齐墩果酸C-3及C-28位衍生物的设计合成及抗肿瘤活性研究

设计及合成一系列新型齐墩果酸衍生物,并对其进行抗肿瘤活性及分子对接研究。以天然产物齐墩果酸为先导化合物,对其C-3羟基和C-28羧基进行结构修饰,合成新型齐墩果酸衍生物;采用MTT法测定化合物对人肺癌细胞(A549)和乳腺癌细胞(MCF-7)的体外抗肿瘤活性;利用计算机辅助药物设计方法分析所合成化合物关键基团与PI3K受体的作用方式。合成了12个未见文献报道的齐墩果酸衍生物,结构均经1HNMR、13 CNMR及MS谱确证。活性测试结果表明,化合物N-[3β-乙酰氧基-齐墩果烷-12-烯-28-酰]-2-氨基乙醇-4-三氟甲基苯甲酸酯(Ⅰ3)、3β-乙酰氧基-齐墩果烷-12-稀-28β-[N-(3-苯甲酰氨基丙基)]甲酰氨基(Ⅱ1)对肿瘤细胞的抑制活性明显高于母体齐墩果酸与阳性对照药Alpelisib相当。经过结构修饰后的齐墩果酸衍生物具有一定的抗肿瘤作用,值得进一步研究。

齐墩果酸C28甲酰胺衍生物的合成及活性研究

设计并合成一系列齐墩果酸衍生物,并对其抗肿瘤活性进行研究。以齐墩果酸为起始原料,通过对C-3,C-28位经过氧化,酯化,取代,酯化反应得到目标产物。结果表明:合成1个新型的齐墩果酸甲酰胺衍生物4,目标化合物结构经MS,1H NMR确证,利用MTT比色法选择高表达人肺癌细胞、人胃癌细胞对目标化合物进行初步的体外抗肿瘤活性研究,所测化合物对该种肿瘤细胞的抑制活性均明显强于齐墩果酸,值得进一步研究。

齐墩果酸衍生物DKS26对非酒精性脂肪肝病小鼠的作用及分子机制

目的探讨齐墩果酸衍生物DKS26对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠的作用及分子机制。方法40只健康5周龄C57/BL小鼠随机均分为对照(CON)组、模型(MOD)组、二甲双胍(MET)组及DKS26组,后3组小鼠用40%CCl 4油溶液皮下注射加高脂饮食喂养、建立小鼠NAFLD模型,MET组和DKS26组小鼠分别给予100 mg/(kg·d)的MET和DKS26灌胃干预、CON组和MOD组小鼠给予100 mg/(kg·d)羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液灌胃干预,1次/d,共6周;末次干预后麻醉各组小鼠,眼球取血,采用微板法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸转移酶(AST)水平;取血后处死各组小鼠,取肝右叶组织,制作匀浆采用微板法检测各组小鼠肝组织甘油三脂(TG)含量,制作切片采用油红O染色和苏木素伊红(HE)染色观察各组小鼠肝组织中脂滴沉积情况及组织形态学特征,采用Western blot法检测各组小鼠肝组织中叉头转录因子O1(FoxO1)和磷酸烯醇式丙酮酸激酶(PEPCK)蛋白的表达。结果与CON组相比,MOD组小鼠血清ALT和AST水平及肝组织TG含量明显上升(P<0.01),肝细胞空泡样变明显、胞质脂质沉积过多,FoxO1与PEPCK蛋白表达上调(P<0.05);与MOD组比较,MET组和DKS26组小鼠血清ALT、AST水平及肝组织TG含量下降(P<0.01),且DKS26组小鼠血清ALT水平较MET组降低(P<0.05);病理形态学显示,MET组和DKS26组小鼠肝脏空泡变性及脂质沉积较MOD组改善,肝组织FoxO1和PEPCK蛋白表达下调(P<0.05),但组间无差异(P>0.05)。结论口服DKS26可改善NAFLD小鼠肝功能损害与肝细胞脂质沉积,其机制可能与调控FoxO1信号通路介导的下游糖脂代谢关键酶PEPCK有关。

熊果酸和齐墩果酸衍生物的合成与表征

为了开发具有潜在保肝和抗肿瘤活性的三萜类化合物,一些新的齐墩果酸和熊果酸衍生物通过对碳-3位羟基,碳-28位羧基的修饰和碳-11位导入羰基而被合成.相关化合物的结构通过IR、1HNMR和13CNMR进行了表征.

齐墩果酸衍生物的合成、抗癌活性及构效关系研究进展

齐墩果酸是一种存在于植物中的五环三萜类天然产物,具有广泛的生物活性。为了克服齐墩果酸抗肿瘤活性不强、水溶性较差,以及生物利用度低等缺点,近年来人们对其结构进行了许多修饰与改造工作,发现了一些具有潜在应用价值的齐墩果酸类似物。本文对近年来齐墩果酸衍生物的合成、抗癌活性及构效关系研究进行了综述,旨在为齐墩果酸的研究提供帮助。

齐墩果酸衍生物的合成及其对胰脂肪酶的抑制作用

本文首先以天然胰脂肪酶抑制剂齐墩果酸作为原料,设计合成新型齐墩果酸衍生物,并对其结构进行1H NMR、13C NMR及MS表征,然后采用对硝基苯酚法对其抑制胰脂肪酶作用进行研究,最后通过分子对接分析其相互作用机制。结果表明,2个全新合成的衍生物,齐墩果烷-28-β-内酯和齐墩果烷-28-α,β-不饱和酯,其抑制胰脂肪酶活性(IC_(50):16.4和18.5μmol/L)均显著高于齐墩果酸(IC50:87.7μmol/L),分别为齐墩果酸的5.35倍和4.74倍。齐墩果酸和齐墩果烷-28-α,β-不饱和酯属于混合型抑制,特别地,齐墩果烷-28-β-内酯转变为竞争型抑制。抑酶活性提高主要与胰脂肪酶形成的氢键数目及衍生物的疏水性有关。

乌索酸与齐墩果酸衍生物的合成进展

乌索酸和齐墩果酸在多种植物中均有分布。二者互为同分异构体,均属于五环三萜类化合物,由于其结构多样性而具有广泛的生物活性,包括抗肿瘤、抗氧化、抗艾滋病、抗溃疡、抗炎、免疫调节等功能。有关这两种活性物质的衍生化研究一直为科研人员所关注,本文主要综述了近10年来二者衍生物合成方面的新进展,为寻找活性先导化合物、合理设计药物分子提供依据。

齐墩果酸和去氧胆酸衍生物合成及抗血管生成活性研究

目的合成齐墩果酸、去氧胆酸-丙酮基衍生物并评价2者对新生血管生成的影响。方法以丙酮/K2CO3作为反应体系,利用溴代川芎嗪分别与齐墩果酸和去氧胆酸发生亲核取代反应,得到齐墩果酸和去氧胆酸衍生物。采用鸡胚绒毛尿囊膜模型(chorioallantoic membrane,CAM)对其进行在体新生血管活性评价。结果产物结构经1H-NMR、13C-NMR及IR确证为齐墩果酸乙酰甲酯和和去氧胆酸乙酰甲酯;二者作用于CAM模型后,新生血管的数目均比空白组减少。结论在丙酮/K2CO3/溴代川芎嗪反应体系中,得到齐墩果酸和去氧胆酸-丙酮基衍生物;经CAM模型测试发现去氧胆酸-丙酮基衍生物对新生血管具有较好抑制活性。

齐墩果酸和熊果酸衍生物抗炎活性的定量构效关系研究

选取实验测定的15种齐墩果酸和熊果酸衍生物抑制NO释放的IC50作为活性参数,与用半经验的PM3方法计算得到的电子结构指数进行相关和逐步回归分析,得到了定量构效关系方程.结果表明,ELUMO、SA、EHy、QC、QD、QC2、QC12等与齐墩果酸和熊果酸衍生物的抗炎活性有较强的相关性.

齐墩果酸衍生物的合成与表征

齐墩果酸属五环三萜类化合物,在自然界中分布广泛,具有多种药理学活性,而且其毒性较低。目前研究发现,齐墩果酸除了具有消炎、降糖、增强免疫、抗氧化、抑制血小板聚集和利尿作用等多方面的临床药理作用,还具有护肝、抗动脉粥样硬化、抗高血脂及抗肿瘤等生物活性,药用开发前景广阔。因此,本文以齐墩果酸为先导化合物,在C-3位通过特定的连接片段丁二酸与氨基酸及其它的活性片段进行偶联,合成了2种新的中间体和7种新的目标产物,并利用IR和1HNMR波谱技术对其结构进行了表征。

杂环齐墩果酸衍生物-阿司匹林缀合物抑制血清素合成及促骨形成作用

目的探讨杂环齐墩果酸衍生物-阿司匹林缀合物对血清素合成的抑制活性以及促骨形成活性。方法采用高效液相色谱(HPLC)法、酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒和荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)测试杂环齐墩果酸衍生物-阿司匹林缀合物对RBL-2H3细胞中血清素合成的关键酶色氨酸羟化酶-1(TPH-1)的抑制率、TPH-1蛋白含量及mRNA的表达。构建去势大鼠骨质疏松症模型(OVX),并将骨质疏松大鼠随机分为给药组、甲状旁腺激素组、模型对照组和假手术组,给药35 d后采用HPLC法测定血清和小肠中血清素水平。采用噻唑蓝(MTT)法测定杂环齐墩果酸衍生物-阿司匹林缀合物对成骨细胞促进活性。结果在RBL-2H3细胞中,杂环齐墩果酸衍生物-阿司匹林缀合物对TPH-1的抑制呈剂量依赖性,抑制率为20.4%~92.5%,缀合物7在10μmol·L^(-1)浓度有最高抑制率(92.5%),TPH-1蛋白含量为51 ng·m L^(-1),较对照组(216 ng·m L^(-1))显著降低,TPH-1mRNA表达也降低。与假手术组比较,模型对照组血清和小肠中血清素水平明显增高(P<0.05),给予缀合物后大鼠血清和小肠中血清素水平却明显降低,缀合物7给药后血清和小肠血清素分别为232,155 ng·m L^(-1),较模型对照组1 050和783 ng·m L^(-1)明显降低。缀合物能够促进乳小鼠成骨细胞增殖。结论该研究为开发新型、高效、低毒的具有抗骨质疏松症的齐墩果酸衍生物提供信息和依据。

齐墩果酸衍生物与查耳酮的缀合物和α-葡萄糖苷酶的相互作用研究

采用荧光光谱法和分子对接法,研究了两种齐墩果酸衍生物与查耳酮的缀合物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用及机理.首先,采用荧光光谱法研究了缀合物和α-葡萄糖苷酶的结合反应,并测定了结合常数及相关的热力学参数;然后使用sybyl 8.0软件研究了缀合物与α-葡萄糖苷酶的分子对接.结果表明:缀合物和α-葡萄糖苷酶的相互作用导致α-葡萄糖苷酶发生内源荧光淬灭,属于静态淬灭机制.缀合物1与α-葡萄糖苷酶在20℃和37℃下结合常数分别为42.91和75.42,结合位点均为0.53;缀合物2与α-葡萄糖苷酶在20℃和37℃下结合常数分别为59.88和92.87,结合位点分别为0.5和0.63.缀合物与α-葡萄糖苷酶的结合中氢键和范德华力起重要作用,缀合物能与α-葡萄糖苷酶活性位点结合,作用力主要依靠缀合物酯羰基上的氧原子与酶结构中氨基酸上的氢所形成氢键.

齐墩果酸C-28位四氮唑衍生物的合成及体外抗肿瘤活性

采用亲核取代和Click反应在齐墩果酸的C-28位羧基引入五元氮杂环,合成了15个氮唑骈缀的齐墩果酸新衍生物,结构均经HRMS、1H-NMR和X射线单晶衍射确证,采用MTT法评价了目标物对人胃癌细胞MKN-45、人乳腺癌细胞MCF-7和大鼠胶质瘤C6细胞的体外抗肿瘤活性。结果表明,浓度为10μmol/L时,目标物的体外抗肿瘤活性较齐墩果酸有一定提高。实验结果证实了在齐墩果酸28位羧基缀合各种苄基取代的四唑,有利于提高齐墩果酸的体外抗肿瘤活性,是优化齐墩果酸的一种有效方法。

齐墩果酸及其衍生物抗乳腺癌作用机制的研究进展

乳腺癌是女性人群中致死率较高的恶性肿瘤,常规治疗毒副作用大、易出现耐药性,在天然产物中寻找靶向治疗药物是目前提高乳腺癌治愈率的有效措施之一。齐墩果酸是广泛存在于植物中的一种五环三萜类化合物,生物活性广、毒副作用小,具有广谱抗癌活性。齐墩果酸及其衍生物具有诱导乳腺癌细胞自噬和凋亡、抑制细胞迁移侵袭、逆转耐药性、抑制瓦尔堡效应等抗肿瘤作用,且不良反应小、安全性高、无耐药性。因此,齐墩果酸及其衍生物在乳腺癌治疗中有广泛的应用前景和开发价值。

齐墩果酸衍生物SZC014同时诱导乳腺癌细胞的凋亡和自噬

目的:齐墩果酸(OA)具有多种药理学作用,如肝保护、抗炎、抗氧化及抗肿瘤等。然而,它的活性相对较弱并且生物利用度低,使其临床应用受到限制。在本研究中,我们合成一种新的OA衍生物—SZC014,并研究它们在乳腺癌细胞中的抗肿瘤作用及其作用机制。方法:应用MTT法测定空白对照组、不同浓度OA及SZC014处理后的乳腺癌细胞的存活率。应用PI染色流式细胞术测定SZC014对细胞周期的影响。通过倒置相差显微镜和透射电子显微镜观察并拍摄SZC014处理后的细胞形态学和超微结构的变化。应用Westernblot分别测定SZC014处理后凋亡相关蛋白、自噬相关蛋白表达的变化情况。结果:MTT实验证明,SCZ014可抑制乳腺癌细胞的增殖,并且其生长抑制作用强于OA。PI染色流式细胞术证明SZC014诱MCF-7细胞周期停滞于G2/M期。倒置相差显微镜和透射电子显微镜证明SZC014处理的MCF-7细胞中凋亡和自噬同时被发现。Westernblot结果提示SZC014可能通过线粒体途径诱导MCF-7细胞凋亡。此外,SZC014诱导Beclin1与ATG5的上调可能与MCF-7细胞自噬相关。结论:SZC014作为一种新的OA衍生物,表现出较OA更强的抗乳腺癌活性,且这种抗肿瘤作用可能与凋亡及自噬相关。

氮唑骈缀的齐墩果酸衍生物的合成及其体外抗肿瘤活性研究

在齐墩果酸A环和C-28位羧基设计引入五元氮杂环,合成了12个氮唑骈缀的齐墩果酸新衍生物,其化学结构经HRMS、1H NMR予以确认,采用MTT法评价了目标物对人胃癌细胞MKN-45、人宫颈癌细胞Hela、人口腔表皮样癌细胞KB、人乳腺癌细胞MCF-7和大鼠胶质瘤C6细胞的体外抗肿瘤活性.结果发现浓度为10μmol/L时,目标物体外的抗肿瘤活性较齐墩果酸得到一定提高,其中化合物Q2表现出较强的抗肿瘤活性.

齐墩果酸及衍生物与牛血清白蛋白相互作用的荧光光谱分析

通过化学修饰改善齐墩果酸与牛血清白蛋白的相互作用,从而提高两者之间的结合能力。以齐墩果酸为先导物,分别对其C-3位羟基和C-28位的羧基进行修饰,得到4种不同的衍生物,并用IR和~1H NMR进行结构表征。采用荧光光谱法,研究了齐墩果酸及4种衍生物与牛血清白蛋白的相互作用规律,以及温度和Cu^(2+),Co^(2+)等金属离子对两者之间的相互作用的影响。与齐墩果酸相比,4种衍生物与牛血清白蛋白的相互作用都有提高,其中衍生物OA_2与牛血清白蛋白的相互作用提高了近16倍。Cu^(2+)和Co^(2+)等金属离子能明显增强衍生物OA_2与牛血清白蛋白间的相互作用。化学修饰是提高齐墩果酸与BSA之间的相互作用的有效途径。

齐墩果酸氮杂环衍生物合成及对非小细胞肺癌A549作用研究

目的:开展齐墩果酸氮杂环衍生物合成及抗非小细胞肺癌A549作用研究。方法:以齐墩果酸为原料,通过氧化、鲍奇还原胺化、缩合等反应合成齐墩果酸氮杂环衍生物。采用CCK-8试剂盒、流式Annexin V-FITC/PI双染色法和Caspase-3试剂盒分别检测A549细胞的增殖抑制作用、细胞凋亡及Caspase-3的变化。结果:成功合成齐墩果酸氮杂环衍生物3-N-(3,5,6-三甲基吡嗪-2-甲酰基)-齐墩果酸,产率为71.2%。齐墩果酸氮杂环衍生物对A549细胞具有抑制作用且呈量效关系,IC50为110μmol·L^(-1),CC50为146μmol·L^(-1)。齐墩果酸氮杂环衍生物能诱导A549细胞株的凋亡,显著增强A549细胞中Caspase-3的活性。结论:合成的齐墩果酸氮杂环衍生物结构为3-N-(3,5,6-三甲基吡嗪-2-甲酰基)-齐墩果酸,该化合物对A549细胞株具有增殖抑制作用。诱导A549细胞株凋亡与增强Caspase-3的酶活性可能是其机制。

齐墩果酸A环衍生物的合成与体外抗肿瘤活性研究

以齐墩果酸为先导化合物,将其A环C-2,3位改造成酮肟基,同时对C-28位羧基进行成酯、酰胺化等结构修饰,设计合成了两类共10个新型齐墩果酸A环衍生物,其结构经1H-NMR、MS等确认.选用人胃癌细胞SGC7901和人肺癌细胞A549,对目标化合物进行初步的体外抗肿瘤活性研究.结果表明:化合物对两种肿瘤细胞的抑制活性均高于母体齐墩果酸,尤其是化合物Ⅱ5对两种肿瘤细胞的抑制活性明显高于阳性对照物吉非替尼,值得进一步研究.

齐墩果酸硫脲类衍生物的合成及以VEGFR-2为靶点的分子对接研究

以齐墩果酸为先导化合物,设计并合成了6个新型齐墩果酸硫脲类衍生物,化合物的结构经1H NMR确认.利用计算机辅助药物设计方法,对目标化合物与VEGFR-2蛋白的作用模式进行研究,结果表明目标化合物与VEGFR-2蛋白的结合能(评分数值的绝对值)均高于母体化合物齐墩果酸,其中化合物Ⅰ5的结合能最高(-554.73 k J/mol).