鼠源单抗3G1单链抗体基因的构建及序列分析

利用RT PCR方法 ,从分泌抗汉滩病毒mAb的杂交瘤细胞系 3G1中扩增出抗体VH 和VL基因 ,通过PCR方法获得linker VL 基因 ,进而利用加端PCR技术 ,在扩增出的单抗体VH 和linker VL基因两端加上限制性酶切位点 ,分别克隆入 pUC18中并测序 .3G1VH 基因长 36 0bp ,编码 12 0个氨基酸 ;VL 基因长 32 4bp ,编码 10 8个氨基酸 .在pUC18载体中将VH 和linker VL 基因连接成ScFv基因 .

中美单克隆抗体技术专利情况对比分析

单克隆抗体（McAb）是由单一B淋巴细胞株分泌的只能识别一种表位的高纯度抗体。1975年Kohler和Milstein首次建立了B淋巴细胞杂交瘤技术，但由于鼠源单抗会使机体产生人抗鼠抗体（HAMA）反应，阻碍了其在临床上的应用。20世纪80年代，DNA重组技术应用于抗体改造，先后出现嵌合抗体和人源化抗体，虽在一定程度上解决了鼠源单抗的问题，但仍可引起不同程度的HAMA反应。随着PCR技术、抗体库技术、转基因技术的发展，1989年第一个全人源单抗Adalimumab研制成功，实现全人源抗体的制备，同时抗体衍生物出现，这些成果使单抗对人类的作用充分发挥。

抗CD4抗体对SEB诱导的PBMC增殖反应的抑制作用机理

目的 :探讨抗CD4抗体在SEB诱导的外周血单个核细胞 (PBMC)增殖反应中的作用机理。方法 :采用MTT法 ,以SEB为刺激原 ,观测在不同条件诱导的PBMC增殖反应中抗CD4抗体的作用。采用形态学、生物化学、流式细胞仪等方法 ,检测抗CD4抗体诱导的CD4+ T细胞凋亡。结果 :抗CD4人 鼠嵌合抗体和鼠源性单抗对由SEB诱导的PBMC增殖均有抑制作用。嵌合抗体能特异性诱导CD4+ T细胞发生凋亡。结论 :抗CD4抗体的增殖抑制作用能直接作用于TCR诱导的早期活化信号 ,嵌合抗体的抑制作用强度与单核细胞的存在密切相关 ,抗CD4嵌合抗体的进一步广泛交联是诱导凋亡的关键。

抗人CD8单链抗体基因的构建

CD8分子分布于部分T淋巴细胞和胸腺细胞。是MHC Ⅰ类抗原的配体,它与MHC Ⅰ类分子结合可以稳定CTL与带有MHC Ⅰ类分子与抗原复合物的靶细胞的结合。近年来已有不少抗CD8的单抗被用于预防及治疗骨髓移植时的移植物抗宿主反应及心、肾移植时的免疫排斥反应,但这些鼠源性单抗应用于人体时,其异源性会引起免疫排斥反应,限制了它的临床应用。

未来十年生物医药新热点

随着全球分子生物学研究的不断发展,单抗经历了鼠源单抗、人鼠嵌合单抗、人源化单抗、人抗体和完全人源化单抗几个主要发展阶段。抗肿瘤药物的作用机制已从宏观向微观逐步转变,推动了个性化疗法和差异性疗法的发展。一系列作用机理新颖的靶向药物陆续上市;

人源化治疗性单克隆抗体的研究进展

治疗性单克隆抗体结合了免疫学和药理学的原理，应用于疾病治疗已有几十年。单克隆抗体在治疗中的运用要特别考虑到生物药效率、耐受性、变化性和适用性。抗体的临床应用结果反映出了单克隆抗体药物存在的一些问题：（1）鼠源性单抗容易产生人抗鼠抗体（HAMA），从而削弱其治疗的有效性：（2）由于鼠单抗是异源蛋白，在体内很快就被清除掉，并对清除抗体的器官产生损害；（3）抗体的分子量相对较大，所以抗体分子到达靶部位不足；（4）鼠源性单抗在人体中常不能有效地活化补体和Fc受体相关的效应功能，因此其应用受到了较大的限制．这些就推动了人源性单抗的产生。

单克隆抗体研究进展

杂交瘤技术使鼠源单克隆抗体被广泛用于人类疾病的诊断和研究,建立了治疗性抗体的第一个里程碑。随着生物学技术的发展和抗体基因结构的阐明,应用DNA重组技术和抗体库技术对鼠单抗进行人源化改造,先后出现了嵌合抗体、人源化抗体和全人抗体,它们从不同角度克服了鼠单抗临床应用的不足,使抗体制备技术进入了一个全新的时代。