齐洛那平临床前体外及体内抗精神分裂症药效的初步研究

目的考察齐洛那平对不同精神分裂症动物模型的药效及其对多巴胺D_(1)、D_(2)等受体的体外亲和力。方法纳入雄性SPF级ICR小鼠324只,雄性SPF级Wistar大鼠72只及SPF级SD大鼠雌雄各10只为研究对象。(1)取100只ICR小鼠分为10组:空白组(溶媒+生理盐水,简称Veh+NS),模型组(Veh+APO 1 mg/kg),利培酮(0.03、0.10、0.30、1.00 mg/kg,灌胃)+APO组,齐洛那平(0.3、1.0、3.0、10.0 mg/kg,灌胃)+APO组;每组10只,观察齐洛那平对小鼠攀爬行为的影响。(2)取84只ICR小鼠分为10组:空白组(Veh+NS),模型组(Veh+MK-8010.3 mg/kg),利培酮(0.01、0.03、0.10、0.30 mg/kg,灌胃)+MK-801组,齐洛那平(0.3、1.0、3.0、10.0 mg/kg,灌胃)+MK-801组;每组8~10只,观察齐洛那平对MK-801诱导小鼠高活动行为的影响。(3)取70只ICR小鼠分为7组:空白组(Veh),利培酮0.3、1.0及3.0 mg/kg组(灌胃),齐洛那平15、27及45 mg/kg组(灌胃),每组10只,观察小鼠在给药后30、60及90 min时保持僵住不动的时间。(4)取72只Wistar大鼠进行条件回避反应训练,将训练成功的大鼠分为7组:空白组(Veh),齐洛那平20、40及60 mg/kg组,利培酮0.2、0.4及0.8 mg/kg组,每组5~6只,考察齐洛那平对大鼠回避反应次数的影响。(5)取70只ICR小鼠,颈部皮下注射给予PCP(5 mg/kg)造模后,将小鼠分为空白组(Veh+NS),模型组(Veh+PCP),利培酮0.05 mg/kg+PCP组,齐洛那平(0.5、1.0、2.0 mg/kg)+PCP组,每组10~12只,考察齐洛那平对PCP诱导小鼠新物体识别障碍的影响。(6)将20只SD大鼠(雌雄各半)断头取脑,并制备5-HT_(2A)及5-HT_(2C)受体膜,取表达CHO-D_(1)、D_(2)及5-HT_(6)受体的细胞株制备D_(1)、D_(2)及5-HT_(6)受体膜,通过放射性配体受体结合的实验方法,考察齐洛那平对D_(1)、D_(2)、5-HT_(2A)、5-HT_(6)及5-HT_(2C)的亲和力。组间计量资料比较采用单因素方差分析,计数资料采用非参数U检验。结果(1)与模型组比较,齐洛那平剂量3.0及10.0 mg/kg可显著抑制APO诱导的小鼠攀爬行为(Z=-3.43、-4.07,均P<0.01),ED_(50)为4.31 mg/kg。利培酮剂量在0.10、0.30及1.00 mg/kg可显著抑制小鼠攀爬行为(Z=-1.83、-2.48、-4.26,P<0.05或P<0.01),ED_(50)为0.19 mg/kg。(2)与模型组比较,齐洛那平剂量3.0及10.0 mg/kg可显著抑制MK-801诱导的小鼠高活动行为(t=-7.18、3.90,均P<0.01),ED_(50)为2.63 mg/kg。利培酮0.01、0.03、0.10及0.30 mg/kg均显著抑制小鼠高活动行为(t=-3.02、4.98、-6.08、7.10,均P<0.01),ED_(50)为0.011 mg/kg。(3)齐洛那平及利培酮均可诱发小鼠产生僵住症,其ED_(50)分别为35.36 mg/kg及1.25 mg/kg。(4)齐洛那平以及利培酮均能剂量依赖性抑制大鼠的回避反应次数,与空白组比较,齐洛那平剂量在40及60 mg/kg时可显著性抑制大鼠条件回避反应次数(t=11.84、13.07,均P<0.01),ED_(50)为34.36 mg/kg;利培酮0.8 mg/kg可显著抑制大鼠条件回避反应次数(t=13.50,P<0.01),ED_(50)为0.60 mg/kg。(5)与模型组比较,齐洛那平0.5及1.0 mg/kg给药时能显著改善PCP诱导的新物体识别障碍模型小鼠的区分指数(t=-3.67、-2.12,均P<0.05及P<0.01),提高认知能力;而利培酮0.05 mg/kg对PCP诱导的新物体识别障碍模型小鼠的区分指数无显著性影响。(6)齐洛那平对D_(1)(Ki=3.21 nmol/L)、5-HT_(2A)(Ki=13.11 nmol/L)、5-HT_(6)(Ki=21.49 nmol/L)及5-HT_(2C)(Ki=48.90 nmol/L)受体有较高的亲和力,而对D_(2)(Ki=563.20 nmol/L)受体亲和力较弱。利培酮对5-HT_(2A)、5-HT_(2C)和D_(2)受体具有较高亲和力,其Ki分别为2.37、18.79和4.82 nmol/L,利培酮对D_(1)和5-HT_(6)亲和力较弱。结论齐洛那平对多个精神分裂症阳性症状动物模型均有较好的药效且能改善小鼠的认知,其体内药效活性可能与多巴胺D_(1)、D_(2)受体及5-HT_(2A)和5-HT_(6)受体有关。