H3K27乙酰化修饰促进lncRNA OIP5-AS1转录并通过上调TLR4诱导过敏性鼻炎鼻黏膜上皮细胞凋亡

目的本研究旨在探讨组蛋白3的27位赖氨酸(H3K27)乙酰化修饰对长链非编码RNA OPA相互作用蛋白5-反义RNA1(lncRNA OIP5-AS1)转录的促进作用,探讨其通过调控Toll样受体4(TLR4)对过敏性鼻炎(AR)中鼻黏膜上皮细胞(NEC)凋亡的影响。方法白细胞介素13(IL-13)处理NEC以建立AR细胞模型。采用实时定量PCR检测OIP5-AS1和TLR4在AR患者鼻黏膜组织和体外细胞模型中的表达。ELISA检测粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、嗜酸性粒细胞趋化因子1(eotaxin-1)和黏蛋白5AC(MUC5AC)的浓度。原位末端转移酶标记技术(TUNEL)染色法用于检测NEC的凋亡。双荧光素酶报告实验用于验证OIP5-AS1和TLR4的关系。染色质免疫沉淀(ChIP)实验分析用于验证OIP5-AS1启动子区组蛋白的H3K27乙酰化修饰。结果与健康对照和未处理的NEC相比,OIP5-AS1和TLR4在AR患者鼻黏膜组织和IL-13刺激的NEC中均表达升高。敲减OIP5-AS1可降低IL-13诱导的NEC的TLR4水平,而过表达OIP5-AS1可增加IL-13处理的NEC的TLR4水平。敲减OIP5-AS1可降低IL-13处理的NEC凋亡率及GM-CSF、eotaxin-1和MUC5AC的分泌,而过表达TLR4可部分逆转敲减OIP5-AS1对NEC凋亡及GM-CSF、eotaxin-1和MUC5AC表达的影响。此外,H3K27ac在OIP5-AS1的启动子区域显著富集,H3K27乙酰化可促进OIP5-AS1在IL-13诱导的NEC中的表达。结论H3K27乙酰化修饰促进OIP5-AS1转录并通过上调TLR4诱导AR中NEC凋亡。

鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤误诊为鼻窦炎眶周蜂窝织炎1例

1临床资料患者,男,34岁,因“鼻堵脓涕1月余伴右眼红肿2周”于门诊就诊。患者1个月前在劳累饮酒后出现双侧持续性鼻堵、黄脓涕,伴双侧额部头痛、右眼眶重度胀痛,需口服止痛药缓解疼痛。2周前右眼疼痛加重,伴视物稍模糊,无复视,伴发热,体温最高38.2℃。门诊初步疑诊“急性鼻窦炎眶周蜂窝织炎”收治入院。发病以来患者神清,精神可,食欲尚可,近6个月体重下降约30斤,夜间睡眠差,伴乏力。

以眼部肿物为首发表现的鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤的临床分析

目的 比较以眼部肿物为首发表现的鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤(extranodal NK/T-cell lymphoma,nasal type,ENKTCL),与其他部位首发的ENKTCL临床特征、疗效及预后的差异。方法 回顾性分析2009年5月至2021年2月于首都医科大学附属北京同仁医院血液科收治的266例新诊断且未经治疗的ENKTCL患者的临床资料,结合随访调查,对两组患者的临床特征、治疗后缓解率及生存情况进行比较分析。结果 266例ENKTCL患者中,26例患者以眼部肿物为首发表现,其中眼睑肿胀为最常见的临床表现。与其他ENKTCL组相比,眼部ENKTCL组中Ⅲ/Ⅳ期患者所占比例更高(23.8%vs 42.3%,P=0.0394),LDH升高患者的比例更高(27.1%vs 46.2%,P=0.0417)。预后方面,眼部ENKTCL组KPI评分≥3分的患者比例高于其他ENKTCL组(46.2%vs 21.3%,P=0.0046);眼部ENKTCL组PINK评分为高危组的患者比例高于其他ENKTCL组(38.5%vs 19.2%,P=0.0219)。疗效方面,两组患者在治疗方案选择上差异无统计学意义;眼部ENKTCL组评效为疾病进展的患者比例高于其他ENKTCL患者组(46.2%vs 22.9%,P=0.0090)。生存方面,眼部ENKTCL组中死亡患者共有12(46.2%)例,其他ENKTCL组中有56(23.3%)例。两组患者3年及5年的PFS率差异无统计学意义,但眼部和其他ENKTCL组3年的OS率分别为69.2%和76.7%,以及5年的OS率分别为58.6%和72.2%,差异有统计学意义(P=0.0321)。结论 以眼部肿物为首发临床表现的ENKTCL具有高肿瘤负荷、疾病进展快、对治疗的反应不佳及预后差等特点,及时进行影像学检查及组织活检对明确诊断尤为重要。

骨髓来源的间充质干细胞对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜上皮细胞的调控作用

目的研究骨髓间充质干细胞(MSCs)对变应性鼻炎(AR)大鼠鼻黏膜上皮细胞形态、增殖和分泌蛋白的影响。方法分离正常大鼠骨髓MSCs、正常大鼠鼻黏膜上皮细胞以及AR大鼠鼻黏膜上皮细胞并分别培养,细胞培养传代至符合要求时,将骨髓MSCs和AR大鼠鼻黏膜上皮细胞共培养,培养3 d、7 d、14 d时显微镜观察鼻黏膜上皮细胞形态,CCK-8法检测鼻黏膜上皮细胞增殖情况[设模型组(AR大鼠鼻黏膜上皮细胞)和模型MSCs组(AR大鼠鼻黏膜上皮细胞和骨髓MSCs共培养),以OD值表示],Western blot法检测鼻黏膜上皮细胞黏液分泌标志物黏蛋白5AC(MUC5AC)蛋白表达情况[设正常组(正常大鼠鼻黏膜上皮细胞)、正常MSCs组(正常大鼠鼻黏膜上皮细胞和骨髓MSCs共培养)、模型组(AR大鼠鼻黏膜上皮细胞)、模型MSCs组(AR大鼠鼻黏膜上皮细胞和骨髓MSCs共培养)]。结果骨髓MSCs与AR大鼠的鼻黏膜上皮细胞共培养14 d时,鼻黏膜上皮细胞明显增多,细胞生长旺盛,活性好,细胞形成大的集落群。培养14 d时,模型MSCs组的鼻黏膜上皮细胞增殖OD值为0.97±0.06,模型组为0.81±0.05,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。正常组和正常MSCs组鼻黏膜上皮细胞中MUC5AC蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);模型MSCs组鼻黏膜上皮细胞中MUC5AC蛋白相对表达量明显低于模型组(P<0.05)。结论骨髓MSCs能促进AR大鼠鼻黏膜上皮细胞增殖,下调AR大鼠鼻黏膜上皮细胞中MUC5AC蛋白表达。

以口腔黏膜溃疡为首发表现的结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤的多学科诊疗1例

结外鼻型NK/T细胞淋巴瘤(extranodal nasal type NK/T-cell lymphoma,ENKTL)是一种以破坏面部中份结构为主的NK/T细胞来源的非霍奇金淋巴瘤,临床少见。以口腔黏膜溃疡为首发症状的病例罕见且易与其他疾病相混淆,在诊断上极其困难。本文报道1例以颊黏膜及牙龈溃疡为首发表现的ENKTL的多学科诊疗,并分析该疾病的临床病理学特征、诊断、鉴别诊断和治疗,以期为临床诊治相关病例提供参考。

缓释糖皮质激素支架对嗜酸粒细胞型慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者鼻黏膜嗜酸粒细胞与鼻腔菌群的影响

目的研究缓释糖皮质激素支架对嗜酸粒细胞型慢性鼻窦炎伴鼻息肉(eosinophilic chronic rhinosinusitis with nasal polyps,ECRSwNP)手术患者鼻黏膜嗜酸粒细胞(Eos)浸润与鼻腔菌群的影响。方法选取2020年8月~2022年8月黔江中心医院收治的104例ECRSwNP患者,采用随机数字表法将患者分为观察组与对照组各52例,鼻内镜手术中分别植入或未植入缓释糖皮质激素支架,比较两组住院时间、鼻腔恢复通气时间及治疗总有效率,比较两组术前和术后1个月的鼻黏膜Eos%及鼻腔菌群,比较两组术前和术后3个月的鼻内镜Lund-Kennedy评分、鼻腔鼻窦结局测试22条(SNOT-22)及视觉模拟量表(VAS)评分,比较两组术后3个月的干预率及额窦口通畅率。结果观察组住院时间、鼻腔恢复通气时间均显著低于对照组(P<0.05)。观察组治疗总有效率为92.31%(48/52)显著高于对照组76.92%(40/52)(P<0.05)。术后两组鼻黏膜Eos%较术前显著降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05)。术前两组Shannon指数、Chaol指数无统计学意义(P>0.05);对照组术后Shannon指数较术前显著降低(P<0.05),术后Chaol指数较术前显著增高(P<0.05);观察组术后Shannon指数、Chaol指数较术前无显著差异(P>0.05)。术后两组Lund-Kennedy评分、SNOT-22评分及VAS评分较术前均显著降低(P均<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05)。观察组患者干预率显著低于对照组(P<0.05),额窦口通畅率显著高于对照组(P<0.05)。结论缓释糖皮质激素支架有利于ECRSwNP手术患者术腔上皮化,可减少黏膜Eos%,改善临床症状,保证额窦引流通畅,降低术后干预率,对鼻腔菌群无显著影响。

鼻分泌物Ⅱ型炎症细胞因子在嗜酸粒细胞型慢性鼻窦炎伴鼻息肉中的表达及其预测价值

探究嗜酸粒细胞型慢性鼻窦炎伴鼻息肉CRSwNP中鼻分泌物Ⅱ型炎症细胞因子的表达及其预测价值。方法 纳入2021年6月~2023年6月我院接受CRSwNP治疗的患者80例,患者术前取其鼻腔分泌物,术中取患者鼻息肉组织,以其嗜酸粒细胞占比均分为嗜酸粒细胞型CRSwNP组(观察组)及非嗜酸粒细胞型CRSwNP组(对照组),对比组间一般资料、Ⅱ型炎症细胞因子水平,并采用logistic回归分析评估相关因素。结果 观察组IL-5、Eotaxin-3水平较高,单因素分析中,观察组血嗜酸粒细胞百分比、IL-5、Eotaxin-3,差异存在统计学意义(P<0.05)。两组SNOT-22症状评分、Lund-Mackay影像学评分、血嗜酸粒细胞绝对值指标比较差异不大(P>0.05)。结论 嗜酸粒细胞型慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者疾病预测及表达中,IL-5、Eotaxin-3具有较为显著的应用价值,可为此类疾病患者临床治疗以及术后复发情况的预测提供参考价值。

人胚鼻咽上皮细胞cDNA文库的构建及鼻咽癌相关基因的筛选

为了进一步分离人鼻咽组织特异性表达基因和鼻咽癌特异相关基因 ,采用SMART (switchingmechanismat 5′endofRNAtranscript)技术 ,构建了人胚鼻咽上皮cDNA文库 .从原代培养的人胚鼻咽上皮分离总RNA并纯化mRNA ,利用经修饰的oligo (dT)引物 (含sfiⅠB酶切位点 )合成cDNA第一链 ,同时根据真核生物mRNA5′端帽子结构特点 ,利用SMART核苷酸 (含sfiⅠA酶切位点 )作为cDNA第一链在mRNA 5′端延伸出去的模板 ,进而以此序列为引物利用LD PCR (long distance PCR)合成双链cDNA ,双链cDNA经sfiⅠ (ⅠA和ⅠB)酶切和过柱分级分离后 ,克隆入经sfiⅠ酶切的λTrip1EX2载体后经体外包装而成cDNA文库 .结果表明 ,原始人胚鼻咽上皮cDNA文库获得 1 0× 10 6个重组子 ,重组率达 96 % .文库扩增后 ,滴度达 7 8× 10 9pfu ml,插入cDNA平均长度为 1 2kb ,用PCR从该文库扩增出本实验室新克隆的鼻咽癌相关基因NAG4的全长cDNA .构建的人胚鼻咽上皮cDNA文库具有良好的质量 ,该cDNA文库为进一步筛选。

EB病毒介导人鼻咽上皮细胞永生化早期阶段的生物学观察

EB病毒转化人鼻咽上皮细胞,建立体外多阶段细胞模型有利于从细胞和分子水平对肿瘤发病机制作深入研究。我们利用与鼻咽癌密切相关的EB病毒和TPA的协同作用,观察原代人胚鼻咽上皮细胞逃避老化期后其生物学特性的变化。结果表明,EB病毒感染的人胚鼻咽上皮细胞在原代培养后期老化相关半乳糖苷酶(SA-β-Gal)表达降低,形态学上发生改变,出现转化灶样集落,群体倍增时间降低,体外培养寿命延长,表明EB病毒促使部分原代人胚鼻咽上皮细胞逃避老化期、进入永生化早期阶段。这些研究资料为进一步阐明上皮细胞永生化分子机制及建立人鼻咽上皮细胞永生化模型提供实验依据。

EB病毒潜伏膜蛋白1诱导人鼻咽上皮细胞端粒酶的表达

上皮细胞逃避老化期是细胞永生化过程中一个重要分子事件,端粒酶活性表达是维持人染色体端粒长度、抑制细胞进入老化期的关键因素之一。我们利用最新的端粒酶PCR-ELISA半定量技术,检测永生化早期阶段人胚鼻咽上皮细胞中端粒酶表达的情况,探讨EB病毒在人胚鼻咽上皮细胞永生化过程中的分子机制。结果表明,EB病毒诱导老化前期人胚鼻咽上皮细胞端粒酶表达,从而促使人胚鼻咽上皮细胞逃避老化期、进入永生化早期阶段。此外,我们还首次发现,人胚鼻咽上皮细胞表达端粒酶活性依赖于EB病毒LMP1蛋白的表达水平和LMP1分子的完整性,LMP1可能通过诱导端粒酶活性表达促进人鼻咽上皮细胞永生化。我们的实验为进一步探讨EB病毒诱导人胚鼻咽上皮细胞永生化的作用机制提供了实验基础。

牵张力对体外培养兔鼻软骨细胞影响的实验研究

目的:探讨牵张力对体外培养的不同年龄兔鼻软骨细胞增殖活性的影响及牵张力大小与兔鼻软骨细胞增殖活性改变的量效关系.方法:将第4代体外培养的新生及6周龄新西兰白兔兔鼻软骨细胞置于细胞膜式牵张力施加装置上培养,流式细胞仪检测不同的牵张力(5 kPa、10 kPa)在0～12 h内对兔鼻软骨细胞增殖活性的影响.结果:0～10 h内5 kPa牵张力组软骨细胞增殖指数随着牵张力作用时间的延长不断上升,增殖指数峰值位于10 h处;0～8 h内10 kPa牵张力组软骨细胞增殖指数随着牵张力作用时间的延长不断上升,增殖指数峰值位于8 h处;5 kPa较10 kPa牵张力对体外培养兔鼻软骨细胞具有更大的促增殖作用;牵张力对体外培养的新生兔兔鼻软骨细胞具有更大的促增殖作用.结论:牵张力可促进体外培养的新生及六周龄新西兰白兔兔鼻软骨细胞增殖活性,提示我们鼻软骨牵张方法不仅适用于临床矫治新生儿唇腭裂伴发鼻畸形,而且有可能用于矫治1岁左右婴儿甚至更大年龄患儿的唇腭裂伴发鼻畸形.

ⅠE期鼻T/NK细胞淋巴瘤临床观察

目的探讨ⅠE期鼻T/NK细胞淋巴瘤的诊断、误诊原因及不同治疗方法及其对患者预后的影响。方法60例ⅠE期患者行单纯放疗9例,单纯化疗11例,放疗加化疗9例,化疗加放疗12例,化疗加放疗加化疗19例。结果全组1,3,5年生存率分别为84.55%、50.59%、26.20%。其中ⅠE局限组1,3,5年生存率分别为100.00%、77.78%、59.83%,ⅠE超腔组1,3,5年生存率分别为80.10%、53.83%、14.58%,两组间差异有显著性(P=0.0008)。单纯化疗组及单纯放疗组1,3,5年生存率分别为75.00%、25.00%、0.00%及63.64%、21.21%、0.00%,两组间差异无显著性;放化组及化放组1,3,5年生存率分别为88.89%、66.67%、22.22%及90.91%、63.64%、34.09%,两组间差异无显著性;化放化组1,3,5年生存率分别为100.00%、84.21%、56.14%,与放化组及化放组差异无显著性。单纯化疗组、单纯放疗组与放化组及化放组间差异有显著性(P=0.0097)。各组间比较差异有显著性(P=0.0004),生存曲线显示,化放化组优于其他组。结论ⅠE鼻T/NK细胞淋巴瘤早期临床表现不典型,易误诊;综合治疗宜作为首选,早期治疗是关键,以尽早达到局部控制。

Epstein-Barr病毒潜伏蛋白1通过核转录因子κB诱导鼻咽上皮细胞表达端粒酶活性

利用已建立的原代人胚鼻咽上皮细胞和Tet on LMP1系统等良好的实验模型 ,采用荧光酶报道基因分析法和端粒酶TRAP ELISA技术 ,分别检测EB病毒潜伏蛋白 1(LMP1)诱导的核转录因子κB (NFκB)活性和端粒酶活性 ,从LMP1介导NFκB信号传导途径角度 ,探讨LMP1诱导端粒酶表达的分子机制 .结果表明 ,LMP1可诱导鼻咽上皮细胞表达端粒酶活性 ,将LMP1羧基端胞浆区突变后 ,可同时下调NFκB活性和端粒酶活性 .在Doxycycline诱导LMP1表达状态下 ,NFκB反式激活活性增强 ,同时端粒酶活性升高 ;进一步应用硫代磷酸化修饰的反义NFκBp6 5寡脱氧核苷酸和IκBα的显性负性突变体分别阻断NFκB活性 ,可降低由LMP1诱导的端粒酶活性 .因此 ,NFκB作为LMP1信号传导途径上的枢纽 ,可能介导了LMP1对端粒酶的表达调控 .

益气解毒颗粒对二亚硝基哌嗪诱导人胚鼻咽上皮细胞转化的阻抑作用

目的 :探讨中药复方益气解毒颗粒对人胚鼻咽上皮细胞转化的阻抑作用。方法 :二亚硝基哌 (DNP)诱导人胚鼻咽上皮细胞转化 ,同时用益气解毒颗粒作用于DNP诱导的鼻咽上皮细胞 ,共同培养 ,然后收集不同代数细胞 ,酶连免疫聚合酶链反应 (PCR -ELISA)和巢式聚合酶链反应 (Nested -RT -PCR)法检测实验细胞端粒酶活性和端粒酶RNA的表达。结果 :加益气解毒颗粒药液组鼻咽细胞形态明显好于盐水对照组 ,其端粒酶活性 (0 34± 0 19)也明显低于对照组 (0 73± 0 2 7) (P <0 0 5 )。结论 :益气解毒颗粒能够抑制鼻咽上皮细胞端粒酶的激活 ,进而阻断DNP诱导的细胞转化。

NK／T细胞鼻型淋巴瘤研究进展

NK/T细胞鼻型淋巴瘤(extranodal NK/T-cell lymphoma,ENKL)是2001年WH0淋巴造血组织肿瘤新分类中的一个独立类型,较多见于亚洲东部以及南美地区,好发于成年男性,中位年龄50岁。ENKL多发生于结外,主要表现为面部中线结构的毁损性破坏,最常见的部位是鼻和腭部,病程表现具有极高的侵袭性。发病机制尚不完全清楚,与EB病毒感染关系密切。基本组织学改变是凝固性坏死和多种炎细胞混合浸润的背景上肿瘤性淋巴样细胞散在或弥漫分布。瘤细胞表达NK细胞相关抗原如CD2、CD56、胞浆CD3ε、CD16、CD43、CD94,表达细胞毒性颗粒相关蛋白。原位杂交检测大部分EBER呈阳性。病情易于复发且对治疗耐药,因此ENKL患者整体预后很差。近年来很多研究致力于ENKL的治疗,但是最佳治疗措施尚不肯定。早期患者多采用放疗后联合化疗;晚期ENKL预后很差,各种化疗方案治疗往往无效,以左旋门冬酰胺为基础的化疗可能是较有希望的新的解救化疗方案,造血干细胞移植可能是一种有效的治疗方法。病程进展迅速,预后很差,需积极寻找不良预后相关因素。本文就ENKL的病因及发病机制、临床表现与分期、病理特征、诊断及鉴别诊断、治疗及预后的研究进展进行了综述。

西南地区鼻和鼻型NK/T细胞淋巴瘤的临床病理特征及预后分析

目的 分析西南地区鼻和鼻型NK/T细胞淋巴瘤的临床病理特征及影响预后的因素。方法 分析 12 0例鼻和鼻型NK/T细胞淋巴瘤的病理形态及免疫表型、临床特点、治疗和生存情况。结果 12 0例患者总的 5年生存率为 5 4 .1%。大型瘤细胞生存率较中小型瘤细胞低 (P <0 .0 1) ,病变中有坏死及血管浸润者生存率明显低于对照组 (P <0 .0 5 ) ,而瘤细胞分布及患病年龄与预后关系不大 ,临床Ⅰ～Ⅱ期与Ⅲ～Ⅳ期两组病例生存率差异有显著性 (P <0 .0 1) ,累及多个部位、伴有穿孔及全身症状者生存率低于对照组 (P <0 .0 5 )。综合治疗疗效优于单一治疗及未治疗组 (P <0 .0 1) ,单一治疗近期疗效好 ,而远期疗效与未治疗组差异无显著性 (P >0 .0 5 )。CoxRegression分析结果亦表明瘤细胞大小、分期及治疗方法与预后密切相关。 结论 瘤细胞大小、坏死、血管浸润、穿孔、B症状、分期、病变范围和治疗方法与鼻和鼻型NK/T细胞淋巴瘤的预后相关 ,其中瘤细胞大小、分期和治疗方法是其主要的预后因素。

细颗粒物(PM2.5)降低人鼻黏膜上皮细胞闭合蛋白(occludin)的表达

目的探讨细颗粒物(PM2.5)对人正常鼻黏膜上皮细胞间闭合蛋白(occludin)表达及分布的影响。方法采用(0、 50、 100、 200、 400、 500、 800、 1000)μg/mL PM2.5处理体外培养的正常人HNEpC鼻黏膜上皮细胞,采用CCK-8法检测细胞活力,确定最佳处理剂量;后续采用(200、 400、 500)μg/mL PM2.5处理HNEpC细胞,用免疫荧光细胞化学染色法检测细胞occludin的表达和分布情况,实时荧光定量PCR检测occludin的mRNA水平, Western blot法检测occludin蛋白水平。结果与阴性对照组(0μg/mL PM2.5)相比,各剂量PM2.5处理鼻黏膜上皮细胞24 h和48 h后,细胞活性均降低,且细胞活性与PM2.5剂量呈负相关。与阴性对照组相比, 200μg/mL PM2.5组,细胞形态及细胞间occludin蛋白分布表达无明显改变; 400μg/mL PM2.5组,细胞形态变为梭形,细胞间隙增宽; 500μg/mL PM2.5组,细胞数量明显减少,细胞形态变为长梭形,细胞间隙增宽明显;除200μg/mL PM2.5处理细胞24 h外,其余各组细胞occludin mRNA及蛋白水平均下调,且occludin蛋白表达水平呈时间依赖性。结论 PM2.5可降低正常人HNEpC鼻黏膜上皮细胞活性、降低occludin的表达和分布。

鼻NK/T细胞淋巴瘤的免疫表型和细胞毒颗粒蛋白的表达及其意义

目的:观察鼻NK/T细胞淋巴瘤的免疫表型和细胞毒颗粒蛋白的表达及其意义。方法:采用DAKOEnVision两步法在44例鼻NK/T细胞淋巴瘤病例中检测CD3、CD20、CD43、CD45、CD45RO、CD56、CD57和CD79α等8种常用淋巴细胞表面标记物和3种细胞毒颗粒蛋白TIA-1、Granzyrme-B、perforin的表达,观察和分析检测结果,并与发生在相同部位的其他常见恶性淋巴瘤的检测结果进行比较分析。结果:44例鼻NK/T细胞淋巴瘤均表达CD45;CD3阳性率为43%,阳性定位在细胞质;CD56、CD43和CD45RO的阳性率分别为52%、45%和52%,CD20、CD79α和CD57均为阴性。TIA-1、Granzyrme-B和perforin的阳性率分别为100%、930%和95%,对照组的23例鼻腔和鼻咽T、B细胞淋巴瘤中均不表达。结论:鼻NK/T细胞淋巴瘤的免疫表型不一致,并非所有病例显示CD56阳性,石蜡切片中CD3的阳性定位与通常的外周T细胞淋巴瘤不同。细胞毒性颗粒蛋白在肿瘤细胞中的高表达,提示它们可能为NK细胞来源。细胞毒性颗粒蛋白是鼻NK/T细胞淋巴瘤诊断和鉴别诊断重要标志。

HIF-1α基因干扰对低氧环境下人鼻黏膜上皮细胞TGF-β_1、VEGF、bFGF表达的影响及其机制

目的观察低氧诱导因子1α(HIF-1α)基因干扰对低氧环境下人鼻黏膜上皮细胞(HNEC)转化生长因子β_1(TGF-β_1)、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响,并探讨其可能的作用机制。方法体外培养HNEC,取传3代对数生长期细胞随机分为空白对照组、NC-shRNA组、HIF-shRNA组和低氧诱导组。空白对照组不予任何处理,NC-shRNA组、HIF-shRNA组分别予NC-shRNA、HIF-shRNA转染,并于转染24 h后经CoCl_2化学诱导模拟低氧环境;低氧诱导组仅经CoCl_2化学诱导模拟低氧环境。采用实时荧光定量PCR法和Western blotting法检测各组HIF-1α、TGF-β_1、VEGF、b FGF mRNA和蛋白表达;采用Western blotting法检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt表达。结果与空白对照组比较,低氧诱导组HIF-1α、VEGF、TGF-β_1、bFGF mRNA和蛋白表达均明显升高(P均<0.05);与NC-shRNA组比较,HIF-shRNA组上述指标mRNA和蛋白表达均明显降低(P均<0.05)。与空白对照组比较,低氧诱导组p-PI3K、p-Akt蛋白表达明显升高(P均<0.05);与NC-shRNA组比较,HIF-shRNA组p-PI3K、p-Akt蛋白表达明显降低(P均<0.05);各组PI3K、Akt蛋白表达比较P均>0.05。结论低氧诱导HIF-1α表达可促进人鼻黏膜上皮细胞TGF-β_1、VEGF、bFGF表达,干扰HIF-1α基因则抑制上述因子的表达;HIF-1α对上述因子的调控机制可能与其抑制PI3K/Akt信号通路有关。

白细胞介素-8基因在鼻息肉组织中的表达及对鼻黏膜上皮细胞凋亡的影响

目的探讨白细胞介素(IL)-8基因在鼻息肉组织中的表达及对鼻黏膜上皮细胞凋亡的影响。方法 Western印迹检测IL-8在鼻息肉组织及下鼻甲组织中的表达;从鼻息肉组织中分离培养人鼻黏膜上皮细胞(HNEC),将IL-8小干扰RNA(IL-8-siRNA)和阴性对照(siRNA-NC)转染细胞,以空脂质体转染的细胞作为对照组,Western印迹检测转染效果;各组转染细胞培养48 h后,流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,Western印迹检测酶切caspase3蛋白表达。结果 IL-8在鼻息肉组织中的表达显著高于下鼻甲组织(P<0.01);siRNA-NC组与对照组差异无统计学意义(P>0.05),IL-8-siRNA组显著低于对照组(P<0.01);siRNA-NC组细胞凋亡率及酶切caspase3蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),IL-8-siRNA组均显著高于对照组(P<0.01)。结论 IL-8在鼻息肉组织中高表达,沉默IL-8的表达能通过上调酶切caspase3蛋白表达促进HNEC凋亡。