塞来昔布对鼻咽癌细胞株CNE-2Z作用的研究

目的:探讨塞来昔布对鼻咽癌细胞株CNE-2Z的生长抑制作用及可能机制。方法:以人鼻咽癌细胞株CNE-2Z为研究对象,体外药物敏感试验(MTT)观察不同浓度和作用时间的塞来昔布对细胞的生长抑制作用;免疫细胞化学染色检测细胞增殖核抗原(PCNA)和环氧化酶-2(COX-2)的表达;流式细胞术(FCM)检测药物作用后细胞周期分布。结果:MTT试验显示塞来昔布对人鼻咽癌细胞株CNE-2Z增殖有抑制作用,其抑制效应具有时间及浓度依赖的特点;流式细胞术表明塞来昔布可引起CNE-2Z细胞G0/G1期阻滞;免疫组织化学检测显示塞来昔布下调PCNA、COX-2蛋白表达。结论:CNE-2Z细胞中存在COX-2表达,塞来昔布可抑制鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖,可能成为鼻咽癌化疗的有效药物。

土贝母皂苷诱导人鼻咽癌细胞株CNE-2Z细胞凋亡的研究

目的 研究土贝母皂苷 (下称皂苷 )对人鼻咽癌细胞株CNE 2Z细胞凋亡的影响。方法 MTT法检测皂苷对CNE 2Z细胞生长的影响 ;形态学方法 (荧光显微镜和透射电镜 )、流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳观察和分析在皂苷作用下CNE 2Z细胞形态、DNA含量的变化和DNA断裂的情况 ;蛋白免疫印迹法检测凋亡相关基因bcl 2、bax和cas pase 3表达的变化。 结果 皂苷抑制CNE 2Z细胞的生长 ,其效果与皂苷的浓度和作用时间相关 ;诱导CNE 2Z细胞发生典型程序性死亡 ;凋亡抑制基因bcl 2表达逐渐减少 ;而凋亡诱导基因bax和caspase 3在 1、3、5h表达增高。 结论 诱导细胞凋亡是皂苷发挥抗瘤效果的一种重要机制 ;皂苷诱导的CNE 2Z细胞凋亡与bcl 2、bax和caspase

熊果酸诱导鼻咽癌细胞株CNE-2Z凋亡的实验研究

目的:探讨熊果酸诱导人鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡的作用机制。方法:用不同浓度的熊果酸处理CNE-2Z细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色检测熊果酸对CNE-2Z细胞的增殖抑制效应;流式细胞术分析细胞周期和凋亡率;应用免疫组织化学SP法检测凋亡相关基因bcl-2,bax和cox-2表达的变化;Western blot检测CNE-2Z细胞内caspase 3的表达。结果:熊果酸对CNE-2Z细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用,并呈浓度依赖性;流式细胞术分析表明S期细胞数减少,细胞主要阻滞在G0/G1期;免疫组织化学检测显示在凋亡过程中bax表达上调,bcl-2、cox-2表达下调;Western blot检测CNE-2Z细胞中caspase 3表达增强。结论:熊果酸在体外对CNE-2Z细胞有诱导凋亡的作用,其作用机制可能是通过促进caspase 3的活化和bax的表达上调、bcl-2、cox-2的表达下调来实现。

探讨姜黄素通过NF-κB对鼻咽癌CNE-2Z细胞的生长抑制作用、诱导凋亡作用及其机制研究

目的:探讨姜黄素通过NF-κB对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖的影响。方法:MTT法测定姜黄素对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖的影响,采用流式细胞仪测定姜黄素不同浓度下的CNE-2Z细胞凋亡情况,Western Blot测定NF-κB蛋白的表达。结果:姜黄素能影响CNE-2Z细胞的NF-κB蛋白表达,使NF-κB蛋白表达水平降低,说明姜黄素对CNE-2Z的增殖和转移有一定的影响。姜黄素对CNE-2Z的作用效果受作用时间和浓度影响,其对CNE-2Z细胞24 h的IC50数值为(43.514~45.435)μmol/L,48 h的IC50数值为(8.366~13.11)μmol/L,72 h的IC50数值为(5.658~8.469)μmol/L。结论:姜黄素能够通过NF-κB蛋白的表达,来抑制鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖与侵袭。姜黄素浓度越高,作用时间越长,CNE-2Z细胞增殖抑制效果越好。

脂质体介导bcl-x_L反义寡核苷酸对鼻咽癌CNE-2Z细胞株凋亡的影响

背景与目的:实验证明bcl-xL在鼻咽癌CNE-2Z细胞中存在高表达,它可能在鼻咽癌的发生发展中发挥着重要的作用。本研究以脂质体(lipofectin)为载体,将人工合成的bcl-xL反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynucleotide,ASODN)片段导入CNE-2Z细胞,拟探讨ASODN对CNE-2Z细胞的影响。方法:以bcl-xL的编码区为靶点,人工合成20个碱基全硫代修饰的反义寡核苷酸,脂质体转染反义寡核苷酸进入CNE-2Z细胞后,用MTT法检测细胞成活率;用琼脂糖凝胶电泳、荧光染色、流式细胞术等方法检测细胞凋亡。结果:MTT结果发现,ASODN在Lip介导下即可显著抑制CNE-2Z细胞株细胞增殖(P<0.01),ASODN对细胞增殖的抑制作用随其浓度增加而增强;ASODN作用细胞36h后,经Hoechst33258/PI双染在荧光显微镜下可见细胞缩小、染色质固缩、核断裂;流式细胞仪分析发现在G1峰前出现一个亚二倍体峰即凋亡峰;琼脂糖凝胶电泳分析可见ASODN/Lip处理组出现明显的“梯状”外观等凋亡特征性改变。结论:ASODN脂质体转染CNE-2Z细胞后可促进CNE-2Z的细胞凋亡;在肿瘤研究中,bcl-xL可作为一个有用的靶基因,为开发鼻咽癌基因治疗药物提供实验依据。

白细胞介素24对鼻咽癌CNE-2Z细胞株增殖的影响

目的探讨白细胞介素24(IL-24)对鼻咽癌CNE-2Z细胞株增殖的影响。方法取鼻咽癌CNE-2Z细胞株,进行细胞培养;用细胞计数、四甲基偶氮唑蓝(MTT)抑制试验,以IL-240 pg/L为对照组,检测不同浓度、不同时间的IL-24对鼻咽癌CNE-2Z细胞株增殖的影响。结果细胞计数及MTT比色法检测得出:体外培养的鼻咽癌CNE-2Z细胞株在培养的48 h增殖状况最差,并且随着IL-24浓度的增加,其活细胞数也随着减少,当IL-24为50 pg/L时,其增殖状况最差;当IL-24为100 pg/L时,其增殖状况反而好转。结论 IL-24可呈时间和剂量依赖性地抑制鼻咽癌CNE-2Z细胞株增殖。

IL-24对鼻咽癌CNE-2Z细胞株增殖的影响

目的探讨IL-24对鼻咽癌CNE-2Z细胞株增殖的影响,为临床应用提供理论依据。方法取鼻咽癌CNE-2Z细胞株,进行细胞培养;采取细胞计数和噻唑蓝(MTT)抑制试验的方法,以IL-24 0 ng/mL为对照组,检测不同浓度的IL-24对鼻咽癌CNE-2Z细胞株增殖的影响,找出IL-24作用的峰浓度。以IL-24达到峰值的浓度为实验组,不加IL-24的为对照组,培养72 h以了解细胞的增殖状况。结果细胞计数得出:体外培养的鼻咽癌CNE-2Z细胞株在培养的48 h时增殖状况最差,并且随着IL-24浓度的增加,其活细胞数也随着减少,当IL-24为50 ng/mL时,其增殖状况最差;当IL-24为100 ng/mL时,其增殖状况反而好转。MTT比色法检测IL-24对鼻咽癌CNE-2Z细胞株的抑制率得出:在培养的48 h时,其抑制率最高。IL-24浓度在0～50ng/mL范围内,随IL-24浓度增加,其抑制作用递增,而当IL-24>50 ng/mL其抑制作用有所减弱。结论 IL-24可呈时间和剂量依赖性地抑制鼻咽癌CNE-2Z细胞株的增殖。

土贝母苷甲诱导人鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡

背景和目的:土贝母犤Bolbostemmapaniculatum(Maxim.)Franquet犦是一种传统中药,我们以前的研究结果已证实从中药土贝母块茎中分离得到的土贝母苷甲(下称苷甲)有强抗肿瘤效果。本研究旨在探讨苷甲对人鼻咽癌细胞株CNE-2Z细胞凋亡的影响。方法:MTT法检测苷甲对肿瘤细胞生长的抑制作用,流式细胞仪分析细胞周期,荧光显微镜和电子显微镜观察细胞形态,琼脂糖凝胶电泳检测DNA电泳图谱的变化,蛋白免疫印迹法检测凋亡相关基因bcl-2和bax表达的变化。结果:苷甲抑制CNE-2Z细胞的生长,其24、48、72h的IC50分别为32.5、20.7、16.7μmol/L。苷甲诱导CNE-2Z细胞发生程序性死亡:流式细胞分析发现Sub-G1峰,50μmol/L苷甲作用CNE-2Z细胞12h,凋亡指数为72.8%;CNE-2Z细胞经苷甲作用(10μmol/L,24、48、72h;30、40、50、60μmol/L,12h)后,其DNA电泳图中出现典型的梯形条带。苷甲诱导bcl-2表达下调且磷酸化,并伴有bax高表达。结论:苷甲诱导CNE-2Z细胞发生形态学和生化学上典型的程序性死亡,其诱导的CNE-2Z细胞凋亡与bcl-2失活和bax激活有关。

橙皮苷提取物对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖和细胞周期的影响

目的探讨赣南脐橙果皮提取物橙皮苷对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖和细胞周期的作用及其机制。方法 MTT法检测橙皮苷对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖的影响;流式细胞术检测橙皮苷处理CNE-2Z细胞后细胞周期的变化。结果不同浓度橙皮苷分别处理CNE-2Z细胞24,48,72 h后,均能抑制CNE-2Z细胞体外增殖;不同时间对CNE-2Z细胞增殖具有高度显著性差异(F=1898.865,P<0.001),不同药物浓度对CNE-2Z细胞增殖具有高度显著性差异(F=5454.040,P<0.001),时间和药物浓度两个因素对CNE-2Z细胞增殖有交互作用(F=118.909,P<0.001)。在1～100μmol/L浓度范围内,随着药物浓度的增加,其抑制率逐渐增大,且随着时间的延长,抑制率也逐渐升高。当浓度大于100μmol/L后,其抑制作用不再随药物浓度增加而进一步增强(P>0.05)。100μmol/L橙皮苷作用CNE-2Z细胞24,48,72 h,随着时间延长G0/G1期细胞比例下降(P<0.01),S期细胞比例增加(P<0.01),G2/M期细胞为0,细胞阻滞于S期。结论橙皮苷能有效动员人鼻咽癌CNE-2Z细胞从细胞周期的G0/G1期进入S期,干扰细胞从S期进入G2期,导致大量细胞堆积于S期解旋复制,阻滞了细胞周期,从而抑制细胞的分裂增殖,诱导细胞周期特异性的细胞凋亡。

白藜芦醇诱导鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡过程中caspase-6的活化

目的:探讨白藜芦醇(Res)诱导鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡过程中是否有caspase-6的活化。方法:用Western-blot分析caspase-6酶原的裂解,半定量RT-PCR检测caspase-6mRNA表达的改变,比色法测定caspase-6活性的变化。结果:用Res 0(对照)、25、50、100、200μmol/L处理细胞24小时,caspase-6酶原的表达随药物浓度的增加而减少,100 μmol/L时开始出现活性裂解片段P20(20 kD),200μmol/L时P20增加;caspase-6 mRNA的表达呈浓度依赖性的增加(P<0.01);caspase-6活性呈浓度和时间依赖性的升高(P<0.01)。结论:Res诱导CNE-2Z细胞凋亡过程中有caspase-6的活化。

芹菜素对人鼻咽癌CNE-2Z细胞化疗敏感性的增强作用

目的观察芹菜素(AP)能否增强人鼻咽癌CNE-2Z细胞对顺铂(DDP)的化疗敏感性。方法采用MTT法对CNE-2Z细胞的增殖抑制率进行检测,中效原理法对联合用药的相互作用进行分析判断;采用流式细胞术和PI/Ho-echst33258荧光双染法检测细胞凋亡;RT-PCR法检测凋亡相关基因bcl-2、bax mRNA表达的改变。结果 AP、DDP单用及合用均明显抑制CNE-2Z细胞的生长,且呈剂量依赖性关系,两药合用时在中、高浓度呈协同效应;流式细胞术和荧光双染法结果表明低浓度AP联合DDP更能明显促进肿瘤细胞的凋亡;与单独用药组比较,RT-PCR结果显示联合用药组bcl-2 mRNA表达明显降低,而bax mRNA表达明显增高。结论芹菜素可增强顺铂对CNE-2Z细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡作用,其机制可能与上调bax和下调bcl-2的表达,导致Bcl-2/Bax比值下降有关。

PKC-α、PKA-Ⅰ反义核酸对鼻咽癌CNE-2Z细胞生长增殖的影响

目的 :探讨PKC -α和PKA -Ⅰ反义核酸 (asODN)对鼻咽癌CNE - 2Z细胞生长增殖的影响。方法 :分别用脂质体 (lipofectin ,LP)介导asODN转染鼻咽癌CNE - 2Z细胞。实验组 :① 0 0 1- 1 0 0 μmol/LPKC -αasODN ;②0 0 1- 1 0 0 μmol/LPKA -ⅠasODN ;③ 0 5 0 μmol/LPKC -αasODN +0 5 0 μmol/LPKA -ⅠasODN。对照组 :相应浓度的随机序列 (rODN)。用免疫组化法检测CNE - 2Z细胞PKC -α和PKA -Ⅰ的表达 ,MTT法检测其生长指数 (growthin dex ,GI) ,软琼脂克隆形成率检测其体外增殖能力。结果 :PKC -αasODN或 /和PKA -ⅠasODN均可阻断其相应PKC-α或PKA -Ⅰ的表达 (P <0 0 5 )。PKC -αasODN或PKA -ⅠasODN均能显著降低CNE - 2Z细胞GI和软琼脂克隆形成率 (P <0 0 5 ) ,且具有量效依赖关系。PKC -αasODN +PKA -ⅠasODN共同作用可使其GI和软琼脂克隆形成率非常显著降低 (P <0 0 1) ,无明显量效依赖关系 ,两者对CNE - 2Z生长抑制作用强于PKC -αasODN或PKA -Ⅰa sODN(P <0 0 5 ) ,对其软琼脂克隆形成率的抑制作用与PKC -αasODN或PKA -ⅠasODN无显著差异 (P >0 0 5 )。结论 :PKC -αasODN和PKA -ⅠasODN均可抑制CNE - 2Z细胞体外生长和增殖 ,两者具有协同作用。

高压氧对鼻咽癌CNE-2细胞株放射敏感性的体外研究

目的体外观察高压氧对鼻咽癌CNE-2细胞放射敏感性的影响。方法将鼻咽癌CNE-2细胞随机分为A、B、C、D四组。A组:细胞用0.22MPa高压氧处理60min后立即进行2Gy放疗;B组:细胞只应用0.22MPa高压氧处理60min;C组:细胞只进行2Gy放疗处理;D组:细胞不作任何处理。应用MTT法检测各组细胞生长抑制率,PI染色检测各组细胞死亡率,流式细胞计数各组细胞凋亡率。结果 A、B、C3组细胞生长抑制率分别为(18.67±4.54)%,(7.47±4.88)%,(14.06±9.39)%,A组与B组和C组比较差异有统计学意义(P<0.05);A、B、C、D4组死亡率分别为(11.70±1.45)%,(4.00±0.56)%,(8.43±0.83)%,(1.43±0.51)%。A与B、C、D组比较差异有统计学意义(P<0.05);A、B、C、D4组凋亡率分别为4.37±1.12、2.19±0.35、2.70±0.38、1.65±0.20,A与B、C、D组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论高压氧对鼻咽癌CNE-2细胞有较强的放射增敏作用。

蛋白激酶C对鼻咽癌CNE-2Z细胞端粒酶活性的影响

为进一步探讨蛋白激酶 C(PKC)调控人低分化鼻咽癌 CNE- 2 Z细胞生长的机制 ,观察了 PKC对 CNE- 2 Z端粒酶活性的影响。结果显示 :CNE- 2 Z细胞有较高的端粒酶活性 ;PKC的抑制剂 Staurosporine显著降低细胞端粒酶活性 (P<0 .0 0 1)。提示抑制 PKC可以抑制 CNE- 2 Z细胞的端粒酶活性 ,PKC可能通过调控端粒酶活性从而影响 CNE- 2

PKC-α反义核酸对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖及c-myc和c-fos表达的影响

为探讨PKC α反义核酸对CNE 2Z细胞增殖及c myc、c fos表达的影响 ,采用脂质体 (LP)介导法 ,用 0 0 1～1 0 0 μmol/L各浓度PKC α反义核酸 (asODN)转染CNE 2Z ;MTT法及软琼脂克隆形成法分别检测CNE 2Z生长指数(growthindex ,GI)及其体外增殖能力 ;免疫组化法检测PKC α、及c myc、c fos的表达。结果表明 :PKC αasODN 0 0 5～ 1 0 0 μmol/L各浓度组CNE 2ZGI显著降低 (P <0 0 5 ) ,且呈量效依耐关系 ;其中 1 0 0 μmol/L和 0 5 0 μmol/LPKC αasODN对CNE 2Z生长有非常显著抑制作用 (P <0 0 1) ;0 5 0 μmol/LPKC αasODN组CNE 2Z软琼脂克隆形成率均低于对照组 (P <0 0 5 ) ,并可下调其PKC α、c Myc、c Fos的表达 (P <0 0 5 )。结果提示 :LP介导PKC αasODN转染CNE 2Z细胞 ,可有效阻断CNE 2ZPKC α的表达 ,抑制其体外增殖能力 ,下调c myc、c fos蛋白表达 ;PKC αasODN可能通过下调c myc、c

整合素αⅤ对鼻咽癌CNE-2Z细胞放疗敏感性的影响

目的:探讨粘附分子整合素αV通过细胞间相互作用,是否对鼻咽癌CNE-2Z细胞的放疗敏感性产生影响,进而初步探讨其可能机制。方法:采用liquid overlay技术进行CNE-2Z细胞三维立体(多细胞球)培养;血球计数器计数法比较在阻断整合素αV作用前后CNE-2Z细胞的放射敏感性;AnnexinV/PI双标流式细胞术检测细胞凋亡。结果:(1)成功建立CNE-2Z多细胞球培养模型;(2)CNE-2Z多细胞球在接受X射线照射后,并在一定的照射剂量下,其表达的整合素αV量,随着照射剂量的增加而增加;(3)阻断整合素αV作用后CNE-2Z多细胞球放疗敏感性增强、细胞凋亡率上调。结论:以多细胞球培养模型模拟体内实体瘤情况,证实粘附分子整合素αV的表达情况可以影响鼻咽癌CNE-2Z细胞的放疗敏感性,抑制细胞凋亡是其可能的作用机制。

菌毒清提取物对鼻咽癌细胞CNE-2Z荷瘤裸鼠治疗作用的研究

目的 研究菌毒清提取物(菌毒清颗粒浸膏粉)对鼻咽癌细胞CNE-2Z荷瘤裸鼠的治疗作用。方法 在裸鼠右腋皮下接种鼻咽癌CNE-2Z细胞悬液0.2mL,建立移植瘤模型。造模成功后将裸鼠随机分为5组,分别为模型组、阳性对照组(绿原酸0.01g·kg^-1)、菌毒清提取物高(8.8g·kg^-1)、中(4.4g·kg^-1)、低(2.2g·kg^-1)剂量组,口服给药,每日1次,连续3周,计算每组裸鼠肿瘤体积、相对肿瘤体积、相对肿瘤增殖率、脾脏指数和胸腺指数。结果 与模型组相比,高、中、低剂量组裸鼠胸腺指数显著升高,差异均具有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,阳性对照组、高、中、低剂量组裸鼠在给药8~20d内肿瘤体积明显缩小,差异均具有统计学意义(P<0.01);高、中剂量组裸鼠在给药8~20d内相对肿瘤增殖体积较模型组明显下降(P<0.01);给药20d后,高、中、低剂量组裸鼠相对肿瘤增殖率分别为8.27%,23.47%,39.42%,与模型组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 菌毒清颗粒可显著抑制鼻咽癌细胞CNE-2Z荷瘤裸鼠移植瘤的生长,具有明显的抗肿瘤活性。

口虾蛄提取物对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨口虾蛄乙酸乙酯提取物对鼻咽癌CNE-2Z细胞的增殖及凋亡相关蛋白表达的影响。方法用MTT比色法检测药物对细胞增殖的作用,流式细胞术和PI/Hoechst33258荧光双染法检测细胞凋亡,Western Blot法检测用药前后凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达的改变。结果口虾蛄乙酸乙酯提取物对CNE-2Z细胞的增殖有显著抑制作用,且可诱导细胞凋亡;随着口虾蛄乙酸乙酯提取物浓度升高,Bax蛋白的表达逐渐增多,而Bcl-2蛋白表达改变不明显。结论口虾蛄乙酸乙酯提取物对CNE-2Z细胞有显著抗增殖及诱导凋亡作用,其诱导肿瘤细胞凋亡的可能机制与凋亡相关基因Bcl-2/Bax蛋白比值下降有关,但诱导凋亡不是主要机制。

槲皮素对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖的影响及机制研究

目的探讨槲皮素对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖的影响及机制,为槲皮素在抗肿瘤临床应用提供理论基础。方法应用MTT法检测槲皮素对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖的影响,RT-PCR检测槲皮素对CNE-2Z细胞,COX-2、p65和Survivin mRNA表达的影响。结果 MTT结果显示槲皮素对CNE-2Z细胞的生长抑制作用呈现明显的浓度依赖性和时间依赖性(P<0.01)。槲皮素能呈时间依赖性的抑制CNE-2Z细胞COX-2、p65和Survivin mRNA的表达(P<0.01)。结论槲皮素呈现明显的浓度依赖性和时间依赖性抑制CNE-2Z细胞的增殖,其作用机制与下调COX-2、p65和Survivin mRNA的表达密切相关。