不同革兰阴性菌内毒素对大鼠肺炎炎症因子和核因子κB表达的差异性研究

目的观察不同革兰阴性菌内毒素(ET)对大鼠肺炎炎症因子和核因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法选取32只体质量180~260g雄性SD大鼠作为研究对象,随机分为对照组、肠埃希菌组、克雷伯杆菌组、大铜绿假单胞菌组,每组8只。其中肠埃希菌组、克雷伯杆菌组、大铜绿假单胞菌组为模型组。对照组不予任何处理,模型组按照造模方法建立铜绿假单胞菌、立克雷伯杆菌、大肠埃希菌感染肺炎大鼠模型。比较各组WBC和中性粒细胞(PMN)、肺组织炎症因子、NF-κB及NF-κB抑制蛋白α(IκBα)mRNA的表达。结果克雷伯杆菌组、大肠埃希菌组、铜绿假单胞菌组WBC、PMN水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。克雷伯杆菌组、大肠埃希菌组、铜绿假单胞菌组白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。克雷伯杆菌组、大肠埃希菌组、铜绿假单胞菌组NF-κB、IκBαmRNA表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、克雷伯杆菌与肺炎的发生发展相关,可为肺炎的临床诊疗提供新的见解与思路。

小鼠肺炎病毒的分离和鉴定

本文采用SPF小鼠滴鼻分离到一株鼠肺炎病毒,经鸡胚试验、组织培养、间接免疫荧光试验(IFA),抗体产生实验,同时用美国鼠肺炎(PVM)药盒的验证试验均证实了该分离物为鼠肺炎病毒(简称PVM-Bj)。1986年PVM抗体检测按季度统计,其阳性率分别为51％,15％,7.7％,0％。

沙眼衣原体鼠肺炎株外膜蛋白抗原特性的研究

用提纯的鼠肺炎株免疫Balb/C小鼠,建立了一株能分泌种特异单克隆抗体和一株能分泌型特异单克隆抗体的杂交瘤细胞株。用电泳技术和兔疫印迹试验证实,所建立的种特异单克隆抗体可与各种沙眼衣原体血清型的外膜主蛋白(MOMP)抗原相反应,说明沙眼衣原体的种特异抗原决定簇位于各型MOMP上;而与型特异单克隆抗体有反应关系的型特异抗原决定簇只分布于鼠肺炎株的MOMP上。并用放射免疫法探讨了种特异单克隆抗体与鹦鹉热衣原体脑膜肺炎株外膜主蛋白抗原间的相互关系。

鼠肺炎沙眼衣原体毒力因子Pgp3蛋白的分段克隆表达

目的获得鼠肺炎沙眼衣原体(CM)质粒编码蛋白Pgp3氨基端(n)、羧基端(c)和中间段(m)分别删除的蛋白Pgp3Δn、Pgp3Δm和Pgp3Δc,为近一步研究其功能及沙眼衣原体(C.t)致病机制提供基础。方法用聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因Pgp3Δn、Pgp3Δm和Pgp3Δc,分别将其定向插入原核表达载体PET-30a(+)中,连接产物转化入大肠埃希菌DH5α、涂板、挑取单克隆提取质粒进行酶切、测序鉴定。鉴定正确的重组质粒分别转化入大肠埃希菌BL21,15℃诱导表达16 h和37℃诱导表达4 h,考马斯亮蓝染色和蛋白质印迹法鉴定目的蛋白。结果PCR扩增的目的基因Pgp3Δn、Pgp3Δm和Pgp3Δc的长度分别为597、525、324 bp,NdeI和HindⅢ双酶切重组质粒后电泳显示酶切片段大小符合预期,测序结果显示插入片段序列均与基因库中一致;考马斯亮蓝染色和蛋白质印迹显示目的蛋白分子量分别约为22000、18700和12000,3个蛋白片段均在15℃诱导表达16 h的条件下表达量更多。结论成功表达Pgp3Δn-His、Pgp3Δm-His和Pgp3Δc-His融合蛋白,为进一步研究Pgp3的功能位点和作用机制奠定基础。

基于“菌毒并治”理论对两种老龄大鼠肺炎模型作用机制的研究思路和方法

肺炎的发病率逐年增加，在我国肺炎的发病人数每年在1500万左右。老年人体质虚弱，呼吸道防御功能减退，排痰能力减弱，容易出现电解质紊乱、多系统和多器官功能衰竭（MOF）等并发症，严重威胁着老年人的生命，成为老年人死亡的一个重要原因。老年肺炎病死率居老年人所有疾病死亡原因的第四位，

左氧氟沙星不同用药方案对大鼠肺炎感染模型的疗效观察

目的:探讨左氧氟沙星不同用药方案对大鼠肺炎感染模型的疗效。方法:通过建立大鼠肺炎感染模型,依据不同剂量左氧氟沙星应用,观察三组治疗疗效。结果:三组大鼠血药浓度均不断增高,药物获得率均≥90%;三组肺组织匀浆细菌培养阳性率均≤20%,其中B组细菌培养阳性率和C组阳性率均为15%。结论:选择可以最大的消除病原菌的药物应用剂量,同时最小的降低不良发生率,为掌握临床实际应用抗生素治疗肺炎提供可靠理论依据,具有重要的意义。

鼠肺炎病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立

根据鼠肺炎病毒NS2基因保守区设计一对特异性引物,建立了一种快速、灵敏、特异的PVM检测方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行了评价。结果显示,标准品浓度在1.0×101~1.0×107 copy/μL之间时,其浓度的对数值与荧光定量RT-PCR实验中的Ct值之间有良好的线性相关性(相关系数R2=0.9988),且该标准品检出限为1.0×102 copy/μL。该方法对猪繁殖与呼吸综合征病毒、口蹄疫病毒、古典猪瘟病毒、牛病毒性腹泻粘膜病病毒、禽流感病毒均无扩增反应,引物具有良好的特异性。同时,该方法实验间的变异系数为0.51%~1.56%,均小于2%,表明该方法扩增稳定性高、重复性强。结果表明:该研究新建的PVM实时荧光定量RT-PCR检测方法有着特异性好、灵敏度高、重复性强的优点,可用于PVM的监测以及流行病学研究。

鼠肺炎病毒实时荧光定量聚合酶链反应方法的建立及其在新型冠状病毒感染模型用小鼠等动物检测中的应用

目的建立鼠肺炎病毒(pneumonia virus of mice,PVM)实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,Q-PCR)检测方法,用于新型冠状病毒感染模型用小鼠等实验动物及其动物相关样本的检测。方法选择PVM G基因保守序列设计合成引物和探针,建立Q-PCR方法。并进行方法的线性、特异性、敏感性、重复性、稳定性和可信度验证。应用建立的方法对包括用于构建新型冠状病毒感染模型用hACE2等8个品系142只小鼠,及15只大鼠、5只沙鼠、4只黄鼠、63只裸鼹鼠和19只PVM感染小鼠的肺组织样本进行PVM检测。结果建立的方法与仙台病毒、呼肠孤病毒Ⅲ型、汉坦病毒、淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒无交叉反应。方法的线性范围为1×10^(1)-1×10^(8)拷贝/μl,检测病毒质粒标准品灵敏度达101拷贝/μl;重复性、稳定性结果显示实验内和实验间平均变异系数均<5%。用建立的方法检测用于构建新型冠状病毒感染模型用hACE2等8个品系142只小鼠,及15只大鼠、5只沙鼠、4只黄鼠和63只裸鼹鼠,结果均为阴性;检测19只PVM感染小鼠肺组织样本,PVM阳性率为36.84%(7/19),与RT-PCR检测结果符合率为100%。结论建立的PVM Q-PCR方法特异性、敏感性,重复性、稳定性好,检测结果可靠,能够用于构建新型冠状病毒感染模型常用品系小鼠等实验动物的监测及其相关样本的检测。未发现用于构建新型冠状病毒感染模型常用品系小鼠携带PVM。

IL-21/IL-21R介导的CD4^(+)T细胞在沙眼衣原体小鼠肺炎菌株呼吸道感染中的作用

目的:探讨IL-21/IL-21R介导的CD4^(+)T细胞在沙眼衣原体呼吸道感染中的作用。方法:利用C57BL/6小鼠(WT小鼠)和IL-21R-/-小鼠,鼻腔吸入沙眼衣原体小鼠肺炎菌株(Chlamydia muridarum;Cm)建立小鼠沙眼衣原体呼吸道感染模型。流式细胞术检测小鼠Cm呼吸道感染后0、3、7、14 d小鼠肺、脾组织中CD4^(+)T细胞数量、活化程度和功能,ELISA分析脾细胞培养上清中IFN-γ和IL-4的含量。监测过继转移WT-CD4^(+)T细胞和IL-21R-/--CD4^(+)T细胞的na?ve WT小鼠Cm呼吸道感染后的体重变化,并分析感染后14 d的肺部细菌载量和病理情况,流式细胞术检测肺中性粒细胞(CD45+CD11b+Gr-1 high)、肺泡巨噬细胞(CD45+F4/80+CD11c high)、Th1(IFN-γ+CD4^(+))和Th2(IL-4^(+)CD4^(+))细胞的比例,ELISA分析脾细胞培养上清中IFN-γ和IL-4的含量。结果:Cm呼吸道感染后,与WT小鼠相比,IL-21R-/-小鼠脾、肺组织CD4^(+)T细胞数量和活化程度以及Th1细胞比例均升高,Th2细胞比例下降,脾细胞培养上清中IFN-γ含量升高,IL-4含量下降。过继转移IL-21R-/--CD4^(+)T细胞的受体小鼠在Cm呼吸道感染后体重下降幅度减小,肺组织细菌载量和病理情况减轻,肺Th1细胞比例升高,脾细胞培养上清中IFN-γ含量增加。结论:IL-21/IL-21R介导的CD4^(+)T细胞通过抑制Th1细胞免疫应答加重Cm呼吸道感染。

树突状细胞在沙眼衣原体小鼠肺炎株呼吸道感染中免疫保护作用的研究

目的探讨树突状细胞(dendritic cells,DC)在沙眼衣原体小鼠肺炎株(Chlamydia muridarum,Cm)呼吸道感染中的作用以及对适应性免疫应答的影响。方法C57BL/6小鼠经鼻腔吸入1×10^(3)包涵体形成单位(inclusion-forming units,IFU)Cm建立小鼠呼吸道感染模型。流式细胞术检测感染后0、3、7 d脾组织中总CD11c^(+)MHCⅡ^(+)DC比例和共刺激分子(CD40、CD80和CD86)表达情况;qPCR检测小鼠脾组织中DC细胞因子IL-12p40、IL-10和IL-6 mRNA的表达;磁珠分选出Cm感染后7 d的小鼠脾组织DC并过继转移给受体小鼠,于感染后14 d利用细胞内细胞因子染色检测受体小鼠Th1应答水平。结果Cm感染诱导小鼠脾组织DC大量浸润并且共刺激分子表达增加;脾组织DC细胞因子IL-12和IL-10 mRNA的表达在感染后3 d达到高峰;将Cm感染小鼠脾组织DC过继转移给受体小鼠,受体小鼠感染Cm后疾病减轻,肺组织衣原体繁殖降低,且肺和脾组织中的Th1细胞比例显著升高。结论DC在Cm感染后成熟、活化并促进Th1细胞免疫应答,在衣原体呼吸道感染中发挥免疫保护作用。

安石榴苷调节AMPK/SIRT1信号通路对肺炎大鼠氧化应激损伤的影响

目的探讨安石榴苷(Pun)基于AMPK/SIRT1信号通路对肺炎大鼠氧化应激损伤的影响机制。方法利用铜绿假单胞菌建立肺炎大鼠模型,将大鼠分为对照组(NC组)、模型组(M组)、安石榴苷低、中、高剂量组(Pun-L、M、H,10、20、40 mg/kg)、安石榴苷高+AMPK抑制剂Compound C组(Pun-H+CC组,40 mg/kg+0.2 mg/kg)。全自动血气分析仪检测大鼠血气值;HE染色观察大鼠肺组织病理学变化;Wright-Giemsa染色观察肺泡灌洗液中炎性细胞(白细胞)数目;ELISA法测定肺泡灌洗液炎性因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)水平;氧化应激因子水平采用试剂盒检测;蛋白表达采用Western Blot法检测。结果与NC组比较,M组大鼠肺损伤严重,PaCO_(2)、炎性因子水平、白细胞数量、MDA含量和p-NF-κB/NF-κB蛋白表达均显著升高,PaO_(2)、SaO_(2)、SOD、GSH-Px、p-AMPK/AMPK、SIRT1、Mn SOD蛋白表达显著降低(P均<0.05);与M组比较,Pun-L、M、H组大鼠肺组织病理学变化好转,PaCO_(2)、炎性因子水平、白细胞数量、MDA含量和p-NF-κB/NF-κB蛋白表达均显著下降,PaO_(2)、SaO_(2)、SOD、GSH-Px、p-AMPK/AMPK、SIRT1、Mn SOD蛋白表达显著上升(P均<0.05);与Pun-H组比较,Pun-H+CC组大鼠肺损伤严重,PaCO_(2)、炎性因子水平、白细胞数量、MDA含量和p-NF-κB/NF-κB蛋白表达均显著升高,PaO_(2)、SaO_(2)、SOD、GSH-Px、p-AMPK/AMPK、SIRT1、Mn SOD蛋白表达显著降低(P均<0.05)。结论Pun可以通过上调AMPK/SIRT1信号通路表达,抑制肺炎大鼠氧化应激损伤,减轻炎症反应。

鼠肺炎沙眼衣原体质粒蛋白pgp5的克隆表达鉴定及免疫原性分析

目的获取鼠肺炎沙眼衣原体(Chlamydia muridarum)质粒蛋白pgp5的基因及纯化的蛋白并鉴定其免疫原性。方法设计引物,PCR扩增目的基因,将其定向插入到原核表达载体pET28a中,然后将重组质粒转化入大肠杆菌E.coli DH5α中,并用PCR扩增及序列测定等方法对重组质粒进行鉴定。再将重组质粒转化入感受肽Rosetta(DE3)并诱导表达,用镍柱纯化pgp5-his融合蛋白。用纯化后的目的蛋白免疫新西兰家兔,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定抗体效价,Western blot、细胞免疫荧光方法检测抗体与pgp5蛋白的结合。结果所获得的pgp5基因片段经测序长度为795 bp,检索确认其序列与GeneBank一致。十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹实验均显示获得相对分子质量约29 000的纯化蛋白。ELISA检测多克隆抗体效价达1∶100 000。细胞免疫荧光检测结果显示抗体可与体外培养的鼠肺炎沙眼衣原体特异性结合。结论成功表达pgp5-his融合蛋白,并制备了高效价、高特异性的抗pgp5抗体,为进一步研究奠定了基础。

疏风宣肺方和解表清里方干预流感病毒性肺炎小鼠细胞凋亡的研究

目的病毒感染宿主细胞后,细胞凋亡天门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白(caspase)途径激活限制病毒复制,但甲型流感病毒感染引起的细胞凋亡的分子机制尚不完全清楚。探讨流感病毒性肺炎小鼠肺组织细胞凋亡相关的基因及2种不同抗流感病毒方药的治疗作用。方法制备甲型流感病毒性肺炎小鼠模型,随机分为空白组、肺炎模型组、奥司他韦对照组、疏风宣肺方高、中、低剂量组,解表清里方高、中、低剂量组。提取各组小鼠肺组织总RNA,采用基因组芯片筛选出与凋亡密切相关的差异表达基因,并用荧光定量PCR对天门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白基因进行验证。结果肺炎模型组肺组织中差异表达基因casp-3、casp-8、casp-9、Fas、FasL、TNF、TNFrasf1a、Tradd、IL1a、IL1b、IL1r1、IL1r2、casp-7明显上调,与空白组比较差异有统计学意义。疏风宣肺方中剂量组差异表达基因casp-8、casp-7、Fas、FasL、TNF、TNFrasf1a、Tradd、IL1a、IL1b、IL1r1、IL1r2明显下调。疏风宣肺方低剂量组下调上述基因的作用强于解表清里方低剂量组,疏风宣肺方中剂量组治疗效果优于解表清里方中剂量组。疏风宣肺方低剂量组与解表清里方中剂量组对casp-3、-8、-9表达有显著抑制,差异有统计学意义(P<0.01)。不同剂量疏风宣肺方的治疗效果与解表清里方比较如下:疏风宣肺方低剂量组>疏风宣肺方中剂量组>解表清里方中剂量组>解表清里方低剂量组。结论疏风宣肺方对细胞凋亡调控基因的调控作用强于解表清里方,上调casp-3、-8、-9表达,对抗流感病毒感染后的细胞凋亡较强,对甲型流感病毒性肺炎小鼠治疗作用优于解表清里方。

沙眼衣原体小鼠肺炎菌株呼吸道感染诱导肺泡巨噬细胞和肺间质巨噬细胞浸润并极化

目的探讨沙眼衣原体呼吸道感染对肺泡巨噬细胞(alveolar macrophages,AMs)和肺间质巨噬细胞(interstitial macrophages,IMs)浸润并向M1型或M2型极化的影响。方法C57BL/6小鼠以鼻腔吸入沙眼衣原体小鼠肺炎菌株(Chlamydia muridarum,Cm)建立小鼠沙眼衣原体呼吸道感染模型。采用流式细胞术检测Cm呼吸道感染后0 d、3 d、7 d、14 d肺组织中AMs(CD45^(+)F4/80^(+)CD11c^(+))和IMs(CD45^(+)F4/80^(+)CD11c-)比例并分析细胞数目,同时检测AMs和IMs中M1型巨噬细胞(CD80^(+)、CD86^(+)、MHCⅡ^(+)、iNOS^(+)细胞)比例和M2型巨噬细胞(CD206^(+)、Arg1^(+)细胞)比例。结果(1)Cm呼吸道感染诱导AMs和IMs浸润,与未感染组(0 d)比较,感染后3 d AMs和IMs比例和数目显著增加(P<0.05和P<0.01),感染后7 d AMs和IMs数目均达峰值(P<0.001)。(2)与未感染组比较,感染后3 d AMs中CD80^(+)和CD86^(+)细胞比例明显升高(P<0.05和P<0.01);AMs中MHCⅡ^(+)细胞比例在感染后持续升高,于14 d达峰值(P<0.05),CD206^(+)细胞比例在感染后持续降低(P<0.05)。(3)与未感染组比较,感染后3 d IMs中CD80^(+)和CD86^(+)细胞比例显著升高(P<0.05和P<0.001),感染后14 d MHCⅡ^(+)细胞比例明显升高(P<0.01),CD206^(+)细胞比例变化差异无统计学意义。(4)AMs中iNOS^(+)细胞比例在感染后持续升高(P<0.01);AMs中Arg1^(+)细胞比例在感染后持续降低,与未感染组比较,感染后7 d和14 d显著降低(P<0.05)。IMs中iNOS^(+)细胞比例于感染后7 d达峰值(P<0.001),IMs中Arg1^(+)细胞比例变化差异无统计学意义。结论Cm呼吸道感染诱导AMs和IMs浸润并刺激AMs和IMs向M1型巨噬细胞极化,减弱AMs中M2型巨噬细胞极化水平,而对IMs中M2型巨噬细胞极化无显著影响。

曲美他嗪对重症肺炎大鼠保护作用的机制研究

目的探讨曲美他嗪对重症肺炎大鼠的保护作用。方法将大鼠气管注入肺炎克雷伯菌液,建立重症肺炎大鼠模型,大鼠被分为对照组、模型组和曲美他嗪组,感染的第7、9、11天,参照白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)的ELISA试剂盒说明检测血清中IL-6、IL-8的含量;根据吸光度变化计算肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性;Western bloting检测感染的第11天肺组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及NF-κB P65的蛋白表达。结果模型组、曲美他嗪组在第7、9、11天IL-6、IL-8含量及MPO活性均显著高于对照组(P<0.05),而曲美他嗪组在第7天IL-6、IL-8含量与模型组差异无统计学意义(P>0.05),第9天和11天IL-6、IL-8含量均显著低于模型组(P<0.05),三个时间点MPO活性均显著低于模型组(P<0.05);模型组、曲美他嗪组MMP-2、MMP-9、NF-κB P65蛋白表达均显著高于对照组(P<0.05),而曲美他嗪组MMP-2、MMP-9、NF-κB P65蛋白表达均显著低于模型组(P<0.05)。结论曲美他嗪可通过降低炎症因子IL-6和IL-8含量,抑制MPO活性,下调MMP-2和MMP-9及NF-κB信号通路NF-κB P65蛋白表达,从而对重症肺炎大鼠起保护作用。

沙眼衣原体小鼠肺炎株呼吸道感染诱导巨噬细胞浸润并向M1极化

目的探讨沙眼衣原体小鼠肺炎株(Chlamydia muridarum,Cm)呼吸道感染对巨噬细胞浸润及向M1/M2极化的影响。方法经鼻腔给予C57BL/6小鼠1×103包涵体形成单位(inclusion-forming units,IFU)Cm建立小鼠沙眼衣原体呼吸道感染模型。流式细胞术检测肺组织中F4/80+总巨噬细胞及CD86、主要组织相容性复合体Ⅱ(major histocompatibility complexⅡ,MHCⅡ)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、CD206表达情况;实时荧光定量聚合酶链反应检测肺组织中iNOS、CD206、CCL2 mRNA表达。结果Cm呼吸道感染诱导小鼠肺组织中巨噬细胞增加,与未感染组比较,感染后第3天F4/80+巨噬细胞显著增加,并且持续到第7天;Cm感染后,M1型巨噬细胞表面标志CD86、MHCⅡ及M1型巨噬细胞相关趋化因子CCL2表达增加,巨噬细胞向M1型极化;M2型巨噬细胞表面标志CD206逐渐降低。进一步研究发现,M1型巨噬细胞活化指标iNOS在感染后增加,第7天达到高峰。结论Cm呼吸道感染后可诱导巨噬细胞在肺组织大量浸润,且向M1型巨噬细胞极化。

热毒清口服液对克雷伯菌老年肺炎大鼠模型炎症反应的影响

目的:观察热毒清口服液对肺炎克雷伯菌感染大鼠炎症反应的影响,探讨其部分作用机制,为热毒清口服液治疗老年肺炎的临床应用提供实验基础和依据。方法 :将75只老龄雄性大鼠随机分为5组,分别为正常对照组、模型组、中药组、西药组和中西医结合组,每组15只。气管内注射肺炎克雷伯菌建立肺炎感染模型,治疗组分别用热毒清口服液(中药组)、头孢呋辛酯(西药组)、热毒清口服液+头孢呋辛酯(中西医结合组)治疗,于末次给药后24h取材。观察各组大鼠的一般情况、肺组织病理、影像学变化,检测外周血中白细胞总数及中性粒细胞计数,用ELISA法检测血清中C反应蛋白的含量。结果 :模型组大鼠出现明显的感染中毒症状,肺组织大体充血水肿,触摸有实质感,光镜下显示肺组织炎症细胞浸润,影像学提示实变征象,外周血白细胞总数、中性粒细胞计数及C反应蛋白含量均增高。与模型组比,各治疗组的上述表现均较模型组减轻,外周血白细胞总数、中性粒细胞计数及C反应蛋白含量均降低,以中西医结合组改善明显。结论 :热毒清口服液可以降低老年肺炎大鼠模型的炎症反应,减轻炎症损伤,保护肺组织。热毒清口服液对肺炎的治疗机制可能与减轻炎症反应有关。

黄芩片治疗肺炎呼吸衰竭模型大鼠的效果及作用机制研究

目的探究黄芩片通过调控NLRP3/Caspase-1通路影响大鼠肺炎呼吸衰竭的分子机制。方法购买SD健康雄性大鼠,尾静脉注射脂多糖(0.2 mg/100 g)构建呼吸衰竭模型,分为Normal组、Model组和黄芩片组,各6只。检测各组大鼠呼吸频率、氢离子浓度(pH)、二氧化碳分压(PaCO_(2))、氧分压(PO_(2))、50%用力呼气流量(FEF50)和呼气峰流速值(PEF)水平,HE染色观察肺组织病理形态学,ELISA检测炎症因子IL-1β、IL-8、IL-10和IL-17表达水平,qRT-PCR和Western Blot检测NLRP3和Caspase-1的表达水平。结果Normal组肺泡结构完整,大小均匀,Model组肺泡间隔增加,发现炎性细胞浸润,而黄芩片组炎性细胞浸润程度下降;与Model组相比,黄芩片组的呼吸频率、pH、FEF50、PEF、PaCO_(2)和PaO_(2)显著降低(P<0.05),炎症因子IL-1β、IL-8、IL-10和IL-17表达水平显著降低(P<0.05),和Model相比,黄芩片组的NLRP3和Caspase-1的mRNA和蛋白表达水平均有所降低(P<0.05)。结论黄芩片通过可能通过调控NLRP3/Caspase-1通路影响肺炎呼吸衰竭大鼠的炎症反应和疾病进程。

毒素清口服液对大肠杆菌肺炎模型老龄大鼠急性反应蛋白的影响

目的 :研究毒素清口服液对大肠杆菌肺炎老龄大鼠模型急性反应蛋白的影响。方法 :复制老龄大鼠大肠杆菌肺炎模型 ,分为老龄对照组、模型组、毒素清高、低剂量组、氟哌酸组。观察肺含水量、肺泡灌洗液中白细胞、中性粒细胞计数和纤维结合蛋白 (Fn)以及血清 C反应蛋白 (CRP)、铜蓝蛋白 (CP)。结果 :老龄模型组肺含水量、肺泡灌洗液中性粒细胞和血清 CRP和 CP含量均高于老龄对照组 ,各用药组肺泡灌洗液中性粒细胞和血清 CP和 CRP含量均低于老龄模型组 (P <0 .0 5 ) ;肺泡灌洗液和血清中的 Fn,老龄模型组显著低于老龄对照组 (P <0 .0 1) ,各用药组明显升高 (P <0 .0 1)。结论 :肺中性粒细胞和血清中急性反应蛋白的变化参与肺炎的发生发展 ;

大鼠肺孢子菌肺炎的中药治疗研究进展

肺孢子茵肺炎（pneumocystis pneumonia，PCP）是由肺孢子菌（Pneumocystis Jiroveci，PC）引起的急性肺炎，是免疫功能低下患者的严重肺部机会性感染，也是进行肿瘤化疗和器官移植等细胞免疫功能低下患者最易感染的疾病。