大鼠胰岛的分离和纯化

目的探讨获得足够数量和较高纯度大鼠胰岛的分离和纯化方法。方法采用Ⅴ型胶原酶灌注消化法分离成年大鼠胰岛,Ficoll400非连续密度梯度法纯化胰岛。双硫腙(DTZ)染色鉴定培养的胰岛细胞,锥虫蓝染色检测细胞活性。葡萄糖刺激胰岛素释放试验评价胰岛细胞的功能。结果分离纯化后大鼠胰岛平均收获量为(480±30)IEQ,纯度大于90%,活性大于90%。在低糖和高糖刺激下,胰岛素分泌量分别为(12.28±0.89)mIU/L、(19.01±1.49)mIU/L,二者相比较,差异有统计学意义(P<0.05),刺激指数为(1.55±0.01)。结论胶原酶Ⅴ逆行灌注消化胰腺和Ficoll400非连续密度梯度纯化法,可获得高纯度高活率的大鼠胰岛。

一种经济高效的SD大鼠胰岛细胞分离技术

目的建立一种经济高效的大鼠胰岛细胞分离纯化方法,为胰腺的修复重建奠定实验基础。方法成年雄性SD大鼠25只,体重230～380g,共进行5次实验,每5只大鼠一组进行消化和分离。采用医用复方氯化钠注射液(compound sodium chloride injection,CSCI)经胰总管灌注大鼠胰腺,0.5mg/mLⅤ型胶原酶消化后,分别采用浓度为27.0%、23.0%、20.5%和11.0%的Ficoll 400形成不连续密度梯度介质,离心纯化胰岛细胞。双硫腙(dithizon,DTZ)染色行纯化前后胰岛细胞计数和纯度检测;荧光染料碘化丙啶(propidium iodide,PI)和二乙酸荧光素(fluorescein diacetate,FDA)储存液双染色鉴定胰岛细胞活性;RPMI1640培养基培养3d后,分别用浓度为2.8mmol/L的低糖和25.0mmol/L的高糖行葡萄糖刺激胰岛素释放实验检测胰岛细胞功能。结果5次实验胰岛细胞消化时间为(13.8±1.6)min。DTZ染色鉴定纯化前胰岛细胞数为(5626±422)个,纯化后为(2914±485)个,纯化后的胰岛细胞数较纯化前明显减少(P<0.01),回收率51.6%±6.0%,每个胰腺收获胰岛细胞数为(583±97)个/只。5次分离获得的胰岛细胞纯度为90.2%±3.4%,活性为81.6%±7.0%。培养3d后,葡萄糖刺激胰岛素释放实验显示:低糖环境下胰岛素水平为(39.7±7.5)EU/L,高糖环境为(116.1±17.4)EU/L,比较差异有统计学意义(P<0.01);刺激指数为3.0±0.4。结论采用CSCI作为大鼠胰岛细胞分离纯化的主要液体试剂,并采用低浓度Ⅴ型胶原酶消化,不仅可降低实验成本,同时可获得高质量的胰岛细胞。

高产的大鼠胰岛提取法

目的探寻经济、高产的大鼠胰岛分离纯化方法。方法Wistar大鼠分别以质量浓度为0.1%、0.05%及0.03%的!型胶原酶胆管灌注,灌注量6～8mL,经过静态及震荡2步消化法后,用Dextran不连续密度梯度法纯化胰岛。通过DTZ和AO/PI染色及葡萄糖刺激试验对分离纯化胰岛进行体外检测;通过体内肾被膜下移植检测其体内活性。结果3种胶原酶浓度平均胰岛收获量分别为(835±183)、(1243±339)及(711±103)个/只,通过体内外检测表明以0.1%、0.05%胶原酶分离纯化胰岛功能良好,0.05%收获量最大,0.05%和0.1%与0.03%之间比较P<0.05。结论以0.05%的胶元酶V6～8mL胆管灌注消化的方法是一种收获量较大,同时所提取胰岛数量多、活性良好,酶耗量较低的胰岛提取方法。

大鼠胰岛的分离、纯化与评价方法改良

【目的】简化胰岛的分离纯化方法,建立完善的胰岛评价体系。【方法】采用Ⅴ型胶原酶分离出Spra-gue-Dawley大鼠胰岛,并采用改良的3层Dextran不连续密度梯度离心法纯化胰岛。纯化的胰岛通过双硫腙(Dithi-zone,DTZ)染色进行计数及纯度检测,丫啶橙(AO)-碘化丙啶(PI)双染色法确定分离细胞的存活率,体外葡萄糖刺激释放胰岛素试验检测胰岛的分泌活性。采用Adobe Photoshop程序改进了常规的胰岛计数方法,并进行胰岛标准计数。【结果】平均每只成年Sprague Dawley大鼠的胰腺,可获得(3 840±24)当量数(IEQ)纯化胰岛,纯度可达到90%,细胞平均存活率达92%。【结论】采用改良的3层Dextran不连续密度梯度离心法及基于Adobe Photoshop程序的标准计数方法,可分别用于大鼠胰岛分离纯化和计数。

大鼠胰岛分离和纯化方法的比较及改进

目的对大鼠胰岛进行分离和纯化。方法胶原酶V内消化法分离胰岛,在通过Histopaque分离液1119、1083、1077配合使用HBSS缓冲液对胰岛进行纯化。结果该方法能够得到充足的胰岛,每只大鼠能够获取(758±55)个胰岛,纯度大于95%,并且与Ficoll法相比操作更加简单。结论胶原酶V内消化联合Histopaque法分离和纯化大鼠胰岛是一种简单有效的方法。

原代分离的大鼠胰岛细胞对葡萄糖刺激胰岛素分泌的反应性研究

目的:研究原代分离的大鼠胰岛对葡萄糖刺激的胰岛素分泌反应性。方法:胶原酶原位灌注法分离大鼠胰岛,在含0.5%BSA、5.5或11.1mmol/L葡萄糖的培养基中培养不同时间后,用含0.2%BSA、3.3mmol/L葡萄糖的KRB缓冲液预培养胰岛30min,分别换入含不同浓度葡萄糖KRB缓冲液,培养1h,收集上清,RIA法测定胰岛素浓度。结果:大鼠胰岛过夜培养后,在基础(3.3mmol/L)和高浓度(16.7mmol/L)葡萄糖条件下胰岛素分泌量分别为(12.4±3.2)和(45.2±4.2)μU/ml/10islets/h;5.5mmol/L和11.1mmol/L葡萄糖浓度下培养12h和20h后,胰岛对葡萄糖的反应性均明显高于16.7mmol/L和22.5mmol/L葡萄糖组(P<0.05);体外培养5d后,对高糖的反应性为(4.28±0.67)倍。结论:原代分离的大鼠胰岛可在(1～5)d内保持对葡萄糖的反应性。

灌注法提取大鼠胰岛及其体内外分泌功能的实验研究

目的:评估胶原酶灌注法提取大鼠胰岛体内外分泌功能。方法:Wistar大鼠以质量浓度0.05%V型胶原酶胆管灌注提取大鼠胰岛。DTZ、AO/PI染色计数及纯度、活性。葡萄糖刺激试验及体内肾被膜下移植检测其体内外分泌活性。结果:以0.05%的胶原酶提取大鼠胰岛有良好体外分泌活性,胰岛移植可使糖尿病大鼠血糖水平获不同程度下降,部分血糖水平正常。结论:灌注法提取胰岛数量多、活性良好,有良好葡萄糖刺激反应性及移植活性。

稠李花色苷酶法制备及对H_2O_2诱导大鼠胰岛素瘤细胞损伤的保护作用

目的:探究纤维素酶酶法制备稠李花色苷的最佳条件,并研究制备的稠李花色苷对H_2O_2诱导的大鼠胰岛素瘤(Ins-1)细胞损伤的保护作用。方法:通过单因素试验和正交试验,优化得到酶法制备稠李花色苷的最佳条件;稠李花色苷处理大鼠Ins-1细胞,进行形态学观察、3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide,MTT]细胞活力实验、2’,7’-二氢二氯荧光素二乙酸酯(2’,7’-dichloro dihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)荧光探针法检测细胞内活性氧实验研究稠李花色苷对H_2O_2诱导损伤的Ins-1细胞保护作用。结果:纤维素酶法提取稠李花色苷的最佳条件为:温度60℃、纤维素酶添加量9 mg/g、料液比1∶35(g/m L)、p H 3.5,此条件下稠李花色苷得率为(0.956±0.027)mg/g;形态学观察及MTT细胞活力实验显示,稠李花色苷对H_2O_2诱导损伤的Ins-1细胞具有较强的保护作用,DCFH-DA法检测细胞内活性氧实验说明,稠李花色苷能够显著地清除Ins-1细胞内的活性氧。结论:纤维素酶法制备稠李花色苷是一种有效的方法,制备的稠李花色苷对H_2O_2诱导的大鼠Ins-1细胞损伤具有较强的保护作用。

PDX-1蛋白对棕榈酸诱导的大鼠胰岛凋亡的保护作用

目的探讨PDX-1蛋白对棕榈酸诱导的大鼠胰岛凋亡的保护作用。方法PDX-1基因克隆及表达质粒的构建,PDX-1蛋白的表达、纯化和鉴定,PDX-1蛋白保护棕榈酸引起的胰岛细胞凋亡的研究。结果PDX-1蛋白可以延缓胰岛细胞的自然凋亡过程,保护其三维形态;可以降低处理后的胰岛Caspase-3活性,同时可以增加葡萄糖刺激胰岛素释放,PDX-1蛋白干预后的棕榈酸组(1.560±0.074)uIU/mL,与对照组(1.426±0.056)uIU/mL相比有显著差异(P<0.05)。结论表明PDX-1蛋白可以减少棕榈酸诱导的胰岛凋亡,保护β细胞功能。

大鼠胰岛分离纯化及功能测定

目的探讨分离和纯化高纯度、高活率、功能佳的大鼠胰岛的方法,并为胰岛移植等实验建立基础。方法采用胶原酶P逆行胆总管灌注,消化分离成年大鼠胰岛,Ficoll 400非连续密度梯度离心法纯化胰岛。形态观察,双硫腙(DTZ)染色鉴定胰岛,AO/PI染色检测细胞活率,胰岛素释放试验评价胰岛的功能。结果分离纯化后大鼠胰岛形态完整,平均获得量为(512±89)IEQ,胰岛细胞纯度大于90%;胰岛细胞活率大于90%。在低糖和高糖刺激下,胰岛素分泌量分别为(25.42±4.22)mIU.L-1和(38.75±4.56)mIU.L-1,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论胶原酶P逆行灌注消化胰腺、Ficoll 400非连续密度梯度离心法可获得形态、功能完好、高纯度、高活率的胰岛。

大鼠胰岛分离与纯化的实验研究

本实验经胰管注射胶原酶、胰腺静止消化方法。分离成年Wistar大鼠胰岛,葡聚糖密度梯度离心纯化。大鼠胰腺消化后,胰岛收获量为710～1015个/胰腺,纯化后胰岛收获量为610—820个/胰腺,纯度达92%。纯化胰岛形态结构完整,内分泌细胞超微结构保持良好;对葡萄糖刺激反应,胰岛素释放量是基础分泌水平的8倍;异体移植可逆转实验性糖尿病小鼠的高血糖达一周。

PDX-1蛋白对TNF-α和IL-1β诱导的大鼠胰岛凋亡的保护作用

目的探讨PDX-1蛋白对细胞因子(TNF-α、IL-1β)诱导的大鼠胰岛凋亡的保护作用。方法 PDX-1基因克隆及表达质粒的构建,PDX-1蛋白的表达、纯化和鉴定,PDX-1蛋白保护TNF-α和IL-1β引起的胰岛细胞凋亡的研究。结果 PDX-1蛋白可以延缓胰岛细胞的自然凋亡,降低处理后的胰岛Caspase-3活性和荧光细胞的数目;PDX-1蛋白干预后的细胞因子组的葡萄糖刺激胰岛素释放为(1.586±0.129)μI U/ml,与对照组(1.375±0.131)μI U/ml,相比有显著差异(P<0.05)。结论表明PDX-1蛋白可以减少细胞因子诱导的胰岛凋亡,保护β细胞功能。

重组大鼠胰岛素样生长因子-1聚(乳酸-羟基乙酸)共聚物缓释微球对2型糖尿病GK大鼠种植体周围骨形成的影响

目的评估重组大鼠胰岛素样生长因子-1(rrIGF-1)聚(乳酸-羟基乙酸)共聚物(PLGA)缓释微球对2型糖尿病GK大鼠种植体周围骨形成的影响。方法将20只雄性GK大鼠进行糖尿病造模成功后随机分为2组,分别给予加载包裹rrIGF-1的PLGA缓释微球(治疗组,n=10)和加载包裹与rrIGF-1等量安慰剂的PLGA缓释微球(糖尿病组,n=10)处理,再以10只未做处理的SD大鼠作为对照组。在所有大鼠胫骨内植入种植体,治疗组和糖尿病组大鼠同时分别加载等量相应种类的PLGA缓释微球。术后4、5、8周在种植体周围局部采血,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清骨钙素(OCN)、骨特异性碱性磷酸酶(B-ALP)及I型前胶原羧基前肽(PICP)含量。结果种植体植入术后4周,糖尿病组和治疗组的血清OCN、B-ALP和PICP水平均明显低于对照组(P均<0.05);术后5周,糖尿病组的OCN和B-ALP水平明显低于对照组和治疗组(P均<0.05),糖尿病组和治疗组的PICP水平也均明显低于对照组(P<0.05),治疗组的OCN水平明显高于术后4周(P<0.05),对照组的PICP水平则明显低于术后4周(P<0.05);术后8周,糖尿病组大鼠的OCN和B-ALP水平明显低于对照组和治疗组(P均<0.05),糖尿病组和治疗组大鼠的血清PICP水平均明显低于对照组(P均<0.05)。结论 rrIGF-1 PLGA缓释微球局部加载可促进GK大鼠种植体周围骨形成。

虎杖苷对四氧嘧啶诱导的大鼠胰岛细胞损伤的保护作用

目的:研究虎杖苷(Polydatin)对四氧嘧啶(Alloxan)诱导的大鼠胰岛素瘤INS-1细胞损伤的保护作用。方法:利用细胞增殖实验分别检测四氧嘧啶或虎杖苷对INS-1细胞增殖的影响,确定给药浓度;实验分为空白组、模型组(18 mmol/L四氧嘧啶)和不同浓度虎杖苷保护组(分别给予25、50μg/mL虎杖苷,同时给予18 mmol/L四氧嘧啶),检测细胞存活率、LDH释放、胰岛素分泌、凋亡相关Caspase-3和Caspase-9的活性、活性氧簇ROS、一氧化氮NO、丙二醛MDA的含量及抗氧化相关超氧化物歧化酶SOD、还原型谷胱甘肽GSH水平。结果:10~30 mmol/L四氧嘧啶处理使INS-1细胞存活率显著降低(P<0.05),18 mmol/L四氧嘧啶处理细胞贴壁数目减少,LDH释放升高,胰岛素分泌量降低,凋亡相关Caspase-3和Caspase-9的活性显著升高(P<0.05),氧化应激相关ROS、NO和MDA含量显著提高(P<0.05),抗氧化相关SOD和GSH水平显著降低(P<0.05)。5~100μg/mL虎杖苷对INS-1细胞无毒性作用,相较于模型组,25和50μg/mL虎杖苷能显著提高四氧嘧啶诱导INS-1细胞存活率,改善细胞形态,降低LDH活性,增加胰岛素分泌量,抑制凋亡相关Caspase-3和Caspase-9酶活性,抑制四氧嘧啶诱导的氧化损伤,提高抗氧化相关酶活力(P<0.05)。结论:虎杖苷对四氧嘧啶诱导的INS-1细胞损伤有显著保护作用,其作用机制可能与抑制氧化应激及凋亡有关。

小鼠胰岛的分离纯化及体外功能检测的实验研究

目的:探讨获得高质量小鼠胰岛的分离纯化方法,评价其功能。方法:采用胆总管内胶原酶灌注膨胀消化胰腺的方法分离小鼠胰岛,不连续密度梯度离心法纯化胰岛,用双硫腙(Dithizone,DTZ)对胰岛进行特异性染色计算胰岛产量及纯度,以葡萄糖和茶碱刺激胰岛素释放检测胰岛功能。结果:胰岛的产量和活性主要与胰腺均匀膨胀和胶原酶的消化时间有关。平均每个小鼠胰腺能得到150～250个高质量胰岛,活性>95%,纯度>90%。葡萄糖及茶碱(carbachol,Cch)刺激后胰岛素释放量明显增加。结论:改良的胆总管内胶原酶灌注膨胀消化小鼠胰腺及不连续密度梯度Ficoll-400纯化胰岛的方法,可获得产量较高、纯度及功能较好的胰岛。

胰岛素抵抗高血压大鼠胰岛素抵抗和血清瘦素水平对血脂的影响

用雄性Sprague Dawley大鼠建立胰岛素抵抗高血压大鼠模型 ,探讨胰岛素抵抗和血清瘦素水平的变化对血脂的影响。采用高果糖饲料喂雄性Sprague Dawley大鼠 ,观察其血压、胰岛素、瘦素和血脂水平的变化 ,用稳态模型评估胰岛素抵抗 ,并对上述指标进行相关性分析。结果发现 ,喂养 8周后 ,与对照组相比 ,模型组血压、血清胰岛素和胰岛素抵抗明显升高 ,血清瘦素、总胆固醇和甘油三酯水平升高 ,高密度脂蛋白降低。模型组中 ,胰岛素抵抗与血压、血清瘦素和甘油三酯呈显著正相关 ,与高密度脂蛋白呈显著负相关 ;血清瘦素与血压、血清胰岛素、胰岛素抵抗和甘油三酯呈显著正相关。结果提示 ,高果糖饲料可诱导雄性Sprague Dawley大鼠发生胰岛素抵抗、高血压、高瘦素血症和脂代谢紊乱 ,胰岛素抵抗和瘦素对脂代谢有广泛影响。

大气PM2.5对大鼠胰岛素瘤细胞凋亡及胰岛素分泌的影响

目的探讨PM2.5对大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1细胞)凋亡及胰岛素分泌的影响。方法采集并收集大气中PM2.5,用INS-1细胞建立细胞模型,用含不同浓度(200、20、2、0μg·mL^-1)PM2.5的培养基染毒,四甲基偶氮唑盐(MTT)细胞毒性实验检测不同浓度PM2.5对INS-1细胞活率的影响;葡萄糖刺激的胰岛素分泌实验(GSIS)检测不同浓度PM2.5染毒对INS-1细胞胰岛素分泌的影响;2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)做为荧光探针检测不同浓度PM2.5染毒对INS-1细胞活性氧(ROS)生成的影响;流式细胞Annexin V-FITC/PI双染法检测不同浓度PM2.5染毒对INS-1细胞凋亡率的影响。结果MTT实验结果显示:与0μg·mL^-1组比较,PM2.5染毒INS-1细胞24 h,20、200μg·mL^-1 PM2.5组INS-1细胞活率均降低(P均<0.05);当PM2.5染毒INS-1细胞48 h和72 h时,2、20、200μg·mL^-1组的INS-1细胞存活率均降低(P均<0.05)。GSIS实验结果显示:在基础葡萄糖浓度(5.6 mmol·L^-1)和高浓度葡萄糖(16.7 mmol·L^-1)刺激下,200μg·mL^-1组胰岛素分泌水平低于0μg·mL^-1组(P<0.05)。ROS含量检测实验结果显示:200μg·mL^-1组INS-1细胞内ROS含量高于0μg·mL^-1组(P<0.05)。流式细胞术实验结果显示:与0μg·mL^-1组比较,2、20、200μg·mL^-1组细胞晚期凋亡率均升高,20、200μg·mL^-1组细胞总凋亡率均升高(P均<0.05)。结论PM2.5可使INS-1细胞活力降低,胰岛素分泌水平降低,可能与ROS水平增高、进而诱导了INS-1细胞凋亡有关。

白藜芦醇减轻大鼠胰岛β细胞瘤细胞低氧损伤

目的研究白藜芦醇减轻大鼠胰岛β细胞瘤细胞(INS-1)低氧损伤的作用。方法将INS-1细胞分为三组,即常氧对照组(control)、低氧组(hypoxia)、低氧及白藜芦醇组(hypoxia+RSV);采用正常培养方法培养常氧对照组,用CCK8检测不同低氧时间(6、12、24、48 h)的细胞增殖情况,选择合适的时间条件构建低氧模型并用于下一步研究;再以不同浓度的白藜芦醇(8、10、12、15μmol/L)提前干预12 h,并进行前期设定的低氧条件处理,用CCK8检测合适的浓度条件,构建白藜芦醇干预模型并用于下一步研究。以组织活性氧试剂盒及线粒体超氧化物试剂盒检测氧化应激水平;线粒体膜电位及ATP水平检测线粒体功能;流式细胞仪分析检测凋亡;胰岛素定量检测试剂盒检测胰岛素分泌量;实时定量反转录检测Sirt1、Pdx1、Glut2的表达水平;蛋白免疫印迹检测相应蛋白水平。结果与常氧对照组相比,低氧组细胞增殖降低(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.01),线粒体功能降低(P<0.05),胰岛素分泌减少(P<0.05),Sirt1、Pdx1、Glut2基因及其相应蛋白表达水平降低(P<0.05)。而白藜芦醇干预可以明显减轻低氧应激损伤(P<0.05),促进增殖(P<0.05),逆转凋亡(P<0.01),改善线粒体功能(P<0.05),促进胰岛素分泌(P<0.05),促进Sirt1、Pdx1、Glut2基因及其相应蛋白表达水平(P<0.05)。结论白藜芦醇可以保护低氧造成的INS-1细胞氧化应激损伤,改善线粒体功能,抗凋亡,并促进胰岛素功能性基因表达,促进胰岛素分泌。

不同方式运动对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌脂肪沉积的影响及AMPK-ACC途径在调节脂肪酸氧化中的作用

目的:研究有氧运动、抗阻运动、有氧联合抗阻运动3种不同方式运动对胰岛素抵抗(IR)大鼠骨骼肌游离脂肪酸(FFA)及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、肉毒碱棕榈酰基转移酶(CPT1)活性水平的影响,为探讨不同方式运动对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌脂肪沉积的效果及AMPK-ACC途径在骨骼肌中调节脂肪酸氧化的作用。方法:高糖高脂饲料喂养建立胰岛素抵抗大鼠模型之后改为普食饲养,并随机分为高脂改善食对照组(C组)、有氧运动组(E组)、抗阻运动组(R组)、有氧+抗阻联合运动组(RE组),运动干预结束后检测股四头肌FFA、AMPK、ACC、CPT1酶活性水平。结果:(1)13周高糖高脂饮食造模后,与P组相比,造模组C组口服葡萄糖耐量、胰岛素耐量在30 min、60 min、曲线下面积AUC均有极显著性差异(P<0.01),造模组C组大鼠FBG无显著性差异(P>0.05);造模组C组FINS、ISI、HOMA-IR较P组均有极显著性差异(P<0.01)。(2)与C组相比,E组、R组、RE组血清FFA无显著差异(P>0.05);股四头肌FFA均显著降低(P<0.01),但各运动组间无显著差异(P>0.05)。(3)与C组相比,E组、R组、RE组AMPK酶活性均显著升高(P<0.01),RE组AMPK酶活性较E组、R组均显著升高(P<0.01);与C组相比,E组、RE组ACC酶活性有降低趋势,而R组则升高,但均无显著性差异(P>0.05),各运动组之间ACC酶活性也未见差异(P>0.05);各运动组CPT1酶活性较C组均显著升高(P<0.01),RE组CPT1酶活性较E组、R组均显著升高(P<0.01)。结论:(1)13周高糖高脂饮食干预成功造成胰岛素抵抗大鼠模型。(2)8周期不同运动均能显著降低IR大鼠骨骼肌脂肪沉积,其机制可能与运动显著上调IR大鼠骨骼肌AMPK、CPT1酶活性水平,增强脂肪氧化利用,改善胰岛素抵抗有关;联合有氧与抗阻运动较单一运动对脂肪氧化效果更为显著。(3)8周期不同方式运动干预未观察到IR大鼠ACC、CPT1的同步变化。IR大鼠骨骼肌脂肪酸氧化的调节可能独立于AMPK/ACC途径,ACC酶活性的调节对于降低脂肪含量是否重要,尚需进一步研究。