鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1密码子600的突变在甲状腺乳头状癌中的突变及其临床意义

目的探讨鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1密码子600的突变(BRAFV600E)在甲状腺乳头状癌中的突变及临床意义。方法分析郑州大学第一附属医院2017年1月1日至2017年12月31日200例甲状腺乳头状癌组织中BRAFV600E突变,探讨BRAFV600E突变与患者临床病理特征的关系。计数资料采用χ2检验。结果BRAFV600E在甲状腺乳头状癌组织中的突变率为91.5%(183/200),与病理诊断率相近,与患者的性别(χ2=0.799,P>0.05)、年龄(χ2=1.110,P>0.05)、肿瘤大小(χ2=0.999,P>0.05)、淋巴结转移(χ2=0.948,P>0.05)以及病灶数量(χ2=0.783,P>0.05)无明显相关。结论BRAFV600E突变与甲状腺乳头状癌的发生发展密切相关,有助于甲状腺乳头状癌患者的诊断及治疗。

外周血鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1 V600E检测在甲状腺乳头状癌中的研究进展

鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1（BRAF）V600E基因突变检测是甲状腺乳头状癌（PTC）临床诊断、治疗决策、疗效判断及预后评估方面的重要手段。研究结果显示，外周血BRAF V600E与组织学水平的BRAF V600E具有良好的相关性，而且外周血BRAF V600E突变检测具有创伤更小、操作便捷、可以实时动态监测等优点，预计这将是未来PTC研究的发展趋势。

K-ras、鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1基因在结直肠癌组织中突变特征及其临床意义

目的 探讨K-ras、鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1 （BRAF）基因在结直肠癌中突变特征及其临床意义.方法 采用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）法检测412例结直肠癌组织K-ras、BRAF基因常见密码子突变特征,分析K-ras、BRAF突变与结直肠癌临床病理特征的关系.结果 412例结直肠癌K-ras基因突变率为37.9％,直肠癌K-ras基因突变率为45.2％,高于结肠癌（28.8％,P ＜0.05）.K-ras基因突变中单个位点突变率为35.4％,2个位点的突变率为2.2％,3个位点突变率为0.2％.K-ras突变常见于12和13位密码子,12位密码子占32.0％,分别为G12D（15.0％）、G12V（9.5％）、G12C（3.9％）、G12S （2.9％）、G12A（2.4％）和G12R （0.7％）,13位密码子占6.1％,均为G13D.K-ras基因突变方式以G→A为主.Ⅰ＋Ⅱ期结直肠癌K-ras基因突变率（30.4％）低于Ⅲ＋Ⅳ期（45.2％,P＜0.05）,基因位点突变分析只发现G12V突变率在TNM分期Ⅰ＋Ⅱ期的突变率（5.9％）低于Ⅲ＋Ⅳ期（13.0％,P＜0.05）.K-ras基因突变与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤大体类型、组织学分型以及淋巴结转移等临床病理参数无关（P＞0.05）.结直肠癌中BRAFV600E基因突变率为2.4％,其中结肠癌中的BRAF基因的突变率（4.9％）高于直肠癌（0.4％,P＜0.05）.结论 在结直肠癌中,K-ras基因突变以单个位点突变为主,其中又以G12D最为常见,其中G12V突变可能与结直肠癌进展相关.直肠癌K-ras突变率高于结肠癌,而结肠癌BRAF突变率高于直肠癌.K-ras、BRAF基因突变在结肠癌和直肠癌中的作用机制可能不同.

鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1检测结合超声评分对侵袭性甲状腺乳头状微小癌术前筛选研究

目的探讨如何结合超声评分体系及鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)基因突变检测提高术前精准筛选伴有颈侧区淋巴结转移的高侵袭性甲状腺乳头状微小癌(PTMC)。方法 2016年9月至2019年9月于苏州大学附属第一医院普外科收治的105例行单侧甲状腺癌根治术及中央区、颈侧区淋巴结清扫术的PTMC患者。分析术前超声表征(有无钙化、肿瘤边界的清晰度、肿瘤位置、肿瘤与甲状腺被膜之间的关联)并予以评分,同时结合术前穿刺标本BRAF突变检测。根据术后病理结果,采用单因素和多因素统计学分析超声评分体系、术前BRAF基因检测、以及结合两种方法的预测价值。并采用Logistic回归方程建立筛选模型,并根据三者受试者工作特征(ROC)曲线来评估对高侵袭性PTMC的术前筛选价值。结果术前超声评分体系及术前穿刺标本BRAF检测均能作为高侵袭性PTMC的独立预测因子,超声评分体系在≥2.5分作为临界点,其灵敏度为81.0%,特异度为87.3%。术前穿刺标本的BRAF突变检测也可以提高侵袭性PTMC确诊率,其灵敏度为73.8%,特异度为77.8%。两种方法的联合诊断模型:Logit(P)=1.523×超声评分+2.555×BRAF突变结果(1突变,0未突变)-5.189。根据最大约登指数0.730,选取截断值0.48。诊断效能92.5%,灵敏度为85.7%,特异度为87.3%。结论超声评分体系以及细针穿刺标本的BRAF基因突变检测对高侵袭性PTMC均有提高部分术前筛选价值,结合两者能提高诊断效能,为进一步指定合理治疗方案提供依据。

肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1 V600E基因及生长分化因子15表达变化与甲状腺乳头状癌患者淋巴结转移及预后关系研究

目的:探究肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)V600F基因及生长分化因子15(GDF-15)表达变化与甲状腺乳头状癌(PTC)患者淋巴结转移及预后的关系。方法:收集出现淋巴结转移的PTC患者60例作为研究组,收集同期无淋巴结转移的PTC患者53例作为对照组,均测定BRAF V600E基因及GDF-15表达。比较两组患者BRAF V600E基因及GDF-15表达差异。分析两指标与研究组患者临床特征间的关系。分析两指标对PTC患者淋巴结转移的预测价值及与患者预后间的关系。结果:研究组患者BRAF V600E基因突变率及GDF-15阳性表达率高于对照组(均P<0.05)。BRAF V600E基因突变及GDF-15阳性表达与淋巴结转移PTC患者肿瘤直径和是否包膜侵犯有关(均P<0.05)。BRAF V600E基因突变及GDF-15阳性表达对PTC患者淋巴结转移均具有一定的预测价值,两项联合的预测价值更高(均P<0.05)。BRAF V600E基因突变患者累积无进展生存率低于BRAF V600E基因未突变患者,GDF-15阳性表达患者累积无进展生存率低于GDF-15阴性表达患者(均P<0.05)。结论:PTC患者BRAF V600E基因及GDF-15表达变化与PTC患者淋巴结转移及预后关系密切,均可能参与了PTC病情发生及进展过程,可以作为患者病情评估及预后的预测指标。

鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1基因在甲状腺乳头状癌诊断和治疗中的应用

甲状腺癌是最常见的内分泌恶性肿瘤,其中甲状腺乳头状癌(PTC)的发病率最高,约占甲状腺癌的85%~90%。有关PTC的肿瘤标志物很多,如鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)、端粒酶逆转录酶、Ki-67、微小RNA146b、PDLIM5等,其中BRAF基因在PTC的发生、发展和预后中发挥重要的作用。文章总结了BRAF基因及其信号通路、BRAF基因在PTC发生发展和预后中的作用、BRAF基因与PTC临床病理特征的相关性、BRAF基因在PTC诊断和治疗中的研究进展等,以供读者参考。

不同亚型甲状腺乳头状癌鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1基因V600E突变研究

目的探讨不同亚型甲状腺乳头状癌鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1（BRAF）基因V600E突变。方法分析411例甲状腺乳头状癌患者的临床病理资料，采用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）法检测BRAF基因V600E突变。结果411例甲状腺乳头状癌中，普通型BRAF基因V600E突变率为88.4%（321/363），滤泡亚型突变率为41.7%（5/12），高细胞亚型突变率为100.0%（23/23），嗜酸细胞亚型突变率为80.0%（4/5），χ2检验结果显示普通型与滤泡亚型BRAF突变差异有统计学意义（χ2＝18.435，P＝0.001），普通型与高细胞亚型在肿瘤大小和是否侵犯包膜方面差异有统计学意义（χ2＝13.563，P＝0.000；χ2＝4.115，P＝0.043）。单因素Logistic回归分析结果显示，普通型与滤泡亚型甲状腺乳头状癌BRAF基因V600E是否突变与患者年龄、性别、肿瘤大小、淋巴结转移、包膜侵犯等无明显相关（P值分别为0.530、0.683、0.274、0.623、0.551，0.921、1.000、0.560、0.560、0.999）。结论甲状腺乳头状癌高危亚型的BRAF基因突变率大体上高于低危亚型；高细胞亚型总体比普通型乳头状癌肿瘤大小更大，侵犯包膜更多。普通型、高细胞亚型、滤泡亚型中BRAF是否突变与年龄、性别、肿瘤大小、淋巴结转移、包膜侵犯等无明显相关。

甲状腺乳头状微小癌中鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1基因V600E位点突变及半乳糖凝集素-3、间皮表面微绒毛抗原、细胞角蛋白19表达特征研究

目的观察甲状腺乳头状微小癌（PTMC）组织中鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1（BRAF）基因V600E位点突变及半乳糖凝集素-3（Gal-3）、间皮表面微绒毛抗原（MC）、细胞角蛋白19（CK19）的表达特征，探讨Gal-3、MC、CK19表达与BRAF基因V600E位点突变的关系。方法应用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测BRAF基因V600E位点突变，应用免疫组织化学检测148例PTMC、74例甲状腺良性疾病（49例结节性甲状腺肿、25例甲状腺腺瘤）中Gal-3、MC、CK19蛋白表达，分析这些蛋白与PTMC患者临床病理特征的关系。结果PTMC组织中BRAF突变率明显高于甲状腺良性疾病（67.6%比4.1%，P＝0.000）；Gal-3、MC、CK19在PTMC中的表达明显高于甲状腺良性疾病（91.2%比8.1%、83.8%比13.5%、95.9%比4.1%，P＝0.000）；Gal-3、MC、CK19蛋白表达与颈淋巴结转移明显相关（P＝0.007、0.000、0.036）；BRAF V600E基因突变与包膜侵犯、颈淋巴结转移明显相关（P＝0.000、0.005）；联合检测BRAF＋Gal-3、BRAF＋MC、BRAF＋CK19诊断PTMC的灵敏度分别为93.2%、85.1%、96.6%，并以BRAF＋CK19组合检测诊断PTMC的灵敏度最高。结论BRAF基因V600E位点突变及Gal-3、MC、CK19蛋白表达有助于PTMC的诊断；联合检测BRAF基因V600E位点突变及Gal-3、MC、CK19蛋白表达有助于提高PTMC的诊断；Gal-3、MC、CK19蛋白的表达可提示颈部淋巴结转移；BRAF基因的突变可能使肿瘤更具有侵袭性，更容易发现淋巴结转移。

超声血流定量参数结合BRAF对桥本甲状腺炎合并甲状腺癌的诊断价值

目的分析超声血流定量参数结合鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B(BRAF)基因突变检测对桥本甲状腺炎(HT)合并甲状腺癌的诊断价值。方法以2020年6月至2022年6月于南京医科大学附属逸夫医院就诊的HT合并甲状腺结节患者86例为研究对象,依据病理检查结果,将合并甲状腺癌的患者为恶性组(n=26),将合并甲状腺良性结节患者为良性组(n=60)。恶性组患者中依据淋巴结转移情况分为转移组(n=10)和未转移组(n=16)。所有研究对象均接受彩色多普勒超声检查及BRAF基因突变检测,对比良、恶性组患者搏动指数(PI)、阻力指数(RI)、血流频谱收缩期峰值速度(S)、舒张末期血流速度(D)、收缩期峰值速度与舒张末期血流速度比值(S/D)、BRAF基因突变情况;对比转移组与未转移组患者彩色多普勒血流显像(CDFI)血流检出率、2~3级血流信号检出率及BRAF基因突变情况,以受试者工作特征(ROC)曲线评价上述血流参数与BRAF基因突变对HT合并甲状腺癌的诊断价值,并评估上述指标及BRAF基因突变对甲状腺癌淋巴结转移的诊断价值。结果恶性组患者的PI、RI、S、D、S/D及BRAF基因突变阳性率高于良性组(P<0.05);转移组患者的CDFI血流检出率、2~3级血流信号检出率及BRAF基因突变阳性率高于未转移组(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,RI、PI、S、D、S/D及BRAF基因突变联合评估HT合并甲状腺癌的曲线下面积(AUC)为0.951,敏感度为88.46%,特异度为93.33%,联合评估效能优于各指标单独评估;同时CDFI血流检出率、2~3级血流信号检出率及BRAF基因突变联合评估甲状腺癌淋巴结转移的AUC为0.938,联合评估效能优于各指标单独评估。结论超声血流定量参数结合BRAF基因突变对HT合并甲状腺癌及淋巴结转移均具有一定的评估价值,且各指标联合评估效能更佳。

甲状腺乳头状癌组织V-raf鼠类肉瘤滤过性病毒致癌基因同源体B1V600E突变与尿碘浓度的关系

目的 探讨甲状腺乳头状癌（PTC）中V-raf鼠类肉瘤滤过性病毒致癌基因同源体B1（BRAF） V600E基因突变和患者的尿碘浓度（UIC）及其与临床病理特征的关系.方法 应用聚合酶链反应（PCR）技术和DNA直接测序法检测110例PTC、47例结节性甲状腺肿、26例甲状腺腺瘤患者标本中BRAF V600E基因突变,同时检测患者的尿碘浓度;分析PTC患者中BRAF V600E基因突变和尿碘浓度与患者性别、年龄、肿瘤数目、腺体外浸润、淋巴结转移及TNM分期等临床病理特征的关系.结果 在183例甲状腺结节组织中,PTC中检测到BRAF V600E突变,突变阳性率为49%（54/110）,而结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤标本未检测到（χ2=50.838,P=0.000）.BRAF V600E突变与PTC的腺体外浸润呈正相关（χ2=6.031,P=0.014）,与性别（P=0.363）、年龄（P=0.360）、肿瘤数目（P=0.593）、肿瘤直径（P=0.497）、淋巴结转移（P=0.554）及pTNM分期（P=0.785）无明显相关.PTC患者碘过量率为79%,高于结节性甲状腺肿的66%和甲状腺腺瘤的58%,差异有统计学意义（χ2=6.288,P=0.043）.PTC患者的尿碘浓度与性别（P=0.187）、年龄（P=0.138）、肿瘤数目（P=0.571）、肿瘤直径（P=0.454）、腺体外浸润（P=0.345）、淋巴结转移（P=0.248）及pTNM分期（P=0.792）无明显相关.PTC中BRAF V600E突变与尿碘浓度无明显相关（χ2=0.019,P=0.891）.结论 BRAF V600E突变与PTC的侵袭性明显相关,PTC患者尿碘浓度的碘过量率高于甲状腺良性结节.

成熟T／NK细胞淋巴瘤中鼠类肉瘤滤过性病毒致癌同源体B1基因突变和表达的检测及意义

目的研究成熟T／NK细胞淋巴瘤组织以及细胞系中鼠类肉瘤滤过性病毒致癌同源体B1（BRAF）基因突变和表达情况，探讨BRAF基因的表达与成熟T／NK细胞淋巴瘤临床病理特征和临床疗效的关系。方法采用直接测序法检测Jurkat细胞、Hut-78细胞、YTS细胞、正常外周血淋巴细胞、58例不同类型成熟T／NK细胞淋巴瘤组织和29例反应性增生淋巴结组织中BRAF基因第15号外显子的1799位点和第11号外显子的463、465和468位点突变情况。采用实时荧光定量PCR和Westernblot法检测Jurkat细胞、Hut-78细胞、YTS细胞和正常外周血淋巴细胞中BRAFmRNA和蛋白的表达情况。采用免疫组化方法检测成熟T／NK细胞淋巴瘤组织和反应性增生淋巴结组织中BRAF蛋白的表达，分析BRAF基因的表达与非特指型外周T细胞淋巴瘤患者临床病理特征和疗效的关系。结果成熟T／NK细胞淋巴瘤组织和细胞系中BRAF基因均未出现第15号外显子的1799位点和第11号外显子的463、465和468位点突变。正常淋巴细胞、YTs细胞、Hut-78细胞和Jurkat细胞中BRAFmRNA的相对表达量分别为1．000、5．207±0．013、8．412±0．615和36．720±1．797，Jurkat细胞中BRAFmRNA的相对表达量明显高于正常淋巴细胞、Hut-78细胞和YTS细胞（P〈0．01）。正常淋巴细胞、YTS细胞、Hut-78细胞和Jurkat细胞中BRAF蛋白的相对表达量分别为0．051±0．003、0．102±0．013、0．113±0．017和0．304±0．010，Jurkat细胞中BRAF蛋白的相对表达量高于正常淋巴细胞、Hut-78细胞和YTS细胞（P〈0．05）。58例不同亚型成熟T／NK细胞淋巴瘤组织中，仅有6例（10．3％）呈BRAF蛋白阳性表达，且全部为非特指型外周T细胞淋巴瘤。BRAF蛋白表达与非特指型外周T细胞淋巴瘤患者的性别、年龄、B症状、临床分期、血清乳酸脱氢酶水平均无关（均P〉0．05）。BRAF蛋白在治疗有效组中的阳性率（8．3％）明显低于治疗无效组（55．6％，P=0．046）。结论BRAF基因的表达有可能成为外周T细胞淋巴瘤恶性生物学特性的标志物和临床治疗靶点。

sARMS-PCR检测非小细胞肺癌肿瘤组织中KRAS、BRAF基因突变研究

目的针对非小细胞肺癌(NSCLC)患者组织标本鼠类肉瘤病毒癌基因同源基因(KRAS)和鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)驱动基因突变使用特异引物双扩增实时蝎形探针扩增阻滞突变系统(sARMS-PCR)检测的可行性;了解KRAS和BRAF基因突变患者临床病理特征,为NSCLC患者个体化治疗提供理论依据。方法收集89例NSCLC患者肿瘤组织甲醛固定石蜡包埋标本(FFPE),采用FFPE样品DNA分离试剂盒(离心柱型)提取DNA,使用sARMS-PCR同时进行KRAS及BRAF基因突变检测。结果1 KRAS基因突变21例(21/89);其中KRAS基因7种热点突变中,检出6种热点突变,均位于第12、13位密码子,1例同时检出存在G12D及G12V位点突变,1例同时检出存在G12C及G12V位点突变;未发现G12S突变型;2 BRAF基因突变1例(1/89),突变位点为V600E,为女性,黏液腺癌;3未见KRAS和BRAF基因同时突变现象。结论临床使用sARMS-PCR技术检测NSCLC患者KRAS和BRAF基因突变有较强敏感性,且石蜡组织标本取材方便,可以作为两种基因的临床检测方法;KRAS和BRAF基因突变与年龄、吸烟史、病理分型等均无明显相关性,KRAS基因突变与性别相关,男性高于女性;KRAS与BRAF基因是独立存在的。

甲状腺癌相关基因检测的研究进展

甲状腺癌是头颈外科最常见的恶性肿瘤,也是最常见的内分泌恶性肿瘤之一。部分类型的甲状腺癌手术治疗的效果不佳,放化疗的敏感性也较低,为寻找更好的治疗方案,近年来研究发现鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)、转染重排(RET/PTC)、端粒酶反转录酶(TERT)、肿瘤蛋白53(P53)、鼠肉瘤病毒(RAS)等基因的突变和重排是导致甲状腺癌发生发展的重要原因,可以通过相关基因检测来预测甲状腺癌的良恶性以及预后情况,并且可以帮助确定治疗靶点从而进一步使用靶向药物来治疗这一部分难治性甲状腺癌。了解甲状腺癌患者的基因突变情况,对于明确其发病机制、制定个体化治疗方案都有很重要的意义。文章对相关基因与癌症发生之间的关系以及基因的研究进展做了概述,旨在为甲状腺癌临床诊治提供参考。

结肠癌患者粪便BRAF表达及临床意义

目的:研究鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)基因蛋白在结肠癌患者粪便中的表达及其与临床病理因素的关系。方法:随机选取汕头大学医学院附属粤北人民医院2015年5月至2016年5月的100例结肠癌患者、100例结直肠高危腺瘤患者和100例正常体检人群,进行粪便中BRAF蛋白的表达对照比较,同时分别进行常规肿瘤消化道相关标志物癌胚抗原(CEA),糖类抗原-199(CA-199),糖类抗原-724(CA-724)比较,采用免疫组织化学技术检测,并对其与临床病理因素的关系进行相关性分析。结果:BRAF蛋白在在结肠癌组、高危患者组和正常对照组粪便中的阳性表达率进行比较,差异具有统计学意义(P<0.05);与常规肿瘤消化道相关标志物CEA,CA-199,CA-724进行比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:BRAF蛋白的高表达与结肠癌的发生发展密切相关,对其进行检测可能会比较好的协助结肠癌的早期临床诊断。

Ki-67和BRAF基因突变与甲状腺乳头状癌侵袭性关系的研究进展

甲状腺乳头状癌(PTC)是最常见的甲状腺恶性肿瘤,近年来发病率呈明显上升趋势。Ki-67是与细胞增殖相关的核抗原,鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)基因所表达的蛋白参与细胞的增殖分化和凋亡,Ki-67及BRAF基因突变均可影响细胞周期的调控及肿瘤的发生发展。本文就Ki-67和BRAF基因突变在PTC发生发展中的作用及其对肿瘤侵袭性、临床诊断及预后方面的影响进行综述。

BRAF基因突变型甲状腺乳头状癌组织基因表达及肿瘤微环境的变化

目的探讨BRAF基因突变型甲状腺乳头状癌组织基因表达及肿瘤微环境的变化。方法从癌症基因组图谱数据库获得甲状腺乳头状癌的转录组测序数据和BRAF基因的突变数据,用Perl语言合并数据,并分为基因突变组、基因野生组;R软件筛选两组差异表达基因,用基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析差异表达基因功能、信号通路;用恶性肿瘤中基质细胞和免疫细胞评估软件对两组间质细胞和炎症细胞进行评分,肿瘤免疫评估软件对免疫细胞丰度进行分析。结果基因突变组290例,基因野生组199例,差异表达基因1524个。BRAF基因突变组中PD-L1、PD-L2、CD80、CD86、CTLA4等基因表达上调。GO和KEGG分析显示,部分生物学过程、分子功能、信号通路与BRAF基因突变相关。基因突变组癌组织中基质细胞、免疫细胞水平高于基因野生组(P均<0.05)。与基因野生组比较,基因突变组肿瘤组织中B淋巴细胞、CD4^+T淋巴细胞、中性粒细胞、巨噬细胞、树突状细胞丰度值高(P均<0.05),而两组肿瘤组织中CD8^+T淋巴细胞丰度值比较差异无统计学意义(P=0.737)。结论BRAF基因突变型甲状腺乳头状癌组织基因表达及肿瘤微环境发生改变,其组织中免疫细胞水平升高。

安徽省皖南地区甲状腺乳头状癌患者BRAF和K-ras基因突变的调查

目的：调查安徽省皖南地区甲状腺乳头状癌（PTC）的主要基因突变.方法：收集PTC石蜡包埋组织33例,进行DNA提取,聚合酶链反应法扩增和基因测序检测鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1基因（BRAF）中的缬氨酸（Ⅴ）被谷氨酸（E）替代（V600E）和K-ras基因的12和13密码子基因突变.所有患者术前均采用发光免疫法检测血清总三碘甲状腺原氨酸、游离三碘甲状腺原氨酸、总四碘甲状腺原氨酸、游离四碘甲状腺原氨酸和促甲状腺激素.结果：33例样本中有13例检测出BRAF基因V600E突变,突变率39.4％;而K-ras基因的12和13密码子没有发现突变;BRAF基因V600E突变与患者性别、年龄和肿瘤直径无关;BRAF基因突变患者血清总三碘甲状腺原氨酸、游离三碘甲状腺原氨酸和促甲状腺激素水平均低于基因非突变患者（P＜0.05～P＜0.01）,基因突变患者血清游离四碘甲状腺原氨酸水平明显高于非突变患者（P＜0.01）,而两者总四碘甲状腺原氨酸水平差异无统计学意义（P＞0.05）.结论：BRAF基因V600E突变是皖南地区PTC患者的高发基因突变.

胶质瘤中MGMT、BRAF和EGFR的变化及其治疗的研究进展

随着分子生物学技术的发展与进步,针对胶质瘤的诊断、鉴别诊断和靶向药物治疗的分子标志物的研究取得了很大的进展。其中,根据O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)、鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)基因和表皮生长因子受体(EGFR)研发的药物也在脑胶质瘤治疗中取得了一定的效果。不同类型的胶质瘤有着不同的发病机制,基于不同分子标志物的药物为胶质瘤患者的个体化治疗或联合治疗提供了新的研究方向。本文就胶质瘤中MGMT、BRAF和EGFR的变化及其与胶质瘤治疗的研究进展进行了综述。

lncRNA TUG1通过miR-524-5p/BRAF轴调节甲状腺乳头状癌TPC-1细胞的增殖、凋亡和EMT进程

目的:lncRNA牛磺酸上调基因1(lncRNA TUG1)对甲状腺乳头状癌(PTC)细胞(TPC-1)增殖、凋亡和EMT进程的影响及作用机制。方法:qPCR检测人PTC组织(2019年5月至2021年4月期间在河北省唐山市工人医院手术切除的35例PTC组织及对应癌旁组织标本)与人PTC细胞TPC-1、BHP10-3、K1、SW-1736及人正常甲状腺上皮Nthyori 3-1细胞中lncRNA TUG1的表达。体外培养TPC-1细胞,将其分为对照组、si-NC组、si-TUG1组、miR-NC组、miR-524-5p mimic组、si-TUG1+NC inhibitor组、si-TUG1+miR-524-5p inhibitor组、miR-524-5p mimic+pcDNA组、miR-524-5p mimic+pcDNABRAF组,对细胞进行si-TUG1、miR-524-5 pmimic、miR-524-5p inhibitor、pcDNA BRAF和各自相应的对照质粒转染,采用CCK-8法、FCM法分别检测TPC-1细胞增殖、凋亡情况;WB法检测TPC-1细胞中BRAF、PCNA、Caspase-3、E-cadherin、N-cadherin和vimentin的表达,双荧光素酶报告基因实验验证miR-524-5p与lncRNA TUG1、BRAF的靶向关系。结果:lncRNA TUG1在PTC组织及细胞中呈高表达(均P<0.05);敲减lncRNA TUG1表达或上调miR-524-5p表达可显著抑制TPC-1细胞增殖及EMT,促进细胞凋亡(均P<0.05);双荧光素酶报告基因实验显示,lncRNA TUG1与BRAF、miR-524-5p之间存在靶向关系;抑制miR-524-5p表达可逆转敲减lncRNA TUG1表达对TPC-1细胞的增殖、EMT进程的抑制及对其凋亡的促进作用(均P<0.05),上调BRAF表达可逆转过表达miR-524-5p对TPC-1细胞增殖、EMT的抑制及对其凋亡的促进作用(均P<0.05)。结论:lncRNA TUG1在PTC组织与TPC-1细胞中呈高表达,敲减lncRNA TUG1表达可通过miR-524-5p/BRAF轴抑制PTC细胞的增殖与EMT进程,并促进TPC-1细胞凋亡。

BRAF V600突变型非小细胞肺癌的治疗进展

肺癌是中国发病率和死亡率均排在第一位的恶性肿瘤,其中非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)约占肺癌的85%。鼠类肉瘤病毒癌基因同源物B1(V-Raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1,BRAF)突变在NSCLC中的发生率为1.5%~3.5%,而BRAF V600约占所有BRAF突变的50%,其中V600E突变最为常见。国内外研究显示,NSCLC中的BRAF突变在男女比例和吸烟状态等方面的差异并不一致,而在病理学类型上,BRAF突变(尤其是BRAF V600E突变)的NSCLC患者均以腺癌为主。BRAF V600突变NSCLC患者的预后差,总生存期(overall survival,OS)较短。在此类患者的药物治疗方面,目前化疗和免疫治疗的临床获益并不理想,化疗的无进展生存期(progression-free survival,PFS)仅为1.5~4.2个月;免疫检查点抑制剂治疗BRAF突变NSCLC患者的PFS也只有2.5~5.3个月。而近年来靶向治疗的应用,为肺癌BRAF突变患者带来了新的希望。Ⅱ期临床试验VE-BASKET使用了BRAF抑制剂维莫非尼治疗BRAF V600E突变型NSCLC,最终结果显示,患者中位PFS和OS分别为6.5和15.4个月,初步证明了该药的有效性;但安全性仍需关注,约77%的患者发生了3/4级不良事件(adverse event,AE)。另一种BRAF抑制剂达拉非尼,对于BRAF V600E突变NSCLC患者,在Ⅱ期临床试验BRF113928的三个队列中,分别证明了该药作为单药治疗经治患者(队列A)、联合丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)激酶(MAPK kinases,MEK)抑制剂曲美替尼治疗经治患者(队列B)以及联合曲美替尼治疗初治患者(队列C)均具有显著疗效,客观缓解率(objective response rate,ORR)分别为33.0%、63.2%和64.0%,PFS分别为5.5、9.7和14.6个月。近期,该研究的5年长期生存随访数据还报告了队列B和C患者的5年OS率分别为19%和22%。BRF113928研究表明,无论作为一线治疗还是后线治疗,达拉非尼联合曲美替尼治疗BRAFV600突变NSCLC患者均具有良好的疗效,且优于BRAF单药靶向治疗。在安全性方面,常见AE为发热和消化道不良反应等,且大多为1~2级,而3/4级AE或因AE而中断治疗的发生率相对较低,总体上安全可控。在现有治疗药物的开发基础上,BRAF V600E突变NSCLC仍有许多值得深入探索的方向,如:①将BRAF抑制剂用于辅助/新辅助治疗;②靶向联合免疫治疗或抗血管生成药物;③双靶耐药后,探索耐药机制以开发新靶向药物或新联合治疗模式,或研发新型BRAF抑制剂,或尝试探索双靶耐药后“再挑战”等。近年来的一些病例报告或探索性研究已经提供了这些方向的线索。目前,达拉非尼联合曲美替尼已被美国国家综合癌症网络(National Comprehensive Cancer Network,NCCN)和欧洲肿瘤内科学会(European Society for Medical Oncology,ESMO)等多个指南优先推荐为BRAF V600E/V600突变NSCLC患者的优选治疗。将聚焦于BRAF V600突变NSCLC患者,对其临床/病理学特征及治疗进展进行系统阐述。