鼠肉瘤病毒致癌基因突变与非小细胞肺癌临床病理特征和预后的相关性分析

目的分析鼠肉瘤病毒致癌基因(KRAS)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者中的突变状况及其与NSCLC患者的临床病理特征和预后关系,为NSCLC临床治疗提供数据支撑。方法收集郑州大学附属肿瘤医院2015年1月至2016年12月收治的经组织病理学确诊并行二代测序技术检测(NGS)的551例NSCLC患者的临床资料,随访至2018年12月31日,排除其中随访丢失的患者数据,共计356例患者入组此研究,讨论KRAS基因突变状态及其与临床病理特征、预后的关系。结果356例NSCLC患者中,42例患者KRAS基因突变,包括2号外显子突变的患者36例和3号外显子突变的患者6例其中2例为合并表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的患者,与KRAS基因野生型比较,KRAS基因突变多见于≥60岁、男性、吸烟的NSCLC患者(χ^2=13.199,P<0.001;χ^2=12.926,P<0.001;χ^2=22.423,P<0.001),而TNM分期、病理类型则对KRAS基因突变无明显影响(χ^2=0.521,P=0.914;χ^2=1.777,P=0.183)。KRAS基因突变NSCLC患者的中位疾病无进展生存时间和中位总生存时间分别为5.5个月和10.7个月,均显著低于KRAS基因野生型NSCLC患者的10.2个月和18.6个月,差异均有统计学意义(P=0.001;P=0.001)。亚组分析显示删除2例含EGFR、KRAS基因双突变的患者,KRAS基因2号外显子突变NSCLC患者与3号外显子突变NSCLC患者的中位疾病无进展生存时间比较差异无统计学意义(P=0.795)。对于KRAS基因突变患者,化疗治疗组中位总生存时间为10.4个月,长于未治疗组的2.2个月,差异有统计学意义(P<0.001)。结论NSCLC患者KRAS基因突变状态可能与患者年龄、性别、吸烟史有关,KRAS基因突变预示着NSCLC患者更差的预后,而化疗能延长其生存时间。

结直肠癌组织中MMR蛋白表达、MSI、RAS和BRAF基因突变与临床病理特征的关系

目的 探讨结直肠癌患者癌组织中错配修复(MMR)蛋白表达、微卫星不稳定性(MSI)、大鼠肉瘤(RAS)基因和致癌同源体B1(BRAF)基因突变与临床病理特征的关系。方法 选取该院2022年1-12月接受根治手术治疗的352例结直肠癌患者的肿瘤组织和血液标本、42例非肠癌患者的实体瘤组织和血液标本,采用免疫组化法检测MMR蛋白表达,一代测序片段分析法检测MSI,实时荧光定量聚合酶链反应检测KRAS、NRAS和BRAF基因突变状态,分析MMR蛋白表达、MSI和3种基因突变状态与结直肠癌临床病理特征的关系。结果 352例CRC患者肿瘤组织中检出MMR缺陷(dMMR)29例(8.2%),高度微卫星不稳定(MSI-H)26例(7.4%),KRAS基因突变161例(45.7%),NRAS基因突变13例(3.7%),BRAF基因突变11例(3.1%)。与dMMR有关因素为低龄、黏液腺癌、原发于右半结肠癌(P<0.05);与MSI-H相关因素包括低龄、肿瘤家族史、原发于右半结肠癌(P<0.05);KRAS和NRAS基因高突变率分别与黏液腺癌和淋巴结转移有关(P<0.05);BRAF基因高突变率与低分化和原发于右半结肠癌有关(P<0.05)。BRAF基因突变与dMMR和MSI-H有关(P<0.05)。结论 MMR蛋白表达,MSI,以及KRAS、NRAS和BRAF基因突变与不同的临床病理特征有关。通过这5种分子标志物的联合检测可以对肿瘤进行分子分型,进一步为结直肠癌患者的个体化精准诊疗提供理论依据。

鼠肉瘤病毒癌基因突变非小细胞肺癌靶向治疗 研究进展

鼠肉瘤病毒癌基因(KRAS)突变是非小细胞肺癌中最常见的驱动基因突变之一,尽管在几十年前就已经发现KRAS基因突变,但由于其独特的生物特性,靶向治疗KRAS基因突变非小细胞肺癌一直面临瓶颈。然而新型KRAS G12C抑制剂的面世打破了这一僵局,使KRAS基因突变非小细胞肺癌靶向治疗得到进一步发展。目前国内外靶向KRAS突变非小细胞肺癌的研究机制主要是抑制膜定位、直接抑制KRAS基因、靶向抑制KRAS下游信号及抑制KRAS突变协同致死基因等。本综述概述KRAS基因突变非小细胞肺癌靶向治疗的研究进展,以便于临床医师更加深入了解这一特殊类型非小细胞肺癌的靶向治疗。

口腔鳞状细胞癌中的鼠肉瘤病毒基因

在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中,鼠肉瘤病毒基因(RAS)亚型哈维-RAS、柯尔斯顿-RAS和神经母细胞瘤-RAS的突变频率分别为11.2%(140/1 251)、4.5%(35/786)和0.3%(1/375)。RAS基因突变大多发生于第12、13和61位密码子,造成RAS蛋白处于不断激活状态。持续活化的RAS蛋白可不断激活迅速加速纤维肉瘤-促丝裂原激活蛋白激酶和磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B下游信号转导,从而使细胞异常增殖,最终导致细胞恶性转化。RAS蛋白及其下游信号分子是OSCC治疗的分子靶点。本文就OSCC中RAS基因突变、激活机制和治疗靶点等研究进展作一综述。

非小细胞肺癌患者肿瘤组织中EGFR和KRAS基因突变及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)患者肿瘤组织中表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)和鼠类肉瘤病毒致癌基因(KRAS)基因突变及临床意义。方法收集2019年1月~2021年8月南阳医专第一附属医院病理科因活检穿刺、手术切除和会诊的NSCLC标本128份。用荧光PCR检测肿瘤组织中EGFR、KRAS基因突变情况,并分析EGFR、KRAS现状以及与临床病理特征的关系。结果128例NSCLC患者中检出KRAS基因突变3例(占2.34%),其中G12A突变、外显子3Q61H和2 G12C突变各1例;检出EGFR基因突变43例(占33.59%),其中外显子19突变占比最高(13例,占30.23%),其次为外显子18突变(12例,占27.91%)和外显子20突变(7例,占16.28%)。不同临床病理特征患者NKRAS基因突变发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。EGFR基因突变中,腺癌基因突变率较非腺癌高,女性基因突变率较男性高,差异有统计学意义(P<0.05);其余病理特征与EGFR基因突变无关,差异无统计学意义(P>0.05)。结论NSCLC患者肿瘤组织中KRAS基因突变率较低,EGFR基因突变率较高且与患者病理类型、性别无关。

甲状腺癌相关基因检测的研究进展

甲状腺癌是头颈外科最常见的恶性肿瘤,也是最常见的内分泌恶性肿瘤之一。部分类型的甲状腺癌手术治疗的效果不佳,放化疗的敏感性也较低,为寻找更好的治疗方案,近年来研究发现鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)、转染重排(RET/PTC)、端粒酶反转录酶(TERT)、肿瘤蛋白53(P53)、鼠肉瘤病毒(RAS)等基因的突变和重排是导致甲状腺癌发生发展的重要原因,可以通过相关基因检测来预测甲状腺癌的良恶性以及预后情况,并且可以帮助确定治疗靶点从而进一步使用靶向药物来治疗这一部分难治性甲状腺癌。了解甲状腺癌患者的基因突变情况,对于明确其发病机制、制定个体化治疗方案都有很重要的意义。文章对相关基因与癌症发生之间的关系以及基因的研究进展做了概述,旨在为甲状腺癌临床诊治提供参考。

治疗非小细胞肺癌新药:kras基因突变靶向药物sotorasib

sotorasib是全球首款针对kras基因突变的靶向药物,于2021年5月28日经美国食品药品监督管理局批准上市,用于至少经过一次系统治疗且病情进展的kras基因G12C阳性非小细胞肺癌患者。sotorasib临床疗效较佳,主要不良反应有腹泻、肌肉骨骼疼痛、恶心、疲劳、肝损伤和咳嗽等。

高通量测序平台研究非小细胞肺癌热点基因突变情况分析

目的:探讨与分析高通量测序平台研究非小细胞肺癌热点基因突变情况。方法:选择2019年11月-2020年11月在本院肿瘤科诊治的非小细胞肺癌患者110例作为肺癌组,同期选择健康体检者110例作为对照组,提取血浆组织,采用高通量测序平台分析基因表达差异情况,重点检测热点基因突变情况。结果:两组所有入选者DNA提取体积>40μl,浓度>1ng/μl,总量>55ng,<200nt比例<5%,都符合质控要求,两组对比差异无统计学意义(P>0.05)。两组筛选出显著差异表达的基因共1245个,其中肺癌组表达上调652个,表达下调593个。基因测序与实时荧光定量PCR显示肺癌组的鼠肉瘤病毒致癌基因(Kirsten rat sarcoma viral oncogene,KRAS)、磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚基α基因(Phosphoinositide-3-kinase,catalytic,alpha gene,PIK3CA)、肿瘤蛋白P53(Tumor protein P53,TP53)表达水平都高于对照组(P<0.05)。基因测序显示肺癌组的KRAS、PIK3CA、TP53基因突变率分别为30.0%、22.7%、17.3%,高于对照组的3.6%、1.8%和0.9%(P<0.05)。结论:高通量测序平台能有效检出非小细胞肺癌热点基因突变情况,具有很好的应用可行性,值得推广应用。

鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1V600E基因突变与甲状腺乳头状癌的关系研究进展

作为甲状腺乳头状癌（PTC）的诊断和预后的分子生物学标志及开发治疗乳头状癌的靶基因，BRAFV600E基因突变已成为甲状腺癌研究领域中的热点。现就BRAFV600E基因及突变与PTC的诊断、治疗的关系及研究进展进行综述.

甲状腺穿刺液基细胞学诊断后的BRAF突变检测问题及对策

甲状腺癌B超引导下细针穿刺细胞学病理诊断后,利用剩余液基细胞进行分子病理v-raf鼠肉瘤病毒癌基因(v-raf murine sarcoma viral oncogene,BRAF)V600E突变检测以进行辅助诊断。该文分析了临床甲状腺穿刺进行细胞和分子病理诊断中遇到的若干问题,探讨发生的原因,给出解决问题的参考答案,对临床病理、内分泌和普外科医生都具有重要的参考价值。

Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物基因突变对骨关节肿瘤大鼠蛋白激酶信号通路的影响

目的探讨Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)基因突变对骨关节肿瘤大鼠蛋白激酶信号途径的影响。方法对健康雄性SD大鼠24只(对照组)与实验动物中心提供的KRAS突变雄性SD大鼠24只(突变组),采用骨肉瘤细胞大鼠骨髓腔注射的方法建立骨关节肿瘤大鼠模型;在造模后4周与8周检测蛋白激酶信号途径的重要因子—Toll样受体4(TLR4)、蛋白激酶B(Akt)的mRNA与蛋白在滑膜组织中的表达,及炎症因子(IL-6、TNF-α)的血清水平。结果突变组造模后4周与8周的血清IL-6、TNF-α水平显著高于对照组(P<0.01)。对照组大鼠膝关节内皮细胞层完整,以平滑肌细胞和弹力纤维为主,内弹力板连续规整,无增殖及脂质沉积;突变组大鼠膝关节表现为内膜增厚、部分管腔闭塞,有大量空泡细胞、脂质沉积。突变组造模后4周、8周的滑膜组织TLR4、Akt mRNA与蛋白相对表达水平显著高于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论KRAS突变可能通过激活骨关节肿瘤大鼠蛋白激酶信号途径的重要因子TLR4与Akt在转录与翻译水平的表达,从而促进炎症因子的释放,恶化骨关节肿瘤的病情。

结直肠癌中错配修复蛋白表达缺失的意义及其与大鼠肉瘤病毒癌基因、v-Raf小鼠肉瘤病毒癌基因同源物B基因状态相关性研究

目的分析探讨结直肠癌中4种错配修复(MMR)蛋白的表达及其临床意义,RAS、鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)基因状态及其与4种蛋白表达的相关性。方法采用免疫组织化学法检测634例结直肠癌组织中4种MMR蛋白的表达;对存在MMR蛋白表达缺失者进行微卫星不稳定(MSI)检测。对其中236例(含缺失组的53例)进行RAS和BRAF基因检测。计数资料组间比较采用χ^2检验。结果634例中53例(8.4%)发生MMR蛋白表达缺失,Mut L同源基因1(MLH1)、PMS2、人类MutS同源蛋白2(MSH2)和人类MutS同源蛋白6(MSH6)蛋白表达缺失率分别4.4%(28/634)、4.7%(30/634)、3.3%(21/634)、3.6%(23/634)。缺失组的53例进行MSI分子检测,其中49例(92.4%)出现2~5个位点微卫星不稳定,为MSI-H。236例(含缺失组的53例)结直肠癌RAS和BRAF基因检测结果显示,BRAF基因V600E突变11例,均为微卫星稳定(pMMR);v-Ki-ras2大鼠Kirsten肉瘤病毒基因同源基因(KRAS)基因突变109例,其中7例为错配修复基因缺陷(dMMR);NRAS基因2号外显子检测到突变8例,均为pMMR。结论MMR蛋白表达缺失组多发生于右半结肠,组织学分化差且常伴有粘液成分,肿瘤组织间可见显著的淋巴细胞浸润,患病年龄偏低。KRAS基因状态影响MMR蛋白表达。

甲状腺髓样癌分子生物学研究及基因靶向治疗临床应用进展

甲状腺髓样癌(MTC)是一种恶性程度较高的肿瘤,目前以手术治疗为主但容易复发,尚无有效且被广泛认可的挽救性治疗方案。本文回顾了近年来MTC相关的转染重排(RET)基因、BRAF基因、大鼠肉瘤病毒致癌基因同源突变(RAS)基因等研究进展,整合并分析了基于基因的分子学研究结果,以期找到可能存在的治疗靶点,为MTC挽救性保守治疗提供新思路,以改善MTC患者的预后。

基因与癌

体细胞的正常生长和分裂是在基因组,甚至整体的调控活动下进行的。但是,癌细胞几乎完全摆脱了这种调控系统而失去了控制,从而表现出不受周围组织制约,独立自主地在宿主体内进行扩散性的侵犯和转移。正常细胞是怎样失掉控制而变成癌细胞的呢?近年来很多试验表明,在每个体细胞的基因组里,有一类专门能使人们致癌的基因,叫做癌基因(oncogene)。这种基因一旦被某些因素所激活,这个细胞就能发生癌变。

人类K-ras基因突变质控品的建立

目的:建立人类K-ras基因突变质控品,用于K-ras基因突变检测试剂盒的注册检测工作。方法:根据人类K-ras基因序列设计引物,通过定点突变技术引入突变位点,将获得的PCR产物与克隆载体连接,转化感受态细菌后筛选阳性克隆,获得了包含不同突变位点的重组质粒,建立了人类K-ras基因突变质控品。结果:对人类K-ras基因突变质控品进行序列测定,并将测序结果进行BLAST比对,结果表明成功建立了人类K-ras基因突变质控品。结论:建立的K-ras基因突变体质控品包括常见的Kras基因12密码子突变类型,可以用于指导Kras基因突变检测试剂盒的注册检验工作。

^(18)F-氟代脱氧葡萄糖正电子发射计算机断层显像-CT代谢参数与结直肠癌患者临床特征的关系

目的探讨^(18)F-氟代脱氧葡萄糖(FDG)正电子发射计算机断层显像(PET)-CT代谢参数与结直肠癌患者临床特征的关系及对Kirsten鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)基因突变的预测价值。方法收集75例结直肠癌患者的临床资料,检测KRAS基因突变情况。分析^(18)F-FDG PET-CT代谢参数与KRAS基因突变型结直肠癌患者临床特征的关系,并分析^(18)F-FDG PET-CT代谢参数对结直肠癌KRAS基因突变的预测价值。结果75例患者中,KRAS基因突变型39例,野生型36例。肿瘤直径﹥4.5 cm KRAS基因突变型结直肠癌患者最大标准摄取值(SUV_(max))、平均标准摄取值(SUV_(mean))、肿瘤代谢体积(MTV)及病灶糖酵解总量(TLG)均高于肿瘤直径≤4.5 cm患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05);T3~4期KRAS基因突变型结直肠癌患者MTV及TLG均高于T1~2期患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。SUV_(max)、SUV_(mean)、MTV及TLG均与肿瘤直径呈正相关,MTV、TLG均与T分期呈正相关(P﹤0.05)。KRAS基因突变型结直肠癌患者SUV_(max)、SUV_(mean)及TLG均明显高于KRAS野生型患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。SUV_(max)、SUV_(mean)、MTV及TLG预测结直肠癌KRAS基因突变的曲线下面积(AUC)分别为0.833、0.696、0.681、0.629,以SUV_(max)最高。SUV_(max)、SUV_(mean)、MTV及TLG预测结直肠癌KRAS基因突变的灵敏度分别为0.883、0.753、0.724、0.676,特异度分别为0.817、0.714、0.694、0.659。结论^(18)F-FDG PET-CT代谢参数可一定程度上反映KRAS基因突变型结直肠癌患者的临床特征,可作为预测KRAS基因突变的辅助指标。

胃癌临床病理特征与KRAS基因突变的相关性研究

目的探讨胃癌临床病理特征与Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物KRAS基因突变相关性。方法选取2016年1月至2019年12月间陕西省核工业二一五医院收治的105例胃癌患者作为胃癌组,同期选取105例健康体检者作为对照组,抽取两组受试者的血液学样本,检测KRAS基因突变情况,调查患者的临床病理特征并进行相关性分析。结果胃癌组的癌胚抗原(CEA)、糖类抗原(CA199)和CA125值均高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。胃癌组的KRAS基因突变率为41.0%,高于对照组的1.9%,差异有统计学意义(P<0.05)。在胃癌组中,G12D突变24例,G12V突变16例,G13D突变3例;对照组突变2例为G12D突变。在胃癌组中,直线相关分析显示KRAS基因突变与组织学分化、神经脉管侵犯、临床分期、淋巴结转移、CEA、CA199和CA125都存在相关性,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论胃癌患者的KRAS基因突变比较常见,多为第12外显子上的突变,与患者的临床病理特征和常见肿瘤标志物都存在相关性。

上皮性卵巢癌组织中EGFR、KRAS的表达变化及意义

目的观察表皮生长因子受体(EGFR)、鼠Kirsten肉瘤病毒致癌基因(KRAS)蛋白在上皮性卵巢癌(下称卵巢癌)组织中的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测45例卵巢癌组织中的EGFR、KRAS蛋白,另选18例卵巢良性肿瘤组织和30例正常卵巢组织为对照。结果卵巢癌组织中EGFR、KRAS蛋白表达明显高于卵巢良性肿瘤和正常卵巢组织(P均<0.05)。EGFR阳性表达率与卵巢癌临床分期有关(P<0.05),KRAS蛋白阳性表达率与卵巢癌临床分期、分化程度有关(P<0.05);卵巢癌组织中EGFR与KRAS蛋白表达呈正相关(r=0.613,P<0.05)。结论卵巢癌组织中EGFR、KRAS蛋白表达明显上调,且两者呈正相关关系,在卵巢癌的发生、发展中起重要作用;KRAS蛋白可能为卵巢癌发生发展的始动因素,可作为卵巢癌的早期诊断指标之一。

miR-622在上皮性卵巢癌组织的表达差异及其机制

目的研究miR⁃622在上皮性卵巢癌组织的表达差异及作用机制。方法收集2018年度在我院手术切除卵巢上皮性癌组织80例、良性卵巢瘤组织40例、正常卵巢组织30例。采用实时荧光定量PCR方法检测3组组织的miR⁃622表达水平,采用免疫组化SP方法检测3组组织的KRAS、MAPK1、p⁃ERK蛋白表达水平。利用脂质体将miR⁃622模拟物转染至人卵巢癌SKOV3细胞株,应用Western Blot技术研究miR-622对KRAS、MAPK1、p⁃ERK蛋白表达的调控作用。结果卵巢上皮癌组织miR⁃622、KRAS蛋白、MAPK1蛋白、p⁃ERK蛋白表达水平明显高于良性以及正常卵巢组织,与卵巢癌的不同FIGO分期以及是否发生淋巴结转移相关,此外,KRAS蛋白在低分化以及粘液性癌组织呈高表达。体外SKOV3细胞株转染实验显示,上调SKOV3细胞株miR⁃622表达可以调控增加KRAS蛋白、MAPK1蛋白、p⁃ERK蛋白表达水平。结论miR⁃622在上皮性卵巢癌组织中呈高表达,能够调控卵巢癌细胞中KRAS、MAPK1、p⁃ERK多种蛋白的表达,并且参与卵巢癌的发生以及恶性演进。

伴微乳头结构的肺腺癌组织中EGFR及KRAS的表达变化及意义

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)、鼠Kirsten肉瘤病毒致癌基因(KRAS)表达与伴微乳头结构的肺腺癌患者临床病理参数间的关系。方法采用SP免疫组织化学染色方法检测伴微乳头结构的肺腺癌组织及对应癌旁正常组织中EGFR及KRAS蛋白的表达,运用Western blot法检测伴微乳头结构的肺腺癌组织及对应癌旁正常组织中EGFR及KRAS蛋白的表达量,并分析EGFR及KRAS蛋白阳性表达情况与患者临床病理特征的关系,采用Spearman等级相关分析EGFR及KRAS在伴微乳头结构的肺腺癌组织中表达的相关性。结果伴微乳头结构的肺腺癌组织中的EGFR与KRAS蛋白表达阳性率分别为74. 4%(67/90)、83. 3%(75/90),明显高于癌旁正常组织的15. 2%(7/46)、19. 6%(9/46)(P=0. 025,0. 018)。癌组织中EGFR、KRAS蛋白表达水平分别为0. 7136±0. 0652、0. 8751±0. 0347,明显高于癌旁正常组织的0. 2148±0. 0124、0. 2308±0. 0136 (P=0. 032,0. 029)。EGFR蛋白阳性表达率与TNM分期、淋巴结转移有关(P=0. 022,0. 015),KRAS蛋白阳性表达率与TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关(P=0. 017,0. 024,0. 011)。经Spearman相关分析显示,癌组织中EGFR与KRAS表达呈正相关(r=0. 516,P=0. 023)。结论 EGFR、KRAS蛋白表达在伴微乳头结构的肺腺癌组织中明显上调,且两者呈正相关的关系,在伴微乳头结构的肺腺癌发生及发展中具有重要作用。EGFR、KRAS检测可以作为早期诊断伴微乳头结构的肺腺癌的生物学指标。