双重PCR和RAPD技术在宁夏鼠疫菌鉴定中的应用研究

目的应用多重PCR和RAPD结合鼠疫常规检测方法对可疑鼠疫菌和自毙鼠脏器进行鉴定,应用多种实验室检测方法联合检测和鉴定鼠疫菌,为科学、快速、有效地判定鼠疫疫情提供实验室支持。方法采用双重PCR对2009年宁夏2个鼠间鼠疫监测点分离获得的可疑菌株和部分自毙鼠脏器进行目标基因fra和pla片段扩增,并利用RAPD技术对2个监测点分离获得的鼠疫菌进行随机引物扩增基因表征分析。结果共分离获得16株菌,所有菌株扩增出2条目标条带,分别为249 bp和456 bp。自毙鼠脾脏扩增出目标基因,肝脏扩增的目标基因条带较弱。RAPD显示所有菌株的扩增条带一致,表明此次分离得到的鼠疫菌株未发生变异。结论双重PCR可作为实验室快速诊断和迅速判定鼠疫疫情的有效方法,用RAPD法筛选的鼠疫菌扩增的随机引物可为确定宁夏分离鼠疫菌株的标识图谱提供参考。