小鼠肥胖的差异,分析鼠李糖乳杆菌(ATCC 53103,LGG)对肥胖的预防及肠道菌群的调控作用。50只5周龄BALB/c雄性小鼠被分为5组,普通饲料的正常组(CT)、猪油高脂饲料组(S)、玉米油高脂饲料组(P)、猪油高脂饲料+LGG灌胃组(SL)、玉米油高脂饲料+LGG灌胃组(PL)。喂养8周,进行指标检测。结果显示:猪油比玉米油更易引起小鼠肥胖及肠道菌群紊乱。S组小鼠体质量(41.42±2.30) g,体质量指数(BMI,4.24kg/m^(2)±0.26 kg/m^(2))、Lee’s指数(351.44±9.06)、脂肪系数(118.87±3.91) mg/g、血清总甘油三脂(TG,0.81 mmol/L±0.08 mmol/L)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C,0.29 mmol/L±0.01 mmol/L)、丙氨酸氨基转移酶(ALT,53.42 U/L±0.95 U/L)及天门冬氨酸氨基转移酶(AST,164.65 U/L±9.35 U/L)均高于P组(P<0.05),而P组仅肝脏指数(51.07±1.35) mg/g高于S组(47.32 mg/g±1.93 mg/g,P<0.05)。小鼠肠道菌群差异菌种中,S组拟杆菌门(8.69±4.68)%和CF231(0.31±0.19)%相对丰度降低,别样棒菌属相对丰度(2.19±1.47)%升高,且F/B值(9.15±1.19)高于P组(4.25±0.57,P<0.05);而P组仅链球菌属丰度(14.41±6.37)%略高于S组(4.91±2.23)%。另一方面,LGG干预对猪油引起的小鼠肥胖的预防作用及肠道菌群紊乱的调控作用更为有效。SL组小鼠体质量(34.53±1.53) g、脂肪系数(26.10±2.51) mg/g均低于PL组(37.69 g±2.41 g,65.88 mg/g±1.98 mg/g,P<0.05),且SL组中LGG上调拟杆菌属的效果较为显著(P<0.05)。PL组中LGG虽下调厚壁菌门显著(P<0.05),但不能调控脱铁杆菌门相对丰度(P>0.05)。结论:猪油比玉米油更易引起肥胖,LGG对其肥胖的预防及肠道菌群的调控更为有效。

红参对乳酸菌体外增菌的影响

采用比浊法和活菌计数法研究在基础培养基/菊芋汁基础培养基中添加不同量低聚木糖、低聚果糖、红参提取液及其酸水解物对鼠李糖乳杆菌AS 1.2466T/保加利亚乳杆菌ATCC 11842生长情况的影响。结果表明:不同添加物对鼠李糖乳杆菌AS 1.2466T的增菌效果为红参提取液>红参酸水解物>低聚木糖>低聚果糖。当红参提取液添加量为12.50%时,鼠李糖乳杆菌AS 1.2466T的最大OD600值为1.172,活菌数为2.72×10^8 CFU/mL,比基础培养基中最大活菌数7.75×10^7 CFU/mL增加1个数量级。对保加利亚乳杆菌ATCC 11842的增菌效果为红参提取液>低聚木糖>红参酸水解物>低聚果糖。当红参提取液添加量为6.25%时,保加利亚乳杆菌ATCC 11842的最大OD600值为0.627,活菌数为4.43×10^8 CFU/mL,比菊芋汁基础培养基中最大活菌数1.48×10^7 CFU/mL增加1个数量级。红参提取液比低聚木糖、低聚果糖具有较好的增菌效果,将红参作为益生元研究其益生功能,为研究红参对肠道微生物的影响提供试验依据。