低温冷冻伯氏疟原虫鼠疟原虫保种法

鼠疟原虫在疟疾实验研究中占有重要的地位。通常是采用含疟原虫血液经鼠转种或低温进行保种。但目前低温保种方法是取抗凝血加一定的保护剂后,低温保存。作者用含伯氏疟原虫的鼠不加保护剂,直接低温冷冻保存,获得了满意的结果,而且方法更简便,节约成本。 材料与方法 一、疟原虫 系湖北医科大学寄生虫学教研室经小白鼠保种的伯氏疟原虫(Plasmodiumberghei)正常株。 二、实验动物 昆明(KM)远交小白鼠,由湖北省医学科学院实验动物中心提供。经血检,无血液原虫。 三、实验方法 当转接小鼠RBC中疟原虫感染率达40％以上时,将鼠颈椎拉断迅速处死后,装入塑料袋内(1袋装1鼠),袋外标明日期,立即放入-70℃冰箱中保存。使用时,自冰箱中取出1只鼠,迅速投入40℃温水中解冻,15min后,将鼠以腹面向上固定,70％酒精消毒皮肤,剪开胸、腹腔,在注射器内先吸入0.9％灭菌盐水1.0ml,然后将针头插入右心室中抽取血液(如抽不出血液,先注入少量生理盐水再回抽)使血液混匀后立即由腹腔接种给健康小鼠2只,每只接种0.3ml。另外无菌取出小鼠肝脏置灭菌的乳钵中,加入0.9％灭菌生理盐水10ml.将肝组织研碎,稍静置,用注射器吸取上层悬液,由腹腔接种给小鼠2只,每只接种0.3ml。自第2d起,将被接种的鼠剪尾取血涂片。

蝮蛇毒对伯氏鼠疟原虫的抑制观察

蝮蛇毒对伯氏鼠疟原虫的抑制观察李凤文，石维志，王槐芳，林珍广西区寄生虫病防治研究所５３００２１汤圣希广西医科大学蛇毒研究所５３００２１近十多年来，国内外学者对蛇毒进行了广泛地研究，并在临床上用蝮蛇毒制剂治疗脑血栓、心肌梗塞以及牛皮癣等二十余种病症［１...

鼠疟原虫引起血小板减少药物干预效果的观察

目的了解退烧药、抗生素及激素对感染鼠疟原虫引起的血小板减少是否具有恢复的效果。方法健康昆明小鼠腹腔接种感染伯氏鼠疟原虫,当感染鼠血小板明显低于正常值后,分别采用临床常用的大环内酯类、β内酰胺类和喹诺酮类抗生素、退烧药及激素类药物按照人体治疗量的10倍灌服或肌注方法给药3d,每12h采血1次做血小板计数观察。每5只小鼠为一个观察试验组,每种药物采用一组小鼠试验观察取平均数据,并设正常对照组。结果正常鼠血小板平均计数为256×109/L。健康鼠感染鼠疟原虫后第8d,各组感染鼠血小板计数平均降至90×109/L后,开始灌服各类抗生素和肌注氨基比林及地塞米松,除阿奇霉素观察组治疗3d后血小板计数平均恢复至201×109/L水平外,其它抗生素和退烧药及激素均对感染鼠疟原虫所引起的血小板明显减少恢复无影响。结论除阿奇霉素外,复方氨基比林、阿莫西林、左氧氟沙星、地塞米松对鼠疟原虫感染小鼠血小板减少无明显效果。

约氏疟原虫在裸鼠与纯系鼠中的发育

约氏疟原虫(P.yoelii yoelii)在裸鼠与 ICR 纯系小鼠体内的发育不同,在裸鼠体内红细胞的感染率上升幅度小,死亡日期明显推迟,裂殖体率低,每个裂殖体核数少,但多感染率和配子体率都高于纯系鼠,这些差别都依赖于宿主的免疫状态。

硝喹对鼠约氏疟原虫细胞色素氧化酶和琥珀酸脱氢酶的影响

给动物灌服单剂量硝喹醋酸盐(nitroquine acetate,NQ,2mg/kg)后,用电镜酶组化方法研究了NQ对红内期、红外期鼠约氏疟原虫细胞色素氧化酶和琥珀酸脱氢酶的影响及NQ对红外期鼠约氏疟原虫超微结构的影响。结果表明:给NQ后3.5h、7h,红内期、红外期的约氏疟原虫线粒体内由Cyt或SDH催化生成的电子致密颗粒一直存在,说明Cyt,SDH活性未被抑制,它们不是NQ的起始作用点。NQ作用早期即引起了红外期疟原虫粗面内质网的扩张、胞核密度降低。

青蒿素对小鼠血清IgG的影响

应用单向免疫扩散法测定了青蒿素和氯喹对小鼠血清IgG及其对小鼠脾脏的影响。结果表明,青蒿素能降低正常小鼠、绵羊红细胞(SRBC)致敏小鼠及感染佰氏疟原虫小鼠的血清IgG含量,同时减轻感染疟原虫小鼠脾脏重量,而增加正常和SRBC致敏小鼠的脾脏重量。氯喹除减轻感染疟原虫小鼠脾脏重量外,其它指标未见明显影响。

鼠疟感染对宿主红细胞脂质过氧化的影响

小鼠感染鼠疟原虫Plasmodium berghei后,鼠红细胞脂质过氧化产物MDA含量较对照动物成倍增加,体外实验发现感染动物的红细胞,尤其是含虫红细胞对自由基发生系统(Fe^(2+),H_2O_2)引起的脂质过氧化更加敏感。感染动物红细胞MDA含量与其贫血严重程度呈显著负相关关系;维生素E治疗显著抑制感染动物血浆和红细胞MDA含量的增加,明显减轻其贫血程度。实验结果提示,疟原虫损伤宿主红细胞的抗氧化能力,促进其脂质过氧化,这在疟疾时红细胞损伤的发病过程中可能具有重要意义。

碘杂环－65等11种化合物的抗约氏鼠疟活性

以约氏鼠疟为模型，探讨了碘杂环－６５等１１种化合物的抗约氏鼠疟活性。在腹腔注射剂量为１００ｍｇ／ｋｇ时，碘杂环－６５、磷钨酸异搏定、柠檬酸钠镧和依地酸钠镧等４种化合物及阳性对照药物氯喹，均可使感染鼠疟原虫的小鼠平均存活期延长（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜（０．０１）、存活率上升（Ｐ＜０．０５）、血中疟原虫减少（Ｐ＜０．０５或Ｐ（０．０１）；氯钼酸铵亦可延长感染鼠存活时间（Ｐ＜０．０５）。

暗罗素及其联合传统抗疟药治疗伯氏疟原虫氯喹抗性鼠疟的相关研究

目的研究暗罗素和传统抗疟药物联合使用对伯氏疟原虫氯喹抗性鼠疟的疗效差异。方法SPF级昆明小鼠腹腔接种伯氏疟原虫氯喹抗性株以及伯氏疟原虫常规株分别建立伯氏疟原虫氯喹抗性模型以及常规模型,按照"4D实验法"接种2 h后连续口服给药4天。设置复方蒿甲醚、蒿甲醚、本芴醇分别与暗罗素等效剂量组配伍,另设置各单组分别考察其等效剂量下对伯氏疟原虫常规鼠疟以及氯喹抗性鼠疟的作用。取血观察并计算镜检后24 h原虫血症密度、转阴率、复燃率及28天治愈率。结果标准剂量下暗罗素、复方蒿甲醚、蒿甲醚、本芴醇单独治疗伯氏疟原虫氯喹抗性鼠疟后,均使疟原虫受到不同程度抑制,用药24 h后各给药组原虫血症有不同程度降低,28天治愈率分别为70%、100%、10%及60%,而空白模型组原虫血症密度在没有药物干预的情况下上升;标准剂量下暗罗素分别配合复方蒿甲醚、蒿甲醚、本芴醇治疗伯氏疟原虫氯喹抗性鼠疟后,各组24 h原虫血症密度均小于各单品单独使用(P<0.05),除复方蒿甲醚组外,其余各组联合暗罗素使用后,28天治愈率均有所提升,复燃率降低,其中暗罗素联合复方蒿甲醚效果最佳,镜检观察24 h原虫血症密度为各组最低值(6.02±0.74)%(P<0.05)。结论标准剂量下暗罗素、复方蒿甲醚、蒿甲醚以及本芴醇对氯喹抗性鼠疟均有直接抑制作用,标准剂量暗罗素分别联合复方蒿甲醚、蒿甲醚及本芴醇,均能增强单品药物对氯喹抗性鼠疟的治疗作用,可以说明复方蒿甲醚、本芴醇、蒿甲醚配合暗罗素后有一定的协同作用,能提高对氯喹抗性鼠疟的治疗效果。

抗疟药药效学研究方法

疟原虫在其生活史不同的阶段对药物的敏感性有所不同,筛选有效的抗疟药首先应研究其对疟原虫红内期的作用,然后再研究其对红外期及孢子增殖期的作用。1 对红内期的作用(筛选控制疟疾症状发作药物)1.1 体外培养1.1.1 药物配制 水溶性药物可用完全培养基配制。水难溶者可用二甲基亚砜。1.1.2 培养基 通常用RPMI 1640或MEN,加HEPES,血清,抗生素等。

寄生虫病

0201198 世界卫生组织赢得了对DDT抗疟疾的暂时解脱/Kapp C∥Lancet.-2000,356(9247).-2076 医科图0201199 疟疾感染中细胞因子的作用[日]/平山谦二∥临免.-2001,35(1).-30～37

硝喹的抗疟机理探讨

硝喹(NQ)是一新的抗疟药。用于预防及治疗恶性疟,抗氯喹恶性疟及间日疟。氨苯砜对NQ有加强作用,临床合用喹哌或咯萘啶,只需各自60％的剂量其疗效即与正常剂量相当,NQ作用机理复杂,从电镜观察它影响原虫线粒体、粗面内质网和膜结构等;从生物化学研究发现它可抑制DNA合成,有期特异性,且较对宿主DNA强,PABA对其拮抗;对RNA的合成影响较小;对蛋白质合成抑制较对DNA敏感,前者为pmol水平,后者为μmol水平。