羊地方性鼻内肿瘤诊断技术研究进展

羊地方性鼻内肿瘤是由羊地方性鼻内肿瘤病毒引起的一种慢性、进行性、接触性传染病,临床症状为流鼻液、打喷嚏、呼吸困难、食欲减退、体重减轻、面部肿胀等,剖检可见鼻腔出现菜花样赘生物。目前尚未开发出针对性的疫苗,抗生素治疗无效,病死率高达100%,给养羊业造成了较大的经济损失。综述近年国内外有关羊地方性鼻内肿瘤病原学及诊断技术等的研究进展,以期为该病的诊断和预防提供参考。

一起山羊地方性鼻内肿瘤的调查与诊断

湖南省宁乡县某羊场山羊鼻内肿瘤的发生呈地方流行性,临床上病羊初期流出大量浆液性鼻液,随后鼻腔内出现糊样物和息肉样或不规则形肿物而表现呼吸困难。对两侧山羊鼻内肿块进行病理学检查,诊断为腺癌。

福建山羊地方性鼻内肿瘤的分子流行病学调查

为明确2014-2017年福建省多地区羊发生的一种以流稀薄鼻液为主要症状疾病的病原,对该病进行流行病学调查、肿瘤组织切片观察,特异性PCR诊断以及核酸序列分析,结果显示该病在流行病学、临床症状、病理变化、组织病理变化上与国内外已报道的病例表现基本一致,RT-PCR鉴定结果为ENTV-2,其中7个分离株与ENTV-2CHN2(分离于中国)处于同一进化树分支,1个分离株与ENTV-SC(分离于中国)、ENTVShaanxi(分离于中国)处于同一进化树分支。说明近几年福建省流行的羊肿瘤病的病原为ENTV-2,为福建省加强该病的防治奠定基础。

4例山羊鼻内肿瘤的诊断

四川省攀枝花市某羊场2013年1月至7月山羊发生鼻内肿瘤。感染羊全为雌性，年龄在1．5岁～7岁之间，病羊初期表现为流大量鼻液，眼球突出，随着病情的发展，后期病羊鼻腔内出现不规则形或息肉样肿物，临床上表现为呼吸困难、咳嗽；从10只临诊表现疑似鼻内肿瘤的山羊中随机选取4只剖检，观察可见肿瘤物自筛骨迷路黏膜向上生长，呈菜花状，经过PCR扩增及序列分析确诊为山羊地方性鼻内肿瘤。

四川一起山羊地方性鼻内肿瘤疫情的诊断

四川某地区山羊养殖基地发生一起特殊的肿瘤性疾病,通过流行病学及临床症状调查、尸体剖检、病理损伤的显微及超微结构观察和病原的核酸测序等一系列研究,将该病确诊为山羊地方性鼻内肿瘤(ENT)。本次疫病与国外报道的病例基本一致。这是国内首次报道ENT的病原,为该病的进一步研究奠定了基础。

山羊地方性鼻内肿瘤病毒重庆株基因组序列分析

目的分析山羊地方性鼻内肿瘤病毒(enzootic nasal tumor virus,ENTV)重庆株基因组序列。方法对临床病例进行剖检、病理学观察,提取组织总RNA,进行RT-PCR扩增,对获得的ENTV-2基因组序列进行测定及分析。结果鼻内肿瘤在鼻腔后端与鼻甲筛骨黏膜紧密相连,完全阻塞鼻腔,侵入鼻窦,呈灰红色、乳头状,表面覆盖大量透明黏液。肿瘤细胞以管状和乳头状结构排列。拼接出1条长度为7 243 nt的ENTV-2 CQ株基因组序列,约占ENTV-2基因组长度的96. 2%。该序列与四川ENTV-2的同源性,最高大于97%,与山羊内源性逆转录病毒(caprine endogenous retrovirus,CERV)gag(XM018046415CERV)的同源性高于98%,与陕西ENTV-2的同源性为91%~92%,与英国ENTV-2(AY197548)的同源性为88%。多序列比对显示,CQ株gag基因有2处多核苷酸插入,这一序列特征与XM018046415CERV的gag基因相同。除了AY197548ENTV-2单独构成Ⅱ群外,ENTV-2在羊反转录病毒进化树中构成Ⅰ群;CQ株与四川ENTV-2构成一分支,与陕西ENTV-2构成另一分支。结论该病例为山羊地方性鼻内肿瘤(enzootic nasal tumor,ENT),提示其病原可能是1株古老ENTV-2毒株,有遗传多样性。

一起南江黄羊地方性鼻内肿瘤的病理学观察

为了对羊地方性鼻内肿瘤的诊断和防治提供理论依据,对贵州省一起南江黄羊地方性鼻内肿瘤病例进行了临床症状与病理学观察。结果表明:患病南江黄羊临床上以面部肿胀、张嘴呼吸、鼻腔流出浆液性分泌物、呼吸困难与有鼻塞音等呼吸道症状和进行性消瘦为特征;肿瘤起源于筛骨黏膜,呈单侧生长、菜花状、粉红色,质脆,无包膜,表面覆盖大量黏液,完全占据单侧鼻腔;组织学上,鼻内肿瘤主要表现为腺管状生长,腺管管腔内充盈大量红染均质渗出物,有腺管共壁现象,瘤细胞偶见病理性核分裂象等;未发现肿瘤向其他组织与器官转移。

山羊地方性鼻内腺瘤病毒和内源性逆转录病毒gag变异区的克隆与分析

根据病毒gag变异区的两端设计引物,PCR扩增ENTV及ERVs的gag变异区,TA克隆并测序,经比对分析发现,在ERVs的783位~803位的＂CCT＂重复序列,编码多聚脯氨酸＂PPPPPPP＂,对应在ENTV gag中存在缺失突变和点突变,编码氨基酸为＂PSL＂,生物信息学预测该区域的变异位于一个重要的抗原决定簇中,对gag在ENTV和ERVs中的功能有较大影响,为进一步研究gag的抗原性及相关免疫学检测方法的建立奠定基础。