乌头碱对大鼠睾丸支持细胞的毒性研究

[目的]研究乌头碱对体外培养的大鼠睾丸支持细胞的毒性。[方法]无菌制备18～20日龄SD大鼠的睾丸支持细胞,通过Tris-Hcl低渗处理进行细胞纯化,采用HE染色、瑞氏-吉姆萨染色进行细胞鉴定。然后用MTT法(四唑盐比色法)检测浓度为0、5×101、5×102、5×103、5×104 ng/ml的乌头碱对大鼠睾丸支持细胞活力的影响,并用乳酸试剂盒检测乌头碱对支持细胞乳酸分泌功能的影响。[结果]MTT结果显示:乌头碱作用24h后,各剂量组对大鼠睾丸支持细胞的增殖均有促进作用;作用48 h后,低剂量乌头碱(5×101、5×102ng/m)对大鼠睾丸支持细胞的增殖有促进作用;高剂量乌头碱(5×103、5×104 ng/ml)抑制支持细胞的增殖。乳酸测定结果显示:乌头碱作用24 h后,各剂量组乳酸分泌量均增加,乌头碱剂量为5×104 ng/ml时,乳酸分泌量增加率降低。[结论]低剂量乌头碱可促进大鼠睾丸支持细胞的增殖及乳酸分泌量的增加,高剂量乌头碱可抑制大鼠睾丸支持细胞的增殖,降低其对乳酸分泌的刺激作用。

高功率微波辐照对大鼠睾丸形态和超微结构的影响

目的 观察高功率微波(HPM)辐照后大鼠睾丸病理形态变化特征。方法 健康成年雄性SD大鼠45只,随机分为8个实验组和1个对照组。以S波段功率密度分别为20 mW·cm-2、40mW·cm-2的HPM辐照实验组大鼠,辐照时间分别为1、5、10和20 min。于辐照后6 h取材,以透射电镜和光镜观察其病理形态变化。结果 光镜下与对照组相比,20 mW·cm-25 min组开始出现轻度炎细胞浸润、组织充血,水肿;10 min组出现生精上皮细胞排列紊乱,畸形精子增多;20 min组和40 mw·cm-21 min组可见大鼠睾丸部分曲细精管管腔断裂,生精细胞明显坏死脱落。上述改变随功率密度增加,照射时间延长而加重。40 mW·cm-2 5 min组部分曲细精管内几乎无细胞,损伤达坏死极限;电镜下超微结构发生轻度线粒体水肿和内质网扩张是从20 mW·cm-25 min组开始,10 min组可见精原细胞水肿变性,20 min组毛细血管内皮细胞肿胀,基底膜分层,断裂。精原细胞凋亡增多,线粒体呈空泡化。功率增高后的各组均可见部分间质细胞发生变性、凋亡和坏死崩解。对照组无改变。结论 高功率微波辐照可导致大鼠睾丸形态发生明显的病理性改变,当达到20 mW·cm-2 20 min或40mW·cm-21 min后,对大鼠睾丸组织细胞有致死作用。

促性腺激素释放激素类似物对大鼠睾丸间质细胞膜联蛋白5和3β-羟类固醇脱氢酶mRNA表达的影响

目的:观察促性腺激素释放激素(GnRH)类似物对大鼠睾丸间质细胞annexin 5和3β-HSD mRNA表达的影响。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞48 h后,分别用不同终浓度的GnRH激动剂(GnRH-agonist,GnRHa)(10-5mol/L、10-6mol/L、10-7mol/L)和GnRH拮抗剂(GnRH-antagonists,GnRHant)(10-6mol/L、10-7mol/L、10-8mol/L)处理细胞,提取细胞总RNA,反转录,设计特异性引物和Tagman探针,荧光定量PCR检测膜联蛋白5(annexin 5)和3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)mRNA表达的改变。结果:荧光定量PCR结果显示,与未加GnRH类似物的对照组相比,当GnRHa的终浓度为10-5mol/L、10-6mol/L时,实验组大鼠睾丸间质细胞annexin 5 mRNA分别升高了38.89%和35.29%,均具有统计学意义(P<0.05);当GnRHa的浓度为10-5mol/L时,3β-HSD mRNA也显著升高了46.43%(P<0.01)。同样,与对照组相比,当GnRHant的浓度为10-6mol/L时,实验组大鼠睾丸间质细胞annexin 5 mRNA下降了45.45%(p<0.05),当GnRHant的浓度为10-6mol/L,10-7mol/L时,实验组大鼠睾丸间质细胞3β-HSD mRNA也分别显著地降低了63.64%(P<0.01)和50%(P<0.05),其余各组与对照组相比,差异无统计学意义。结论:GnRH类似物能够调控大鼠睾丸间质细胞annexin5和3β-HSD mRNA表达,GnRH类似物可能与睾丸间质细胞上GnRH受体结合后,通过特定的生理机制,进而影响annexin5和3β-HSDmRNA表达,为揭示GnRH类似物调控间质细胞分泌睾酮的作用机制提供了一定的依据,其内在的机制还有待进一步研究。

北冬虫夏草子实体对大鼠睾丸功能的影响

为研究人工栽培的冬虫夏草子实体对生殖系统的作用 ,将 37只 10周龄SD大鼠随机分为A、B、C、D、E 5组 ,A组为正常对照组 ,按常规饲养 ;B、C、D 3组在饲料中加入腺嘌呤 ( 30 0mg/kg·d- 1 )造成大鼠睾丸功能障碍 ,其中C、D两组同时给予北冬虫夏草子实体细粉、复合粉 (虫草素、虫草酸含量较高 )模拟治疗 ;E组在与A组同法饲养的基础上 ,加用北冬虫夏草子实体复合粉。 30d后 ,处死全部实验动物 ,并以组织学及组织化学定量的方法观察动物睾丸的结构变化及与激素合成有关酶 (SDH、3β -HSD)的活性。结果 :与A组相比 ,B组大鼠睾丸生精细胞数与精子数明显减少 ,SDH、3β -HSD活性下降 ;C、D2组酶活性增强 ,精细胞数与精子数接近正常 ,其中D组优于C组 ;E组动物上述两项指标优于A组 ,但无统计学差异。提示 :北冬虫夏草子实体能增强睾丸的生精与内分泌功能 ,对腺嘌呤引起睾丸功能障碍大鼠的作用尤为明显。

FSH和LH在不同发育阶段大鼠睾丸中的表达

ＦＳＨ和ＬＨ在不同发育阶段大鼠睾丸中的表达陈雪雁李劲松陈克铨陈实平刘平王莎丽阎月明程凯金淑梅邹宇红（中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所细胞生物室）促性腺激素（ＦＳＨ和ＬＨ）通常被认为只在垂体前叶合成和分泌，另有报导认为它们也能在性腺和乳腺中...

CS2致大鼠睾丸Sertoli细胞DNA损伤的研究

目的研究CS2对离体培养大鼠睾丸Sertoli细胞DNA的损伤作用。方法从大鼠睾丸组织中分离Sertoli细胞进行离体原代培养、纯化及鉴定,用不同浓度(0、0.36、0.72和1.44μmol/ml)CS2染毒,应用SCGE检测CS2诱导Sertoli细胞DNA损伤,以彗星尾DNA%和Olive尾距反映DNA损伤水平。结果染毒组Sertoli细胞呈彗星状,尾DNA%[(13.91±3.23)、(37.07±5.42)和(49.10±5.26)]和Olive尾距[(3.71±1.66)、(11.73±2.65)和(19.54±3.41)]随CS2染毒浓度的增高而逐渐增高,与阴性对照组比较差异均有显著性(P<0.01),且与剂量对数呈明显的剂量-效应关系。结论CS2可诱导大鼠睾丸Sertoli细胞DNA损伤。

二硫化碳对大鼠睾丸c-myc表达的影响

目的检测二硫化碳(CS2)对大鼠睾丸c-myc表达水平的影响。方法取健康Wistar雄性大鼠36只随机分为6组,以不同浓度CS2(0、50、250、1250mg/m3)静式吸入染毒,共10周。另设1250mg/m3(CS2)加VitE(250mg/kg)组和单纯VitE(250mg/kg)组,作为实验干预组,VitE拌入饲料。染毒结束后,处死动物取出睾丸组织制备组织匀浆,分别测定各组超氧化的歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量。蛋白定量后用WesternBlot法检测c-myc表达水平。结果睾丸中SOD活力下降,MDA含量上升,前者在各个浓度时与对照组比较均有显著差异(P<0.01),后者在最高浓度时与对照组比较有显著差异(P<0.01)。c-myc的表达出现双向变化,即在低浓度时被抑制,中、高浓度时被诱导,且最高浓度时与对照组比较有显著差异(P<0.05)。当用VitE干预后,SOD活性回升(P<0.05),MDA含量下降(P<0.01),c-myc的表达明显降低(P<0.05)。结论脂质过氧化可能参与了CS2对大鼠睾丸c-myc表达的调节。

三硝基甲苯对大鼠睾丸芳基酯酶和芳基硫酸酯酶活性的影响

本研究采用亚慢性染毒给于三硝基甲苯(TNT)(50,100和200mg/kg/天×6天/周),于染毒后2、4、6和8周处死大鼠观察有关指标的变化。结果表明,仅200mg/kgTNT染毒组,在染毒第6和第8周时,芳基酯酶(ARE)活性显著高于对照组(P【0.05);

三硝基甲苯对大鼠睾丸和血清中表皮生长因子水平的影响

三硝基甲苯(TNT)是一种氧化性应激毒物,其毒作用范围广。研究表明,TNT使得染毒大鼠睾丸和血清中睾酮含量下降。已知,表皮生长因子(Epidermal Growth Factor,EGF)参与间质细胞睾酮生成的调节作用。为此,我们观察了TNT对大鼠睾丸和血清EGF含量的影响。

2-乙氧基乙醇急性染毒大鼠睾丸和血清某些生化指标的变化

目的 观察 2 -乙氧基乙醇 (2- ethoxythanol,EE)急性染毒大鼠睾丸某些酶活力及血清和睾丸中铜、锌含量变化 ,探讨EE致睾丸损伤的可能机制。方法 将 90只大鼠随机分为对照组、EE 80 0、160 0和 3 2 0 0mg kg 4组 ,每组 2 0只。将EE用蒸馏水配制成溶液 ,采取一次性灌胃染毒。于灌胃后第 12、2 4、48和 72h ,将各组动物随机处死 5只 ,测定睾丸非特异性酯酶、芳基酯酶 (ARE)活力及Cu、Zn含量 ;测定血清Cu、Zn含量及睾丸 体比值。结果 染毒后 72h ,EE 80 0、160 0和3 2 0 0mg kg组睾丸重量 体重比值分别为 0 .92、0. 87、0 . 80 % ,明显低于对照组 0 .94% (P <0 . 0 5 ) ;染毒后 12h ,EE 80 0、160 0和3 2 0 0mg kg组睾丸及血清Zn含量分别为 2 1. 76、16. 96、19.80 μmoL g和 1. 3 7、1. 3 5、1 .2 9mg L ,显著低于对照组的 3 3. 0 8μmol g和 1 46mg L(P <0. 0 5 ) ;在染毒后 2 4h ,EE 80 0、160 0和 3 2 0 0mg kg组睾丸Cu和Zn含量分别为 1 .91、1. 91、2. 14和 2 2 . 60、2 3 . 75、2 5. 65 μg g ,显著高于对照组的 1. 3 1和 14 . 5 4μg g(P <0 . 0 1)。 结论 EE染毒大鼠睾丸重量 体重比值、ARE酶活力及血清Zn含量显著降低而睾丸Zn含量明显升高。推测睾丸可能是EE的靶器官 ,EE具有明显?

以巴戟天多糖干预的精索静脉曲张大鼠睾丸基因谱分析

精索静脉曲张是男性泌尿生殖系统常见疾病,是造成男性不育的主要因素,但其病理病生机制尚未明确。本研究在建立精索静脉曲张大鼠模型基础上,以巴戟天多糖300mg·kg^(-1)灌胃4周后取左侧睾丸(假手术组、VC+生理盐水组、VC+巴戟天多糖组各3只),应用Illumina HiSeq4000测序和生物信息学分析,从高通量测序结果中挑选24个差异表达的mRNA和26个差异表达的lncRNA进行实时荧光定量PCR验证,最终筛选出差异表达mRNA8个,分别是Akrlb8、Clstn2、Gprl62、Nilr1、P2rx4、Tmem255b、Wnt9b、Yipf7.

乙二醇对大鼠睾丸和附睾中某些酶的影响

本文就乙二醇对大鼠睾丸和附睾中LDH(LDH-X),ACP,AKP及γ-GT酶活性的影响进行了研究。

镉对大鼠睾丸的影响

本文报告饮水中含镉对大鼠睾丸的慢性毒性实验,并作有关酶组织化学活性检查。结果:大鼠连续饮用含CdCl_2(氯化镉)300ppm的水,其睾丸曲精小管内各级生精细胞损害严重。曲精小管和附睾内精子完全消失;曲精小管各级生精细胞核呈固缩状,残留甚少且难以区别。腔内可见较多多核聚体、嗜伊红团块和网状结构等坏死组织产物。糖原PAS反应减弱;SDH(琥珀酸脱氢酶)、ATPase(三磷酸腺苷酶)的活性明显减弱;LDH(乳酸脱氢酶)、ACP(酸性磷酸酶)的活性增强。

大鼠睾丸间质内的巨噬细胞

大鼠睾丸间质内的巨噬细胞安劬何才春孟珊珊谢黎（四川生殖卫生学院）巨噬细胞是遍布人体各器官、组织的一种单核吞噬细胞，不同组织中的巨噬细胞在功能、形态、生物特性等方面都有明显的差异。近年研究发现巨噬细胞除具有免疫功能外还具有分泌多种生物活性物质特性，而生...

何首乌饮通过Wnt信号通路延缓“肾精亏虚”雄性大鼠睾丸退化的机制

探讨何首乌饮通过Wnt通路延缓“肾精亏虚”雄性大鼠睾丸衰老机制。2月龄Wistar雄性大鼠,采用单因素电刺激法模拟“房劳+惊恐”造“肾精亏虚”大鼠模型,为期30d。于建模第10、20、30天,建模结束7d,大鼠4、5、6月龄,ELISA法测定血清睾酮浓度;于建模40d取睾丸组织进行HE染色。结果显示,至6月龄时模型组血清睾酮持续性下降,睾丸形态明显异常。

氟伐他汀对糖尿病大鼠睾丸组织氧化应激水平的影响

目的探讨氟伐他汀对糖尿病大鼠睾丸组织氧化应激水平的影响。方法将86只成年SD大鼠随机抽取10只为正常对照组,余76只制备糖尿病大鼠模型。将成模大鼠分为糖尿病模型组、氟伐他汀高、低剂量(18、6mg·kg-1)组、胰岛素组(2 U·kg-1),8周以后分别测定存活大鼠睾丸组织GSH-PX、MDA含量及SOD活力。结果与正常对照组大鼠相比较,经8周药物干预后,糖尿病模型组大鼠GSH-PX、MDA水平显著增高(P<0.05)、SOD水平显著降低(P<0.05);与糖尿病模型组大鼠相比较,氟伐他汀各治疗组GSH-PX水平显著下降(P<0.05)。结论氟伐他汀对可减轻糖尿病大鼠睾丸组织氧化应激水平,对糖尿病引起的大鼠睾丸组织损伤有一定的保护作用。

重复热处理对大鼠睾丸的支持细胞和间质组织的影响

成年大鼠睾丸接受43±0.2℃温水浴25min,每月处理一次。首次加温后1~7天,支持细胞内的溶酶体、脂滴和线粒体数量明显增多。结果指出,热处理不但引起线粒体暂时性增生,同时也加速其变性和解体过程。加温后7~30天,常见支持细胞脱落入管腔,第二次和第三次处理后更为常见。电镜显示,加热对间质细胞的超微结构无损害,但首次加温后2~7天,间质组织内的胶原纤维出现增生。每月加温一次,二次和三次处理后,所有睾丸都呈现纤维化。每65天加温一次,二次处理后,仅见一例睾丸出现轻度纤维化。上述结果表明,睾丸纤维化程度与两次热处理之间的恢复时间长短有关。

镉对大鼠睾丸氧化应激和线粒体功能影响及葛根素保护效应

为探究镉对大鼠睾丸氧化应激和线粒体功能的影响及葛根素的保护效应,将24只雄性SD大鼠随机分为4组,分别为对照组、葛根素组、醋酸镉组、镉与葛根素共处理组,持续5周。试验结束后,制作睾丸病理切片并镜检观察;比色法测定丙二醛(MDA)含量和还原型谷胱甘肽(GSH)活性;使用MTT和Rhodamine 123染料检测线粒体功能;qPCR检测凋亡相关基因表达水平。结果表明:镉导致雄性大鼠睾丸MDA含量极显著升高,GSH活性显著降低(P<0.01),线粒体活力和膜电位降低(P<0.01),凋亡相关基因表达增加(P<0.01),精子数量和活力下降(P<0.01);镉与葛根素共处理组上述损伤明显减轻。这说明氧化应激和线粒体功能障碍是镉致睾丸损伤的关键环节,葛根素可改善镉暴露诱导的睾丸氧化应激、线粒体损伤和细胞凋亡,从而在镉致睾丸损伤中发挥保护效应。

氯化汞对大鼠睾丸功能的亚慢性毒性影响

本研究试图通过氯化汞（Hgcl）2染毒大鼠亚慢性生殖毒性试验,进一步探讨汞对雄性生殖毒作用。