布鲁氏菌BP26蛋白对鼠源树突状细胞分化及抗原提呈作用

构建pET-30a-BP26并在大肠杆菌中表达获得重组布鲁氏菌BP26蛋白,研究重组表达蛋白对鼠髓源树突状细胞分化及抗原提呈作用。设计布鲁氏菌BP26蛋白引物,PCR扩增该基因并酶切、连接在pET-30a载体上。将构建成功的pET-30a-BP26转化至感受态细胞BL21表达获得重组BP26蛋白。采用SDS-PAGE和Western-Blot检测蛋白表达量和反应原性后,用重组蛋白刺激BALB/C小鼠分离髓源树突状细胞(BM-DCs),观察BM-DCs的成熟分化并利用流式细胞术进行表型分析。成功获得BP26重组蛋白,SDS-PAGE和Western-Blot分析结果表明,BP26重组蛋白可溶性高且具有良好的反应原性,流式细胞术检测结果显示,BP26能刺激BM-DCs分化成熟和抗原提呈作用。