鼠源性单克隆抗体F(ab′)_(2)片段制备工艺

目的 制备符合临床应用质量标准的鼠源性 m Ab F(ab′) 2 片段 .方法 采用胃蛋白酶消化小鼠腹水抗体 ,疏水作用色谱法纯化 F(ab′) 2 片段的新工艺 ,替代原有的木瓜蛋白酶消化 Ig G,阴离子交换色谱法纯化的旧工艺 .结果 新工艺所制备的 F(ab′) 2 片段经 SDS- PAGE检测纯度达 98%以上 ,ABC免疫组化法测定免疫活性为 1∶ 80 0 0 ,回收率大于 5 0 % ,核酸含量及热原均合格 ,整个工艺流程可在 48h内完成 .结论 新工艺制备人用鼠源性 m Ab F(ab′) 2 片段更简便高效、安全实用 。

抗重组SARS病毒N蛋白单克隆抗体制备及性质初步研究

目的:制备抗重组SARS病毒N蛋白单克隆抗体。方法:重组SARS病毒N蛋白免疫BALB/c雌性小鼠获得免疫脾细胞,利用杂交瘤技术将免疫脾细胞同骨髓瘤Sp2 /0细胞融合,间接ELISA方法筛选阳性克隆并扩增。结果:获得了能稳定分泌抗重组SARS病毒N蛋白抗体的杂交瘤细胞株,经鉴定分泌的抗体IgG亚类为IgM。结论:制备了鼠源性单克隆抗体并初步研究了该抗体性质。

鼠源性抗日本血吸虫噬菌体抗体库的构建、筛选和鉴定

构建鼠源性抗日本血吸虫噬菌体抗体文库 ,以探索制备抗日本血吸虫单克隆抗体的新方法。用文库构建试剂盒 ,以感染小鼠脾脏为材料 ,建立了抗日本血吸虫噬菌体抗体文库 ,并对该抗体库进行了富集、筛选和鉴定。构建的噬菌体抗体库库容为 1 .0 7× 1 0 6 ;从抗体库随机挑取的 72个克隆中最终筛选到特异性抗日本血吸虫阳性克隆 2个。 SDS-PAGE和 Western blot-ting分析结果显示 :两个克隆表达的单链抗体大小均为 3 .1万 ,且具有良好的特异性。

抗细胞因子抗体在疾病治疗中的应用

由于许多疾病的发生和发展与细胞因子的异常表达有看十分密切的关系,因此,用抗细胞因子治疗的手段有可能成为控制某些疾病的发生和发展的一个研究方向。抗体具有特异性识别抗原的能力,具有中和活性的单克隆抗体(McAb),其相应细胞因子的生物学效能非常特异。基因工程抗体的问世不仅能降低鼠源性单克隆抗体治疗的副作用,而且为批量生产提供了可能。现概述如下: