齿瓣石斛研究进展

石斛是我国传统名贵药材,齿瓣石斛作为云南地区药用石斛的主要代表,也是云南重点发展的药用石斛资源。通过对齿瓣石斛化学成分、药理作用、毒理学研究等方面的相关进展进行综述,以期为其多领域的深入研究、资源科学合理开发利用以及产业链的持续发展提供有益参考。

齿瓣石斛的位点特异性PCR鉴别

目的 设计出齿瓣石斛的位点特异性鉴别引物 ,仅通过PCR就能完成对齿瓣石斛真伪进行准确鉴别。方法 根据齿瓣石斛及其他枫斗类、黄草类石斛的rDNAITS序列数据库 ,设计了齿瓣石斛的位点特异性PCR鉴别引物JB Chiban 0 1S和JB Chiban 0 1X。然后 ,对 38种石斛属植物模板DNA进行了PCR扩增 ,阳性者即为齿瓣石斛正品。结果 当退火温度设定为 5 8℃时 ,只有齿瓣石斛的模板DNA能被扩增出来 ,而其他的 37种石斛属植物均为阴性。该鉴别反应重复性好 ,已在鉴别齿瓣石斛时发挥重要作用。结论 运用位点特异性鉴别引物能成功地对齿瓣石斛进行PCR鉴别 ,与DNA测序鉴别方法相比 ,位点特异性PCR具有高效、准确、简便、省时等优点。

齿瓣石斛栽培基质筛选及其栽培方式研究

通过对齿瓣石斛栽培基质和栽培方式的对比试验研究,结果表明:(1)不同栽培基质中,树皮∶苔藓(1∶1)中新枝数最多,树皮中枝条生长最好,树皮∶锯末∶羊粪(5∶3∶2)中产量最高;(2)不同栽培方式中直立捆绑产量最高。因此在齿瓣石斛生产中宜选择树皮基质和直立捆绑栽培方式。

齿瓣石斛多糖提取及脱蛋白工艺研究

目的通过正交实验对齿瓣石斛多糖的提取工艺、脱蛋白条件进行优化研究。方法采用苯酚-硫酸法考察提取温度、提取时间及溶剂体积等因素对多糖提取的影响,采用比色法考察样品与萃取剂体积比、萃取剂体积比、振荡时间等因素对多糖脱蛋白的影响。结果多糖提取的最佳条件,提取温度100℃,提取时间2 h,加水量200 ml,提取2次,醇沉浓度为80%,醇沉时间30 h;多糖脱蛋白的最佳条件,样品/萃取剂(V/V)为4∶1,氯仿/正丁醇(V/V)为4∶1,萃取时间30min。结论苯酚-硫酸法简单,易操作,可测定齿瓣石斛中多糖含量。

齿瓣石斛不同营养器官多糖的含量测定

目的探讨齿瓣石斛不同营养器官的多糖含量。方法采用硫酸-苯酚法对齿瓣石斛根、嫩条、叶、老条多糖含量进行测定。结果嫩条中的多糖含量明显高于其它部位,其含量的顺序分别为嫩条>叶>根>老条。结论齿瓣石斛采收嫩条部位比较合理,老条可用于分株繁殖和压条繁殖。

云南龙陵齿瓣石斛化学成分分析测定及栽培方式选择

对齿瓣石斛药用成分进行测定、分析,并对其栽培方式进行对比选择,结果表明,齿瓣石斛含有石斛多糖、矿质元素、氨基酸等有效成分;不同栽培方式对于齿瓣石斛生长作用不同,槽式栽培最具推广前景,与仿野生结合,在提高产量的同时能极大地利用空间。

齿瓣石斛的原生境播种及其株丛生长特性研究

兰科(Orchidaceae)植物是植物保护中的"旗舰"类群,其种子细小粉末状,缺乏萌发所需的营养物质,研究种子萌发和幼苗生长特性对于兰科植物保育、资源可持续利用和产业化等具有重要意义。本研究以附生齿瓣石斛(Dendrobium devonianum Paxt.)为对象,建立原生境播种方法,研究其生活史周期和不同附主树种齿瓣石斛株丛生长特性。结果显示,采取稀牛粪+种子(或米汤+种子)的原生境播种方法,齿瓣石斛种子可大量萌发生长形成幼苗;种子萌发当年生长缓慢,完成由种子到种子的生活史周期需3~5年或更长;不同附主树种的齿瓣石斛株丛生长及结果情况存在差异,4年生假鳞茎在不同附主树种上的茎节数指标为:李树>梨树>桃树>披针叶楠;茎粗指标为:披针叶楠>梨树>桃树>李树;茎长指标为:梨树>披针叶楠>李树>桃树;结实率指标为:梨树>桃树>李树>披针叶楠,其中,梨树上的齿瓣石斛株丛自然结果率达24.86%。该研究为附生石斛的原生态栽培和回归保育提供了一条新途径。

齿瓣石斛研究进展

为推进齿瓣石斛产业发展,对齿瓣石斛的化学成分、药理作用以及繁殖技术作了全面综述,为产业发展提供参考。

齿瓣石斛提取物的急性毒性和遗传毒性

目的探讨齿瓣石斛的急性毒性和遗传毒性。方法 20只ICR小鼠灌胃3次,每次间隔4 h,观察7 d,考察对小鼠的急性毒性;选用TA97a、TA98、TA100、TA1024株组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌在加和不加S9两种条件下设齿瓣石斛5个剂量组(32、160、800、4 000、20 000μg/皿)行Ames试验;按齿瓣石斛5.0、10.0、20.0 g/kg进行小鼠精子畸形试验和小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验考察遗传毒性。结果齿瓣石斛对小鼠经口最大耐受量大于45.0 g/kg;Ames试验显示,在加和不加S9时各剂量组回变菌落数与溶剂对照组相似;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和精子畸形试验结果均为阴性。结论在本实验条件下,齿瓣石斛属无毒级物质,未见遗传毒性。

齿瓣石斛和铁皮石斛的显微比较

目的:对铁皮石斛及其替代资源齿瓣石斛进行显微结构特征比较。方法:采用石蜡切片、徒手切片、粉末制片对2种石斛茎横切面结构及粉末特征进行研究。结果:齿瓣石斛具少量网状增厚的薄壁细胞,且在薄壁细胞中含草酸钙针晶(较大)、柱晶(多)和大量淀粉粒;有52个外韧型维管束,周围细胞中常有1～3～4个硅质体(块)分布。铁皮石斛具大量网状增厚的薄壁细胞,在薄壁细胞中含大量淀粉粒,近表皮处含草酸钙针晶(较小)和柱晶(少);有85个外韧型维管束且周围多数由厚壁纤维环绕,有的形成纤维鞘。结论:该结果为齿瓣石斛药材的鉴别及其药材质量标准制定以及进一步深入研究和开发利用提供科学依据。

齿瓣石斛多倍体育种研究初报

采集云南野生齿瓣石斛(Dendyobiumdevonianum)果实,在种子无菌萌发和组培快繁的基础上,利用前期研究形成的试管苗,用倍性育种技术,在短期内培育出多倍体植株,阶段性实验结果显示,多倍体石斛在形态上、气孔直径上以及染色体数目上有明显的改变,此研究将为中国兰花育种开辟新的途径。

西双版纳地区铁皮石斛及齿瓣石斛品质的初步研究

目的对比铁皮石斛与其常用替代品在品质方面的差异。方法采用苯酚-硫酸法与重量法,研究对比了西双版纳地区不同来源铁皮石斛及齿瓣石斛多糖含量及折干率的差异。结果铁皮石斛的多糖含量及折干率分别为20.29%,20.16%,齿瓣石斛为16.93%,18.92%。结论不同栽培类型的铁皮石斛存在品质差异;齿瓣石斛的野生苗品质优于组培苗。

齿瓣石斛中微量元素含量及浸出特性

采用湿法消化-原子吸收光谱法(AAS)测定齿瓣石斛中8种微量元素的含量及不同浸煮时间的微量元素浸出量。结果表明,齿瓣石斛中含有丰富的微量元素,含量分别为Cu 7.52μg/g、Mn 16.31μg/g、Zn 42.45μg/g、Na 95.20μg/g、Fe 183.60μg/g、Ca 1 171.56μg/g、K 2 312.75μg/g、Mg 3 005.03μg/g。不同浸煮时间下齿瓣石斛的微量元素浸出量不同,其浸出量与浸煮时间未呈线性关系。

齿瓣石斛提取物体外抗菌作用初步研究

[目的]研究齿瓣石斛的无水甲醇和水提取物的抗菌活性。[方法]采用试管稀释法测定齿瓣石斛无水甲醇和水提取物对11种临床常见的病原菌的MIC及MBC,初步判定其抑菌效果。[结果]无水甲醇和水提取物在体外对7种细菌有不同程度的抑制作用,其中对金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌的抑制作用最强,对痢疾志贺菌、伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌和乙型副伤寒沙门菌无明显作用;无水甲醇提取物的抗菌作用强于水提取物。[结论]齿瓣石斛无水甲醇和水提取物对所测试菌种具有良好的体外抗菌作用。

齿瓣石斛种子保存和萌发形态发育过程研究

石斛属植物种子小,无胚乳,自然条件下,需与真菌共生才能萌发,萌发率极低。以齿瓣石斛的种子为研究对象,研究不同贮存条件对种子萌发率和活力的影响,并对种子萌发中的形态发育过程进行观察,试验结果表明,齿瓣石斛种子细小,解剖镜下观察呈纺锤形,由1层透明的种皮和1个种胚组成;种子比较适宜贮存温度是0～5℃,贮存1个月时种子萌发率和染色率较高,随着时间的延长,种子萌发率和染色率逐渐降低;种子接种后,吸水膨胀逐渐转绿,形成椭球体,椭球体以2条途径发育成幼苗,一是原球茎途径,二是根状茎途径。

齿瓣石斛多倍体的诱导初报

采用多倍体育种技术,对云南的野生热带兰花齿瓣石斛(Dendrobium devonianum)进行多倍体诱导试验。利用秋水仙素作为诱导剂,对二倍体试管苗进行诱导,在短期内培育出多倍体植株。用0.03%的秋水仙素处理齿瓣石斛丛生芽24h,其诱导效果最好。观察结果显示:多倍体齿瓣石斛材料在形态、气孔直径、染色体数目上都有变化。DNA指纹图谱等方面都发生了显著的改变。多倍体齿瓣石斛试管苗出现了植株粗壮、叶片增厚等优良性状。此研究是多倍体育种技术在我国热带兰花育种中的一次成功尝试。

齿瓣石斛对大鼠的亚慢性毒性

目的观察齿瓣石斛对大鼠的亚慢性毒性。方法 80只大鼠随机分为阴性对照组及齿瓣石斛低、中、高剂量组(4. 5、9. 0、18. 0 g/kg),每组20只,连续给药90 d。其间观察大鼠一般情况(饮水、进食、毛色、行为、粪便、尿液),记录体质量和进食量,计算食物利用率;实验中期(第7周)和末期检测血常规(血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数及分类)、血液生化指标(谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白、白蛋白、胆固醇、甘油三酯、血糖、尿素氮、肌酐);实验末期取主要脏器计算脏体比,进行组织病理学检查。结果齿瓣石斛对大鼠一般情况、体质量、进食量、食物利用率、血常规、血液生化指标、脏体比无明显影响,主要脏器色泽、大小、形态结构无明显异常,显微镜下未发现明显组织病理学变化。结论齿瓣石斛在90 d内对大鼠无明显亚慢性毒性,安全剂量为18. 0 g/kg。

不同因子对齿瓣石斛增殖系数和平均苗高的影响

以齿瓣石斛(Dendrobium devonianum)组培苗为外植体,以培养一个周期后的增殖系数、苗高生长量为指标,采用单因素试验分别考察不同温度、光强、丛植芽数量、pH值和有机添加物5个因子对幼苗生长的影响。采用单因素方差分析和多重比较法处理观测数据。试验结果表明:齿瓣石斛增殖培养过程中,控制白天温度为25℃,夜晚温度为18℃,光强2 600 lx,丛植芽为5株一丛,pH值为5.6,添加10%的椰汁时,能显著提高其增殖系数和平均苗高。

早春类短命植物生物量研究(Ⅰ)——齿瓣延胡索生物量特征及模型构建

以早春类短命植物齿瓣延胡索为对象,采用全收获法研究其生物量及分配特征,构建株高与生物量的线性回归模型.结果表明:齿瓣延胡索的高生长在进入花果并存期后基本停止,地上与地下生物量随生长发育不断增加,在花果并存期达到最高,但在果期下降;生物量分配在营养生长期至花期由地下向地上转移,进入花果并存期和果期又转为地下积累.茎叶生物量比例在营养生长期和花期增大,在花果并存期和果期趋于稳定.花果生物量比例逐渐增大,表明了齿瓣延胡索在发育过程中营养生长向生殖生长转移的生活对策.以株高为自变量构建的总生物量、地上生物量和地下生物量4种线性回归方程均具有较高的R2值,拟合结果显示总生物量和地上生物量优于地下生物量,其中总生物量的直线、指数和幂函数拟合方程和地上生物量的指数方程均达到建模标准,可为齿瓣延胡索资源储量的估算及开发利用等提供重要的理论依据.

齿瓣石斛化学成分的研究

通过硅胶、Sephadex LH-20反复柱层析、纯化,从齿瓣石斛的茎中分离得到7个化合物,利用理化性质和波谱分析分别鉴定为新甘草苷(1)、3,5-二羟基黄酮-7-O-葡萄糖醛酸苷(2)、芦丁(3)、芹菜素-7-O-芸香糖苷(4)、芹菜素-7-O-葡萄糖苷(5)、β-胡萝卜苷(6)和β-谷甾醇(7)。以上化合物均为首次从齿瓣石斛中分离得到。