肿瘤干细胞标志物在鼻咽癌细胞株中的表达

目的探索肿瘤干细胞(CSC)标志物ABCG2、CD44、CD34在鼻咽癌细胞株CNE2、5-8F和6-10B中的表达情况,为选择CSC标志物进行鼻咽癌CSC样研究奠定基础。方法常规培养CNE2、5-8F和6-10B这3种鼻咽癌细胞株,用流式细胞仪检测3种鼻咽癌细胞株中ABCG2、CD44、CD34细胞比例及其交互情况。结果 ABCG2在CNE2、5-8F和6-10B这3种鼻咽癌细胞株中表达率分别为0.1%、18.6%、19.9%;CD44在CNE2、5-8F和6-10B中表达率分别为99.5%、93.2%、99.1%;CD34在CNE2、5-8F和6-10B中表达率分别为0、3.0%、0.1%。在5-8F中,ABCG2+CD44+细胞交互比例为11.6%,ABCG2+CD34+细胞交互比例为0。结论 5-8F和6-10B中CD34+细胞比例与CSC理论中CSC的比例相符。CD34可以作为鼻咽癌CSC的候选标志物。

肿瘤体积在鼻咽癌不同分期系统中的意义比较

目的根据鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)原发灶肿瘤、颈部转移淋巴结体积大小分别在鼻咽癌中国2008分期与美国癌症研究联合会(American Joint Committee on Cancer,AJCC)分期中的关系进行比较,验证两种分期系统中T分期、N分期的合理性。方法将100例鼻咽癌患者治疗前行磁共振增强扫描后,应用美国CMS适形调强4.0治疗计划系统进行NPC原发肿瘤靶区鼻咽部大体肿瘤体积(nasopharynx gross tumor volume,GTVnx)及颈部阳性淋巴结大体肿瘤体积(lymph node gross tumor volume,GTVnd)勾画和体积计算。结果在鼻咽癌T分期中,中国2008分期原发病灶肿瘤体积大小在不同T分期之间差异具有统计学意义(P=0.000),两两比较中T2、T3分期差别不大,差异无统计学意义(P=0.225);第7版AJCC分期中,原发病灶肿瘤体积大小在不同T分期之间差异具有统计学意义(P=0.000),且两两比较,各组之间差异均有统计学意义(均P<0.05)。在鼻咽癌N分期中,两种分期系统颈部转移淋巴结体积大小在不同N分期之间差异具有统计学意义(P=0.0008),两两比较相邻N分期之间差异无统计学意义(均P>0.05)。结论鼻咽癌原发灶肿瘤、颈部转移淋巴结体积与两种分期均具有相关性,建议将体积因素作为预后判断指标,鼻咽癌第7版AJCC系统在T2、T3分期较中国2008分期合理,建议中国2008分期进一步细化。

miR-1181在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义

【目的】探讨微小RNA-1181(miR-1181)在鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)组织中的表达及其临床意义。【方法】连续随机招募2019年10月至2021年5月在安康市中心医院接受手术治疗的71例NPC患者,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测miR-1181在NPC组织和癌旁正常组织中的相对表达量,比较不同分化程度、临床分期、是否远处转移患者NPC组织中miR-1181的相对表达量。对所有患者术后进行随访,分析miR-1181与NPC预后的相关性。【结果】与癌旁正常组织相比,miR-1181在NPC组织中显著下调;miR-1181在临床分期Ⅲ期+Ⅳ期NPC组织中相对表达量低于Ⅰ期+Ⅱ期,在中低分化NPC组织中miR-1181相对表达量低于高分化组织,在发生远处转移的NPC组织中miR-1181相对表达量低于未转移组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。预后良好患者miR-1181相对表达量显著高于预后不良患者(P<0.05);Logistic回归分析结果显示:miR-1181<3.59与NPC预后不良相关,其优势比(OR)(95%CI)为3.52(1.65~5.28)。【结论】miR-1181在NPC组织中呈低表达,在高分化、临床分期低及发生远处转移的NPC组织中高表达,且miR-1181<3.59是NPC患者预后不良的危险因素。

Notch1、P21^(WAF1)和Involucrin在鼻咽癌组织中的表达及意义

背景与目的:Notch1受体蛋白的异常表达常见于多种原发性肿瘤,但它与鼻咽癌的关系仍不清楚。本研究拟探讨鼻咽癌组织中Notch1受体蛋白、其下游蛋白P21WAF1和Involucrin蛋白的表达,以及它们与鼻咽癌分化程度的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测101例鼻咽癌组织和20例鼻咽慢性炎症组织中Notch1﹑P21WAF1和Involucrin蛋白的表达。结果:20例鼻咽慢性炎症组织中Notch1、P21WAF1和Involucrin蛋白表达率分别为100%(20/20)、90.0%(18/20)、100%(20/20);鼻咽癌组织中Notch1、P21WAF1和Involucrin蛋白的表达率分别为77.2%(78/101)、89.1%(90/101)和80.1%(81/101);三者在不同组织类型鼻咽癌组织中的表达均有显著差异,随着分化程度的下降表达明显减弱,分别为P=0.000,P=0.026和P=0.000;并且在角化性鳞状细胞癌、分化型非角化癌和未分化癌之间两两比较,表达均有显著差异,分别P<0.05;Notch1的表达水平分别与P21WAF1和Involucrin的表达水平正相关,P=0.002和P=0.001;而P21WAF1与Involucrin的表达水平无明显的相关。结论:鼻咽癌组织中Notch1、P21WAF1和Involucrin的表达与鼻咽癌细胞分化程度密切相关。

鼻咽癌调强放疗初步结果

目的：探讨鼻咽癌三维适形调强放射治疗（intensity-modulated radiotherapy，lMRT）的初步疗效。方法：对91例经病理确诊的鼻咽低分化鳞癌患者进行调强放疗。处方刺量分别为GTV（鼻咽部和颈部淋巴结肿瘤靶区）66～70Gy，CTV1（临床靶区）60～62Gy，CTV2和CTVn（颈部淋巴结区域）54～56Gy。11例患者IMRT结束后有局部残留，1例采用IMRT追量照射10Gy／4次，其余给予鼻咽腔内后装追量照射9～15Gy／3～5次。分析疗效及放射治疗毒性。结果：中位随访时间12个月，1和2年生存率为97．1％和97．1％，局控率为97．1％和92．5％。急性放射反应多为Ⅰ度和Ⅱ度以口干和放射性口腔炎为主，分别占72．5％和58．2％。远期放射反应表现为不同程度的口干和听力下降，占患者的39．6％和17．6％。GTV、CTV1及CTV2的平均剂量分别为70．6、67．9和65．0Gy；5％体积的正常器官受照射荆量的平均值为：脑干41．4Gy，脊髓35．4Gy，左腮腺46．5Gy，右腮腺51.8Gy。结论：调强放疗能使得鼻咽癌各靶区得到很好的刺量分布，提高了初治鼻咽癌的局部控制率，明显减轻了急性放射反应。鼻咽癌IMRT处方剂量70Gy以上，CTV2预防照射的范围有待于进一步探讨。

鼻咽癌放疗后分泌性中耳炎的临床观察和防治探讨

目的:探讨鼻咽癌患者放疗后分泌性中耳炎发生的原因和防治对策。方法:观察176例鼻咽癌患者放疗前后分泌性中耳炎的发生情况,对中耳积液耳聋者行鼓室穿刺抽液处理。采用χ2检验比较患者年龄、性别、鼻咽原发病灶大小、部位以及放疗前后有否分泌性中耳炎等因素与放疗后产生分泌性中耳炎的关系。结果:鼻咽癌患者放疗后分泌性中耳炎的发生率为48.9%,而放疗后6个月内的发生率为51.2%。患者年龄(P=0.367)、性别(P=0.126)及鼻咽原发灶大小(P=0.147)等因素对放疗后分泌性中耳炎的发生无显著影响,而放疗前有分泌性中耳炎和鼻咽肿瘤侵及侧壁与放疗后分泌性中耳炎的长期存在显著相关,P值均为0.000。结论:放疗前有分泌性中耳炎、鼻咽肿瘤侵犯侧壁是鼻咽癌放疗后分泌性中耳炎长期存在的危险因素。对放疗后分泌性中耳炎患者的耳聋实行多次鼓室穿刺抽液和适当选择助听器是目前可行的处理方法。

三氧化二砷对鼻咽癌放疗增敏作用及其机制的研究

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)注射液对鼻咽癌放疗增敏作用与肿瘤血管生成素表达的关系。方法:将74例鼻咽癌患者随机分为单纯放疗组(放疗组)和As2O3放射增敏组(增敏组),观察两组患者鼻咽肿瘤消退情况。每个病例在治疗前及放疗20Gy后24h各取材1次。免疫组化SP法检测血管生成素1(Ang-1)和血管生成素2(Ang-2)蛋白表达。结果:放疗40Gy时增敏组和放疗组的鼻咽肿瘤消退率分别为43.6%(17/39)和20.0%(7/35),χ2=4.684,P=0.003。增敏组Ang-1和Ang-2蛋白在放射治疗剂量20Gy时均表达下调,z分别为-2.147和-2.985,P值分别为0.032和0.003。在40Gy肿瘤消退组,Ang-2蛋白下调,z=-2.183,P=0.029。结论:As2O3注射液对鼻咽癌患者放射治疗具有增敏作用,其增敏机制可能与Ang-1和Ang-2蛋白抑制肿瘤血管形成有关。

人鼻咽癌顺铂耐药细胞系建立及其与凋亡关系的研究

目的:建立耐顺铂(DDP)人鼻咽鳞癌耐药细胞系HNE1/DDP,探讨其与凋亡的关系。方法:以DDP为诱导剂,采用浓度递增法诱导建立人鼻咽癌耐药细胞系HNE1/DDP,测定药物敏感性,绘制细胞生长曲线和分析细胞周期分布,TUNEL法测定凋亡指数,免疫细胞化学法检测凋亡相关蛋白p53、Bcl-2和Bax的表达。结果:成功建立DDP耐药细胞系HNE1/DDP,耐药指数为5.57;细胞增殖减慢,倍增时间较亲代延长(41.85hvs37.44h),P=0.035;细胞周期分布改变,G0/G1期细胞增多,S期、G2/M期细胞减少;TUNEL法显示,耐药细胞较亲本细胞凋亡减少,凋亡细胞指数分别为3.80±0.26和21.43±0.11,χ2=13.211,P=0.001;免疫细胞化学法显示,其Bax表达减少,阳性细胞指数分别为1.52±0.16和16.05±5.11,χ2=11.966,P=0.001。结论:建立了稳定的人鼻咽癌耐药细胞系HNE1/DDP,其耐药机制与凋亡减少有关。

叶酸受体在鼻咽癌组织及细胞中的表达与意义

目的研究人鼻咽癌组织和细胞株中叶酸受体表达情况,探讨其与肿瘤临床和病理特征的关系,为进一步研发叶酸受体靶向抗鼻咽癌药物载体奠定基础。方法分别以免疫组织化学法和免疫细胞荧光法观察20例鼻咽癌组织和体外培养的HNE1、HNE2,CNE1,CNE2,SUNE1,5-8F等6株鼻咽癌细胞株表达叶酸受体的情况,分析鼻咽癌组织叶酸受体表达与临床病理特征的关系。结果鼻咽癌组织叶酸受体阳性表达率为85%(17/20),正常鼻咽黏膜组织中无叶酸受体表达(0/8)。鼻咽癌叶酸受体表达与患者性别、年龄等因素无相关性,在非角化鳞癌和鼻咽未分化癌两种病理类型中无明显差异,但临床分期Ⅲ～Ⅳ期的病例阳性表达高于Ⅱ期以下的病例。HNE1细胞株叶酸受体表达阳性,其余5株细胞为阴性。结论鼻咽癌组织广泛高表达叶酸受体,这为开发针对鼻咽癌的叶酸受体靶向药物奠定了基础。

鼻咽癌前期病变中的EB病毒感染(英文)

背景与目的:鼻咽癌中的浸润性癌细胞均感染了EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV)。前期病变可见于早期鼻咽癌癌旁上皮。本研究旨在通过检测前期病变中的EB病毒,探讨EB病毒感染在鼻咽癌变过程中的作用,及其基因型在鼻咽癌变过程中发生的宿主内演变。方法:采用核酸原位杂交检测15例早期鼻咽癌活检组织中的EB病毒编码RNA(EBV-encodedRNA,EBER)。采用巢式PCR法检测前期病变和癌巢中的EB病毒类型和潜伏膜蛋白1(latentmembraneprotein1,LMP1)EB病毒株。具有代表性的LMP1基因羧基末端PCR产物采用四色荧光终止序列技术进行DNA序列分析。结果:所有15例早期鼻咽癌中的绝大多数浸润性癌细胞均呈EBER阳性。在15例前期病变中,14例可检测到EBER阳性的异常上皮细胞和/或浸润性淋巴细胞。单个A型EB病毒可在9例癌巢(11例适用)及9例前期病变(10例适用)的DNA样本中检测到。EB病毒LMP1基因羧基末端在15例癌巢DNA样本中均可检测到,其中14例是30bp缺失型LMP1EB病毒株,1例是野生型和30bp缺失型LMP1株的混合感染。在11例适合做EB病毒LMP1基因羧基末端扩增的前期病变的DNA样本中,5例呈野生型和30bp缺失型LMP1EB病毒株的混合感染,4例是单个缺失型LMP1EB病毒株感染,1例呈单个野生型LMP1EB病毒株感染,1例呈阴性反应。野生型LMP1基因羧基末端的DNA序列与B95-8细胞的DNA序列完全一致;30bp缺失型LMP1基因羧基末端的DNA序列却具有30bp缺失(密码子:346～355)和4个错义点突变(密码子:334、335、338和366)。结论:鼻咽上皮细胞的EB病毒感染是癌变过程中侵袭前的事件;而在鼻咽癌变过程中,EB病毒基因型会产生宿主内的演变。

鼻咽癌咽旁间隙侵犯对预后的影响

目的:探讨鼻咽癌咽旁间隙受侵对预后的影响。方法:咽旁间隙的侵犯程度根据SO线(茎突到枕骨大孔中线后缘中点连线)进行划分,无咽旁侵犯记录为0级,SO线以前的咽旁侵犯记录为1级,SO线以后记录为2级。KaplanMeier法计算总生存率、无瘤生存率、无局部复发生存率和无远处转移生存率,Cox模型进行预后的多因素分析。结果:176例患者中,咽旁受侵的发生率为81.8%,其中1级为70.1%,2级为29.9%。咽旁间隙受侵与颈部淋巴结转移有明显相关性,χ2=8.185,P=0.0040。咽旁受侵0、1和2级患者5年总生存率分别为90.2%、75.1%和51.2%,logrank检验值为16.45,P=0.0003;5年无瘤生存率分别为87.2%、71.5%和53.3%,logrank检验值为10.87,P=0.0044;5年无远处转移生存率分别是93.7%、82.2%和62.7%,logrank检验值为9.41,P=0.0091。多因素分析显示,咽旁受侵不是独立的预后因素,但严重咽旁间隙侵犯是影响鼻咽癌总生存、无瘤生存及远处转移的独立预后因素。结论:咽旁侵犯应该根据程度进行划分,单纯咽旁侵犯的有无不能独立的影响预后,但根据咽旁侵犯程度进行分级后,严重的咽旁侵犯是影响总生存、无瘤生存和远处转移的独立预后因素。

鼻咽癌咽旁间隙侵犯程度对预后的影响

对４１１例首程放疗前完成ＣＴ检查鼻咽癌患者。用生存曲线，无局部区域复发生存曲线，无远处转移生存曲线，无瘤生存曲线。在传统的咽旁间隙划分的基础上，将鼻咽癌咽旁间隙侵犯划为３个层次，即①咽旁阴性，②茎突前间隙侵犯或茎突后间隙浸润，③茎突后间隙肿物占据，并对鼻咽癌咽旁间隙划分的标准，原则及方法进行了讨论。

鼻咽癌放射敏感性异质性的形态学差异观察

目的探讨鼻咽癌放射敏感性异质性与形态学变化的相关性。方法应用电镜观察并用体视学技术测算,比较鼻咽癌细胞系CNE-2Z亚克隆株H5和S1,于体内体外照射后形态学改变的差异;用流式细胞仪、荧光显微镜检测H5和S1放射后凋亡率的不同,用Western-blot检测H5和S1放射后凋亡蛋白Bcl-2表达的差异,以期探讨其形态学异质性机制。结果H5和S1照射后形态学改变差异有显著性;照射后的H5比S1凋亡率高,对射线敏感;S1细胞的各个照射剂量组Bcl-2蛋白表达无明显差异;而H5细胞的各个照射剂量组Bcl-2蛋白表达随照射剂量的增加而递减。结论H5、S1照射后形态学的差异变化可用于预测其放射敏感性的异质性。

鼻咽癌患者血浆EBVDNA水平的研究进展

EB病毒与鼻咽癌的发生有密切关系。近年来,随着PCR技术的发展,在鼻咽癌患者血浆中可定量检测EBVDNA水平。大量研究表明,鼻咽癌患者血浆EBVDNA的检出率及拷贝数明显高于正常人群。放疗后转移、复发患者其EBVDNA的阳性率及拷贝数高于持续缓解患者。血浆EBVDNA水平在鼻咽癌的早期诊断、临床分期、预后判断及监测治疗后转移、复发中均有重要临床意义。

鼻咽癌组织多药耐药相关蛋白表达及其与临床分期关系的研究

目的：探讨多药耐药相关蛋白（multidrug resistance-associated protein，MRP）在鼻咽癌中的表达及与临床分期的关系。方法：对73例鼻咽癌采用免疫组化SP法检测鼻咽癌中MRP的表达，并分析其表达与临床分期的关系。结果：鼻咽癌中有较高水平的MRP表达，阳性表达率为68．49％（50／73）。其中，MRP在Ⅰ～Ⅱ期的阳性表达率为58．33％（7／12），Ⅲ～Ⅳ期的阳性表达率为70．49％（43／61）；T1～2期的阳性表达率为61．54％（24／39），T3～4期中阳性表达率为76．47％（26／34）；N0～1期的阳性表达率为69．70％（23／33），N2～3期中阳性表达率为67．50％（27／40）。以上表达率经检验差异无统计学意义，P〉0．05。结论：MRP基因在鼻咽癌中有较高的表达水平，但其表达与临床分期无关。

凋亡抑制因子Survivin在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨凋亡抑制因子Survivin在鼻咽癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblot免疫印迹法,检测25例鼻咽癌组织及对应的对侧鼻咽部黏膜、10例正常人的鼻咽部黏膜组织中SurvivinmR-NA和蛋白的表达。结果:Survivin在正常鼻咽部黏膜组织中不表达。80·0%(20/25)的鼻咽癌组织和40·0%(10/25)的对应对侧相对正常鼻咽部黏膜中均可检测到Survivin基因mRNA和蛋白的表达,SurvivinmRNA在鼻咽癌组织中的表达较对应的对侧鼻咽部黏膜组织高,其吸光度(A)比值分别为0·83±0·22和0·29±0·14,差异有统计学意义,P=0·00;Survivin蛋白在鼻咽癌中的表达同样高于对侧鼻咽部黏膜组织,其A值分别为33680±1466和17925±1908,差异有统计学意义,P=0·00。Ⅲ+Ⅳ期的鼻咽癌患者中Survivin表达强度明显高于Ⅰ+Ⅱ期的鼻咽癌患者,P<0·05。鼻咽癌组织中Survivin表达强度与患者的年龄、性别、分化程度及有无淋巴结转移无相关性,P>0·05。结论:Survivin的过度表达可能在鼻咽癌发生、发展过程中起一定作用,检测Survivin在鼻咽癌中的表达对鼻咽癌的诊断、临床分期有一定意义。

巨噬细胞移动抑制因子和肝细胞生长因子在鼻咽癌组织中的表达及其对预后的影响

目的研究巨噬细胞移动抑制因子(macrophagemigrationinhibitoryfactor,MIF)和肝细胞生长因子(hepatocytegrowthfactor,HGF)在鼻咽癌组织中的表达水平及其对预后的影响作用。方法对45例确诊未治的鼻咽原发癌活检组织标本,采用LSAB免疫组化法检测鼻咽癌组织中MIF和HGF-α亚单位的表达,同时计数癌组织中新生血管热区的CD34阳性微血管密度(intratumoralmicrovesseldensity,IMD),并将各检测指标与患者的病理临床特点及随访资料相联系,采用Kaplan-Meier法比较各因素与患者生存率之间的关系。结果在45例鼻咽原发癌组织中,癌细胞MIF的阳性表达率为77.8%(35/45),但仅有1例鼻咽癌细胞表达HGF。Kaplan-Meier生存率分析显示,MIF和HGF均高表达病例的生存率明显降低(P=0.033),高IMD病例的生存率与低IMD病例相比差异也有显著性(P=0.048)。结论细胞因子MIF和HGF与肿瘤微血管生成有较密切的关系,并可能在癌细胞的早期淋巴结转移过程中起重要促进作用,两者同步高表达则提示鼻咽癌患者的预后较差。

鼻咽癌组织中Cox-2基因表达的临床研究

目的:探讨环氧化酶-2(Cox-2)基因在鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学技术检测86例NPC组织中Cox-2蛋白表达情况,所有病例随访达5年以上,分析其与临床病理及预后的关系。结果:Cox-2在NPC组织中阳性表达率为73·3%(63/86),与原发灶范围(P<0.05)、颈淋巴结转移(P<0.05)和肿瘤分级均密切相关,P<0·05,且与预后有关,生存期≤5年组Cox-2蛋白表达阳性率(84.4%)显著高于生存期>5年组(61.0%),P<0·05。结论:Cox-2在NPC组织中高表达,可作为判断预后的一种有用指标;Cox-2选择性抑制剂有望成为NPC防治的新靶点。